花生四烯酸氨基乙醇对人成牙本质细胞样细胞MMP-9表达的影响

目的探讨花生四烯酸氨基乙醇(anandamide,AEA)对人成牙本质细胞(HODs)样细胞中基质金属蛋白酶(MMP)-9表达的影响。方法体外培养HODs样细胞,免疫荧光进行形态和功能验证,四甲基偶氮唑盐(MTT)法研究AEA对HODs样细胞活性影响,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western blotting检测AEA处理后MMP-9基因和蛋白表达水平及AEA的作用受体大麻素受体1,2和TRPV1的表达,并检测MAPK信号通路的调控作用。结果大麻素受体1,2和TRPV1在HODs样细胞中表达,不同浓度AEA和不同处理时间可刺激MMP-9基因和蛋白表达水平提高。抑制大麻素受体1,2和TRPV1后AEA诱导的MMP-9表达水平下降,其中大麻素受体1和TRPV1作用较强。JNK信号通路在AEA对MMP-9的表达调节中起主导作用。结论AEA主要通过大麻素受体1和TRPV1调控HODs样细胞中MMP-9的表达,JNK信号通路是此过程的主要调节通路。

内源性大麻素N-花生四烯酸氨基乙醇介导卵巢癌细胞自噬和内质网应激

目的:探讨内源性大麻素N-花生四烯酸氨基乙醇(AEA)在卵巢癌中的作用,并深入研究其作用机制。方法:ELISA实验分析健康对照组和卵巢癌组患者血清中AEA的水平,并结合ROC曲线评估AEA对卵巢癌患者的诊断价值;结合CCK-8实验、Transwell小室侵袭实验和划痕实验检测AEA对卵巢癌细胞活性、迁移和侵袭的影响;并通过肿瘤体积、瘤重的测量及瘤组织肉眼观图进一步验证AEA对卵巢癌的作用;同时用流式细胞术和Western blot检测AEA对卵巢癌细胞凋亡的影响,进而采用Western blot检测卵巢癌细胞自噬及内质网应激相关蛋白的水平,探究其促进卵巢癌细胞凋亡的机制。结果:卵巢癌患者体内AEA的含量较健康对照组显著下降,ROC结果提示AEA有望成为区分卵巢癌患者和健康个体的灵敏性生物学标志物,且AEA可以抑制卵巢癌细胞的活力、迁移、侵袭,抑制卵巢癌组织生长。结论:AEA通过促进卵巢癌细胞内质网应激并影响其自噬,进而促进卵巢癌细胞凋亡。

花生四氢酸氨基乙醇对体外培养的牛眼小梁网细胞基质金属蛋白酶-3和基质金属蛋白酶抑制剂-1表达的影响

目的观察花生四氢酸氨基乙醇(AEA)对体外培养的牛眼小梁网细胞基质金属蛋白酶-3(MMP-3)和基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)表达的影响。方法对牛眼小梁网细胞进行原代及传代培养,并进行鉴定。对传3代的牛眼小梁网细胞分别施加AEA浓度为0.0、0.1、1.0、10.0μmol·L-1的无血清培养液,作用24 h后提取细胞上清液,并制备10.0μmol·L-1作用6、12、18、24 h的细胞上清液,用酶联免疫吸附测定法检测AEA作用后细胞上清液中MMP-3及TIMP-1水平的变化。结果随着AEA浓度的增加,MMP-3及TIMP-1水平均逐渐增加,并呈剂量依赖性(P<0.05)。10.0μmol·L-1AEA作用6、12、18、24 h后的MMP-3、TIMP-1水平均高于0.0μmol·L-1组(P<0.05),且MMP-3、TIMP-1水平随着作用时间的延长逐渐增加,各时间点之间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论AEA可以促进MMP-3的分泌,早期AEA可以抑制TIMP-1的分泌,进一步打破MMP-3及TIMP-1的平衡,影响细胞外基质的降解,从而起到降低眼压的作用。

N-花生四烯酸氨基乙醇对小鼠肝片去甲肾上腺素递质体外释放的影响

目的探讨N-花生四烯酸氨基乙醇(anandamide,AEA)对肝组织中去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)的影响及可能的神经生物学机制。方法制备肝片,用高效液相色谱-电化学(HPLC-ECD)方法检测AEA在体外对肝片NE释放的影响。结果随着AEA浓度的增加,AEA对肝片NE含钙自发性释放的抑制率(与对照组比较)逐渐下降并显现剂量-效应关系;而对无钙自发性释放抑制率先降低后升高,最低为11.43%。对肝片NE含钙去极化释放的抑制率先升高后降低,最高为39.17%,当AEA浓度达到20μmol/L时,对肝片NE的作用表现为刺激而不是抑制;对无钙去极化释放抑制率先升高后降低,最高为85.29%。结论AEA对NE自发性和去极化释放过程均有干扰作用,且该作用与钙离子有一定关系。

硅胶负载四氯化锡催化合成N,N-二乙氨基乙醇己酸酯

以硅胶为载体,用浸渍法制备了不同负载量的SnCl4催化剂,用于催化合成DA-6(N,N-二乙氨基乙醇己酸酯),通过BET法对SnCl4/SiO2催化剂的表面结构进行了分析。考察了SnCl4负载量、催化剂用量、原料摩尔配比、反应温度对N,N-二乙氨基乙醇己酸酯收率的影响,实验结果表明:当n(N,N-二乙氨基乙醇):n(己酸)=1:1.2、54.1%SnCl4/SiO2催化剂用量为反应原料的2(m/m)%、溶剂为甲苯、反应时间6h时,DA-6收率达94.4%。

N-花生四烯酰乙醇胺及其类似物的神经保护作用

N-花生四烯酰乙醇胺(anandamide,AEA)属于内源性大麻素类长链脂肪酸衍生物,可通过大麻素受体(CB1/CB2)和(或)非CB1/CB2受体途径发挥神经保护作用。AEA类似物包括脂氨基酸类、脂肪酰乙醇胺类和甲基氟膦酸酯类化合物等。AEA类似物在生物活性及化学结构上与AEA相似,但作用靶点及作用机制并不完全相同,非CB1/CB2受体途径介导的神经保护活性及对脂肪酸酰胺水解酶活性的调节作用为该类化合物的重要特征。由于AEA作用于多靶点所致的许多副作用,给其临床试验和应用带来一定困难,而AEA类似物可能既具备AEA的神经保护活性又避免其毒副作用,因此研究AEA类似物的神经保护作用具有重要的理论意义和应用价值。本文主要对AEA及其类似物的神经保护活性和其作用机制进行综述。

N-花生四烯基乙醇胺对背根神经节轴突再生的影响

背景:神经轴突再生主要受其自身再生能力和抑制性外环境的影响,N-花生四烯基乙醇胺在秀丽线虫中已被证实可以调控神经轴突再生,而在哺乳动物中的作用仍是未知。目的:探究N-花生四烯基乙醇胺对小鼠背根神经节神经元轴突再生的作用。方法:取6-8周龄ICR小鼠的L4-L5处背根神经节组织,经过胶原酶和胰酶消化后,分成脂肪酸酰胺水解酶选择性抑制剂URB597干预组、N-花生四烯基乙醇胺干预组、二甲亚砜对照组、电转绿色荧光蛋白与特异性脂肪酸酰胺水解酶siRNA混合物组。细胞经过3 d的体外培养后,通过神经元特异性抗体免疫标记轴突,测量轴突长度、初级分支和次级分支数量并对其进行统计,判断N-花生四烯基乙醇胺对背根神经节神经元轴突再生的调控作用。结果与结论:①抑制脂肪酸酰胺水解酶活性后,背根神经节细胞轴突再生没有明显的变化并且URB597对背根神经节神经元不具有细胞毒性作用(P>0.05);②敲减脂肪酸酰胺水解酶后,背根神经节细胞轴突再生没有明显的变化(P>0.05);③外源性N-花生四烯基乙醇胺对背根神经节细胞轴突再生没有明显的调控作用,并且N-花生四烯基乙醇胺,对背根神经节神经元细胞没有细胞毒性作用(P>0.05);④无论是抑制脂肪酸酰胺水解酶活性还是加入外源性N-花生四烯基乙醇胺,对背根神经节神经元轴突分支均没有影响(P>0.05)。

N-花生四烯酸氨基乙醇通过CB1受体及脂筏介导抑制结肠癌细胞的生长

目的研究内源性大麻素N-花生四烯酸氨基乙醇（AEA）对结肠癌细胞系CaCo-2增殖及凋亡的影响，阐明CBl受体和脂筏所起的作用，进一步明确大麻素系统在结肠癌发生、发展中的作用及其分子机制。方法分别以不同浓度的AEA、AEA＋SRl41716A（CBI受体拮抗剂）、AEA＋AM630（CB2受体拮抗剂）和AEA甲基-B-环糊精（MCD，脂筏的耗竭剂）孵育结肠癌细胞CaCo-2。采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞的增殖活性，annexinVPE-7AAD双染流式细胞术检测细胞的凋亡，利用Westernblot方法检测CBI、CB2、磷酸化蛋白激酶B（p-AKT）和caspase-3蛋白的表达。结果AEA呈剂量依赖性地抑制结肠癌细胞CaCo-2的增殖，5、10、20、40μmol／I。AEA的抑制率分别为（21．52±0．45）％、（42．16±0．21）％、（73．64±0．73）％和（83．28±0．71）％。SRl41716A和MCD均能拮抗AEA所导致的增殖抑制效应。20μmol／LAEA、20μmol／LAEA＋10μmoL／LSR141716A及20μmol／LAEA＋1mmol／LMCD的细胞增殖抑制率分别为（73．64±0．73）％、（16．15±0．75）％和（12．58±0．63）％。流式细胞术检测结果照示，AEA可致CaCo-2细胞凋亡，H只有MCD能有效地拈抗AEA所致的CaCo-2细胞凋亡。对照组、20μmol／LAEA组和20μmol／LAEA＋1mmol／LMCD组的细胞凋亡率分别为（2．95±0．73）％、（39．61±0．73）％和（14．10±0．64）％。Western blot检测结果显示，CB1、CB2、p-AKT及caspase-3蛋白在CaCo-2细胞中均有表达。AEA可抑制p-AKT的表达，促进caspase－3蛋白的表达，这两种效应均能被MCD拮抗。SR141716A能拮抗AEA对p-AKT蛋白表达的抑制作用。结论内源性大麻素AEA可以有效地抑制结肠癌细胞CaCo-2的增殖并促进其凋亡，其抑制增殖的效应通过CBl受体和脂筏介导，促凋亡效应通过脂筏介导。大麻素系统在结肠癌的发生、发展中起重要作用，其中脂筏尤为关键。

1992—2010年N-花生四烯酰乙醇胺研究文献计量分析

通过文献计量学方法分析内源性大麻素N-花生四烯酰乙醇胺(anandamide,AEA)的研究现状。以anandamide为关键词在ISI Web of Knowledge数据库中检索相关文献,对其发表时间、语种、作者、期刊来源、学科类别和被引用次数等进行分析。共检索相关文献3015篇,主要作者、国家、期刊、学科类别、发表时间依次为:Di Marzo V(220篇)、美国(1254篇)、Br J Pharmacol(189篇)、生物化学与分子生物学类(2631篇)、2009年(318篇)。AEA领域的研究正逐渐受到世界各国研究者的重视,但其产业化、规模化发展还需要很长的发展过程。

氨基酸离子液体-MDEA混合水溶液对CO2的吸收研究

二氧化碳的过量排放，给全球气候环境造成了严重的负面影响。二氧化碳的排放控制直接关系着工业生产、气候、人类健康和能源利用等方面，因此对脱碳技术的研究显得尤为重要和迫切。目前工业上使用较多的有机胺吸收法存在诸多的缺点，如MEA虽然吸收CO2速率快，但腐蚀性强且再生能耗高，MDEA有较高的CO2吸收负荷，但吸收速率较慢。离子液体的特殊优良性能使其可作为一种环境友好的脱碳吸收剂，

N-花生四烯甘氨酸(NAGly)缓解七氟烷诱导的发育期大鼠原代海马神经元神经毒性

目的探讨N-花生四烯酰乙醇胺(N-arachidonoylethanolamine,AEA)类似物N-花生四烯甘氨酸(Narachidonoyl glycine,NAGly)对发育期大鼠原代海马神经元七氟烷暴露诱导的神经毒性的保护作用。方法体外培养7 d的原代海马神经元经七氟烷暴露,同时给予NAGly处理,采用TUNEL染色和流式检测细胞凋亡。Western blot检测凋亡蛋白表达。结果 NAGly促进细胞活性,抑制了七氟烷诱导的凋亡。NAGly改善了七氟烷暴露诱导的ERK1/2活性抑制。MEK抑制剂能够破坏NAGly的神经保护作用。结论 AEA类似物NAGly能够保护发育期海马神经元改善七氟烷诱导的神经毒性,其可能机制是通过上调MEK/ERK1/2 MAPK信号通路实现的。

内源性大麻素对体外培养的牛眼小梁细胞PGE2表达及细胞骨架的影响

目的:研究内源性大麻素N-花生四氢酸氨基乙醇(anan-damide,AEA)对体外培养的牛眼小梁细胞细胞骨架及PGE2表达的影响。方法:对牛眼小梁细胞进行原代及传代培养,并行鉴定。对传3代的牛眼小梁细胞分别施加AEA浓度分别为0,0.1,1.0,10μmol/L的无血清培养液,作用24h后提取细胞上清液,并将细胞置于倒置显微镜下摄像,计算机图像分析系统计算细胞面积。用ELISA法检测PGE2浓度的变化。结果:AEA可以产生明显的细胞舒张效应,呈浓度依赖性。而且在一定范围内可以成剂量依赖性的促进PGE2的表达。与对照组均有显著性差异(P<0.05)。结论:AEA可引起小梁细胞的舒张和促进PGE2的释放。

内源性大麻素—生物合成、信号转导及生物降解

大麻素系统由内源性大麻素、大麻素受体和内源性大麻素失活系统三部分组成,该系统失衡与多种中枢神经系统和免疫系统疾病有关。内源性大麻素水平是衡量大麻素系统活性的主要指标。内源性大麻素代谢途径的深入研究对揭示大麻素系统生理、病理作用以及设计基于该系统的新型治疗药物至关重要。该文综述内源性大麻素的生物合成、信号转导及其降解过程。

CB1受体介导AEA对齿状回抑制性突触的抑制作用

目的探讨大麻素受体1(CB1)在N-花生四烯酸乙醇胺(AEA)对海马齿状回颗粒细胞的抑制性突触的作用。方法应用电压钳技术在海马脑片齿状回颗粒细胞记录抑制性突触后电流(IPSC),观察CB1受体的特异性抑制剂SR141716A(SR)和AEA对齿状回IPSC的影响。结果 (1)AEA对齿状回的抑制性突触具有抑制作用;(2)SR可翻转AEA对齿状回IPSC的抑制效应。结论 CB1受体介导AEA对齿状回抑制性突触的抑制作用。

室旁核内脂肪酸酰胺水解酶上调介导慢性心衰大鼠交感神经兴奋亢进

目的:探讨慢性心衰大鼠室旁核(PVN)内脂肪酸酰胺水解酶(FAAH)表达失衡导致中枢交感传出增加的机制。方法:雄性Wistar大鼠左冠状动脉结扎8周后,用超声心动图检测心功能,并通过组织病理学测定心肌梗死面积,鉴定大鼠心衰模型构建成功;酶联免疫吸附法测血浆去甲肾上腺素(NE)水平;Western blot测定PVN内FAAH蛋白表达量;高效液相色谱法测定PVN内N-花生四烯酰乙醇胺(AEA)的生成量;PVN微量注射AEA、FAAH抑制剂PF3845或r AAV2-FAAH sh RNA病毒,记录交感驱动和心功能指标的变化。结果:与假手术组相比,心衰组心功能显著降低,血浆NE显著增加,PVN内FAAH表达量显著上调,AEA生成量显著减少(P<0.05);PVN微量灌注PF3845、AEA或r AAV2-FAAH sh RNA病毒后,心衰组交感驱动指标显著降低,心功能明显改善。结论:心衰状态下PVN内FAAH蛋白表达上调可能引起AEA生成量的减少,从而增强交感神经兴奋性,恶化心衰。

高CO2负荷的离子液体复合吸收剂的开发与性能表征

二氧化碳作为一种主要的“温室气体”过量排放，给全球气候环境造成了严重的负面影响。但同时二氧化碳也是一种潜在的资源，二氧化碳是与氢气合成甲醇的重要原料。超临界二氧化碳也得到愈来愈广泛的应用，如作为石油开采的助采剂，能够有效地提高的石油的开采率。因此，脱碳技术的研究显得尤为重要和迫切。目前工业上使用较多的有机胺吸收法存在诸多的缺点，如MEA虽然吸收CO2速率快，但腐蚀性强且再生能耗高，MDEA有较高的CO2吸收负荷，但吸收速率较慢。离子液体的特殊优良性能使其可作为一种环境友好的脱碳吸收剂，其中氨基酸离子液体对CO2有较高的吸收速率。因此将离子液体和有机胺复配使用成为新型的脱碳吸收剂研究热点。本课题组张等人合成了4种季铵类的离子液体：[N1111][Gly]，[N2222][Gly][N1111][Lys]和[N2222][Lys]，

基于内源性大麻素探讨皂术抗纤方治疗肝纤维化大鼠的作用机制

目的:基于内源性大麻素研究皂术抗纤方对肝纤维化大鼠的药理效应及其作用机制。方法:按照随机数字表法将40只Wistar雄性大鼠随机分为正常组、模型组、皂术抗纤方组和安络化纤丸组,每组10只。模型组、皂术抗纤方组和安络化纤丸组给予四氯化碳(CCl4)腹腔注射8周,复制肝纤维化模型。第5~8周,皂术抗纤方组、安络化纤丸组分别给予皂术抗纤方(16.1g/kg)、安络化纤丸(30g/kg)治疗。检测各组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平,肝组织羟脯氨酸(Hyp)、N-花生四烯酸氨基乙醇(AEA)、2-花生四烯酸甘油(2-AG)及内源性大麻素水解酶脂肪酰胺水解酶(FAAH)、单酰基甘油酯酶(MGL)mRNA表达量变化。结果:与正常组比较,模型组大鼠肝组织出现明显肝纤维化,血清ALT、AST水平及肝组织Hyp、AEA、2-AG含量显著升高(P<0.01),FAAH、MGL mRNA表达显著降低(P<0.01)。与模型组比较,皂术抗纤方组、安络化纤丸组血清ALT、AST水平及肝组织Hyp含量均显著降低(P<0.01),皂术抗纤方组肝组织大麻素AEA、2-AG含量显著降低(P<0.01),FAAH、MGL mRNA表达显著升高(P<0.01)。结论:皂术抗纤方治疗肝纤维化效果显著,其作用机制与调节内源性大麻素有关。