N-Boc保护氨基酸的酯化方法研究

目的研究N Boc保护氨基酸的酯化方法。方法以甲磺酰氯与醇反应制备甲磺酸酯 ,N Boc保护氨基酸与甲磺酸酯反应得到相应的N Boc保护氨基酸酯。结果制备了 5种N Boc保护氨基酸酯 ,其结构均经1H NMR和ESI MS确证。结论该N Boc保护氨基酸酯化方法反应条件温和、成本低、无副反应发生、收率高。

瘤胃保护性氨基酸对内蒙古白绒山羊氮消化代谢的影响

选用9只安装永久性瘤胃瘘管,十二指肠近端瘘管和回肠末端瘘管的内蒙古白绒山羊半同胞羯羊,随机分为3组,即保护性氨基酸组(A组)、常规氨基酸组(B组)和对照组(C组),每组3只进行动物试验。采用体内法研究在相同蛋白质水平(CP 9.93%)日粮条件下,日粮中添加瘤胃保护性蛋氨酸(RPMet)和瘤胃保护性赖氨酸(RPLys)对内蒙古白绒山羊氮消化代谢的影响。结果表明:在内蒙古白绒山羊基础日粮中添加RPMet和RPLys显著地增加了绒山羊的干物质采食量DMI(P<0.05),提高了机体氮的沉积(P>0.05),并有降低尿中尿素氮(UUN)排出量的趋势(P>0.05)。

瘤胃保护性氨基酸在奶牛生产中的应用研究

赖氨酸(Lys)和蛋氨酸(Met)是泌乳奶牛最主要的限制性氨基酸,而传统的饲喂高蛋白质日粮或添加游离蛋氨酸和赖氨酸并不能使其达到理想的生产性能,现在研究的重点转移到瘤胃保护性氨基酸上。作者阐述了瘤胃保护性氨基酸的概念、保护措施、保护效果及其影响因素和应用前景。

醒脑静对脑缺血大鼠神经保护作用与氨基酸受体表达的关系

目的:探讨醒脑静对局灶性脑缺血大鼠海马N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体的影响。方法:采用线栓法制备大鼠左侧大脑中动脉阻断(MCAO)模型,分别观察醒脑静对MCAO大鼠神经功能缺损评分、脑梗死体积和海马NMDA受体的含量的影响。结果:缺血3和6h,醒脑静组神经功能缺损评分明显低于MCAO组(P<0.01);且模型组梗死体积24h(197.60±34.03)mm3明显大于6h(140.60±14.81)mm3,差别有统计学意义(P<0.05);但治疗组梗死体积6h是(114.60±23.62)mm3,24h是(125.60±20.51)mm3,后者明显小于模型组(P<0.01);缺血1,6,24h,模型组NMDA受体表达分别为(8.40±1.23),(12.08±1.80),(17.94±1.62)nmol/g,呈逐渐上调趋势(P<0.05),24h时治疗组NMDA受体表达为(5.22±1.43)nmol/g,明显低于模型组(P<0.01)。结论:醒脑静对局灶性脑缺血大鼠具有明确的神经保护作用,其机制可能与拮抗兴奋性氨基酸受体表达上调有关。

预运动训练对脑梗死大鼠脑保护作用的兴奋性氨基酸递质效应

目的:动态观察预运动训练对大鼠脑梗死后纹状体处兴奋性氨基酸水平变化的影响,探讨预运动对缺血脑损伤的保护作用机制。方法:将SD大鼠随机分为5组,每组实验用时均为4周:运动1周组(运动训练1周,在第4周实施),运动2周组(运动训练2周,在后2周实施),运动4周组(运动训练4周),假手术组和缺血组。各组大鼠在4周后,立体定位在脑内纹状体(尾状核)留置微透析管,进行大脑中动脉缺血术,采用在体微透析技术收集大鼠缺血前、缺血期间(40,80和120min)和再灌注后(40,80,120,160,200和240min)的脑细胞外液。测定纹状体(尾状核)脑区兴奋性氨基酸谷氨酸(Glu)和天门冬氨酸(Asp)含量的变化。同时测量计算缺血再灌注24h的脑梗死体积。结果:2周和4周的预运动训练可以显著下调因缺血而过度释放的Glu和Asp水平(P<0.01)。缺血再灌注24h的不同组的脑梗死体积变化差异有显著意义(P<0.05)。结论:至少2周的预运动训练对随后发生的脑缺血及再灌注期间,纹状体(尾状核)脑区内兴奋性氨基酸递质Glu和Asp的过度释放有一定程度的抑制作用,这种抑制效应对早期缺血脑损伤具有一定的保护作用。

补充蛋氨酸和小肽及过瘤胃保护处理对奶牛血液生化指标和氨基酸浓度的影响

采用2×2因子设计研究了日粮中添加小肽、蛋氨酸和过瘤胃保护处理对奶牛血清生化指标及血清氨基酸浓度的影响。结果表明,两种补充形式和两种处理方式对奶牛血清尿素氮含量没有显著的影响(P>0.05),其组合效应以脂肪包被的小肽日粮组含量最低(P<0.05);两种处理方式和组合效应对血清中总蛋白和白蛋白含量没有显著影响(P>0.05);同时添加蛋氨酸及包被处理组血清钙含量显著高于其他各组(P<0.05)。日粮蛋白质的不同补充形式对奶牛血清必需氨基酸Arg(P<0.01)、Ile(P<0.05)、Lys(P<0.05)、Phe(P<0.01)、His(P=0.01)和4种非必需氨基酸Cys(P<0.05)、Ser(P<0.05)、Gly(P<0.05)、Cys(P<0.05)指标有显著影响,其中以添加小肽试验组的游离氨基酸浓度较高。

瘤胃保护性氨基酸及其对奶牛生产性能的影响

蛋氨酸或赖氨酸通常被认为是合成奶牛乳蛋白的第一限制性氨基酸，对反刍动物来说，补充游离氨基酸效果不佳，对氨基酸加以保护可以弥补这一缺陷。瘤胃保护性氨基酸可分为两大类：一类是氨基酸的类似物、衍生物或聚合物，另一类是包被氨基酸。不同的保护方法，其抵抗微生物降解的能力和在肠道内的可利用性不一，同一包被氨基酸在不同的日粮类型中其稳定性也有差异，其中以对 pH不敏感的多聚合物包被氨基酸效果较好。饲喂保护性氨基酸对奶牛的干物质采食量和产奶量没有明显影响，但能提高蛋白质利用率，增加乳蛋白含量，对菌体蛋白的合成无不利影响。

瘤胃投饲不同水平保护赖氨酸对肉牛小肠氨基酸流量和消化率的影响

采用基础日粮+待测氨基酸法,研究添加不同水平保护赖氨酸对肉牛小肠氨基酸流量和消化率的影响。基础日粮由小麦糠、玉米和豆粕等组成,能量和蛋白质等营养水平按肉牛营养需要和饲养标准供给。选择体况良好、安装永久性瘤胃瘘管、十二指肠前端和回肠末端瘘管的利木赞×鲁西黄牛杂交公牛6头作为试验动物,采用6×6拉丁方设计,试验设6个赖氨酸水平,分别在基础日粮的基础上添加0、6、9、12、15和18 g/d包被赖氨酸,对肉牛十二指肠、回肠氨基酸流通量进行了研究。结果表明:瘤胃投饲保护赖氨酸能显著增加十二指肠EAA、TAA、MetI、le、Leu、Lys、Glu的流通量(P<0.05);进而提高EAA、TAA、Thr、Cys、Val、MetI、le、Lys、Ala、Tyr和Pro在小肠的表观消化率(P<0.05)。本试验条件下赖氨酸最适添加量为15 g/d。

瘤胃保护性氨基酸制备工艺及包被效果的研究

试验以棕榈油脂肪粉为包被壁材,研究了先制粒后底喷流化床包衣工艺制备瘤胃保护性赖氨酸及蛋氨酸的主要工艺参数,以人工唾液释放率为评价指标对适宜包被比例(芯材:壁材)进行了筛选。结果发现,在理想制粒及包衣工艺参数条件下,赖氨酸和蛋氨酸的适宜包被比例(芯材:壁材)分别以40:60和50:50为宜。

兴奋性氨基酸受体拮抗剂对清醒大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的:观察兴奋性氨基酸受体拮抗剂对清醒大鼠全脑缺血再灌注损伤的影响。方法:采用我们改进的清醒大鼠脑缺血模型,于缺血前15min、再灌注6h分别腹腔注射5mg/kg或10mg/kg的竞争性N-甲基-D天冬氨酸(NMDA)受体拮抗剂CPP、25mg/kg或50mg/kg的非竞争性NMDA受体拮抗剂氯胺酮、15mg/kg或30mg/kg的!-氨基羟甲基恶唑丙酸(AMPA)受体拮抗剂NBQX;观察其对不同脑区(脑下脚、海马CA1/2区、CA3区与CA4区、齿状回)神经细胞数目的变化以及纹状体病理损伤的影响,并监测肛温的变化。结果:各组脑缺血与再灌注期间的肛温和纹状体病理损伤无显著差异。应用CPP、氯胺酮或NBQX的大鼠多个脑区正常神经细胞数目明显多于生理盐水对照组。结论:兴奋性氨基酸受体拮抗剂CPP、氯胺酮、NBQX对缺血性脑损伤具有明显的保护作用,并且这种保护作用不是由于体温下降所致。

Fmoc保护氨基酸与Wang树脂的缩合反应

研究了保护氨基酸、Wang树脂取代度、树脂粒度、搅拌方式对Fmoc-氨基酸-Wang树脂连接效率的影响.结果表明,保护氨基酸分子量的大小会因产生不同的位阻而影响缩合反应的效率,分子量越小缩合效率越高;Wang树脂的取代度较高时,已缩合的氨基酸给后续保护氨基酸的缩合形成阻碍,使缩合效率降低;粒径较小和搅拌较好时,对保护氨基酸的粒内外扩散有利,可提高反应速度和缩合效率.

氨基酸过瘤胃保护方法及其在奶牛营养中的应用

保护性氨基酸是调控奶牛小肠氨基酸平衡最直接有效的方法。作者主要就氨基酸的保护方法、保护性氨基酸的应用效果及保护性氨基酸效果的检测方法进行了综述。

过瘤胃保护蛋氨酸对奶牛乳和血浆氨基酸含量及血液生化指标的影响

本研究采用在生产条件下的对比饲养试验,通过研究日粮中添加本实验室研发的过瘤胃保护蛋氨酸产品对高产荷斯坦牛乳和血浆氨基酸含量与组成、血液生化指标的影响,验证产品的性能,探讨过瘤胃保护蛋氨酸对奶牛生产性能和乳成分产生影响的机理。试验选择2～5胎之间、日产奶量30kg以上、处于泌乳高峰期的荷斯坦牛20头,随机分为两组,试验组每头每天添加本实验室研发的过瘤胃保护蛋氨酸产品75g。试验结果表明,日粮中添加该产品可明显增加荷斯坦牛乳大多数种类氨基酸和总氨基酸含量,使11种血浆游离氨基酸含量有不同程度的增加,总游离氨基酸含量有一定程度的提高,血浆白蛋白、球蛋白、总蛋白含量明显增加,6种血浆游离氨基酸含量有不同程度的降低,谷草转氨酶和谷丙转氨酶活性增强,游离脂肪酸含量和葡萄糖含量明显上升,尿素氮含量明显降低。上述结果进一步验证了本实验室研发的过瘤胃保护蛋氨酸产品具备较好的瘤胃稳定性和小肠可消化性,在一定程度上揭示了其提高产奶量和乳蛋白含量的作用机理。

经济实用的Boc保护氨基酸键合氯甲基树脂的方法研究

在固相多肽合成中,探索一种经济有效的Boc保护氨基酸键合氯甲基树脂的方法.采用K_2CO_3/KI作为键合试剂,一步合成产物,反应条件为:Boc保护氨基酸2.5倍量,K_2CO_32.5倍量,KI0.01倍量,氯甲基树脂1.0倍量,普通DMF作反应溶剂,70℃空气浴中旋转反应25h.考察了28种不同结构的氨基酸底物在此条件下与氯甲基树脂的键合收率,大多数氨基酸都能得到几乎定量的酯化产率.并选取了不同空间位阻的4种Boc保护氨基酸,比较了KOH,Cs_2CO_3,TEA/KI,DCHA/KI,DIPA/KI,Cs_2CO_3/KI和K_2CO_3/KI等不同键合条件对收率的影响.结果表明,除Boc-Asn-OH外,K_2CO_3/KI条件与Cs_2CO_3/KI的效果大体相同,但K_2CO_3/KI更为经济、可行.

过瘤胃保护氨基酸提高泌乳盛期奶牛乳蛋白含量的营养调控研究

选择体况、胎次、产犊时间、产奶量相近的泌乳盛期中国荷斯坦奶牛27头,采用L9(34)正交试验设计,研究过瘤胃保护氨基酸(RPAA)、小肠可消化蛋白(IDCP)、中性洗涤纤维(NDF)对提高泌乳盛期奶牛乳蛋白含量的营养调控效果。结果表明:3因子的最优水平组合可比习用日粮提高乳蛋白率0.19个百分点(P<0.05),提高乳蛋白量121.34 g/d(P<0.05)。试验结果说明,在NDF 41%/DM日粮中,IDCP按我国《奶牛饲养标准》推荐量92%组合添加过瘤胃保护蛋氨酸(RPMet)8 g/d+过瘤胃保护赖氨酸(RPLys)32 g/d,可有效提高奶牛泌乳盛期的乳蛋白含量与产量。

肥育牛日粮中添加瘤胃保护氨基酸的研究

日粮中添加保护性氨基酸(RPAA)研究对肉牛增质量的影响。将2～3岁的夏洛来架子牛按体质量、年龄和体况分成4组,每组10头牛。对照组饲喂基础日粮,试验1组、2组和3组在基础日粮中分别添加30g保护赖氨酸、30g保护蛋氨酸和30g保护赖氨酸+蛋氨酸的复合物。试验结果表明:试验1组、2组和3组分别比对照组提高日增质量6%(P>0.05)、10%(P<0.05)和9%(P>0.05),均获得良好的经济效益。

牛磺酸和支链氨基酸对大鼠肝细胞氧化损伤的保护作用

①目的 探讨牛磺酸和支链氨基酸对CCl4致大鼠体外肝细胞损伤的保护作用及其可能机制。②方法 实验分为对照组、损伤组、牛磺酸 (Tau)组、牛磺酸和支链氨基酸 (T&B)组。用 1 0、2 0mmol/LCCl4诱导大鼠体外肝细胞过氧化损伤 ,并以 1 .5 0mmol/LTau和按一定比例混合的T&B复合物 0 .75 g/L进行肝细胞保护。测定孵育液中谷丙转氨酶 (ALT)、谷草转氨酶 (AST)活性及丙二醛 (MDA)含量。③结果 以 1 0mmol/LCCl4诱导肝细胞损伤时 ,Tau和T&B均能降低血清ALT、AST活性 ,减少MDA生成 ,与损伤组相比有显著差异 (F =4 .4 4 5～1 4 .0 71 ,q =3.82 5～ 4 .6 72 ,P <0 .0 1 )。以 2 0mmol/LCCl4诱导肝细胞损伤时 ,T&B能降低血清ALT、AST活性 ,减少MDA生成 ,与损伤组相比有显著差异 (q =4 .933～ 6 .0 0 1 ,P <0 .0 1 ) ,而Tau只能降低ALT、AST活性 (q =5 .6 0 3、5 .986 ,P <0 .0 1 ) ,但对MDA的生成影响不大 (q =1 .879,P >0 .0 5 )。 ④结论 牛磺酸和支链氨基酸对CCl4所致的肝细胞损伤具有保护功能 ,其保护作用可能是通过抗脂质过氧化作用实现的。

支链氨基酸对心肌缺血大鼠线粒体损伤的保护作用

目的和方法：本文用异丙肾上腺素（Ｉｓｏ） 造成大鼠心肌缺血动物模型，观察支链氨基酸（ＢＣＡＡ）对大鼠心肌缺血时线粒体结构和功能损伤的预防作用。结果：ＢＣＡＡ 能显著降低心肌缺血后心肌线粒体中丙二醛（ＭＤＡ） 水平、维持线粒体模平均微粘度（－η） 、线粒体呼吸链中细胞色素氧化酶及心肌肌球蛋白ＡＴＰａｓｅ活力。

脑损伤保护作用的基础研究:神经元兴奋性氨基酸损伤保护模型的建立

目的:建立体外培养神经细胞N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)损伤及地佐环平(MK-801)保护作用模型。方法:采用原代培养的大鼠皮质神经细胞模型,给予NMDA直接损伤,加入MK-801,在不同时间窗测定不同剂量时神经细胞损伤的形态学,及生化改变。结果:NMDA100μmol/L组细胞死亡率和乳酸脱氢酶(LDH)漏出率分别为(54.30±3.79)%,(67.13±5.90)%,NMDA的损伤作用具有明显的浓度时间依赖性,至NMDA1000μmol/L组细胞死亡率和LDH漏出率分别为(97.74±7.28)%,(94.10±6.31)%,MK-801具有明显的保护作用。结论:NMDA和其拮抗剂MK-801具有明显的剂量和时间依赖损伤和保护作用,LDH测定是检测其变化的良好指标,此实验可以作为神经元兴奋性氨基酸毒性损伤保护因素的检验模型。

大环糖肽抗生素键合相高效液相色谱法拆分7种氨基带保护基的氨基酸对映体

采用高效液相色谱法在装有大环糖肽抗生素键合相的手性柱上拆分了7种氨基带有芴甲氧羰基(fluo reny l-m ethoxycarbony l,Fm o c)保护的氨基酸对映体。比较了Fm o c-缬氨酸和相应的不带保护基的缬氨酸对映体在不同流动相体系中的色谱保留行为;考察了甲醇-醋酸-三乙胺流动相体系中醋酸和三乙胺的浓度以及它们二者的浓度之比对N-Fm o c氨基酸对映体拆分效果的影响。实验结果表明分离温度及流动相流速的变化也会对分离结果产生影响。该法简便快速,已成功地用于这类氨基酸的光学纯度测定。