N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯测定水蛭提取物生物活性

目的:建立水蛭提取液生物活性测定方法。方法:用N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯(BAEE)为底物,通过测定反应体系中未被水蛭提取物抑制的凝血酶的量,间接测定水蛭提取物抗凝血酶的生物活性。结果:水蛭提取物的生物活性测定曲线线性关系良好,回归方程为Y=0.0014X+0.0196,r=0.9994。结论:本方法于30℃条件下反应25min进行测定,日间、日内精密度分别为2.6%和1.9%,适宜作为提取物生物活性测定方法。

N~α-月桂酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐对5种果蔬腐败菌的抑菌活性

通过体外抑菌试验评价N~α-月桂酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐(Nα-lauroyl-L-arginate ethylester,LAE)的抑菌活性。以果蔬腐败菌中具有代表性的指状青霉、意大利青霉、灰葡萄孢、链格孢、胡萝卜软腐病坚固杆菌为模式菌,测定LAE对5种腐败菌的最低抑制浓度(Minimum Inhibitory Concentration,MIC),并测定LAE对霉菌的菌丝生长抑制率以及对细菌的杀菌效果。同时探究LAE和其他几种果蔬防腐剂的联合抑菌效果。结果表明:LAE对4种真菌性腐败菌灰葡萄孢、链格孢、意大利青霉、指状青霉的MIC分别为400,200,400,400μg/mL,当LAE浓度达到对各菌的MIC后,能对各霉菌保持较高的菌丝抑制率,分别为100%(16h),78.2%(48h),81.8%(48h),79.1%(48h);LAE对细菌性腐败菌胡萝卜软腐病坚固杆菌的MIC为25μg/mL,且50μg/mL的LAE能在90min内完全杀灭受试菌;LAE与尼泊金甲酯钠共同使用时对模式菌有最佳的联合抑制效果。

N-苯甲酰-L-精氨酰胺的晶体结构

在水热条件下得到N-苯甲酰-L-精氨酰胺单晶,并用X射线衍射测定其晶体结构,化合物属单斜晶系,空间群为P21/n,分子式C13H20N5O2,Mr=278.34,晶胞参数:a=0.92838(15)nm,b=0.97000(16)nm,c=1.4836(2)nm,β=90.411(3)°,V=1.3360(4)nm3,Z=4,Dc=1.384g/cm3,R1=0.0596,wR2=0.1932,化合物分子通过氢键形成三维结构.

Nα-月桂酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐与山梨酸钾对榨菜的协同保鲜及诱导致腐菌的氧化应激作用

为了开发更安全有效的榨菜用保鲜剂,需要测试山梨酸钾(PS)和Nα-月桂酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐(LAE)以及其复配的抑菌性和应用效果,并探索其机理。本研究从腐烂榨菜分离出致腐菌作为研究对象,应用棋盘格法体外抑菌实验测试了不同pH环境下,LAE和PS对其最小抑菌浓度(MIC),以及测试了两者联合抑菌作用,并在榨菜保鲜中验证了效果。此外以分离出的最主要致腐菌为研究对象,对LAE胁迫下其过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性、DPPH自由基清除率、蛋白质含量、丙二醛(MDA)含量进行了测定。分离得到主要致腐菌:盐脱氮枝芽胞杆菌(Virgibacillus halodenitrificans),施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)和微紫青霉菌(Penicillium janthinellum)作为被试菌,结果显示LAE对其MIC为16~32 mg/L,PS对其MIC为256~1024 mg/L,PS表现出抑菌强度和酸度正相关,LAE则相反。PS和LAE对被试菌株表现出加合或协同联合抑菌作用。在袋装榨菜中LAE和PS复配使用能够抑制微生物增殖达1~2个数量级。在LAE胁迫下,细菌POD、CAT、SOD活性上升,DPPH自由基清除率、蛋白质和MDA含量下降。LAE和PS能够有效抑制榨菜中的致腐菌,并且拥有复配提效的潜力。此外,LAE潜在的抑菌机理可解释为其使微生物细胞膜完整性降低、氧化应激水平升高。

N-乙酰-L-酪氨酸乙酯偶氮衍生物的合成及偶氮-腙互变异构性质

以N-乙酰-L-酪氨酸乙酯为原料,与6个取代芳胺重氮盐在碱性条件下发生偶合反应,合成了6个新型的N-乙酰-L-酪氨酸乙酯偶氮衍生物,结构通过IR、~1H NMR进行了表征.探讨了所合成化合物的偶氮式-腙式互变异构以及溶剂和pH对紫外可见光谱的影响.结果表明,溶质-溶剂相互作用会影响化合物在不同溶剂的λmax发生微小的变化,分子内和分子间氢键的作用影响较大.溶液pH会直接影响偶氮式-腙式的平衡构成,随着pH的增加,腙式在偶氮-腙互变异构平衡中的比例逐渐增加.这些偶氮化合物有望成为一类潜在的pH指示剂.

佛波酯磷脂酰-L-丝氨酸(PEPS)中间体的合成工艺改进

目的改进佛波酯磷脂酰-L-丝氨酸(PEPS)的中间体3-苄基-2-(8-叔丁基二苯基硅氧辛酰基)-1-三苯甲基-sn-甘油(9)和N-叔丁氧羰基-L-丝氨酸二苯甲酯(11)的合成工艺。方法以D-甘露醇为原料,经丙叉基保护、氧化-还原、苄基保护、脱丙叉保护、选择性保护、酯化、羧基还原、硅烷基保护合成化合物9;以L-丝氨酸为原料,经氨基、羧基保护合成化合物11。结果与结论目标化合物的结构经1H-NMR谱确证,改进后的工艺,缩短了合成路线,简化了柱色谱分离、纯化步骤,具有原料易得,操作简便,成本低廉的优点。

4-(2-乙酰氨基-3-羧基丙酰氨基)苯甲酸的合成工艺研究

以L-天冬氨酸和乙酸酐为原料,经脱水环化合成N-乙酰-L-天冬酸酐,然后与对氨基苯甲酸经N-酰化反应合成得到新化合物4-(2-乙酰氨基-3-羧基丙酰氨基)苯甲酸。通过Scifinder查询,未发现它的报道。研究了物料配比、反应温度、反应时间和溶剂等因素对产物收率的影响。优化条件为:无水乙醇作溶剂,n(N-乙酰-L-天冬酸酐)∶n(对氨基苯甲酸)=1∶1,反应温度为45℃,反应时间为3 h。优化条件下产物收率为78.7%。目标化合物经熔点、红外和核磁氢谱确证。

双保护氨基酸N-乙酰-L-酪氨酸乙酯的合成工艺研究

以L-酪氨酸、乙酰氯为主要原料合成了N-乙酰-L-酪氨酸,再和乙醇与氯化亚砜反应得到的氯化亚硫酸乙酯反应得到N-乙酰-L-酪氨酸乙酯,产物结构经IR、1H NMR确证.单因素试验和正交试验结果表明,N-乙酰-L-酪氨酸乙酯合成的最佳工艺条件为:n(L-酪氨酸)∶n(氯化亚砜)∶n(乙醇)=1∶1.3∶10,加热温度75℃,加热时间2 h.该工艺具有原料价廉易得、反应周期短、产物易分离的特点,适于工业化大规模生产.

4-(N-乙酰氨基)-3-(4-芳基噻唑-2-氨基)苯甲酸乙酯的合成与生物活性

以3-氨基-4-乙酰氨基苯甲酸乙酯为原料设计合成了18种4-(N-乙酰氨基)-3-(4-芳基噻唑-2-基)-苯甲酸乙酯新化合物.化合物结构经质谱,元素分析,1H NMR和13C NMR确证.生物活性实验结果表明,化合物3d,3h,3p(40μg/mL)对神经氨酸酶(NA)的抑制率分别为36.02%,33.40%,42.05%;化合物3g,3h(500mg/L)对纹枯病菌的抑制率为50%.

新型细胞调节性死亡Parthanatos参与子痫前期胎盘损伤的机制研究

目的:验证新型细胞调节性死亡Parthanatos在子痫前期(PE)胎盘中的发生情况,探讨抗氧化剂N-乙酰-L-半胱氨酸乙酯(NACET)对PE滋养细胞的保护作用。方法:胎盘样本选自行剖宫产手术的PE患者15例(PE组)和正常妊娠分娩的产妇15例(NP组),利用蛋白质免疫印迹(Western blot)、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、免疫荧光、透射电镜评估PE患者胎盘中Parthanatos的发生情况。通过细胞计数8(CCK8)、Western blot、免疫荧光、荧光探针分别验证二甲基胍(MNNG)及NACET(分别为对照组、MNNG处理组、MNNG+NACET处理组)对HTR8/Sveno细胞Parthanatos的诱导和抑制作用。结果:①与NP组胎盘相比,PE组胎盘多聚腺苷二磷酸(ADP)核糖基聚合酶1(PARP1)mRNA及蛋白的表达增高,多聚ADP核糖(PAR)累积增多,线粒体受损严重,凋亡诱导因子(AIFM1)核定位增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。②与对照组相比,MNNG处理组表现为可以引起HTR8/Sveno细胞PARP1蛋白的表达增高,PAR累积增多,细胞内活性氧增多,线粒体膜电位下降,AIFM1核定位增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。③与MNNG处理组相比,MNNG+NACET处理组中5μmol/L的NACET能够显著提高细胞的存活率;伴随PARP1蛋白表达降低和PAR蛋白累积减少、细胞内活性氧水平降低、细胞核内AIFM1蛋白表达量降低、线粒体膜电位升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:PE胎盘中Parthanatos水平显著升高,MNNG可显著诱导HTR8/Sveno细胞发生PARP1依赖性的细胞调节性死亡,而NACET能够有效抑制MNNG诱导的滋养细胞Parthanatos的发生,有望成为PE临床治疗的新靶点。

胰酶颗粒的胰蛋白酶活性测定方法

目的:检测碳酸氢钠、果汁和水三种溶液溶解胰酶颗粒后的胰蛋白酶活性,以供临床医师使用时采用合适的溶剂作为参考。方法:以苯甲酰L-精氨酸乙酯为底物,用紫外吸收法测定胰蛋白酶的活性。结果:用蒸馏水作为溶剂溶解胰酶颗粒,胰蛋白酶活性最高。结论:碳酸氢钠易溶解胰酶,但用水溶液溶解的胰酶颗粒其胰蛋白酶活性最高。

一氧化氮对猪细小病毒体外增殖的影响研究

本文研究了来源于不同前体物的一氧化氮(Nitro oxide, NO)对猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)体外增殖的影响。结果表明,NO前体物S 硝基 N 乙酰青霉胺(SNAP)、L 精氨酸(L Arg)均能够有效地诱导 PK 15 细胞产生NO,进而显著地抑制PPV在PK 15 细胞上的复制,其效果与前体物的浓度呈正相关,在浓度为 100μmol/L和200μmol/L时,SNAP产生NO的能力与抑制病毒复制的作用要强于 L Arg。在病毒感染前 6 h和 3 h添加SNAP或L Arg对病毒复制的抑制作用比在病毒感染后3 h 和 6 h添加的作用强,表明 NO的抗病毒作用主要发生在病毒感染的初始阶段。此外,添加具有抑制 L Arg产生 NO作用的 N 硝基 L 精氨酸(L NNA)能抵消 L Arg体外抗病毒的作用。

采前喷施LAE提高蓝莓冷藏品质及其通径分析

目的探究Nα-月桂酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐(Nα-lauroyl-L-arginine ethyl ester hydrochloride,LAE)处理蓝莓影响冷藏好果率及其作用机制。方法采用逐步多元回归和通径分析方法,研究采前喷施LAE(0,30,60,90 mg/L)对蓝莓冷藏期间果实品质理化指标的影响。结果LAE处理的蓝莓在冷藏过程中还原糖的含量高峰比对照组推迟10 d以上,有效地使贮藏前期果实保持了较高的硬度和POD活性。在整个冷藏期中,30~60 mg/L LAE处理蓝莓果实的·OH清除率与好果率之间呈极显著正相关关系(P<0.01)。30 mg/L LAE处理的蓝莓冷藏15 d后,果实的硬度、可溶性固形物和还原糖含量分别比对照组高45.27%,23.81%和28.57%,总酸含量下降37.50%,好果率(86.8%)比对照组高16.04%。结论采前喷施30 mg/L LAE能提高冷藏蓝莓的好果率,果实的·OH清除率是影响好果率的决策因子,果实硬度通过·OH清除率对蓝莓好果率产生了较大的间接正向作用。

LAE和1-MCP联合处理在蟠桃常温货架贮藏中的应用

目的研究Nα-月桂酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐(LAE)和1-甲基环丙烯(1-MCP),以及其联合处理对蟠桃的常温货架耐贮藏性能的改善作用。方法采用0.2,0.5,0.8 g/L的LAE水溶液对蟠桃进行采前喷施,1μL/L的1-MCP采后熏蒸24 h,以及联合使用的处理。在25~30℃下贮藏11 d后,考察其相关指标。结果LAE和1-MCP处理能够抑制蟠桃腐烂,其中联合处理能够达到最大的抑腐效果,腐烂率为42.8%,在贮藏结束后处理组比对照组腐烂率减少了57.2%;1-MCP处理,以及其与LAE联合处理能够显著减缓贮藏中可溶性固形物(SSC)和还原性糖(RS)含量的下降,在贮藏初期能显著维持果实的硬度和脆度,减缓过氧化物酶(POD)活性的升高,在贮藏过程中能抑制多酚氧化酶(PPO)活性和丙二醛(MDA)积聚,从而减轻褐变程度。结论LAE和1-MCP联合处理能提升蟠桃的耐贮性,其中LAE作为抑菌剂能发挥抑制腐烂作用,1-MCP作为乙烯抑制剂能延缓果实后熟,降低氧化应激和褐变程度。

新型联苯胺替代偶氮化合物的合成及互变异构性质研究

以4,4’-二氨基苯甲酰替苯胺为重氮组分,以N-乙酰-L-酪氨酸为偶合组分,发生重氮化偶合反应,合成了一个新型的偶氮化合物,结构通过UV、1H NMR进行了表征。探讨了所合成化合物的偶氮式-醌腙式互变异构和顺反互变异构性质。结果表明,酸碱效应对偶氮-醌腙互变异构有着显著的影响。化合物在弱酸性条件下主要为醌腙体,中性条件下主要为偶氮体。在甲醇-水体系中,存在着一个pH依赖性的偶氮体-醌腙体分子离子平衡。偶氮化合物365 nm紫外光照射发生了反式-顺式光异构化过程,化合物可由稳定的反式结构变为顺式结构。

年糕保鲜剂筛选及其联合臭氧的应用分析

本研究主旨在于解决传统包装年糕生产工艺中,由于依赖包装后的水热灭菌,而导致的二次加热使年糕品质劣化的问题。本研究首先依据体外抑菌实验,筛选了抑制椰毒假单胞菌属酵米面亚种生长的有效保鲜剂,之后将其与臭氧联合应用于接种了椰毒假单胞菌和扩展青霉菌的年糕保鲜中。结果表明,Nα-月桂酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐对椰酵假单胞菌能够有效进行抑制,在之与臭氧协同应用中,能够将新鲜年糕在37℃非真空包装下达到4天的保质期。本研究为年糕等米制品相关产业中冷杀菌工艺的开发提供了理论基础。