期刊文献+
共找到15篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
基于超滤膜辅助的糖蛋白全N-连接糖链的富集和质谱解析(英文) 被引量:7
1
作者 杨刚龙 马恬然 李铮 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2014年第4期403-408,共6页
糖基化作为一种常见的蛋白质翻译后修饰,对蛋白质的空间结构、生物功能等具有重要的影响.解析糖蛋白糖链结构有助于更清楚地认识糖蛋白及其功能.本研究建立了一种基于超滤膜富集血清中糖蛋白全N-连接糖链,并利用质谱技术对糖链结构进行... 糖基化作为一种常见的蛋白质翻译后修饰,对蛋白质的空间结构、生物功能等具有重要的影响.解析糖蛋白糖链结构有助于更清楚地认识糖蛋白及其功能.本研究建立了一种基于超滤膜富集血清中糖蛋白全N-连接糖链,并利用质谱技术对糖链结构进行分析的方法.根据糖蛋白及其糖链结构之间的分子质量差异,利用Millipore公司的10 ku超滤膜富集血清糖蛋白上酶解(PNGase F)释放的全N-连接糖链,并使用MALDI-TOF/TOF-MS解析糖链结构.通过该技术可以从血清中富集并鉴定到23种独特的N-连接的糖链结构,并且利用二级质谱进行了结构确认.该方法可以被用于从大量生物样本中富集糖蛋白全N-连接糖链,可以达到快速、高通量地解析糖蛋白N-连接糖链的目的. 展开更多
关键词 n-连接糖 超滤膜辅助的蛋白全n-连接糖链富集法 超滤膜 蛋白
下载PDF
重组人红细胞生成素中N-连接糖的毛细管凝胶电泳-激光诱导荧光测定法 被引量:1
2
作者 周国华 罗国安 张晓丹 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期227-231,共5页
目的:表征重组人红细胞生成素中影响体内生物学活性的N连接糖谱。方法:以毛细管凝胶电泳激光诱导荧光检测法(CGELIF)测定了重组人红细胞生成素(rHuEPO)中N连接的多个糖基化形式,并以此为基础研究结构与活... 目的:表征重组人红细胞生成素中影响体内生物学活性的N连接糖谱。方法:以毛细管凝胶电泳激光诱导荧光检测法(CGELIF)测定了重组人红细胞生成素(rHuEPO)中N连接的多个糖基化形式,并以此为基础研究结构与活性的关系。结果:同一生产线上的样品,其N连接糖的CGELIF图谱基本一致;不同表达载体所表达的rHuEPO,其N连接糖的形式不同;活性不同的样品,各N连接糖组分的相对含量存在很大差异。结论:建立的方法可用于判断产品的来源及批间差异。 展开更多
关键词 n-连接糖 蛋白 RHUEPO CGE-LIF
下载PDF
毛细管电泳-激光诱导荧光法测定基因工程人细胞生成素的N-连接糖谱
3
作者 周国华 张晓丹 +3 位作者 刁勇 周勇 罗国安 程亚琴 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第8期609-612,共4页
目的 建立重组人红细胞生成素 (EPO)中影响体内生物学活性的含唾液酸和去唾液酸的N 连接糖的糖谱。方法 用肽糖苷酶F释放EPO中与天冬酰胺连接的寡糖 ,再用唾液酸酶脱去糖末端的唾液酸 ,采用荧光试剂APTS标记后 ,以毛细管凝胶电泳 激... 目的 建立重组人红细胞生成素 (EPO)中影响体内生物学活性的含唾液酸和去唾液酸的N 连接糖的糖谱。方法 用肽糖苷酶F释放EPO中与天冬酰胺连接的寡糖 ,再用唾液酸酶脱去糖末端的唾液酸 ,采用荧光试剂APTS标记后 ,以毛细管凝胶电泳 激光诱导荧光法分离和检测糖的各种形态。结果 EPO样品含有大致相同的N 连接糖谱 ;去唾液酸后的N 连接糖组分的保留时间延长 ;体内生物学活性不同的样品 ,其N 连接糖也有差异。 结论此法可用于判断EPO产品的来源及批间差异 ,与肽图相结合可作为EPO的指纹鉴别图谱 。 展开更多
关键词 毛细管凝胶电泳-激光诱导荧光检测法 重组人红细胞生成素 n-连接糖 去唾液酸n-连接糖
下载PDF
乳腺癌组织N-连接糖链的分析
4
作者 虞迪 和晓涵 杨刚龙 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期801-805,共5页
目的: 解析乳腺癌组织的特异性糖链结构,为乳腺癌的早期诊断提供可能标志物。方法:收集2014年5月至2014年9月在陕西省肿瘤医院乳腺科手术切除的乳腺癌患者组织标本15例及距癌组织边缘3-5 cm的癌旁组织标本5例,另选取乳腺小叶增生组... 目的: 解析乳腺癌组织的特异性糖链结构,为乳腺癌的早期诊断提供可能标志物。方法:收集2014年5月至2014年9月在陕西省肿瘤医院乳腺科手术切除的乳腺癌患者组织标本15例及距癌组织边缘3-5 cm的癌旁组织标本5例,另选取乳腺小叶增生组织标本4例,提取组织蛋白质,利用滤膜辅助的糖蛋白糖链释放方法获得N-连接糖链,应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDITOF/TOFMS)技术分析乳腺癌组织、癌旁组织和正常乳腺组织中糖蛋白N连接糖链类型分布和含量变化情况。结果:乳腺癌组织、癌旁组织和正常乳腺组织中分别鉴定到38、34和22个糖链。与癌旁组织及正常乳腺组织相比,癌症组织中复杂型、高甘露糖型、平分型、岩藻糖化和二天线型糖链的含量除高甘露糖型明显升高外,其他均显著降低(P〈0.05或P〈0.01)。乳腺癌组织中相对分子质量分别为1 580.455和1 742.490的2种高甘露糖型N糖链的含量显著高于正常乳腺组织(P〈0.05或P〈0.01)、相对分子质量分别为1 647.473和1 850.583的2种复杂型N-糖链的含量则显著低于正常乳腺组织(P〈0.05或P〈0.01)。这4种糖链经ROC曲线分析显示具有较高检测准确性(P〈0.05或P〈0.01)。结论:发现的4种乳腺癌组织特异性的N糖链有成为早期诊断和靶向治疗标志物的潜力。 展开更多
关键词 乳腺癌 n-连接糖 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱 肿瘤标志物
下载PDF
基于FFPE组织切片的膀胱癌N-连接糖链原位酶解及分析 被引量:1
5
作者 程颖 孙承文 +5 位作者 秦艳 时帅 李岳阳 樊启高 杨刚龙 高晓冬 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2022年第10期2001-2014,共14页
目的研究膀胱癌FFPE组织切片的N-连接糖链,发现膀胱癌FFPE肿瘤组织的异常N-连接糖链修饰情况。方法发展基于FFPE组织切片原位提取N-连接糖链的实验流程。通过PNGase F酶切FFPE组织解释放N-连接糖链。对N-连接糖链自由端进行全甲基化修... 目的研究膀胱癌FFPE组织切片的N-连接糖链,发现膀胱癌FFPE肿瘤组织的异常N-连接糖链修饰情况。方法发展基于FFPE组织切片原位提取N-连接糖链的实验流程。通过PNGase F酶切FFPE组织解释放N-连接糖链。对N-连接糖链自由端进行全甲基化修饰。通过MALDI-TOF/TOF-MS检测N-连接糖链的相对含量。进行数据库匹配,确定N-连接糖链的可能糖型。ROC分析用于预测显著差异N-连接糖链作为预测膀胱癌生物标志物的准确度。结果MALDI-TOF/TOF-MS检测泛甲基化修饰N-连接糖链的数据显示,在16例膀胱癌患者的肿瘤和癌旁组织的3次重复实验中,肿瘤组织中蛋白质高甘露糖型N2H6、N2H7、N2H8、N2H9和复杂型N5H6F1糖链修饰水平显著上升,同时高甘露糖型N2H5、杂合型N3H5以及复杂型N3H4、N4H4、N5H6F1S2糖链修饰水平显著下降。ROC分析显示,双天线型N-连接糖链N3H4(AUC=0.90)和N4H4(AUC=0.91)在单独或者共同区分膀胱癌患者肿瘤组织和癌旁组织中都具有很好的可靠性,可能成为膀胱癌的潜在生物标志物。结论膀胱癌FFPE肿瘤组织中存在蛋白质异常N-糖基化修饰,N-连接糖链N3H4和N4H4或可成为膀胱癌的潜在生物标志物。 展开更多
关键词 n-连接糖 膀胱癌 FFPE切片 生物标志物
下载PDF
红曲霉葡萄糖淀粉酶N-连接糖链的初步研究 被引量:2
6
作者 于海妮 腰锐锋 +3 位作者 竺安 王维通 严自正 张树政 《生物化学杂志》 CSCD 1990年第2期147-152,共6页
在加强了的碱性条件下对红曲霉葡萄糖淀粉酶进行β-消除反应,分离未发生消除的级分。对反应前后的样品进行糖组成及甲基化分析,证实了红曲霉葡萄糖淀粉酶上确有对β-消除有抵抗的含GlcNAc的糖链存在。
关键词 红曲霉 葡萄淀粉酶 n-连接糖
下载PDF
膀胱癌临床血清样本N-连接糖链的表达分析 被引量:1
7
作者 王雯雯 孙承文 +1 位作者 杨刚龙 关锋 《生物学杂志》 CAS CSCD 2017年第5期7-14,共8页
膀胱癌是发生在膀胱黏膜上的恶性肿瘤,是最常见的泌尿系统肿瘤之一。国内外研究表明糖链表达的异常改变与肿瘤的发生、发展和转移紧密关联。分析膀胱癌临床样本糖链的表达变化可以为膀胱癌研究提供有效的分析手段,有助于发现潜在的临床... 膀胱癌是发生在膀胱黏膜上的恶性肿瘤,是最常见的泌尿系统肿瘤之一。国内外研究表明糖链表达的异常改变与肿瘤的发生、发展和转移紧密关联。分析膀胱癌临床样本糖链的表达变化可以为膀胱癌研究提供有效的分析手段,有助于发现潜在的临床早期诊断标志物。首先利用乙酰肼修饰糖链唾液酸,用PNGase F酶将糖蛋白质N-连接糖链释放出来,通过基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF-MS)技术对20例膀胱癌血清,11例正常人血清中糖蛋白N-连接糖链进行相对定量分析。共鉴定出42种N-连接糖链结构,其中15种N-连接糖链在两组样本中含量差异明显。此外,通过分析不同类型的糖链在两组临床样本中的分布差异,发现唾液酸化、复合型的N-连接糖链在膀胱癌血清中呈现显著升高的趋势,而高甘露糖型、平分型N-连接糖链表达呈下降趋势,说明这些糖链结构的表达变化与膀胱癌的发生有关,从而有助于进一步阐明膀胱癌发生过程中糖链相关的分子机理,并可为膀胱癌的早期诊断、恶性演进和转移预测提供数据支持。 展开更多
关键词 膀胱癌 血清 n-连接糖 生物标志物 MALDI-TOF/TOF-MS
下载PDF
舌癌临床样本N-连接糖链的表达分析
8
作者 郭辉 张健 +2 位作者 杨刚龙 黄如今 郭佳 《生物学杂志》 CAS CSCD 2016年第6期7-14,共8页
从糖组学角度分析健康志愿者和舌癌患者血清中差异表达的N-连接糖链,找出与舌癌密切相关的N-连接糖链结构,为舌癌早期诊断、治疗及预后提供参考依据。以临床血清样品为研究材料,采用滤膜分离全糖蛋白N-连接糖链法(N-glycan-FASP-T)对健... 从糖组学角度分析健康志愿者和舌癌患者血清中差异表达的N-连接糖链,找出与舌癌密切相关的N-连接糖链结构,为舌癌早期诊断、治疗及预后提供参考依据。以临床血清样品为研究材料,采用滤膜分离全糖蛋白N-连接糖链法(N-glycan-FASP-T)对健康志愿者和舌癌患者血清中全糖蛋白N-连接糖链分别进行比较分析,并利用MALDI-TOF/TOF串联质谱解析糖链结构,通过一级、二级质谱方法分析糖链结构和种类,并通过对糖链丰度数据的ROC曲线分析等统计学方法分析确定其表达水平对舌癌的影响。结果表明,与健康志愿者相比,舌癌患者血清糖链特征主要有:杂合型糖链比例升高;在复合型糖链中,三天线比例升高,而二天线及四天线的比例降低;末端Neu5Gc增加;平分型糖链比例升高。统计学分析发现其中有10个糖链结构在疾病发生过程中显著上调(AUC值大于0.50,其中m/z=1256.510/1418.573的两个糖链的AUC值达到了0.75),可以作为潜在的生物标志物并可以进行深入探究,为舌癌早期诊断提供临床参考依据。 展开更多
关键词 舌癌 MALDI-TOF/TOF-MS n-glycan-FASP-T n-连接糖 组学
下载PDF
新型N-连接糖链分析用试剂MMDPZ-Boc-Asn-GlcNAc的合成
9
作者 汪素芳 韩荣弼 金东日 《化学试剂》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期239-240,252,共3页
利用2-氯-5-硝基-4-(N-甲基哌嗪)三氟甲基苯(MDPZ)和Boc-Asn-GlcNAc的反应产物MDPZ-Boc-Asn-GlcNAc与碘甲烷反应合成了一种新的标题化合物,并通过1HNMR、MS对其结构进行了表征。
关键词 2 4-二氯-5-硝基三氟甲基苯 受体 n-连接糖
下载PDF
O连接N-乙酰葡萄糖胺糖基化修饰在神经退行性疾病中的研究进展
10
作者 余婷 刘海军 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期370-376,共7页
O连接N-乙酰葡萄糖胺(O-GlcNAc)糖基化是一种由O-键连接的乙酰氨基葡萄糖和胞内蛋白上的丝氨酸/苏氨酸残基形成的蛋白质翻译后修饰。O-GlcNAc糖基化修饰在脑内普遍存在,其与转录、翻译和蛋白稳态等关系密切。O-GlcNAc糖基化修饰参与多... O连接N-乙酰葡萄糖胺(O-GlcNAc)糖基化是一种由O-键连接的乙酰氨基葡萄糖和胞内蛋白上的丝氨酸/苏氨酸残基形成的蛋白质翻译后修饰。O-GlcNAc糖基化修饰在脑内普遍存在,其与转录、翻译和蛋白稳态等关系密切。O-GlcNAc糖基化修饰参与多种神经系统变性疾病的发生发展,但其调控机制尚不清楚。现就O-GlcNAc糖基化修饰与神经系统退行性病变的关系作一综述。 展开更多
关键词 O连接n-乙酰葡萄基化 神经退行性变 O连接n-乙酰葡萄基转移酶 O连接n-乙酰葡萄苷酶 基化修饰
下载PDF
细胞表面N-连接型糖链β1,6分支结构与肿瘤转移 被引量:1
11
作者 郭华北 陈惠黎 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 1998年第6期433-435,共3页
细胞的功能可以归结为两大类,即“社会”功能(socialfunctions)和“看家”功能(housekeepingfunctions)。前者主要指细胞与细胞间,细胞与间质间的相互作用,包括细胞间粘附,识别及受体作用... 细胞的功能可以归结为两大类,即“社会”功能(socialfunctions)和“看家”功能(housekeepingfunctions)。前者主要指细胞与细胞间,细胞与间质间的相互作用,包括细胞间粘附,识别及受体作用等;后者则主要是指细胞内部的一般代... 展开更多
关键词 肿瘤转移 细胞表面 n-连接 分支结构
下载PDF
人肝癌Bel-7402细胞及Bel-7402/5-FU细胞的N-连接聚糖的差异分析
12
作者 熊思元 张智慧 +1 位作者 高文杰 刘欣 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期573-580,共8页
以培养的人肝癌细胞Bel-7402及其5-氟尿嘧啶(5-FU)耐药细胞(Bel-7402/5-FU)为研究对象,通过使用快速PNGase F酶切,结合TMPP-Ac-OSu和甲胺化共衍生方法,对两者的总蛋白和分泌蛋白的N-连接聚糖进行了基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MAL... 以培养的人肝癌细胞Bel-7402及其5-氟尿嘧啶(5-FU)耐药细胞(Bel-7402/5-FU)为研究对象,通过使用快速PNGase F酶切,结合TMPP-Ac-OSu和甲胺化共衍生方法,对两者的总蛋白和分泌蛋白的N-连接聚糖进行了基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)分析。从两种细胞总蛋白中共鉴定到56种N-连接聚糖,分泌蛋白中鉴定到38种N-连接聚糖。5-FU与Bel-7402相比,耐药细胞岩藻糖化唾液酸糖型在总蛋白和分泌蛋白中都显著升高;高甘露糖型N-聚糖在总蛋白中下降,而在分泌蛋白中显著增加。本研究为进一步探索肿瘤耐药提前诊断提供糖链标志物起到一定的参考作用,并为后续解决癌症治疗的耐药提供理论依据。 展开更多
关键词 BEL-7402细胞 基质辅助激光解吸电离质谱 n-连接 差异分析
下载PDF
不同转移潜能膀胱癌细胞糖组相对定量分析 被引量:3
13
作者 杨刚龙 张甲戌 +1 位作者 刘昌梅 关锋 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1144-1154,共11页
膀胱癌是发生在膀胱黏膜组织上的一种恶性肿瘤,是泌尿系统中最常见的恶性肿瘤,早期(非肌层浸润型膀胱癌)阶段的诊断和治疗是降低膀胱癌死亡率的最有效方式.肿瘤的发生过程与糖链表达的改变有着密切的关系,而定量分析膀胱癌发生过程中糖... 膀胱癌是发生在膀胱黏膜组织上的一种恶性肿瘤,是泌尿系统中最常见的恶性肿瘤,早期(非肌层浸润型膀胱癌)阶段的诊断和治疗是降低膀胱癌死亡率的最有效方式.肿瘤的发生过程与糖链表达的改变有着密切的关系,而定量分析膀胱癌发生过程中糖链的表达变化尚未有研究.本研究以2株人膀胱正常上皮细胞系(HCV29、HUCV1),1株非肌层浸润性膀胱癌细胞系(KK47),和3株浸润性膀胱癌细胞系(YTS1、J82、T24)为研究材料,应用本室建立的利用乙酰肼修饰糖链唾液酸,以及[12C6]-和[13C6]-苯胺同位素修饰糖链还原性末端技术,然后利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS),进行膀胱上皮细胞不同病理状态的糖组相对定量分析.从6株细胞中共鉴定出52种N-连接糖链结构,并定量分析了不同类型的糖链在不同细胞中的分布差异,发现唾液酸化、岩藻糖化的N-连接糖链在膀胱癌肿瘤细胞恶化过程中呈现显著升高的趋势,同时平分型糖链和高甘露糖型N-连接糖链也呈表达升高趋势,说明这些糖链结构的表达变化与膀胱癌发生关系密切,从而有助于进一步阐明膀胱癌发生过程中糖链相关的分子机理. 展开更多
关键词 膀胱癌 n-连接糖 定量组学 稳定同位素标记 MALDI-TOF/TOF-MS
下载PDF
病毒蛋白糖基化研究进展 被引量:2
14
作者 李东林 雷迎峰 《微生物学免疫学进展》 2013年第4期71-74,共4页
病毒蛋白糖基化较为常见,但是长期处于被忽视的地位。近些年随着糖生物学相关技术的发展,病毒蛋白质糖基化的研究也取得了快速发展。目前已知病毒糖蛋白与病毒生成、病毒感染、机体免疫应答均有密切关系。从病毒蛋白糖基化类型、功能和... 病毒蛋白糖基化较为常见,但是长期处于被忽视的地位。近些年随着糖生物学相关技术的发展,病毒蛋白质糖基化的研究也取得了快速发展。目前已知病毒糖蛋白与病毒生成、病毒感染、机体免疫应答均有密切关系。从病毒蛋白糖基化类型、功能和应用三个方面进行了综述。 展开更多
关键词 蛋白基化 n-连接 O-连接 免疫应答
下载PDF
O-GlcNAcylation, a sweet link to the pathology of diseases 被引量:9
15
作者 Hao NIE Wen YI 《Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology)》 SCIE CAS CSCD 2019年第5期437-448,共12页
O-linked N-acetylglucosamine(O-GlcNAc)is a dynamic post-translational modification occurring on myriad proteins in the cell nucleus,cytoplasm,and mitochondria.The donor sugar for O-Glc NAcylation,uridine-diphosphate N... O-linked N-acetylglucosamine(O-GlcNAc)is a dynamic post-translational modification occurring on myriad proteins in the cell nucleus,cytoplasm,and mitochondria.The donor sugar for O-Glc NAcylation,uridine-diphosphate N-acetylglucosamine(UDP-Glc NAc),is synthesized from glucose through the hexosamine biosynthetic pathway(HBP).The recycling of O-GlcNAc on proteins is mediated by two enzymes in cells—O-GlcNAc transferase(OGT)and O-Glc NAcase(OGA),which catalyze the addition and removal of O-GlcNAc,respectively.O-GlcNAcylation is involved in a number of important cell processes including transcription,translation,metabolism,signal transduction,and apoptosis.Deregulation of O-GlcNAcylation has been reported to be associated with various human diseases such as cancer,diabetes,neurodegenerative diseases,and cardiovascular diseases.A better understanding of the roles of O-GlcNAcylation in physiopathological processes would help to uncover novel avenues for therapeutic intervention.The aim of this review is to discuss the recent updates on the mechanisms and impacts of O-GlcNAcylation on these diseases,and its potential as a new clinical target. 展开更多
关键词 O-GLCNACYLATION Cancer DIABETES Neurodegenerative disease Cardiovascular disease
原文传递
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部