室温下N-羟基琥珀酰亚胺活化酯法合成吡咯-2,5-二乙酰胺

在室温下用一锅反应法以二环己基碳二亚胺(DCC)(2 equiv.)为偶合试剂,使用过量(4 equiv.)的胺,用N-羟基琥珀酰亚胺(HOSu)(2 equiv.)活化酯法合成了吡咯-2,5-二酰胺,且产率(70%)比在低温时(63%)有所提高.探讨了选用不同的合成方法及偶合试剂以及反应条件和试剂的用量对合成目标产物的影响.

癸二酸-N-羟基琥珀酰亚胺酯的合成及应用——应用化学综合实验教学改革探究

介绍了一个关于活性酯基交联剂的合成及应用的应用化学综合实验。内容包括:癸二酸-N-羟基琥珀酰亚胺酯(NHS-DA)的制备,产物的结构的鉴定,以及在胶原热稳定性改善方面的应用。首先,以癸二酸、N-羟基琥珀酰亚胺作为原料,碳化二亚胺作为脱水剂,制得癸二酸-N-羟基琥珀酰亚胺酯,产率约为85%。通过核磁共振波谱和红外光谱分析对合成产物的结构进行了鉴定,结果表明为目标产物——NHS-DA。其次,将NHS-DA应用于胶原海绵的改性,差式扫描量热分析表明NHS-DA可以改善胶原的热稳定性,促进实验产物的应用。整体实验反应条件温和、速率快、产率高,废弃物丙酮可回收利用,涉及多种先进实验仪器的使用,能够紧密结合理论所学知识、科学前沿和应用需求,有助于培养学生理论结合实际应用的能力,激发学生的创新性思维且拓展学生的科学视野。

碳化二亚胺联合N-羟基琥珀酰亚胺交联过氧乙酸-乙醇处理后的肌腱:体外形态学特征

背景:过氧乙酸已被证明能有效灭活异体肌腱中的潜在微生物,但会使胶原分子内、分子间交联受到破坏,因此如何减弱或者修复这种损伤,灭菌的同时改善肌腱形态学特性是一个待解决的问题。目的:探讨碳化二亚胺/N-羟基琥珀酰亚胺交联是否对过氧乙酸-乙醇处理后的肌腱起保护作用。方法:选取18只新西兰大白兔,切取半腱肌肌腱(36条)作为实验材料。将肌腱分3组处理,每组12条:对照组肌腱脱细胞后置入过氧乙酸-乙醇溶液中进行灭菌处理;实验1组在对照组处理的基础上,置入MES缓冲液中浸泡24 h,置入含50 mmol/L MES、2.5 mmol/L碳化二亚胺、5 mmol/L N-羟基琥珀酰亚胺的乙醇交联液中浸泡6 h;实验2组在对照组处理的基础上,置入MES缓冲液中浸泡24 h,置入含50 mmol/L MES、5 mmol/L碳化二亚胺、5 mmol/L N-羟基琥珀酰亚胺的乙醇交联液中浸泡6 h;3组处理后均进行伽马辐照灭菌,分别进行光学显微镜、扫描电镜、透射电镜与偏光显微镜观察。结果与结论:①光学显微镜、扫描电镜:空白组胶原纤维无序性较强,肌腱细胞散在分布,腱束间连接松散纤维间隙较宽,纤维缠绕在一起,波形紊乱;两实验组肌腱平行排列且均匀规则,呈波浪形,纤维间隙小,以实验2组表现更为显著;②透射电镜:实验2组胶原原纤维直径、胶原原纤维指数大于对照组、实验1组(P<0.05),实验1组、实验2组胶原纤维质量平均直径大于对照组(P<0.05),对照组胶原纤维密度大于实验1组、实验2组(P<0.05);③偏光显微镜:3组均为Ⅰ型胶原纤维占比较大、Ⅲ型胶原纤维占比较小,对照组纤维密度较小,间隙较宽松;实验1组纤维密度有所增加,实验2组纤维间隙最小、密度最为大,对照组胶原卷曲周期大于实验1组、实验2组(P<0.05);④结果表明,碳化二亚胺联合N-羟基琥珀酰亚胺交联处理能在微观角度改善肌腱的受损程度,对过氧乙酸-乙醇处理后肌腱起保护作用,且碳化二亚胺浓度为5 mmol/L较2.5 mmol/L处理可获得更好的肌腱形态学特征。

在线红外法在N-羟基琥珀酰亚胺酯合成中的应用

在线红外法是一种通过监测反应体系中各组分浓度变化,直观体现反应历程的监测方法。具有无需取样,灵敏度高,时效性强,应用范围广泛等优点。在N-羟基琥珀酰亚胺酯的合成中采用在线傅里叶红外法,通过实时直观的反应进程,成功克服了实验中的困难,并且有利于进一步的条件优化。所得一系列产物的结构均经过1HNMR确证。

N-羟基琥珀酰亚胺生物素酯的合成与应用

利用两种方法合成了N-羟基琥珀酰亚胺生物素酯,并用核磁共振谱进行了结构表征,N-羟基琥珀酰亚胺生物素酯的应用前景非常广泛。

己二酸-N-羟基琥珀酰亚胺酯交联对胶原溶液流变性能的影响

为了促进胶原的开发和利用,使用流变仪考察了己二酸-N-羟基琥珀酰亚胺酯(NHS-AA)交联对胶原溶液稳态剪切、动态黏弹性、触变和蠕变的影响。稳态剪切实验表明,未交联的胶原溶液和NHS-AA交联后的胶原溶液均表现出明显的假塑性,其剪切黏度均随着剪切速率的增大而减小;同一剪切速率下,NHS-AA用量越大,胶原溶液的剪切黏度越大。通过动态黏弹性测试发现,随着NHS-AA的加入,胶原溶液的弹性模量显著增大,使得其弹性特征更明显。触变测试的结果表明,在胶原溶液中加入越多的NHS-AA,其触变环面积也越大,说明对胶原溶液施加剪切作用后,其结构更难回复了。蠕变测试结果显示,NHS-AA用量越大,胶原溶液柔量越小,意味着NHS-AA的加入可以增强胶原溶液抵抗形变的能力。以上实验结果证明NHS-AA交联可以调节胶原溶液的流变学性能。

11-苄硫醇十一酸-N-羟基琥珀酰亚胺酯的制备

硫醇类化合物通过Au-S可以共价结合于金表面,形成高度有序的自组装膜,因而硫醇及其衍生物的合成引起了人们的广泛兴趣,而本文主要是通过活化酯法合成含不同链长的巯基生物素衍生物的中间体——11-苄硫醇十一酸-N-羟基琥珀酰亚胺酯,并用1HNMR对产物的分子结构进行了表征。

甲烷磺酸N-羟基琥珀酰亚胺酯的制备及其在寡肽合成中的应用

制备甲烷磺酸N-羟基琥珀酰亚胺酯,并将其应用于寡肽的液相合成.以N-羟基琥珀酰亚胺与甲烷磺酰氯反应制备甲烷磺酸N-羟基琥珀酰亚胺酯,并使其与Boc保护的酪氨酸、丙氨酸或Boc保护的酪氨酰脯氨酸发生SN2取代反应,生成相应的N-羟基琥珀酰亚胺活泼酯而活化羧基,并成功用于内吗啡肽-2和力肽的液相合成;N-羟基琥珀酰亚胺活泼酯的制备和应用反应条件温和、副产物少、收率较高.实验结果表明,甲烷磺酸N-羟基琥珀酰亚胺酯可用于寡肽的液相合成.

N-羟基琥珀酰亚胺-荧光素-O-乙酸酯柱前衍生HPLC分离荧光检测肽及其水解产物

探索了N-羟基琥珀酰亚胺-荧光素-O-乙酸酯(SIFA)与氧化型谷胱甘肽(GSSG)、三甘肽(Gly-Gly-Gly)、二甘肽(Gly-Gly)和组成它们的氨基酸-谷氨酸(Glu)、胱氨酸(Cys2)、甘氨酸(Gly)反应的衍生条件以及其衍生物的色谱分离条件。于含pH8.5的0.2 mmol/L H3BO3-Na2B4O7缓冲溶液中衍生25 min,衍生反应液直接进样,采用C18柱,以含42％甲醇的pH5.0 10mmol/L H3cit-Na2HPO4缓冲溶液为流动相,在λex/λem=492/513 nm处荧光检测,分离测定了六种肽及其组成氨基酸的衍生物,检出限为O.64～12 fmol。该方法具有流动相体系简单、灵敏度更高等优点。

N-琥珀酰亚胺4-[^(18)F]氟苯甲酸酯的合成

合成了18F标记多肽和蛋白类药物中常用的中间体N-琥珀酰亚胺-4-[18F]氟苯甲酸酯([18F]SFB)。由于[18F]SFB能和生物分子结合达到较高的标记率以及具有较好的体内稳定性,成为一种最适宜的氟-18标记试剂。本工作首先合成标记前体乙基-4-三甲胺苯甲酸酯-三氟磺酸盐,接下来经三步放射合成,然后经Sep-PakC18柱分离可得[18F]SFB,并对第一步的18F标记反应进行了优化。合成时间约1h;放化产率约50%;经放射性TLC和HPLC分析,放化纯度大于98%。

3-正丁基锡-N-琥珀酰亚胺苯甲酸酯的合成及其^(125)I标记

合成了3-正丁基锡-N-琥珀酰亚胺苯甲酸酯(ATE)和N-琥珀酰亚胺-3-碘苯甲酸酯(SIB),其产率分别为45.4%和71.4%,并用核磁、质谱、红外等对它们的结构进行了表征。对ATE进行了125I标记,得到S125IB,标记率可达93.0%,放化纯度>98.0%。本方法为放射性药物碘的间接标记提供了重要参考。

硫辛酸N-琥珀酰亚胺基酯的合成研究

利用两种方法合成了硫辛酸N-琥珀酰亚胺基酯,并用核磁和质谱进行了结构表征。

N-琥珀酰亚胺3-[^(125)I]碘苯甲酸酯(S^(125)IB)的放射化学合成

利用Iodogen法成功地对N-琥珀酰亚胺 3-(三正丁基锡)苯甲酸酯(ATE)进行了放射性碘-125标记,利用Sep-Pak硅胶柱实现了干扰蛋白标记的ATE及Iodogen与S125IB的分离,得到了放射性碘间标蛋白质有用的中间体S125IB,标记率93%以上。并研究了影响标记的因素,得出较佳标记条件为:ATE与 Na125I摩尔比6:1、氧化剂 Iodogen用量7mg、室温反应5min。

N-琥珀酰亚胺-3-碘[^(125)I]苯甲酸酯标记人IgG

研究能有效降低抗体的体内脱碘的标记方法。碘标记N-琥珀酰亚胺-3-(三正丁基锡)苯甲酸酯(ATE)前体,得到N-琥珀酰亚胺-3-碘[125I]苯甲酸酯(S125IB),分别与人IgG和抗人肝癌单抗(Hepama-1)进行偶联,探索最佳标记条件,并测定标记物的稳定性和生物活性,研究直接标记和间接标记的Hepama-1在正常小鼠体内的生物学分布。结果表明,用N-氯代琥珀酰亚胺(NCS)法125I标记ATE前体,在ATE用量为25～100μg、NCS用量为10～20μg、磷酸盐缓冲溶液(PBS)用量为10～20μL、反应时间为5 min时,标记率大于95%;S125IB和人IgG的偶联率最高可达75%,偶联产物稳定性、生物活性良好;与Hepama-1偶联率可达75%以上。生物分布的对比实验证明,1,3,4,6-四氯-3α,6α-二苯甘脲(Iodogen)直接标记的Hepama-1在甲状腺的放射性摄取率(脱碘显示)最高是S125IB间接标记的Hepama-1的87.9倍。这说明以ATE为前体的放射性碘间接标记蛋白质方法与传统的碘直接标记方法相比较,在解决体内严重脱碘问题上具有明显的优越性。

N-羟基琥珀酰亚胺生物素酯的制备及其热稳定性研究

目的研究N-羟基琥珀酰亚胺生物素酯(BNHS)的制备及其稳定性研究。方法以D-(+)-生物素为原料,与N-羟基琥珀酰亚胺在N,N'-二环己基碳二亚胺作用下反应生成N-羟基琥珀酰亚胺生物素酯,用差示扫描量热法和热重分析研究分析N-羟基琥珀酰亚胺生物素酯的热稳定性和热分解过程。结果合成工艺的收率为79.7%以生物素计。在氮气氛(氮气流量为20 mL·min^(-1))、10 K·min^(-1)的升温条件下,N-羟基琥珀酰亚胺生物素酯在353℃发生剧烈分解,至500℃几乎分解完全。结论所用制备方法简单、产率良好,适合大量制备,且产物热稳定性好。

半自动化合成N-琥珀酰亚胺-4-^(18)F-氟苯甲酸酯

通过对现有半自动化学合成模块(CPCU)的改造,以乙基-4-三甲胺苯甲酸酯-三氟磺酸盐为反应前体合成用于标记蛋白质、抗体及多肽等生物分子的辅助基团N-琥珀酰亚胺-4-18F-氟苯甲酸酯(18F-SFB),产物用高效液相色谱(HPLC)进行检测。合成过程在80 min内完成,校正后得到中间产物18F-FBA,产率为80%±5%(n=8),而终产品18F-SFB总衰变校正后的放化收率为40%±5%(n=20),放化纯度≥99%。利用CPCU半自动化合成18F-SFB,方法简便,产率稳定。该法为将来多肽等生物分子的18F标记提供了依据。

2-氯苄基-N-琥珀酰亚胺基碳酸酯的合成研究

以2-氯苄醇和三氯甲基碳酸双酯为起始原料,以二氯乙烷为溶剂,合成了氯甲酸2-氯苄酯,并和N-羟基琥珀酰亚胺反应制备得到肽类保护剂2-氯苄基-N-琥珀酰亚胺基碳酸酯。对反应条件进行了优化,两步反应的总收率接近50%,所得产品经1H NMR确证。

N-(4-丁酸甲酯)-4-羟基-1,8-萘酰亚胺葡萄糖醛酸苷的高效制备

使用猪肝微粒体对N-(4-丁酸甲酯)-4-羟基-1,8-萘酰亚胺进行生物转化,实现了N-(4-丁酸甲酯)-4-羟基-1,8-萘酰亚胺葡萄糖醛酸苷的高效制备。同时借助C18AEX固相萃取小柱实现了代谢产物的高效收集、快速离及纯化,最终获得的目标代谢产物纯度大于98%,其结构通过质谱、核磁共振等手段进行了表征。

三种苯甲酸琥珀酰亚胺酯的合成

以对甲氧基苯甲酸、3,4-二甲氧基苯甲酸、3,4,5-三甲氧基苯甲酸为原料,以三氟乙酸N-琥珀酰亚胺酯为活化剂合成了3种苯甲酸琥珀酰亚胺酯,经1 HNMR、IR对其结构进行了表征,并对反应投料比及反应时间进行了优化。

N-羟基琥珀酰亚胺作为(pq)_(2)Ir(acac)共反应剂电致化学发光法检测Hg^(2+)

制备了(pq)_(2)Ir(acac)(pq=2-苯基喹啉,acac=乙酰丙酮)并对其进行表征。采用N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)作为中性混合溶剂中(pq)_(2)Ir(acac)的共反应剂,获得强的电致化学发光(ECL)信号。向该体系中加入Hg^(2+)后,因NHS与Hg^(2+)的特异性螯合作用,阻断了NHS与(pq)_(2)Ir(acac)之间的共反应,使得其ECL响应显著降低,据此构建了灵敏检测Hg^(2+)的方法。优化条件下,(pq)_(2)Ir(acac)/NHS体系ECL强度变化的对数值与Hg^(2+)浓度的自然对数值在0.1~90μmol/L范围内呈良好的线性关系,检出限达33 nmol/L。(pq)_(2)Ir(acac)/NHS体系对Hg^(2+)具有良好的选择性和稳定性。该方法可用于测定实际水样中Hg^(2+)浓度。