N-myc下游调节基因2、微卫星不稳定在不同病理学特征胃癌患者中的表达及意义

目的:探讨N-myc下游调节基因2(NDRG2)、微卫星不稳定(MSI)在不同病理学特征胃癌患者中的表达及意义。方法:回顾性分析2019年1月至2020年12月该院收治的98例行胃癌根治术患者的临床资料,统计胃癌患者NDRG2、MSI的检测结果,比较不同病理学特征胃癌患者NDRG2、MSI的表达情况。结果:临床分期Ⅰ~Ⅱ期、未合并淋巴结转移的胃癌患者NDRG2阳性率高于临床分期Ⅲ~Ⅳ期、合并淋巴结转移的患者,差异均有统计学意义(P<0.05);肿瘤位置在胃窦、Lauren分型为肠型、低分化、临床分期Ⅰ~Ⅱ期、未合并淋巴结转移胃癌患者的MSI阳性表达率高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:NDRG2在临床分期Ⅰ~Ⅱ期、未合并淋巴结转移的胃癌患者中呈高表达;MSI在肿瘤位置在胃窦、Lauren分型为肠型、低分化、临床分期Ⅰ~Ⅱ期、未合并淋巴结转移的胃癌患者中呈高表达,二者共同参与胃癌的发生发展。

N-myc下游调节基因2对巨噬细胞极化及乳腺癌增殖、侵袭和迁移的影响

目的探究N-myc下游调节基因2(N-myc downstream-regulated gene 2,NDRG2)在乳腺癌中的表达及对巨噬细胞极化和乳腺癌增殖、侵袭及迁移的影响。方法生物信息学分析NDRG2在乳腺癌组织中的表达及与临床相关病理特征和预后的关系。免疫荧光检测乳腺癌组织中NDRG2与巨噬细胞分子标志物的定位与表达。构建巨噬细胞与乳腺癌细胞的共培养体系观察巨噬细胞内NDRG2水平改变对乳腺癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。结果NDRG2在乳腺癌组织中表达下调并与不良预后相关,巨噬细胞内NDRG2表达下调促进巨噬细胞向促瘤表型M2极化,NDRG2表达上调则促进巨噬细胞向抑瘤型M1极化,共培养体系中巨噬细胞内NDRG2表达下调可增加乳腺癌细胞增殖、侵袭和迁移能力,从而促进乳腺癌进展。结论巨噬细胞内NDRG2表达下调不仅可以促进巨噬细胞向促瘤型M2转变,还能增强乳腺癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力。

miR-181b通过靶向调控N-myc下游调节基因2影响骨肉瘤细胞的迁移和侵袭

目的探讨miR-181b对骨肉瘤细胞迁移和侵袭的影响。方法培养骨肉瘤细胞,实时荧光定量PCR检测miR-181b在骨肉瘤细胞中的表达。抑制miR-181b的表达,Transwell检测对骨肉瘤迁移和侵袭的影响;生物信息学分析miR-181b靶基因并采用荧光素酶报告基因分析miR-181b和靶基因在骨肉瘤中是否直接作用,同时采用Western Blotting检测靶基因在骨肉瘤细胞中的表达以及Transwell检测靶基因对骨肉瘤迁移和侵袭的影响。结果实时荧光定量PCR结果表明miR-181b在骨肉瘤细胞中高表达。抑制miR-181b的表达能够抑制骨肉瘤细胞的迁移和侵袭;生物信息学分析表明N-myc下游调节基因2(NDRG2)是miR-181b直接作用的靶基因,荧光素酶报告基因分析验证了该结果;Western blotting检测表明NDRG2在骨肉瘤中低表达,而抑制miR-181b能够显著提高NDRG2的表达。抑制miR-181b的表达的同时抑制靶基因NDRG2的表达,能够逆转抑制miR-181b的表达对骨肉瘤细胞的迁移和侵袭的影响,从而显著提高骨肉瘤细胞的迁移和侵袭。结论 miR-181b在骨肉瘤中过表达,NDRG2为miR-181b直接调控靶基因,抑制miR-181b能够提高NDRG2的表达从而抑制骨肉瘤细胞的迁移侵袭。

褪黑素对大鼠肠缺血再灌注肺损伤及N-myc下游调节基因2表达的影响

目的研究褪黑素对大鼠肠缺血再灌注肺损伤的保护作用及其对N-myc下游调节基因2(NDRG2)表达的影响。方法将健康雄性SD大鼠40只随机分为褪黑素高剂量组(10 mg/kg)、褪黑素低剂量组(1 mg/kg)、缺血再灌注组和假手术组。褪黑素高、低剂量组造模前30 min给予腹腔注射褪黑素,缺血再灌注组和假手术组造模前30 min腹腔注射与褪黑素治疗量等容量的生理盐水。褪黑素高、低剂量组和缺血再灌注组大鼠经夹闭肠系膜上动脉,缺血60 min后松开动脉夹造成再灌注,建立肠缺血再灌注肺损伤模型,于再灌注45 min后取右肺组织。假手术组全身麻醉后只切除右肺,缝合切口。观察肺组织病理学改变和湿/干重比值(W/D),免疫组化、Western-blot方法观察大鼠肺组织NDRG2的表达。结果与假手术组比较,缺血再灌注组肺泡壁增宽,肺泡腔内可见出血等炎症表现,W/D显著升高,肺组织NDRG2蛋白表达明显降低。与缺血再灌注组比较,褪黑素高、低剂量组肺泡腔内出血等炎症表现减轻,W/D显著降低,肺组织NDRG2蛋白表达明显增强。褪黑素高、低剂量组间各指标均无显著差异。结论褪黑素可能通过上调NDRG2的表达而减轻肠缺血再灌注造成的肺损伤。

过表达N-myc下游调节基因2(NDRG2)抑制直肠癌细胞的增殖和迁移并促进细胞凋亡

目的探讨N-myc下游调节基因2(NDRG2)基因对直肠癌细胞增殖、迁移、凋亡的影响。方法培养SW480人直肠癌细胞,以p CDNA3.1为载体,将p CDNA3.1-NDRG2和空载体(SW480-Ve)转染至SW480人直肠癌细胞,并设定SW480细胞为空白对照组。MTT法检测SW480、SW480-Ve、SW480-NDRG2组细胞增殖活性;划痕愈合试验检测三组细胞在24、48、72 h迁移距离;流式细胞术检测三组转染48 h细胞凋亡率;Western blot法检测三组细胞Bax、caspase-3、Bcl-2蛋白表达。结果细胞培养7 d后,SW480-NDRG2组细胞生存率显著低于SW480组和SW480-Ve组,且细胞生存率随着培养时间延长逐渐降低,而SW480-Ve组细胞生存率与SW480组无显著差异;SW480-NDRG2组细胞迁移距离显著低于SW480-Ve组和SW480组,SW480-Ve组和SW480组细胞迁移距离无显著差异;SW480-NDRG2组细胞凋亡率显著高于SW480组和SW480-Ve组,SW480组和SW480-Ve组细胞凋亡率差异不明显;SW480-NDRG2组细胞Bax和caspase-3蛋白表达量显著高于SW480组和SW480-Ve组,Bcl-2蛋白表达量显著低于SW480细胞和SW480-Ve细胞,SW480组和SW480-Ve组Bax、caspase-3和Bcl-2蛋白表达差异不明显。结论过表达NDRG2抑制人直肠癌细胞株SW480的增殖,降低细胞迁移,通过调控Bcl-2、Bax和caspase-3蛋白表达促进细胞凋亡。

鸟嘌呤核苷酸抑制因子2和N-myc下游调节基因2在肝癌的表达及与病理生物学特点的相关性

目的探讨鸟嘌呤核苷酸抑制因子2(RhoGDI2)和N-myc下游调节基因2(NDRG2)在肝癌组织中的表达及意义。方法所有患者手术中取原发灶癌组织及癌组织旁的正常组织,做好标签,立即放到液氮中保存,以备后期对标本石蜡包埋,免疫组化染色,对RhoGDI2和NDRG2的定位和表达情况进行分析。结果肝癌组织RhoGDI2阳性表达率为69.66%,明显高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05),而NDRG2阳性表达率为22.47%,明显低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);Ⅲ~Ⅳ期患者RhoGDI2阳性表达率为91.11%,明显高于Ⅰ~Ⅱ期患者,差异有统计学意义(P<0.05),而NDRG2阳性表达率为8.89%,明显低于Ⅰ~Ⅱ期患者,差异有统计学意义(P<0.05);有淋巴结转移患者RhoGDI2阳性表达率为87.50%,明显高于无淋巴结转移患者(P<0.05);RhoGDI2与NDRG2表达呈负相关(r s=-0.640,P<0.05)。结论RhoGDI2在肝癌组织中呈高表达,而NDRG2呈低表达,与临床病理特征有一定关系,值得进一步研究。

脊髓N-myc下游调节基因2对奥沙利铂诱导神经病理性疼痛及星形胶质细胞分化影响

目的探讨星形胶质细胞N-myc下游调节基因2(NDRG2)是否参与奥沙利珀诱导的神经病理性疼痛(OINP),并探索其对脊髓星形胶质细胞表型分化的影响。方法选取清洁级(SPF级)雄性SD大鼠32只。实验分为两部分,第一部分,将16只雄性大鼠随机分为Vehicle组(腹腔注射5%葡萄糖溶液,n=8)和Oxaliplatin组(腹腔注射奥沙利铂溶液,n=8);第二部分,将16只雄性大鼠随机分为对照腺病毒+OINP组(AD-control+OINP组,鞘内注射AD-control,腹腔注射奥沙利铂溶液,n=8)和Ndrg2干扰腺病毒+OINP组(AD-Ndrg2-RNAi+OINP组,鞘内注射AD-Ndrg2-RNAi,腹腔注射奥沙利铂溶液,n=8)。行为学检测各组大鼠机械缩足阈值(MWT)、热缩足潜伏期(TWL)。蛋白免疫印迹和实时荧光定量聚合酶链反应检测星形胶质细胞标记物GFAP、A1型星形胶质细胞标记物C3、A2型星形胶质细胞标记物S100A10及NDRG2的蛋白及mRNA表达,免疫荧光检测GFAP和C3、NDRG2的荧光表达。结果腹腔注射奥沙利铂7、11、18、25 d,Vehicle组的MWT、TWL均高于Oxaliplatin组,差异有统计学意义(P<0.05)。Oxaliplatin组脊髓星形胶质细胞标记物GFAP蛋白含量、A1表型星形胶质细胞标记物C3蛋白含量均高于Vehicle组,而A2表型星形胶质细胞标记物S100A10蛋白含量低于Vehicle组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Oxaliplatin组脊髓NDRG2蛋白含量显著高于Vehicle组,差异有统计学意义(P<0.05)。AD-Ndrg2-RNAi+OINP组NDRG2蛋白含量及Ndrg2相对mRNA含量显著低于AD-control+OINP组,差异有统计学意义(P<0.05)。给药11 d,AD-Ndrg2-RNAi+OINP组的MWT和TWL显著高于AD-control+OINP组,差异均有统计学意义(P<0.05)。AD-Ndrg2-RNAi+OINP组A1表型星形胶质细胞标志物C3的蛋白含量及mRNA含量低于AD-control+OINP组,而A2表型星形胶质细胞标志物S100A10的蛋白含量及mRNA含量显著高于AD-control+OINP组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论脊髓背角NDRG2促进星形胶质细胞向神经毒性A1表型分化,从而促进OINP雄性大鼠产生机械痛觉过敏和热痛觉过敏,为治疗OINP提供潜在的干预靶点。

N-myc下游调节基因2在膀胱癌细胞凋亡中对信号转导和转录激活因子3信号通路的影响

目的探讨N－myc下游调节基因2（N－myc downstream regulated gene 2，NDRG2）在膀胱癌细胞凋亡中对信号转导和转录激活因子3（signal transducer and activator of transcription 3，STAT3）信号通路的影响。 方法2014年12月至2015年8月采用蛋白质印迹法检测人膀胱癌细胞BIU－87和膀胱上皮永生化细胞SV－HUC－1中NDRG2的表达水平。分别用空载体（pcDNA3.1）、过表达NDRG2的载体（pcDNA3.1/ NDRG2）、NDRG2小干扰RNA（siRNA－ NDRG2）和对照siRNA转染NDRG2细胞，并分别命名为pcDNA3.1组、pcDNA3.1/NDRG2组、siRNA－NDRG2组和siRNA对照组。培养48h后，蛋白质印迹法检测NDRG2、Cleaved caspase 3、STAT3、p－STAT3、JAK2、p－JAK2表达水平，MTT法检测细胞增殖情况，流式细胞术检测细胞凋亡情况。BIU－87与45 μmol/L的STAT3信号通路抑制剂AG490作用48h后，MTT法检测细胞增殖情况，流式细胞术检测细胞凋亡情况，蛋白质印迹法检测Cleaved caspase 3、STAT3、p－STAT3、JAK2、p－JAK2表达水平。 结果NDRG2在膀胱癌细胞中的表达水平（0.016±0.001）低于膀胱上皮永生化细胞（0.096±0.003）。pcDNA3.1/NDRG2组细胞存活率（40.32±0.06）%显著低于pcDNA3.1组（100.00±0.02）%，差异有统计学意义（P〈0.01）。siRNA－NDRG2组细胞存活率（135.74±0.04）%高于siRNA对照组（100.01±0.05）%。pcDNA3.1/NDRG2组细胞凋亡率（28.64±0.05）%高于pcDNA3.1组（11.21±0.03）%，差异有统计学意义（P〈0.01）。siRNA－NDRG2组细胞凋亡率（6.31±0.05）%低于siRNA对照组（10.32±0.07）%，差异有统计学意义（P〈0.01）。pcDNA3.1/NDRG2组细胞中p－STAT3（0.11±0.04）、p－JAK2（0.13±0.03）的表达水平低于pcDNA3.1组（0.29±0.06、0.32±0.03），差异有统计学意义（P〈0.01）。AG490作用后BIU－87的细胞存活率和凋亡率与转染pcDNA3.1/NDRG2后的趋势一致。 结论NDRG2能够促进膀胱癌细胞凋亡，作用机制与STAT3信号通路有关。

N-myc下游调节基因2在子宫内膜癌组织中表达及意义

目的探讨N-myc下游调节基因2(N-myc downstream-regulatedgene 2,NDRG2)在子宫内膜癌组织中的表达,及对肿瘤细胞增殖、侵袭的影响。方法行根治性切除术子宫内膜癌患者77例,手术切除的肿瘤组织为子宫内膜癌组,癌旁正常组织为癌旁组,采用实时荧光定量PCR法检测2组NDRG2基因表达,并分析其表达与临床病理特征的关系。将对数生长期子宫内膜癌HEC-1A细胞随机分为NDRG2抑制组(转染NDRG2干扰序列)、NDRG2正常表达组(转染NDRG2干扰对照序列)、空白对照组(不作任何处理),采用实时荧光定量PCR法检测3组转染48 h NDRG2基因表达,CCK-8法检测3组转染48、96 h增殖活力,划痕试验检测3组转染后培养12、24 h迁移能力,Transwell小室法检测3组转染48 h侵袭能力。结果子宫内膜癌组NDRG2 mRNA相对表达量(1.30±0.11)低于癌旁组(1.95±0.15)(P<0.05);FIGO分期Ⅱ~Ⅳ期、中低分化、有淋巴结转移者NDRG2 mRNA相对表达量(1.16±0.07、1.14±0.10、1.24±0.07)低于FIGO分期Ⅰ期、高分化、无淋巴结转移者(1.52±0.13、1.56±0.17、1.48±0.12)(P<0.05);转染48 h,NDRG2抑制组NDRG2 mRNA相对表达量(0.48±0.11)低于NDRG2正常表达组(1.07±0.08)、空白对照组(1.09±0.16);转染48、96 h,NDRG2抑制组增殖活力吸光度(optical density,OD)值(0.47±0.06、0.76±0.03)高于NDRG2正常表达组(0.33±0.07、0.58±0.03)、空白对照组(0.36±0.08、0.61±0.02)(P<0.05);NDRG2正常表达组、空白对照组转染48 h,NDRG2 mRNA相对表达量及转染48、96 h增殖活力OD值比较差异均无统计学意义(P>0.05);NDRG2抑制组转染后培养12、24 h划痕愈合率[(14.32±2.17)%、(34.28±4.95)%]及侵袭细胞数[(122.91±8.87)个]均高于NDRG2正常表达组[(7.14±1.52)%、(12.73±3.02)%、(104.21±2.94)个]、空白对照组[(6.82±1.24)%、(11.64±2.86)%、(99.71±5.40)个](P<0.05),NDRG2正常表达组与空白对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论NDRG2在子宫内膜癌组织中呈低表达,下调NDRG2基因表达可促进子宫内膜癌HEC-1A细胞增殖、迁移和侵袭。

血清N-myc下游调节基因2和雷帕霉素靶蛋白与急性缺血性脑卒中患者早期神经功能恶化的关系

目的观察急性缺血性脑卒中(acute ischemic stroke, AIS)患者血清N-Myc下游调节基因2(N-Myc downstream regulated gene 2, NDRG2)、雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin, mTOR)水平变化,探讨其与AIS患者发生早期神经功能恶化(early neurological deterioration, END)的关系。方法 150例AIS患者,入院时和入院第7天采用美国国立卫生研究院卒中量表(National Institutes of Health Stroke Scale, NIHSS)评估END发生情况,其中发生END者33例为END组,未发生END者117例为非END组。比较2组一般资料,入院时及入院第7天NIHSS评分,入院时血清NDRG2、mTOR水平及血脂等指标;多因素logistic回归分析AIS患者发生END的影响因素;绘制ROC曲线,评估入院时血清NDRG2、mTOR预测AIS患者发生END的价值。结果 END组年龄,体质量指数,性别、合并症、TOAST分型、吸烟、饮酒比率,入院时收缩压、舒张压、空腹血糖、血小板计数、纤维蛋白原及血清三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇水平与非END组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。END组入院时、入院第7天NIHSS评分[(6.25±1.24)、(8.05±2.41)分]均高于非END组[(5.31±1.01)、(4.74±1.51)分](t=4.482,P<0.001;t=9.627,P<0.001),入院时血清NDRG2[(8.25±2.46)mmol/L]、mTOR[(31.29±7.85)mmol/L]水平均高于非END组[(6.54±1.58)、(28.25±5.67)mmol/L](t=4.801,P<0.001;t=2.485,P=0.014)。入院时NIHSS评分(OR=4.327,95%CI:2.745~6.821,P<0.001)、入院第7天NIHSS评分(OR=4.701,95%CI:3.128~7.065,P<0.001)及入院时血清NDRG2(OR=4.518,95%CI:2.941~6.941,P<0.001)、mTOR(OR=4.606,95%CI:3.025~7.012,P<0.001)是AIS患者发生END的影响因素。血清NDRG2、mTOR分别以8.22 mmol/L、32.81 mmol/L为最佳截断值,预测AIS患者发生END的AUC分别为0.695(95%CI:0.582~0.809,P<0.001)、0.605(95%CI:0.480~0.729,P<0.001),灵敏度分别为42.42%、45.45%,特异度分别为94.02%、85.47%;二者联合预测AIS患者发生END的AUC为0.839(95%CI:0.761~0.918,P<0.001),灵敏度为69.70%,特异度为81.20%;二者联合预测的AUC大于单独预测(Z=3.115,P=0.012;Z=2.098,P=0.006)。结论 AIS患者血清NDRG2、mTOR水平增高提示END发生风险大,血清NDRG2、mTOR联合检测对AIS患者发生END有一定预测价值。

N-myc下游调节基因-2在大鼠肠缺血再灌注肺损伤中的表达及其与NF-κBp65的相关研究

目的通过建立大鼠肠缺血再灌注肺损伤(IIRI)模型,观察大鼠肠缺血再灌注肺损伤,肺组织中N-myc下游调节基因-2(NDRG2)表达水平的变化。方法 50只健康成年雄性SD大鼠随机分成对照组(control)、缺血再灌注组(I/R)(其中根据缺血再灌注时间又分4个亚组),每组10只。缺血再灌注4个亚组选择缺血60min后分别再灌注30、60、120和180min,获取样本肺组织。术后样本行病理(HE)、湿干重比例(W/D)检测,免疫组化、Western-blot对NDRG2、核转录因子-κBp65(NF-κBp65)检测,RT-PCR方法对NDRG2在mRNA水平含量进行检测,TUNEL法对凋亡细胞进行检测。结果缺血再灌注组与对照组比较,缺血再灌注组肺泡壁增宽,肺泡腔内可见出血等炎症表现,W/D比值显著性升高(P<0.05),免疫组化显示NF-κBp65发生核转位现象,NF-κBp65蛋白水平表达明显升高(P<0.05),肺组织NDRG2在mRNA水平和蛋白水平的表达明显降低(P<0.05)。结论缺血再灌注损伤可下调肺组织中NDRG2的表达,NDRG2可能通过对NF-κB通路进行调控,是导致缺血再灌注后肺损伤的靶向调控位点,对肠缺血再灌注肺损伤的大鼠起保护作用。

三叶因子2和N-myc下游调节基因1在不同子宫内膜组织中的表达

目的 探讨三叶因子2（TFF2）和N-myc下游调节基因1（NDRG1）在不同子宫内膜组织中的表达,为早期诊断子宫内膜癌提供新的生物学指标。方法 收集珠海市人民医院经手术切除并经病理检查确诊为子宫内膜癌组织157例,另选择同期经手术切除并经病理检查确诊的子宫内膜不典型增生组织30例及其他病因手术切除的正常子宫内膜20例,分别检测其TFF2和NDRG1蛋白的表达情况,并分析TFF2和NDRG1蛋白的表达与子宫内膜癌临床病理因素的关系。结果 与正常子宫内膜和子宫内膜不典型增生组织比较,TFF2在子宫内膜癌组织中的阳性表达率显著降低（P〈0.05）,但NDRG1在子宫内膜癌组织中的阳性表达率显著升高（P〈0.01）。TFF2在Ⅰ、Ⅱ期子宫内膜癌组织中的阳性表达率显著高于Ⅲ~Ⅳ期（P〈0.05）;高、中分化子宫内膜癌组织中TFF2的阳性表达率显著高于低分化组织及其他类型（P〈0.01）。与深肌层浸润的子宫内膜癌比较,浅肌层浸润的子宫内膜癌组织中TFF2的阳性表达率显著升高（P〈0.05）;与有淋巴结转移的子宫内膜癌比较,无淋巴结转移的子宫内膜癌组织中TFF2的阳性表达率显著升高（P〈0.01）。而高、中度分化的子宫内膜癌组织中NDRG1的阳性表达率显著低于低分化及其他类型（P〈0.05）。浅肌层浸润的子宫内膜癌组织中NDRG1的阳性表达率显著低于深肌层浸润（P〈0.01）,与无淋巴结转移的子宫内膜癌比较,有淋巴结转移的子宫内膜癌组织中NDRG1的阳性表达率显著升高（P〈0.01）。结论 在子宫内膜组织中,TFF2表达的缺失及NDRG1蛋白的高表达可能与子宫内膜癌的发生发展有重要关系,有望在子宫内膜癌的早期诊断、判断是否存在侵袭转移等临床评估中发挥作用。

N-Myc下游调节基因2可提示人表皮生长因子受体2阳性乳腺癌赫赛汀治疗的敏感性

目的观察N-Myc下游调节基因2(NDRG2)在人表皮生长因子受体2(Her-2)+乳腺癌中的表达及其对抗Her-2治疗药物赫赛汀敏感性的影响。方法蛋白质印迹法(Western blot)检测不同分子分型乳腺癌细胞NDRG2表达差异;挖掘癌症基因组图谱数据库(TCGA)中NDRG2在不同分子分型乳腺癌中的表达差异以及与Her-2表达的关联;分析64例Her-2+乳腺癌组织化学结果,探究NDRG2在癌与癌旁组织的表达差异;构建过表达NDRG2的Her-2+乳腺癌细胞株,观察赫赛汀敏感性。结果NDRG2在Her-2+乳腺癌细胞中的表达水平低于三阴性及雌激素受体阳性(ER+)乳腺癌细胞(2.21±0.93和1.78±0.79、6.31±1.15、5.84±1.50);TCGA提示Luminal型、Her-2+以及三阴性乳腺癌中NDRG2表达低于正常乳腺组织(中位表达为42.378、28.912、96.163、319.652,P<0.05),其中Her-2+乳腺癌表达最低,乳腺癌组织中随着Her-2扩增,NDRG2表达减少(27.814比10.711,P<0.01);组织化学结果表明Her-2+乳腺癌NDRG2的表达低于癌旁组织(阳性率31.25%比75.00%,P<0.01);上调Her-2+乳腺癌NDRG2表达可改善对赫赛汀的敏感性并抑制增殖(0.37±0.06比0.16±0.03,P<0.05)、促进凋亡[(4.07±1.16)%比(25.91±3.64)%,P<0.01]。结论NDRG2在Her-2阳性乳腺癌中表达下调,其表达水平可作为提示Her-2阳性乳腺癌赫赛汀治疗敏感性的分子指标。

肿瘤抑制基因N-myc下游调节基因2调节结肠癌细胞糖代谢

目的 观察肿瘤抑制因子N-myc下游调节基因2（NDRG2）于结肠癌细胞葡萄糖代谢调节作用.方法 稳定转染NDRG2于结肠癌细胞HCT116,乳酸检测试剂盒检测细胞（1×10^6个）乳酸代谢的水平;葡萄糖试剂盒检测通过细胞（1 ×10^6个）消耗培养基葡萄糖的水平;Western blot检测HCT116细胞（1×10^6个）糖酵解中丙酮酸激（PKM）、乳酸脱氢酶（LDHA）、己糖激酶（HK）表达水平.结果 转染NDRG2后,NDRG2可有效抑制HCT116细胞乳酸[（38.2 ±3.4） mol/L比（62.1±4.8）mol/L,P＜0.05]的生成,培养基剩余葡萄糖量则明显增多[（137.0±3.6） mol/L比（88.2±2.2）mol/L,P＜0.05].Western blot检测NDRG2转染的HCT116细胞显示PKM、LDHA、HK表达显著低于对照组HCT116细胞.结论 NDRG2作为肿瘤抑制基因,能够 调控结肠癌细胞糖代谢,抑制糖酵解关键酶生成,从而抑制肿瘤细胞糖酵解.

N-myc下游调节基因2在小鼠创伤性脑损伤模型中的时空表达

目的探讨N-myc下游调节基因2(NDRG2)在小鼠创伤性脑损伤(TBI)后的时空表达.方法将雄性小鼠随机分为7组:sham、TBI 6 h、TBI 12 h、TBI 24 h、TBI 48 h、TBI 72 h、TBI 7 d.采用重物自由落体法制备小鼠脑损伤模型.采用免疫蛋白印迹法检测小鼠伤灶附近脑组织中NDRG2蛋白水平.采用免疫荧光法分析小鼠伤后NDRG2的细胞和亚细胞定位.采用Student-t检验依次分析TBI组与sham组NDRG2蛋白水平的差异.结果免疫蛋白印迹结果显示NDRG2蛋白在TBI后12 h开始显著升高至1.52倍(t=3.181,P<0.05),24h达到峰值1.92倍(t=5.032,P<0.01).免疫荧光结果显示NDRG2蛋白信号特异性位于星形胶质细胞.TBI后,NDRG2蛋白出现核转移现象和与原位末端标记法(TUNEL)信号共定位现象.结论NDRG2蛋白在TBI后表达升高,并伴有核转移及与TUNEL信号共定位,提示NDRG2参与TBI后细胞凋亡的发生发展.

转化生长因子-β1抑制人肾小管上皮细胞株HK-2中N-Myc下游调节基因2表达及意义

目的探讨转化生长因子-β1（TGF-β1）对人肾小管上皮细胞株HK-2中N-myc下游调节基因2（NDRG2）表达的影响。方法按照是否孵育TGF-β1分别设置对照组和实验组，取两组细胞分别提取蛋白及RNA行Western blot及实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR），检验两组上皮细胞E-钙黏蛋白（E-cadherin）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、波形蛋白（Vimentin）和Snail蛋白的表达差异。然后根据孵育TGF-β1的不同浓度梯度设置不同组别，分别取各组细胞提取蛋白及RNA行Western blot及RT-qPCR以检验NDRG2在TGF-β1作用后的人肾小管上皮细胞（HK-2）中的表达。结果结果表明对照组和实验组在蛋白水平相关表达量分别为E-cadherin（1.0±0.2比0.3±0.2）（t＝4.850, P＝0.008），α-SMA（1.0±0.1比2.6±0.4）（t＝6.721, P＝0.003），Vimentin（1.0±0.1比2.6±0.4）（t＝6.721, P＝0.003），Snail（1.0±0.1比2.5±0.2）（t＝11.620, P＝0.000），以上标志物两组之间差异均有统计学意义。对照组和实验组在mRNA水平相关表达量分别为E-cadherin（1.0±0.2比0.2±0.1）（t＝7.686, P＝0.002），α-SMA（1.0±0.3比2.4±0.3）（t＝5.715, P＝0.005），Vimentin（1.1±0.2比2.6±0.5）（t＝4.977, P＝0.008），Snail（0.9±0.2比1.9±0.2）（t＝6.124, P＝0.004），以上标志物两组之间差异均有统计学意义。同时在TGF-β1孵育后，HK-2细胞中NDRG2在蛋白和RNA水平都明显下调，各组在蛋白水平相关表达量分别为1.00±0.04比0.80±0.03比0.50±0.05比0.30±0.03比0.20±0.02（P＝0.019），在mRNA水平相关表达量分别为1.00±0.05比0.70±0.03比0.50±0.04比0.30±0.02比0.20±0.05（P＝0.021）。尤其当孵育TGF-β1浓度大于10 ng/ml时这种作用最为显著，各组表达水平之间差异有统计学意义。结论TGF-β1可以促进HK-2细胞中上皮-间充质转化（EMT）过程，同时TGF-β1可以下调HK-2细胞中NDRG2在蛋白和RNA水平的表达量。

老年急性缺血性脑卒中患者N-myc下游调节基因3和信号素3A表达及其临床意义

目的分析老年急性缺血性脑卒中患者N-myc下游调节基因3(NDRG3)和信号素3A(SEMA3A)表达及其临床意义。方法选择2020年9月至2022年9月聊城市人民医院老年病科收治的老年急性缺血性脑卒中患者100例(研究组)。研究组根据入院时美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分分为轻度组34例,中度组31例,重度组35例;出院后随访3个月,依照改良的Rankin量表评分分为预后良好组69例,预后不良组31例。另选取同期我院健康体检者100例(对照组)。使用Westernblot法检测外周血单个核细胞(PBMC)中NDRG3、SEMA3A表达,ELISA法检测外周血内皮生长因子、转化生长因子β1、TNF-α、白细胞介素17水平,Spearman等级相关性分析NDRG3、SEMA3A与NIHSS评分的相关性,ROC曲线分析NDRG3、SEMA3A对老年急性缺血性脑卒中患者预后不良的预测价值。结果研究组PBMC中NDRG3、SEMA3A表达较对照组明显升高(1.11±0.16vs0.76±0.13,0.78±0.13vs0.42±0.09,P<0.01)。轻度组、中度组、重度组PBMC中NDRG3、SEMA3A表达明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。预后不良组NDRG3、SEMA3A表达明显高于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.01)。Spearman等级相关性分析显示,老年急性缺血性脑卒中患者NIHSS评分与NDRG3、SEMA3A表达呈正相关(r=0.597,P<0.01;r=0.618,P<0.01),NDRG3与SEMA3A表达呈正相关(r=0.477,P<0.01)。ROC曲线分析显示,NDRG3+SEMA3A联合预测的曲线下面积优于NDRG3、SEMA3A单独预测(0.962vs 0.861、0.880,P<0.01)。结论老年急性缺血性脑卒中患者NDRG3、SEMA3A表达上调,且与患者病情严重程度及预后密切相关。

miR-181c-5p通过靶向N-myc下游调控基因2调控人胶质母细胞瘤生物学行为机制研究

目的探讨miR-181c-5p通过靶向N-myc下游调控基因2(NDRG2)调控人胶质母细胞瘤生物学行为的机制。方法选取2021年4月至2022年4月海南省第二人民医院收治的30例非功能区胶质瘤患者术中的胶质母细胞瘤(GBM)组织标本及邻近正常脑组织标本进行研究。应用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测GBM组织标本、正常脑组织标本中miR-181c-5p的表达水平;荧光素酶检测miR-181c-5p靶向调控NDRG2基因情况;应用qRT-PCR及免疫印迹试验(Western Blot)检测GBM组织标本中NDRG2的基因及蛋白表达水平;检测GBM细胞增殖、迁移和侵袭情况。结果GBM组织中NDRG2 mRNA相对表达量高于正常组织标本(P<0.05);双荧光素酶实验显示,miR-181c-5p模拟物(miR-181c-5p mimics)组NDRG2野生型(NDRG2 WT)的相对荧光素酶活性低于模拟物对照(NCmimics)组(P<0.05);miR-181c-5p抑制剂(miR-181c-5p inhibitor)组U87细胞中NDRG2 mRNA表达和蛋白表达高于抑制剂对照(NCinhibitor)组(P<0.05);miR-181c-5p mimics组U87细胞中NDRG2 mRNA表达和蛋白表达显著低于NC mimics组(P<0.05);细胞增殖-毒性试验(CCK-8)检测结果显示,转染sh-NDRG2(sh-NDRG2)组U87细胞增殖率低于转染sh-NC(sh-NC)组(P<0.05);miR-181c-5p inhibitor+sh-NDRG2组U87细胞增殖率低于miR-181c-5p inhibitor+sh-NC组(P<0.05)。Transwell实验显示,sh-NDRG2组U87细胞迁移数量及侵袭数量低于sh-NC组(P<0.05);miR-181c-5p inhibitor+sh-NDRG2组U87细胞迁移数量及侵袭数量低于miR-181c-5p inhibitor+sh-NC组(P<0.05)。结论miR-181c-5p能够通过调节NDRG2的表达,进而调节人胶质母细胞瘤细胞的增殖、侵袭及迁移能力。

N-myc下游调节基因2在癫痫小鼠海马中的表达及对星形胶质细胞谷氨酸、葡萄糖摄取的影响

目的:探讨N-myc下游调节基因2(N-myc downstream regulated gene 2,NDRG2)在癫痫小鼠海马中的表达及其对小鼠脑星形胶质细胞谷氨酸和葡萄糖摄取的影响。方法:采用氯化锂-匹鲁卡品诱导法建立癫痫小鼠模型,在造模后1 d、7 d、15 d、6周处死小鼠取取海马区脑组织,Western blot检测NDRG2蛋白表达变化。原代培养野生型、NDRG2+/+和NDRG2-/-小鼠的星形胶质细胞并进行基因型鉴定。使用谷氨酸含量测定试剂盒及紫外分光光度计检测星形胶质细胞培养上清液中谷氨酸含量。流式细胞术检测2-NBDG荧光标记星形胶质细胞的阳性率。结果:(1)与对照组(0.25±0.07)比较,小鼠海马区NDRG2表达量在癫痫急性期1 d(0.45±0.06,t=-3.84,P<0.05)、7 d(0.54±0.09,t=-4.30,P<0.05)、15 d(1.04±0.06,t=-15.08,P<0.01)均有明显增加,癫痫慢性期6周(1.30±0.16,t=-10.40,P<0.01)依然保持明显的高表达。(2)检测原代细胞培养上清液剩余的谷氨酸含量,发现NDRG2-/-组星形胶质细胞对谷氨酸的摄取相对于NDRG2+/+组明显减少[(689.03±101.78)μmol/L,(113.67±37.35)μmol/L;t=9.19,P<0.01]。(3)Western blot分析NDRG2-/-组原代星形胶质细胞中EAAT1蛋白的表达显著低于NDRG2+/+组[(0.34±0.03),(1.16±0.21)],差异有统计学意义(t=-6.59,P<0.01)。(4)流式细胞术检测发现,NDRG2-/-组细胞的阳性率明显低于NDRG2+/+组细胞阳性率[(17.60±5.72)%,(72.22±8.35)%],差异有统计学意义(t=-13.22,P<0.01)。结论:NDGR2与癫痫疾病的发生发展密切相关。NDRG2的表达有利于EAAT1发挥其生理功能,促进星形胶质细胞对谷氨酸和葡萄糖的摄取,可能是一种潜在细胞保护因子,促进神经保护和修复。

自噬蛋白Beclin-1与N-myc下游调控基因2在食管鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

目的探索自噬蛋白Beclin-1和N-myc下游调控基因2(NDRG2)在食管鳞状细胞癌(ESCC)中的表达,并探讨两种蛋白作为ESCC预后分子标志物的临床价值。方法采用免疫组织化学染色检测Beclin-1与NDRG2在121例ESCC组织中的表达,通过Pearson相关分析两者表达与临床病理参数的关系。根据Beclin-1与NDRG2的表达情况将所有患者分为2组,高、低表达组的生存概率通过Kaplan-Meier曲线计算,Log-rank检验用于生存分析的比较。采用Cox比例风险模型进行单因素和多因素分析,确定ESCC患者的独立预后因子。结果免疫组织化学染色分析显示Beclin-1蛋白在121例ESCC及癌旁组织中的阳性表达率分别为40.5%(49/121)和59.5%(68/121),差异有统计学意义(χ^(2)=5.973,P=0.015)。NDRG2蛋白在ESCC组织中的阳性表达率亦明显低于癌旁组织,差异有统计学意义(46.3%vs.61.2%;χ^(2)=5.385,P=0.020)。Beclin-1低表达者有更为频繁的淋巴结转移(χ^(2)=6.158,P=0.013)和更晚的TNM分期(χ^(2)=4.538,P=0.033),而NDRG2低表达与更晚的T分期(χ^(2)=6.607,P=0.010)和TNM分期(χ^(2)=5.744,P=0.017)相关。Kaplan-Meier曲线显示,Beclin-1低表达与高表达患者的3年总体生存(OS)率分别为44.3%和60.9%,差异有统计学意义(χ^(2)=5.696,P=0.017)。NDRG2低表达者的预后亦明显低于NDRG2高表达者,3年OS率分别为43.9%和59.2%(χ^(2)=9.004,P=0.003)。单、多因素Cox比例风险模型分析表明,Beclin-1低表达(HR=1.727,95%CI:1.017~2.934,P=0.043)、NDRG2低表达(HR=1.671,95%CI:1.023~2.730,P=0.040)与TNMⅡ~Ⅲ期(HR=3.823,95%CI:2.133~6.852,P<0.001)是ESCC患者预后不良的独立预测因素。结论Beclin-1和NDRG2表达在ESCC中明显下调,且与患者不良预后相关,其可能是预测ESCC患者生存的预后标志物。