羰基咪唑法固定化pH梯度毛细管等电聚焦电泳用于蛋白质分离

本文以N,N′-羰基二咪唑作为连接臂,将两性电解质(CAs)与毛细管内壁进行偶联。在电场作用下,CAs在毛细管内按照等电点次序依次分开,再通过与羰基二咪唑的化学键合,形成固定化pH梯度。该方法操作简单,适用于两步法毛细管等电聚焦分离蛋白质等两性生物大分子。考察了对血红蛋白、牛血清白蛋白及胃蛋白酶三种蛋白质混合样品的分离,证明该方法可行。

虾仁中酸性红73间接ELISA检测方法的建立

本文采用活性酯法和N，N-羰基二味唑法分别合成了酸性红73的人工抗原，方阵滴定实验表明活性酯法所得兔抗酸性红73的IgG更适合用于后继实验，以此为基础建立了一种虾仁中酸性红73的间接ELISA检测方法井对反应条件进行了优化。优化后，该方法的半敬抑制浓度（IC50）为45．39μg/L，检测限（LOD）为5．64μg／L。交叉反应实验结果表明除苏丹红3号（0．15％）外与番红花红、苯酚红、刚果红、碱性品红和胭脂红等其他竞争物无交叉反应。在虾仁中的空白添加回收率范围为71．3％-84．4％，变异系数（RSD）〈9．55％。此法可用于虾仁中酸性红73的残留检测，并为进一步制备单克隆抗体和研制快速检测试制盒奠定了基础。

纳米纤维素接枝环氧基的制备与表征

以微晶纤维素(MCC)为原料,采用酸水解法制备纳米纤维素(NCC),再以N,N-羰基二咪唑(CDI)活化纳米纤维素表面的羟基,最后将其与环氧氯丙烷进行接枝反应,得到接枝环氧基的纳米纤维素(NCC-g-ECH)。采用透射电镜、红外光谱、溶解性、接枝率、X射线衍射对所制得的样品NCC和NCC-g-ECH的结构和性能进行表征。结果表明,实验制得的NCC符合纳米尺寸; NCC-g-ECH的红外图中出现明显的环氧基峰; NCC-g-ECH的接枝率最大达到8. 47%;与NCC相比,样品NCC-g-ECH在丙酮中能均匀、稳定地分散; NCC和NCC-g-ECH均为纤维素Ⅰ晶型,NCC-g-ECH的结晶度比NCC减小8. 59%。

酸性红73人工抗原的合成与鉴定

为进一步制备酸性红73新型人工抗原,试验采用N,N-羰基二咪唑(CDI)法合成酸性红73的免疫原和包被原,经紫外扫描和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定偶联成功,酸性红73与牛血清白蛋白(BSA)、卵清蛋白(OA)的偶联比分别为9∶1和5∶1。免疫后所得兔源多克隆抗体,采取双向琼脂扩散实验和方阵滴定法确定包被抗原和抗体的最适工作浓度分别为1∶4000、1∶8000。

盐酸乌拉地尔的新合成工艺研究

以3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙酸(2)和1-(2-甲氧基苯基)哌嗪盐酸盐(3)为起始原料,通过活性酯法进行酰胺合成,得[3-[4-(2-甲氧基苯基)哌嗪-1-基]-3-氧代丙基]氨基甲酸叔丁酯(4),再经脱保护得3-[4-(2-甲氧基苯基)哌嗪-1-基]丙胺三盐酸盐(6盐酸盐),最后与6‑氯‑1,3‑二甲基尿嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(7)缩合得盐酸乌拉地尔(1盐酸盐)。目标产物经HPLC、^(1)H NMR、^(13)C NMR、MS和元素分析确证。总收率达61.2%(以2计),纯度99.95%。改进后的工艺解决了关键中间体6国产化的技术难题,适合工业化生产。