N-丁基-9 H-嘧啶并[4,5-b]吲哚-2-甲酰胺通过NLRP3/Caspase-1抑制巨噬细胞泡沫化及焦亡作用

目的设计并合成了嘧啶并吲哚类衍生物N-丁基-9 H-嘧啶并[4,5-b]吲哚-2-甲酰胺(BFPI),探讨其是否通过NLRP3/Caspase-1通路抑制巨噬细胞焦亡和泡沫化作用。方法以2,4,6-三乙氧羰基-1,3,5-三嗪和2-氨基吲哚为起始原料合成BFPI,并通过1H NMR、13 C NMR、ESI-MS对其结构进行表征。将体外培养的小鼠单核巨噬细胞株RAW264.7分为空白组、模型组(PA)组和治疗组(BFPI)组,各组细胞用对应培养液处理24 h后,用MTT法检测其增殖活力,油红O染色检测细胞内脂滴形成情况,并用Western blot和RT-qPCR检测NLRP3、Caspase-1和MCP-1 mRNA和蛋白表达水平。结果与空白组比较,模型组细胞增殖活力明显下降,脂滴形成量明显增加,与模型组比较,治疗组细胞增殖活力明显增加,脂滴形成量明显降低,差异均有统计学意义(P<0.01);与空白组比较,模型组细胞NLRP3、Caspase-1和MCP-1的mRNA和蛋白表达水平均明显增加,与模型组比较,治疗组细胞上述指标表达水平均明显下降,差异有统计学意义(P<0.01)。结论BFPI可通过抑制巨噬细胞NLRP3、Caspase-1和MCP-1的表达进而促进其增殖并抑制脂质吞噬能力,有助于延缓动脉粥化时巨噬细胞来源的泡沫细胞形成。

阻断N-钙黏蛋白可降低CTRP9对糖尿病小鼠血小板异常激活的抑制作用

目的本研究利用糖尿病动物模型,在体外环境下,研究C1q肿瘤坏死因子相关蛋白9(C1q/Tumornecrosis factor related protein 9,CTRP9)对糖尿病血小板异常激活的作用,以及其可能的受体通路。方法将6-8周龄雄性C57BL/6J小鼠共64只,随机平均分为2组,分别给予正常饮食及高脂饮食12周,检测其体质量、血糖、血小板数、胰岛素水平、血清CTRP9水平,并计算其胰岛素抵抗指数(homeostasis modelassessment-insulin resistance,HOMA-IR)水平;麻醉后取全血测定在不同因素干预组中血小板聚集效应的变化。结果与正常饮食组相比,高脂饮食的小鼠体质量增加,血糖和胰岛素水平升高,HOMA-IR指数升高,CTRP9水平降低,血小板最大聚集率升高,聚集曲线下面积增加。在体外环境下,加入CTRP9后,可改善两组小鼠血小板异常聚集的现象;在加入N-钙黏蛋白(N-cadherin)抑制剂ADH-1后,可抑制CTRP9对血小板异常聚集的抑制作用;与未给予任何干预的小鼠血小板对比,只加入ADH-1的样本上述指标未发现明显差异。上述效应在高脂饮食及正常饮食的小鼠中均有发现。结论在体外环境中,CTRP9可抑制糖尿病小鼠血小板的异常激活;抑制N-cadherin后,血小板聚集功能未受影响,CTRP9的作用消失,由此推断:N-cadherin可能为CTRP9抑制血小板异常激活的受体。

n-9单不饱和脂肪酸减轻危重症病人的氧化应激和过度炎症反应

目的:观察含有不同脂肪酸的肠外营养(PN)对危重症病人氧化应激和炎症反应的影响。方法:将40例危重症病人随机分为试验组(n=19)和对照组(n=21)。使用等氮、等热量PN,共7 d,其中非蛋白质热量为83.68 kJ/(kg.d)、氮量0.2 g/(kg.d)。对照组病人应用中长链脂肪乳剂,试验组应用橄榄油脂肪乳剂。分别于试验开始前和第8天早晨,抽取病人静脉血检测白细胞介素-6(IL-6)、C反应蛋白(CRP)、维生素E和丙二醛水平。结果:含有橄榄油脂肪乳剂的肠外营养能CRP和IL-6降低水平,减轻丙二醛浓度。结论:橄榄油脂肪乳剂能降低危重症病人的过度炎症反应,减轻氧化应激损伤。

新型荧光试剂N-9-吖啶基氨基乙酸及其甲酯的合成

设计合成了新型荧光试剂N 9 吖啶基氨基乙酸及N 9 吖啶基氨基乙酸甲酯 ,其结构经IR ,1HNMR表征 ,并初步讨论了它们的荧光性质及UV性质。可望应用于金属离子和有机高分子的检测及免疫分析等方面。

N-乙酰半胱氨酸对H9N2猪流感病毒所致急性肺损伤小鼠的保护作用

目的:探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对H9N2猪流感病毒所致急性肺损伤小鼠的保护作用。方法:采用BALB/c小鼠建立H9N2猪流感病毒诱导的急性肺损伤模型。实验小鼠在接种病毒前1 h腹腔注射NAC(10mg/kg,稀释于生理盐水),此后连续使用5 d。检测肺湿重与干重比变化,评估肺水肿情况,观察肺组织的病理学变化,检测支气管肺泡灌洗液内炎症细胞、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)及白细胞介素1β(IL-1β)的变化,同时检测肺组织匀浆中病毒的增殖、总超氧化物歧化酶(T-SOD)和髓过氧化物酶(MPO)活性以及丙二醛(MDA)含量。结果:NAC能降低小鼠死亡率,延长小鼠存活时间,显著降低肺组织的病理学变化和肺水肿程度,并能降低巨噬细胞、淋巴细胞和中性粒细胞等炎症细胞的数量,同时降低TNF-α、IL-6、IL-1β和MDA的含量,抑制MPO的活性以及升高T-SOD的活性。结论:NAC减轻H9N2猪流感病毒诱导的小鼠急性肺损伤,其保护作用可能与减轻氧化应激作用和炎症反应相关。

新型N-取代苯基-9-烷基-3-咔唑磺酰脲类化合物的合成及其抗肿瘤活性

以9-烷基咔唑为原料,经磺化、氯化和氨化反应制得9-烷基咔唑-3-磺酰胺(4a和4o);取代苯胺与三光气反应制得取代苯基异氰酸酯(6a^6n,6s,6Ⅳ);4分别与6经缩合反应合成了30个新型的N-取代苯基-9-烷基-3-咔唑磺酰脲类化合物(7a^7Ⅳ),其结构经1H NMR,IR和ESI-MS表征。对7进行了Cdc25B抑制活性筛选。结果表明,在用药浓度为20μg·m L-1时,其中12个化合物对Cdc25B具有良好的抑制活性,抑制率大于90%。

3-(N-联苯基氨基)-9-苯基咔唑的合成与表征

以咔唑为初始原料,经NBS亲电取代反应、Ullmann反应和Buchwald-Hartwig偶联反应,合成了有机电致发光器件(OLED)空穴传输材料中间体标题化合物,利用NMR、IR、MS和元素分析等分析方法对产物进行了表征。

荧光探针N-9-吖啶-α-氨基乙酸的合成及荧光分光光度法测定环境水样中痕量铜

对荧光探针N-9-吖啶-α-氨基乙酸的合成方法作了改进，使偶氮化反应时间由7h缩短为3h，产率由78．9％提高至85．2％。此试剂与铜（Ⅱ）反应使其荧光猝灭，并据此提出了以此试剂为探针的痕量铜的荧光光度测定法。在pH7．0的缓冲介质中，在一定量的乙醇存在下，铜（Ⅱ）与荧光探针反应，通过测定样品溶液和空白溶液在激发波长（λex）262．0nm和发射波长（λem）456．0nm的荧光强度F_A和F_B，计算得反应液荧光强度猝灭程度△F，其荧光强度的猝灭程度与铜（Ⅱ）质量浓度在0．20-600．0μg·L^-1范围内呈线性关系，方法的检出限（3σ／b）为0．04μg·L^-1。按此方法分析了3个环境水样，测得其铜量值的相对标准偏差（n=6）均小于2．5％，回收率在96．0％～102．0％之间。

N-乙酰半胱氨酸通过下调缺氧诱导因子-1α抑制胃癌SGC-7901细胞MMP-9的表达的实验研究

目的研究N-乙酰半胱氨酸(NAC)能否通过下调低氧环境诱导的HIF-1α抑制胃癌SGC-7901细胞MMP-9的表达。方法首先将胃癌SGC-7901细胞分为3组,分别为常氧组(Normoxia组)、低氧组(Hypoxia组)和低氧+NAC组(Hypoxia+NAC组)。在低氧环境下对胃癌SGC-7901细胞使用NAC干预,在3个不同时间点(0h、24h和72h)使用MTT法对SGC-7901细胞活性进行检测;同时在干预24h后,分别采用RT-PCR法和western blot法对SGC-7901细胞MMP-9和HIF-1α的mRNA和蛋白水平进行检测。结果低氧环境下SGC-7901细胞活性呈时间依赖性下降,差异均有统计学意义(P<0.05);且在各时间点低氧+NAC组细胞活性较低氧组细胞下降更加明显,差异均有统计学意义(P<0.05)。在干预24h后,SGC-7901细胞MMP-9和HIF-1αmRNA和蛋白的表达水平较未干预细胞明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在低氧环境下,NAC可以通过抑制HIF-1α的合成下调胃癌SGC-7901细胞MMP-9的表达,抑制肿瘤细胞的增殖。

碘化N-正丁基氟哌啶醇通过抑制线粒体凋亡通路抗H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤

目的研究碘化N-正丁基氟哌啶醇(F2)对H9c2心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤中线粒体凋亡通路的影响,并探讨其分子作用机制。方法建立H9c2心肌细胞H/R损伤模型,将H9c2心肌细胞随机分为5组:正常对照组(C组)、缺氧/复氧组(H/R组)、F_2低、中、高剂量组。流式细胞术分析测定细胞凋亡率;采用蛋白免疫印迹(Western blot)检测细胞色素C(Cyto C)、Bcl-2、和Bax蛋白表达变化;比色法测定caspase-3的活性。结果与H/R组相比,F_2低、中、高剂量组可明显降低H9c2细胞缺氧/复氧损伤后细胞凋亡率;提高Bcl-2/Bax比值;抑制线粒体中Cyto C的释放;减少caspase-3的活性。结论 F_2能够降低H/R后H9c2心肌细胞凋亡率,其机制可能与抑制线粒体通路的细胞凋亡有关。

N-(2-乙胺)-9,10-二氢蒽-9,10-桥-α,β-琥珀酰亚胺的合成及晶体结构

以蒽和顺丁烯二酸酐为原料,经Diels-Aldel反应制备9,10-二氢蒽-9,10-桥-α,β-琥珀酸酐,然后该中间体与乙二胺进行反应得到一个新的胺类化合物,用X—射线单晶衍射仪确定了结构。标题化合物的晶体属于三斜晶系,P-1空间群,a=7.4221(15)A,b=9.2161(18)A,c=12.425(3)A,α=74.97(3)0,β=76.89(3)0,γ=83.75(3)0。

胰腺癌中CIP2A与p-Akt、N-cadherin、MMP-9的表达及其临床意义

目的:探讨胰腺癌组织中蛋白磷酸酶2A癌性抑制因子(CIP2A)、p-Akt、N-cadherin及MMP-9蛋白的表达及其临床意义。方法:采用免疫组织化学法检测42例胰腺癌及癌旁组织中CIP2A、p-Akt、N-cadherin和MMP-9的表达情况,分析其与临床病理因素的关系。结果:CIP2A在胰腺癌及癌旁组织中的表达率分别为71.4%、7.7%,差异有统计学意义(P<0.05);p-Akt在胰腺癌及癌旁组织中的表达率分别为66.7%、11.5%,差异有统计学意义(P<0.05)。N-cadherin在胰腺癌及癌旁组织中的表达率分别为59.5%、7.7%,差异有统计学意义(P<0.05)。MMP-9在胰腺癌组织及癌旁组织中的表达率分别为61.9%、15.4%,差异有统计学意义(P<0.05)。CIP2A、p-Akt在胰腺癌组织中的表达与分化程度、TNM分期、淋巴结转移明显相关(均P<0.05),N-cadherin、MMP-9在胰腺癌组织中的表达与分化程度、TNM分期、神经浸润、淋巴结转移明显相关(P<0.05)。胰腺癌组织中,CIP2A和p-Akt、N-cadherin和MMP-9的表达均呈正相关(均P<0.05);p-Akt与N-cadherin及MMP-9的表达均呈正相关(P<0.05);N-cadherin与MMP-9的表达呈正相关(P<0.05)。结论:CIP2A参与了胰腺癌恶性进展,可能通过PI3K/Akt信号通路诱导上皮间质转化,促进胰腺癌增殖、侵袭和转移。CIP2A有望成为治疗胰腺癌的一个靶向治疗基因。

N-(2-氯乙基)-N'-2-(O^6-苄基-9-鸟嘌呤基)乙基-N-亚硝基脲的合成

以O^6-苄基鸟嘌呤为原料,经取代反应和盖布瑞尔反应制得N9-(2-胺基)乙基-O6-苄基鸟嘌呤(4);4与异氰酸酯经取代反应和经亚硝化反应合成了N-(2-氯乙基)-N'-2-(O6-苄基-9-鸟嘌呤基)乙基-N-亚硝基脲(6)。4和6为新化合物,其结构经UV-Vis,1H NMR,13C NMR,IR和HR-ESI-MS表征。

用4,9-二[N-(2-二甲氨基)乙基]-9-吖啶胺-4-甲酰胺测定微量蛋白质

应用水溶性4,9-二[N-(2-二甲氨基)乙基]-9-吖啶胺-4-甲酰胺(DNAF)探针,并结合十二烷基硫酸钠(SDS),研究DNAF-SDS体系用于牛血清白蛋白(BSA)的定量测定方案。线性范围为5.0×10-9～8.3×10-7 mol/L,检出限为1.0×10-10 mol/L。4,9-二[N-(2-二甲氨基)乙基]-9-吖啶胺-4-甲酰胺作为一种新型的荧光染料探针在微量蛋白质定量测定方面具有良好应用潜力。

N-甲基-3-氮杂双环(3,3,1)壬-9-酮的制备

环己酮、甲胺盐酸盐、 3 6%甲醛在冰醋酸中进行 Mannich缩合生成 N-甲基 -3-氛杂双环 ( 3,3,l)壬 -9-酮 ,其中 n(环己酮 )∶ n(甲胺盐酸盐 )∶ n(甲醛 ) =1∶ 1 .2∶ 3,产率为 2 4 .4。

补体C1q肿瘤坏死因子相关蛋白9与其受体的相互作用

补体C1q肿瘤坏死因子相关蛋白9(CTRP9)是一种分泌型糖蛋白,对心血管系统具有保护作用,是近年发现的CTRPs蛋白质家族中研究最多的成员之一。CTRP9通过与其受体相互作用,影响机体心血管系统及其他多种系统。CTRP9的受体目前已知主要有脂联素受体1、脂联素受体2和N-钙黏蛋白,上述受体可介导CTRP9调节能量代谢平衡、减轻炎症等作用。了解CTRP9受体的分布及CTRP9与受体间的相互作用关系将对保证CTRP9发挥有益的生理作用具有重要意义。现就CTRP9在生理病理过程中通过受体发挥的调节功能的研究做一综述,为更进一步了解CTRP9与受体间的相互作用关系提供理论依据。

N-烷基-2,7-二硼酸频哪醇酯咔唑的合成与表征

以2,7-二溴-9H-咔唑为初始原料,经亲电取代反应、Miyaura Borylation反应合成了一类化合物N-烷基-2,7-二硼酸频哪醇酯咔唑。利用^(1)H NMR对目标化合物的结构进行了表征;研究了反应溶剂、碱、催化剂和膦配体等因素对Miyaura Borylation反应的影响,确定了最佳反应条件:NMP为溶剂,乙酸钾为碱,Pd_(2)(dba)3为催化剂,S-PHOS为配体。

N-(9H-芴-9-甲氧羰基氧)丁二酰亚胺合成研究

9-芴甲醇与光气反应合成9-芴甲酯(FMOC-Cl),不经分离直接与N-羟基丁二酰亚胺反应,一锅法合成N-(9H-芴-9-甲氧羰基氧)丁二酰亚胺(FMOC-OSu),总收率95%,产品纯度98%。

N,N-二甲基-9-癸烯酰胺与十二烷基硫酸钠复配协同效应研究

为了改善绿色非离子表面活性剂N,N-二甲基-9-癸烯酰胺(NADA)水溶性较差的缺陷,将NADA与阴离子表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)复配并考察了NADA和SDS二者之间的协同效应。结果表明:NADA与SDS复配后二者之间产生正协同效应,可以有效地改善NADA在水中的溶解性,当SDS的摩尔分数xS>0.05时,NADA-SDS复配体系水溶液(其中NADA的质量分数为1%)在25℃时呈澄清透明。NADA-SDS混合胶束可以明显地提高NADA-SDS降低表面张力的效率,当NADA的摩尔分数xN=0.5时,临界胶束浓度(cmc,以NADA-SDS总浓度计)具有最小值(约为4.04 mmol/L),且混合胶束的临界胶束聚集数([Nm])具有最大值(约为76);与SDS相比,NADA与SDS复配可以将水的表面张力降至更低,在xN=0.9时,cmc处对应表面张力(γcmc)具有最小值(约为28.44 mN/m)。

Studies on the esterifications of 9-(hydroxyimino)-4-methyl-8,9-dihydrofuro[2,3-h]chromen-2-one with acid chlorides under different conditions

The esterifications of 9-（hydroxyimino）-4-methyl-8,9-dihydrofuro[2,3-h]chromen-2-one （4） with acid chlorides afforded normal oxime-esters 3a-e in 35-78% yields in presence of excessive 4-dimethylaminopyridine as the acid scavenger, whereas the reactions gave unexpected 8-substituted products N-（8-chloro-4-methyl-2-oxo-2H-furo-[2,3-h]chromen-9-yl）amides （5a-c） and 4-methyl-2,9-dioxo-8,9-dihydro-2H-furo[2,3-h]chromen-8-ylcarboxyloates （6d-e） by using excessive acid chlorides. The structures of 10 new compounds were determined by 1H NMR, 13C NMR, MS and HRMS, and the possible mechanism for the formation of unexpected products 5a--c and 6d-e was also proposed.