连续条件下氨基酸的N-苄基化反应研究

以氨基酸、苯甲醛、氢氧化钠、硼氢化钠为原料合成了一系列N-苄基氨基酸类化合物,并选取典型天然氨基酸进行连续N-苄基化反应,考察了缩合反应中苯甲醛摩尔分数、反应温度、停留时间等因素对反应的影响;以及还原反应中硼氢化钠摩尔分数、反应温度、停留时间等因素对反应的影响。对典型案例进行连续和间歇反应结果的对比,结果表明,连续法能大大缩短反应时间、简化操作、提高装备效率与收率,该研究为氨基酸的连续N-苄基化生产应用奠定了理论基础。

N-(2-吡咯甲酰基)氨基酸甲酯的合成

在室温条件下 ,氨基酸甲酯和 2 三氯乙酰基吡咯经酰基化反应 ,以 80 3 %～ 95 6%的产率合成了系列N ( 2 吡咯甲酰基 )氨基酸甲酯 ,通过1HNMR ,IR ,MS和元素分析对其结构进行了表征 .

L-N-(2-吡咯甲酰基)-α-氨基酸甲酯的合成

2-三氯乙酰基吡咯（Ⅰ）与L-缬氨酸甲酯（Ⅱa）或L-苯丙氨酸甲酯（Ⅱb）在n（Ⅰ）：n（Ⅱ）=1：1，乙腈为溶剂，室温反应10-13h条件下，合成了系列标题化合物（Ⅲ），摩尔收率为71．3％-90．8％。通过元素分析、^1HNMR、IR和MS对产物结构进行了表征，培养了N-（4，5-二溴-2-吡咯甲酰基）-L-缬氨酸甲酯（Ⅲg）的单晶，并通过单晶X射线衍射分析研究了晶体结构。初步活性实验表明，部分目标产物对猪霍乱沙门氏菌、藤黄微球菌、粪链球菌、金黄色葡萄球菌和大肠埃希氏菌有抑制作用，其中化合物Ⅲg对粪链球菌的最小抑制质量浓度（MIC）为0．078mg／mL。

N-(溴代-2-吡咯甲酰基)氨基酸甲酯的合成

在室温条件下,2-三氯乙酰基吡咯经溴代反应,再与氨基酸甲酯反应得到一系列N-(溴代-2-吡咯甲酰基)氨基酸甲酯,收率为64.8%～92.2%.通过元素分析,1HNMR,IR和MS对产物结构进行了表征,培养了N-(1-甲基-4,5-二溴-2-吡咯甲酰基)甘氨酸甲酯的单晶并进行单晶X射线衍射分析.初步活性试验表明,目标产物对金黄色葡萄球菌、粪链球菌等五种细菌有一定的抑制作用.

N-(2-吡咯甲酰基)-α-氨基酸甲酯的合成

以2-吡咯甲酸为原料,经酰氯化反应生成2-吡咯甲酰氯(III),III再与α-氨基酸甲酯(II)在n(III)∶n(II)=1∶1,二氯甲烷为溶剂,室温反应4h,合成了3个N-(2-吡咯甲酰基)-α-氨基酸甲酯(I),摩尔收率为79 5%～95 6%.通过1HNMR、13CNMR、IR、MS和元素分析对其进行了表征.

N-氨甲酰基-D-氨基酸酰胺水解酶基因的克隆与表达

按本室纯化的N 氨甲酰基 D 氨基酸酰胺水解酶 (DCase)的N 末端氨基酸序列设计了正向引物 ,并在已报道的不同来源菌株DCase的氨基酸序列同源性分析的基础上 ,设计了反向引物。用菌株No . 2 2 62总DNA为模板 ,经PCR扩增获得长度为约0 9kpb的片段 ,DNA序列分析表明基因全长为 912bp。将该片段插入 pET 3a ,构建成重组子 pET DCase ,并在E coliDH5α中获得表达 ,经SDS PAGE检测 ,表达产物分子量与天然纯DCase相同 ,约为 35kD。

N-(1-丁基-2-吡咯甲酰基)氨基酸甲酯的合成

在室温下，氨基酸甲酯和1-丁基-2-三氯乙酰基吡咯经酰基化反应，以81．3％-87．1％的产率，合成了系列N-（1-丁基-2-吡咯甲酰基）氨基酸甲酯，通过1HNMR，IR，MS和元素分析对其结构进行了表征。

由N-酰基-a-氨基酸合成5(4H)-噁唑酮的新方法

在碳酸钾、丙酮的水溶液中由N-酰基四氢噻唑-2-硫酮进行氨基酸解得到10种N-酰基-α-氨基酸Ⅰ_a-(?)发现在三聚氯氰及三乙胺存在下,由N-酰基-α-氨基酸环合成8种饱和5(4H)-(口恶)唑酮Ⅱ_a-h的新方法,进而在硫酸铁催化下得到10种不饱和5(4H)-(口恶)唑酮衍生物Ⅲ_a-(?)

N-(2-呋喃甲酰基)氨基酸的合成

在温和的条件下,以2-呋喃甲酸为起始原料,通过3步合成了标题化合物,产率达89.6%～93.3%,通过1HNMR、IR对其结构进行了表征。

N-二异丙氧磷酰化氨基酸的合成

以亚磷酸二异丙酯为磷酰化试剂、次氯酸钠为氯代试剂首次对 2 0种常见的α 氨基酸进行了磷酰化 .通过添加适量四丁基溴化铵为相转移催化剂 ,使用过量的亚磷酸二异丙酯以补偿其在强碱环境中的水解 ,从而提高了反应产率 .所得产物经核磁共振谱。

N-[5-(2-氯苯基)-2-呋喃甲酰氨基硫羰基]-L-α-氨基酸乙酯的合成与生物活性测定

设计并合成了9种未见文献报道的N-(5-邻氯苯基-2-呋喃甲酰氨基硫羰基)-L-α-氨基酸乙酯衍生物,其结构经IR,1HNMR,MS和元素分析测试确证.MTT法测试结果表明大部分目标化合物对白血病K562细胞系的增殖具有明显的抑制作用.

N-苯基-α-氨基酸的微波合成及表征

以溴苯 ,α 氨基酸为原料 ,碘化亚铜为催化剂 ,DMF为溶剂 ,在碱性介质中微波辐射合成了目标化合物 ,并以颉氨酸与溴苯的偶联为模型反应进行条件优化 ,产物结构经IR ,1HNMR表征。

N-(α-芳氧丙酰基)α-氨基膦酸二苯酯的合成与除草活性

通过芳氧丙酸与α-氨基膦酸二苯酯的缩合反应合成了 8个未见报道的目标化合物 ,利用红外光谱、核磁共振、质谱及元素分析确定了目标化合物的结构 ,初步的生物活性测定结果表明 ,目标化合物具有较好的除草活性 ,如化合物 Vg,在浓度为 10 mg/L下对单、双子叶植物的抑制率接近于 2 ,4 -

氨基酸钛螯合物和高分子氨基酸钛螯合物对N-丙烯酰-1,3-噁唑烷-2-酮与环戊二烯的Diels-Alder反应的对映选择性催化作用

用磺酰化的L 缬氨酸、L 苯丙氨酸、L 亮氨酸和L 异亮氨酸的钛螯合物催化N 丙烯酰 1,3 唑烷 2 酮与环戊二烯的对映选择性Diels Alder (D A)反应 ,其ee值为 48.1%～ 78.2 %.将这些磺酰基氨基酸钛螯合物受载于高分子链上 ,用来催化同一D A反应时 ,反应的对映选择性更好 ,其ee值为 82 .8%～ 84.5 %.

氨基酸对锯缘青蟹N-乙酰氨基葡萄糖苷酶的效应

研究Gly、Ala、Val、LeuI、le、Pro、Phe、Met、Asn、Cys、Ser、Thr、Asp、Glu、His、Lys、Arg等17种氨基酸对锯缘青蟹(Scylla serrata)N-乙酰--βD-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)活力的影响.结果表明:非极性氨基酸中Gly、Ala、Leu、Phe对酶活力几乎没有作用,而ValI、le对酶略有激活,20 mmol/L的Val可以使酶活力提高7.5%,40 mmol/L的Ile可以使酶活力提高10.5%;Pro、Met对该酶略有抑制作用,当浓度为40 mmol/L时,分别可以使酶活力下降15.2%和9.8%;极性氨基酸Asn、Cys、Ser、Thr对酶的活力没有影响;带负电荷的酸性氨基酸Asp和Glu对酶有抑制作用;带正电荷的碱性氨基酸His对该酶略有抑制,Lys和Arg对该酶抑制作用较强.研究Lys和Arg对酶催化pNP-NAG水解反应的抑制机理,并测定其抑制常数,结果表明:Lys和Arg的抑制作用均表现为可逆效应,抑制类型均为反竞争性抑制,其KIS分别为5.29mmol/L和3.76 mmol/L.

固定化D-氨基酸氧化酶转化头孢菌素C为戊二酰基-7-氨基头孢霉烷酸

部分纯化的变异三角酵母D-氨基酸氧化酶(DAO)在碱性条件下变性过氧化氢酶,再与大孔聚甲基丙烯酸缩水甘油酯高聚物共价交联。与游离酶相比,固定化酶的最适反应温度升高,最适pH范围变宽,对温度和pH的稳定性都有明显的提高。固定化DAO在搅拌反应器中催化头孢霉素C(CPC)转化为戊二酰基-7-氨基头孢霉烷酸(Gl-7-ACA)。以0.03g/mL的CPC为底物,在温度25℃、pH7.2条件下,产物的得率>93%,副产物得率<5%。经过110批反应后,固定化酶保持64%的初始活力。

N-对氟苯甲酰基-1,3,4,6-四-O-乙酰基-2-脱氧-β-D-氨基葡萄糖的合成

以D-氨基葡萄糖盐酸盐和对氟苯甲酸为原料,先将氨基葡萄糖的羟基加以保护,然后以DCC为脱水剂,合成了未见文献报道的产物N-对氟苯甲酰基-1,3,4,6-四-O-乙酰基-2-脱氧-β-D-氨基葡萄糖.探讨形成目标化合物最佳反应条件,该法反应条件温和,产率高.目标化合物结构经IR,1HNMR和13CNMR表征得以确认.

氨基酸对凡纳滨对虾N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶活力的影响

选用甘氨酸(Gly)、丙氨酸(Ala)、缬氨酸(Val)、亮氨酸(Leu)、异亮氨酸(Ile)、脯氨酸(Pro)、苯丙氨酸(Phe)、色氨酸(Trp)、丝氨酸(Ser)、苏氨酸(Thr)、半胱氨酸(Cys)、谷氨酰胺(Gln)、天冬酰胺(Asn)、谷氨酸(Glu)、天冬氨酸(Asp)、组氨酸(His)、赖氨酸(Lys)及精氨酸(Arg)等18种氨基酸为效应物,研究它们对凡纳滨对虾(Litopenaeusvannamei)N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶催化pNP-NAG水解反应的影响。结果表明,非极性氨基酸及不带电荷的极性氨基酸对NAGase没有明显的抑制作用;带正电荷的碱性氨基酸L-His及Lys有轻微的激活作用,而Arg则先激活后抑制;带负电荷的酸性氨基酸Asp及Glu有明显的抑制作用,其IC50分别为20,28mmol/L。研究Asp,Glu对酶催化pNP-NAG水解反应的抑制作用机理,并测定其抑制常数。研究表明Asp及Glu的抑制作用均表现为可逆效应,抑制类型均为竞争性抑制,其抑制常数KI值分别为9.50mmol/L和11.06mmol/L。

N-[4-[2-[乙酰基[2-萘氧基]乙基]氨基]-乙基]苯甲磺酰胺对离体豚鼠心房肌的影响

目的 考察 N-[4-[2 -[乙酰基 [2 -萘氧基 ]乙基 ]氨基 ]-乙基 ]苯甲磺酰胺 (MS0 0 49)对离体豚鼠心房肌的影响对心肌电生理特性 :收缩性、自律性、兴奋性的影响 ,并初步探讨其作用机制。方法 采用离体豚鼠心房肌 ,测定 MS0 0 49对心房收缩力、心率、功能不应期、兴奋性、自律性、静息后增强及正阶梯现象的影响。结果 MS0 0 491 0 - 8～ 1 0 - 5mol/L可延长左心房功能不应期 ,降低右心房收缩性及心率。MS0 0 49(1× 1 0 - 6 mol/L)对肾上腺素诱发左心房自律性无明显影响 ,对兴奋性亦无显著影响。但可显著抑制左心房正阶梯现象及静息后增强效应。结论 MS0 0 49可能作用于心肌钾通道 ,同时对心肌钙内流亦有非选择性的抑制作用。

新型荧光试剂N-9-吖啶-α-氨基酸的合成及表征

以探索合成N-9-吖啶基-α-氨基乙酸为基础,在优化条件下合成了其他9种具有代表性的N-9-吖啶基-α-氨基酸,产物均采用IR、1H NMR、旋光度和元素分析等测试技术进行结构表征。初步研究表明,目标化合物的光谱性质良好,可望作为生物分子或者金属离子分析的荧光探针。