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CpOGA^(D298N)与核心链霉亲和素Stv13融合表达用于检测蛋白质O⁃GlcNAc修饰
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作者 黎先感 杨明 +4 位作者 鲁莹 李玲 马骞 李静 张连文 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期513-519,共7页
氧连接的β-N-乙酰葡萄糖胺修饰(O-GlcNAc修饰)是一种发生在蛋白质丝氨酸、苏氨酸羟基上的一种动态、可逆的翻译后修饰。O-GlcNAc修饰在细胞的许多关键过程中发挥重要作用,也是研究阿尔茨海默病和糖尿病等的重要途径,但是常用于O-GlcNA... 氧连接的β-N-乙酰葡萄糖胺修饰(O-GlcNAc修饰)是一种发生在蛋白质丝氨酸、苏氨酸羟基上的一种动态、可逆的翻译后修饰。O-GlcNAc修饰在细胞的许多关键过程中发挥重要作用,也是研究阿尔茨海默病和糖尿病等的重要途径,但是常用于O-GlcNAc蛋白检测的抗体特异性或者检测分子量范围仍存在问题且耗时(~36 h)过长,对后续研究造成困扰。在本研究中,我们设计构建了产气荚膜梭菌OGA(O-GlcNAcase)突变体(CpOGA^(D298N))与核心链霉亲和素Stv13融合表达质粒pET28a-CpOGA^(D298N)-Stv13。将质粒pET28a-CpOGA^(D298N)-Stv13转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达,获得了融合蛋白质CpOGA^(D298N)-Stv13。通过CpOGA^(D298N)特异性结合O-GlcNAc的能力及生物素-亲和素特异性亲和作用,设计了Far-Western blot(Far-WB)用于检测蛋白质O-GlcNAc修饰,利用sOGT(short form O-GlcNAc transferase)、去O-GlcNAc修饰sOGT、细胞裂解液样本及人肝细胞核因子1A(hepatocyte fuclear factor 1A,HNF1A)对该方法进行验证。本研究成功构建了一种蛋白质O-GlcNAc修饰检测方法,耗时相对O-GlcNAc特异性抗体缩短至5~7 h,丰富了蛋白质O-GlcNAc修饰的检测方法,为其后续研究奠定了基础。 展开更多
关键词 氧连接的β-N-乙酰葡萄糖胺修饰 CpOGA^(D298N)-Stv13 生物素 Far-Western blot
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O-GlcNAc糖基化修饰的研究进展 被引量:1
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作者 王梦荷 郑路 +1 位作者 孟领航 王佳佳 《聊城大学学报(自然科学版)》 2024年第1期92-101,共10页
蛋白质的N-乙酰氨基葡萄糖(O-linked-N-acetylglucosamine,GlcNAc)修饰是一种广泛存在于真核细胞内的O-连接的单糖修饰,其通过β-糖苷键将GlcNAc与细胞质或核蛋白上的丝氨酸或苏氨酸残基结合。O-GlcNAc糖基化修饰可以调控基因的表达、... 蛋白质的N-乙酰氨基葡萄糖(O-linked-N-acetylglucosamine,GlcNAc)修饰是一种广泛存在于真核细胞内的O-连接的单糖修饰,其通过β-糖苷键将GlcNAc与细胞质或核蛋白上的丝氨酸或苏氨酸残基结合。O-GlcNAc糖基化修饰可以调控基因的表达、调节信号转导、参与免疫保护和细胞代谢等生理过程,其异常表达与某些疾病相关,如糖尿病、癌症、心血管和神经退行性疾病等,明确蛋白质的糖基化修饰位点对阐明疾病的发生具有重要意义。由于O-GlcNAc修饰是一种动态、化学计量的修饰,质谱检测信号响应低,导致位点鉴定困难。本文将基于O-GlcNAc的生物学功能,对O-GlcNAc糖蛋白的富集方法进行归纳总结,为未来O-GlcNAc相关研究提供思路。 展开更多
关键词 O-glcnac糖基化修饰 分子探针 代谢标记
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靶向编辑O⁃GlcNAc糖基化修饰的化学生物学技术
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作者 潘雅文 王贞超 沈大成 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期453-462,共10页
糖基化修饰是最丰富和最复杂的蛋白质翻译后修饰之一。其中,氧连-N-乙酰氨基葡萄糖基化修饰(O-GlcNAcylation)作为广泛存在于真核细胞质或线粒体的蛋白质糖修饰,影响了蛋白质性质、细胞功能和疾病状态等方面,因此,在活细胞中的靶蛋白质... 糖基化修饰是最丰富和最复杂的蛋白质翻译后修饰之一。其中,氧连-N-乙酰氨基葡萄糖基化修饰(O-GlcNAcylation)作为广泛存在于真核细胞质或线粒体的蛋白质糖修饰,影响了蛋白质性质、细胞功能和疾病状态等方面,因此,在活细胞中的靶蛋白质上进行编辑O-GlcNAc糖基化对于与其相关的功能调控至关重要。这些在细胞靶蛋白质上操控O-GlcNAc糖基化修饰的新技术,将在很大程度上加速O-GlcNAc功能研究的发展。本文简要介绍了近年来靶向编辑O-GlcNAc糖基化修饰化学生物学技术的研究进展,讨论了目前可用的O-GlcNAc编辑策略并进行了分析,展望了相关技术的未来发展前景。这些技术组成了一个强大的化学生物学工具箱,并有望用于与O-GlcNAc糖基化相关疾病的诊断与治疗。 展开更多
关键词 O-glcnac 糖基化修饰 靶向编辑 化学生物学
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O⁃GlcNAc糖基化修饰在免疫系统中的作用
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作者 薛俊杰 孙慧 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期474-483,共10页
O-GlcNAc糖基化修饰是一种广泛存在于细胞内蛋白质上的翻译后修饰,与一般的蛋白质糖基化修饰不同,催化该修饰的O-GlcNAc糖基转移酶将GlcNAc糖单元添加在蛋白质的丝氨酸或苏氨酸残基上后便不再延伸。自被发现以来,已有大量研究表明,O-Glc... O-GlcNAc糖基化修饰是一种广泛存在于细胞内蛋白质上的翻译后修饰,与一般的蛋白质糖基化修饰不同,催化该修饰的O-GlcNAc糖基转移酶将GlcNAc糖单元添加在蛋白质的丝氨酸或苏氨酸残基上后便不再延伸。自被发现以来,已有大量研究表明,O-GlcNAc糖基化修饰广泛参与了细胞生长发育、基因转录调控、免疫反应和应激反应等诸多基础性的生理过程。在免疫系统中,O-GlcNAc糖基化修饰通过多种途径调控免疫细胞的活化、分化以及功能发挥。巨噬细胞的分化与表型维持依赖O-GlcNAc糖基化修饰的稳态,葡萄糖代谢水平的改变或OGT的缺失都会导致巨噬细胞极化发生转变。此外,O-GlcNAc糖基化修饰通过改变NF-κB等转录因子的活性调节细胞因子的转录维持巨噬细胞炎性,亦可影响MAVS蛋白泛素化以响应病原体感染。在其他先天性免疫细胞中,O-GlcNAc糖基化修饰水平的降低都会不同程度地影响细胞免疫功能。T细胞和B细胞中的NF-κB、NFAT和c-Myc等转录因子上均受到该修饰的调控,从而影响细胞因子与代谢相关基因的表达,并伴随着较高水平的葡萄糖摄入和O-GlcNAc糖基化修饰,以满足细胞活化与增殖。O-GlcNAc糖基化修饰在免疫系统中的异常变化与慢性炎症、肿瘤等相关疾病的发生发展密切相关,或成为肿瘤免疫逃逸的手段。深入了解O-GlcNAc糖基化修饰在免疫系统中的作用,将有助于揭示免疫调控的分子机制,为新型免疫治疗策略的开发提供理论基础。 展开更多
关键词 O-glcnac糖基化修饰 O-glcnac糖基转移酶 免疫细胞 炎症反应 肿瘤逃逸
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O-linked N-acetylglucosamine transferase(OGT) is overexpressed and promotes O-linked protein glycosylation in esophageal squamous cell carcinoma 被引量:2
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作者 Zhe Qiao Chengxue Dang +6 位作者 Bin Zhou Shaomin Li Wei Zhang Jiantao Jiang Jin Zhang Ranran Kong Yuefeng Ma 《The Journal of Biomedical Research》 CAS 2012年第4期268-273,共6页
The aim of this present study was to explore the expression and clinical significance of O-linked N-acetylglucosamine(O-GlcNAc) transferase(OGT) and enzymatic O-linked glycosylation(O-GlcNAcation) through the ad... The aim of this present study was to explore the expression and clinical significance of O-linked N-acetylglucosamine(O-GlcNAc) transferase(OGT) and enzymatic O-linked glycosylation(O-GlcNAcation) through the addition of O-linked-β-N-acetylglucosamine in esophageal squamous cell carcinoma.OGT expression and O-GlcNAcation in 40 samples from patients with esophageal squamous cell carcinoma was detected by immunohistochemical staining with anti-OGT antib ody and O-GlcNAc-specific antibody RL 2,respectively.The relationship between pathological and clinical factors of patients was analyzed.We found that the expression of OGT was higher in esophageal squamous cell carcinoma samples compared to the normal tissues.RL 2 antibody level was positively correlated with OGT expression,and the metastasis of lymph node,which means the level of O-GlcNAcation was high and related to the metastasis of lymph node in esophageal squamous cell carcinoma.In conclusion,OGT activation is the main reason for promoting the level of O-GlcNAcation in esophageal squamous cell carcinoma.O-GlcNAcylation may play an important role in esophageal squamous cell carcinoma. 展开更多
关键词 O-linked N-acetylglucosam ine(O-glcnac transferase(OGT) O-linked glycosylation(O-glcnacation) esophageal squamous cell carcinoma
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Synthesis of two derivatives of tigogenyl disaccharides containing N-acetylglucosamine and the long range shielding effect of benzoyl groups
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作者 Shu Jie Hou Liang Zhou Ping Sheng Lei De Quan Yu 《Chinese Chemical Letters》 SCIE CAS CSCD 2007年第4期373-376,共4页
Two tigogenyl glycosides containing N-acetylglucosamine were synthesized. Their structures were confirmed by ^1H and ^13C NMR spectra. The shielding effect caused by benzoyl groups was elucidated by ^1H NMR, COSY, HSQ... Two tigogenyl glycosides containing N-acetylglucosamine were synthesized. Their structures were confirmed by ^1H and ^13C NMR spectra. The shielding effect caused by benzoyl groups was elucidated by ^1H NMR, COSY, HSQC, HMBC spectroscopy. 展开更多
关键词 n-acetylglucosamine GLYCOSYLATION Shielding effect
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HBP介导的O-GlcNAc修饰在PFOS暴露致斑马鱼胚胎发育异常中的作用
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作者 袁琴 范赟 +7 位作者 钱鸿 韩舒雯 汤静雅 徐俏俏 吴炜 姜子燕 秦玉峰 陆春城 《环境卫生学杂志》 2023年第11期809-817,829,共10页
目的通过构建全氟辛烷磺酸(perfluorooctane sulfonate,PFOS)斑马鱼染毒模型,探讨PFOS暴露对胚胎发育的影响及可能机制。方法基于人群内暴露浓度设置PFOS暴露浓度梯度(0、0.02、0.2、2和20μmol/L),对斑马鱼胚胎染毒至120 hpf受精后小时... 目的通过构建全氟辛烷磺酸(perfluorooctane sulfonate,PFOS)斑马鱼染毒模型,探讨PFOS暴露对胚胎发育的影响及可能机制。方法基于人群内暴露浓度设置PFOS暴露浓度梯度(0、0.02、0.2、2和20μmol/L),对斑马鱼胚胎染毒至120 hpf受精后小时(hourspost-fertilization,hpf),检测斑马鱼胚胎的孵化率、畸形率、死亡率、心率及运动分析等基础指标;采用非靶向代谢组学技术分析PFOS暴露后斑马鱼胚胎整体代谢水平的变化,并结合实时荧光定量(RT-qPCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)观察差异代谢酶及蛋白表达水平。结果暴露于20μmol/L的PFOS导致斑马鱼胚胎畸形率升高(P<0.05)、心率升高(P<0.05)、行为分析异常(P<0.05);代谢组学结果发现20μmol/L PFOS暴露组斑马鱼胚胎中葡萄糖-6-磷酸(Glu-6-P)、乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)和N-乙酰氨基葡萄糖-6-磷酸(GlcNAc-6-P)水平显著升高(P<0.05),提示己糖胺生物合成途径(hexosamine-biosynthesis pathway,HBP)被过度激活;RT-qPCR结果显示20μmol/L PFOS组HBP关键代谢酶slc2a1b、hk1、gfat1基因表达水平显著上调(P<0.05);Western blot结果显示斑马鱼胚胎整体O-连接-N-乙酰葡萄糖胺糖基化(O-GlcNAc)水平在20μM PFOS暴露组与对照组之间存在差异。结论PFOS暴露可能通过干扰HBP途径,介导O-GlcNAc修饰水平改变导致斑马鱼胚胎发育畸形率升高及运动行为学异常,提示PFOS具有胚胎发育毒性。 展开更多
关键词 全氟辛烷磺酸(PFOS) 斑马鱼胚胎发育 代谢组学 O-连接-N-乙酰葡萄糖胺糖基化(O-glcnac)修饰
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O-GlcNAc转移酶介导的Kruppel样因子5 O-GlcNAc糖基化修饰调控细胞周期素D1参与结直肠癌发生、发展实验研究
8
作者 彭明沙 黎爽 +3 位作者 周翼 黄世贵 舒子龙 彭洪 《陕西医学杂志》 CAS 2023年第12期1648-1653,1659,共7页
目的:探讨O-GlcNAc转移酶(OGT)通过O-GlcNAc糖基化修饰稳定Kruppel样因子5(KLF5)蛋白并上调细胞周期素D1(CCDN1)表达参与结直肠癌(CRC)发生、发展的分子机制。方法:采用生物信息学方法分析KLF5 mRNA和蛋白在CRC组织中的表达。采用实时... 目的:探讨O-GlcNAc转移酶(OGT)通过O-GlcNAc糖基化修饰稳定Kruppel样因子5(KLF5)蛋白并上调细胞周期素D1(CCDN1)表达参与结直肠癌(CRC)发生、发展的分子机制。方法:采用生物信息学方法分析KLF5 mRNA和蛋白在CRC组织中的表达。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测CRC细胞中KLF5的表达水平,CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期。通过生物信息学方法分析KLF5的靶基因和潜在结合位点,并通过双荧光素酶实验证实KLF5蛋白可与CCDN1结合,采用RT-qPCR检测KLF5对CCDN1 mRNA的影响。抑制KLF5并过表达CCDN1,分析KLF5是否通过正调控CCDN1促进细胞增殖和促进细胞进入G 1期。采用生物信息学分析KLF5蛋白是否存在O-GlcNAc糖基化位点,OGT mRNA和蛋白在结直肠癌组织中的表达以及OGT和KLF5表达的相关性。使用OGT抑制剂OSMI-1处理CRC细胞,蛋白质免疫印迹法(Western blot)分析KLF5蛋白表达,O-GlcNAc糖基化蛋白表达水平通过免疫荧光实验检测。并用Western blot法检测OSMI-1和放线菌酮(CHX)处理后KLF5蛋白的稳定性。最后抑制OGT并过表达KLF5,分析OGT是否通过正调控KLF5促进CCDN1表达。结果:KLF5 mRNA和蛋白在CRC中高表达。KLF5在CRC细胞中高表达并可促进细胞增殖和促进细胞进入G 1期。CCND1是KLF5的靶基因并可与CCND1靶向结合。KLF5通过正调控CCND1促进细胞增殖和促进细胞由G 1期向S期转化。生物信息学分析证实KLF5蛋白存在O-GlcNAc糖基化位点。OGT mRNA和蛋白在CRC中高表达,并且OGT和KLF5表达水平呈正相关。抑制OGT表达可降低O-GlcNAc糖基化蛋白和KLF5蛋白水平,并可降低KLF5蛋白的稳定性。OGT通过正调控KLF5上调CCND1表达。结论:KLF5通过正调控CCND1促进CRC细胞增殖,并促进细胞进入G 1期。OGT通过O-GlcNAc糖基化修饰稳定KLF5并上调CCND1表达。 展开更多
关键词 结直肠癌 O-glcnac转移酶 Kruppel样因子5 细胞周期素D1 增殖 细胞周期
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EOGT介导的O-GlcNAc修饰对Notch信号通路的影响及其在疾病中的作用
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作者 毛元鹏 魏红山 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期1284-1290,共7页
O-连接-N-乙酰氨基葡萄糖(O-linked-N-acetylglucosamine,O-GlcNAc)修饰是一种特殊的翻译后修饰,在众多细胞过程中发挥调节作用,例如转录、胞内信号转导、内吞作用和蛋白质稳定性。表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)结构域特异... O-连接-N-乙酰氨基葡萄糖(O-linked-N-acetylglucosamine,O-GlcNAc)修饰是一种特殊的翻译后修饰,在众多细胞过程中发挥调节作用,例如转录、胞内信号转导、内吞作用和蛋白质稳定性。表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)结构域特异性O-GlcNAc转移酶(EGF domain-specific O-linked-N-acetylglucosamine transferase,EOGT)是一种内质网(endoplasmic reticulum,ER)驻留蛋白质,能够对含有EGF结构域的分泌或膜(跨膜)糖蛋白丝氨酸/苏氨酸残基进行糖基化修饰。Notch信号通路是一种普遍存在的细胞间通讯过程,通过邻近细胞间的相互作用调节细胞生物过程。目前,已经在多种人类疾病中发现有EOGT介导的O-GlcNAc修饰参与,并且通常与Notch信号通路相关。然而,其中具体分子机制尚未完全阐明。本文对近年来EOGT介导的O-GlcNAc修饰,以及相关Notch信号通路在多种人类疾病中的作用研究现状进行简要回顾。 展开更多
关键词 表皮生长因子结构域特异性O-glcnac转移酶 O-连接-N-乙酰氨基葡萄糖 NOTCH信号通路 糖基化修饰 疾病
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洗心汤对SAD大鼠脑内tau蛋白O-GlcNAc糖基化修饰相关酶的影响 被引量:7
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作者 第五永长 田金洲 时晶 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1442-1447,共6页
目的建立SAD动物模型,研究名方洗心汤对SAD模型大鼠脑组织tau蛋白O-GlcNAc糖基化修饰中蛋白质O位N-乙酰葡萄糖胺糖基转移酶(OGT)、和糖苷酶(O-GlcNAcase)的影响,探讨名方洗心汤防治SAD的可能作用机制。方法将SPF级健康雄性SD大鼠随机分... 目的建立SAD动物模型,研究名方洗心汤对SAD模型大鼠脑组织tau蛋白O-GlcNAc糖基化修饰中蛋白质O位N-乙酰葡萄糖胺糖基转移酶(OGT)、和糖苷酶(O-GlcNAcase)的影响,探讨名方洗心汤防治SAD的可能作用机制。方法将SPF级健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、多奈哌齐对照组、名方洗心汤小、中、大剂量组。治疗结束及行为学测试之后,以免疫组化及蛋白印迹方法检测大鼠脑组织tau蛋白O-GlcNAc糖基化修饰过程中OGT、O-GlcNAcase酶表达的变化。结果名方洗心汤能显著提高SAD大鼠海马OGT的表达,降低O-GlcNAcase的表达,组间差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。多奈哌齐对照组与SAD模型组相比无显著性差异(P>0.05)。结论名方洗心汤能够调节O-GlcNAc糖基转移酶和糖苷酶的表达,从而提高SAD大鼠海马组织tau蛋白O-GlcNAc糖基化修饰水平。 展开更多
关键词 散发性老年性痴呆 洗心汤 SAD模型 O—glcnac糖基转移酶 O-glcnac糖苷酶
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远志皂苷元对PC12细胞tau蛋白磷酸化和O-GlcNAc糖基化的影响 被引量:13
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作者 陈玉静 黄小波 +1 位作者 陈文强 王宁群 《天津中医药》 CAS 2013年第1期40-42,共3页
[目的]观察远志皂苷元对体外培养的PC12细胞tau蛋白磷酸化和O-GlcNAc糖基化的影响。[方法]应用低糖培养PC12细胞模拟O-GlcNAc糖基化水平的下降,四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色(MTT)法检测细胞存活率;采用Western blot方法检测O-GlcNAc糖... [目的]观察远志皂苷元对体外培养的PC12细胞tau蛋白磷酸化和O-GlcNAc糖基化的影响。[方法]应用低糖培养PC12细胞模拟O-GlcNAc糖基化水平的下降,四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色(MTT)法检测细胞存活率;采用Western blot方法检测O-GlcNAc糖基化和tau蛋白磷酸化水平。[结果]远志皂苷元能明显改善PC12细胞存活率,与对照组相比,模型组O-GlcNAc糖基化表达降低,tau蛋白磷酸化水平升高。与模型组相比,远志皂苷元处理组未发生O-GlcNAc糖基化表达降低,tau蛋白未发生过度磷酸化。[结论]tau蛋白磷酸化在某些位点受到O-GlcNAc糖基化修饰的负性调节,远志皂苷元在一定程度上可以升高O-GlcNAc糖基化表达,降低tau蛋白磷酸化水平。 展开更多
关键词 远志皂苷元 PC12细胞 TAU蛋白 O-glcnac糖基化 磷酸化
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O⁃连接⁃N⁃乙酰葡糖胺糖基化蛋白质的富集方法
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作者 孟领航 张威 王佳佳 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期463-473,共11页
O-连接-N-乙酰葡糖胺(O-GlcNAc)糖基化修饰是将N-乙酰葡萄糖胺添加到细胞核和细胞质蛋白质的丝氨酸和苏氨酸残基上的一种丰富的、独特的翻译后修饰,与癌症、神经退行性病变和糖尿病等疾病密切相关。明确O-GlcNAc修饰位点是探究其在相关... O-连接-N-乙酰葡糖胺(O-GlcNAc)糖基化修饰是将N-乙酰葡萄糖胺添加到细胞核和细胞质蛋白质的丝氨酸和苏氨酸残基上的一种丰富的、独特的翻译后修饰,与癌症、神经退行性病变和糖尿病等疾病密切相关。明确O-GlcNAc修饰位点是探究其在相关疾病中调控机制的前提,同时也是临床诊断和靶向干预的关键。本文介绍了近年来O-GlcNAc糖基化修饰与疾病之间的关系以及相关修饰位点的富集方法,包括抗体和凝集素、化学酶法、亲水作用液相色谱法和非天然糖代谢标记等;此外,“凹凸理论”、“定点活化”等靶向标记特定组织内蛋白质的糖基化修饰策略已成为当前研究热点,同时基于“一石多鸟”的多功能酶法标记,以及“一锅法”分析多种糖链结构等方法也将极大促进糖蛋白组学的快速发展。总之,开发更加高效、特异的糖蛋白富集策略,将对阐明包括O-GlcNAc在内的异常糖基化修饰在相关疾病中的调控机制具有重要的研究意义。 展开更多
关键词 糖蛋白 O-连接-N-乙酰葡糖胺修饰 蛋白富集 代谢标记
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洗心汤对散发性老年性痴呆大鼠脑内tau蛋白O-GlcNAc糖基化修饰的影响 被引量:14
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作者 第五永长 田金洲 时晶 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1620-1625,共6页
目的研究洗心汤(人参、半夏、茯神、附子、菖蒲)对散发性老年性痴呆模型大鼠脑组织tau蛋白O位N-乙酰葡萄糖胺(O-GlcNAc)糖基化修饰水平的影响。方法 SPF级健康雄性SD大鼠侧脑室注射链脲佐菌素(ICV-STZ),随机分为模型组、多奈哌齐对照组... 目的研究洗心汤(人参、半夏、茯神、附子、菖蒲)对散发性老年性痴呆模型大鼠脑组织tau蛋白O位N-乙酰葡萄糖胺(O-GlcNAc)糖基化修饰水平的影响。方法 SPF级健康雄性SD大鼠侧脑室注射链脲佐菌素(ICV-STZ),随机分为模型组、多奈哌齐对照组、洗心汤小、中、大剂量组并设假手术组作为对照。治疗结束及行为学测试之后,以免疫组化及蛋白印迹方法检测大鼠脑组织tau蛋白O-GlcNAc糖基化修饰水平。结果洗心汤能明显提高散发性老年性痴呆大鼠海马组织以琥珀酸化凝集素富集的O-GlcNAc糖基化蛋白质以及用RL2、CTD110.6检测的O-GlcNAc糖基化tau蛋白表达,组间差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。多奈哌齐对照组与散发性老年性痴呆模型组相比则无显著性差异(P>0.05)。结论洗心汤能够明显提高散发性老年性痴呆大鼠海马组织tau蛋白O-GlcNAc糖基化修饰水平,从而可能起到抑制tau蛋白在重要位点的过度磷酸化及其tau毒性,防止散发性老年性痴呆病理进展的作用。 展开更多
关键词 散发性老年性痴呆 洗心汤 侧脑室注射链脲佐菌素模型 TAU蛋白 O-glcnac糖基化修饰
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蛋白质O-GlcNAc糖基化及其细胞生物学功能 被引量:6
14
作者 杨新颖 李静 耿美玉 《细胞生物学杂志》 CSCD 2007年第5期682-686,共5页
糖基化是蛋白质翻译后修饰的一项重要内容,大多数蛋白质糖基化发生在细胞膜表面,且糖链结构复杂。而发生在细胞浆与细胞核内的、单个O-GlcNAc修饰的蛋白质糖基化现象,因其独特的细胞定位、糖链连接方式以及重要的生物学调控作用而日益... 糖基化是蛋白质翻译后修饰的一项重要内容,大多数蛋白质糖基化发生在细胞膜表面,且糖链结构复杂。而发生在细胞浆与细胞核内的、单个O-GlcNAc修饰的蛋白质糖基化现象,因其独特的细胞定位、糖链连接方式以及重要的生物学调控作用而日益成为糖生物学领域研究的热点。现对蛋白质O-GlcNAc修饰及其细胞生物学功能研究进展情况进行综述。 展开更多
关键词 O-glcnac O-磷酸化 OGT O-glcnacASE 阴-阳学说
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O-GlcNAc对上唇发育过程中上皮间叶转化影响的研究 被引量:1
15
作者 朴正国 Seok-Kee Baik +2 位作者 邹瑞 Hye-Jin Tak Sang-Hwy Lee 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期285-289,共5页
目的:研究氧联乙酰葡萄糖胺(O-linked N-acetylglucosamine,O-GlcNAc)在上唇发育过程中对面突间上皮间叶转化的影响。方法:通过在鸡胚上唇植入浸有O-GlcNAc促进剂OGT(O-GlcNAc transferase)、OGlcNAc的抑制酶OGA(O-GlcNAcase)、以及OGA... 目的:研究氧联乙酰葡萄糖胺(O-linked N-acetylglucosamine,O-GlcNAc)在上唇发育过程中对面突间上皮间叶转化的影响。方法:通过在鸡胚上唇植入浸有O-GlcNAc促进剂OGT(O-GlcNAc transferase)、OGlcNAc的抑制酶OGA(O-GlcNAcase)、以及OGA的抑制剂STZ(streptozoticin)的琼脂糖微球,构建O-GlcNAc高表达与低表达以及反向高表达实验组并继续孵育24h,茜素红/阿利新蓝骨组织染色观察胚胎骨、软骨发生的变化,免疫组化染色法检测具有间叶组织表达特异性的fibronectin和上皮表达特异性的p63的表达状态。结果:高表达O-GlcNAc实验组OGT和STZ中,发现胚胎上唇出现了骨缺损,且P63、fibronectin持续高表达,上皮、间叶组织保持连续性,凋亡出现延迟,上皮间叶转化出现障碍。正常对照测与低表达OGA组在上皮融合过程中P63表达减弱,fibronectin在上皮中出现表达,上皮层出现断裂,表明上皮间叶转化的正常进行。结论:O-GlcNAc过表达对于上唇形成过程中上皮间叶转化具有负面作用,将影响上唇的正常发育并可能导致唇裂的发生。 展开更多
关键词 氧联乙酰葡萄糖胺 上皮间叶转化 上唇发育
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O-GlcNAc对冷应激下小鼠骨骼肌卫星细胞Caspase-3的影响 被引量:1
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作者 张雪 SHI Hao +5 位作者 李士泽 李云龙 刘鹏 甄莉 李鹏 杨玉英 《黑龙江八一农垦大学学报》 2017年第2期25-28,共4页
O-连接的N-乙酰葡糖胺糖基化修饰(O-GlcNAcylation)是一种存在于蛋白质Ser/Thr上的翻译后修饰,主要是由OGlcNAc催化转移酶(简称OGT)和O-GlcNAc水解酶(简称OGA)调控的动态过程。其过程与磷酸化相似,在多种细胞过程中扮演着重要的信号转... O-连接的N-乙酰葡糖胺糖基化修饰(O-GlcNAcylation)是一种存在于蛋白质Ser/Thr上的翻译后修饰,主要是由OGlcNAc催化转移酶(简称OGT)和O-GlcNAc水解酶(简称OGA)调控的动态过程。其过程与磷酸化相似,在多种细胞过程中扮演着重要的信号转导通路角色,并与神经退行性疾病、Ⅱ型糖尿病、癌症等许多疾病的发病机理密切相关。主要是在低温应激下,通过抑制剂来调控OGT和OGA,间接调控小鼠骨骼肌卫星细胞内O-GlcNAc的含量,来探讨O-GlcNAc对骨骼肌卫星细胞凋亡的作用。实验分为正常对照组、OGA高表达组、OGT高表达组,经过常温(37℃)和亚低温(32℃)不同条件的处理,采用ELISA方法检测Casp-3指标的变化。结果显示:冷应激处理后,人为调控骨骼肌卫星细胞内O-GlcNAc的含量后,所检测的指标有明显差异(P<0.05)。结果说明:在低温应激条件下,O-GlcNAc降低会促进细胞凋亡,从而降低了小鼠骨骼肌卫星细胞的抗应激能力,对骨骼肌卫星细胞造成了一定的影响。 展开更多
关键词 冷应激 O-glcnac 骨骼肌卫星细胞
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葡糖酰胺(O-GlcNAc)修饰:细胞内糖基化的前世今生 被引量:2
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作者 李静 谭忠平 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期987-1001,共15页
糖基化是一种古老的蛋白质翻译后修饰,常见于细胞外的糖被结构和细胞内部的内质网和高尔基体内。近年来,一种细胞内的糖基化修饰逐渐被大家所认识,这就是氧连接的N-乙酰葡糖胺(O-linkedβ-N-acetylglucosamine,O-GlcNAc)。它是唯一发生... 糖基化是一种古老的蛋白质翻译后修饰,常见于细胞外的糖被结构和细胞内部的内质网和高尔基体内。近年来,一种细胞内的糖基化修饰逐渐被大家所认识,这就是氧连接的N-乙酰葡糖胺(O-linkedβ-N-acetylglucosamine,O-GlcNAc)。它是唯一发生在细胞内的参与信号转导的糖修饰,一般发生于细胞质和细胞核中。自从20世纪80年代发现O-GlcNAc以来,生物学家和化学家一直在研究它修饰的位点和行使的生物学功能。O-GlcNAc修饰发生在丝氨酸和苏氨酸上,因此可以与磷酸化之间形成阴阳关系并参与信号转导过程。但由于其低丰度易水解的特点导致难以鉴定位点,又使研究人员难以见其真容。本文将回顾O-GlcNAc修饰的发现历史,介绍近年来发展的化学生物学手段对其位点的鉴定,并着重阐释该修饰在细胞周期以及表观遗传等生物过程中的功能。随着学科交叉及质谱技术的发展,古老而弥新的糖基化修饰将绽放出新的花蕾。 展开更多
关键词 氧连接的N-乙酰葡糖胺 糖基化 化学生物学 细胞周期 表观遗传
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重组O-GLcNAc糖基转移酶在昆虫细胞中的表达和纯化 被引量:1
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作者 钱慰 刘飞 +1 位作者 龚成新 金淑仪 《南通医学院学报》 2003年第1期16-19,共4页
蛋白质的 O- Glc NAc糖基化修饰是一种细胞核蛋白与细胞浆蛋白的蛋白质翻译后修饰。不同于膜蛋白和分泌蛋白的糖基化修饰 ,与蛋白质磷酸化修饰相似。催化蛋白质 O- Glc NAc糖基转移酶 ( OGT)已被克隆。用Hi5昆虫细胞系统表达并纯化了具... 蛋白质的 O- Glc NAc糖基化修饰是一种细胞核蛋白与细胞浆蛋白的蛋白质翻译后修饰。不同于膜蛋白和分泌蛋白的糖基化修饰 ,与蛋白质磷酸化修饰相似。催化蛋白质 O- Glc NAc糖基转移酶 ( OGT)已被克隆。用Hi5昆虫细胞系统表达并纯化了具有活性的重组 OGT。在 Hi5昆虫细胞中表达的鼠肝 OGT带有一 His 6标记片段。经镍离子螯合柱纯化后 ,其比活性达到 0 .88nmol· min- 1·m g- 1 OGT。因此本研究为进一步研究蛋白 O- Glc 展开更多
关键词 蛋白质 O-位N-乙酰葡萄糖胺糖基化修饰 O-位N-乙酰葡萄糖胺糖基转移酶
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O连接N-乙酰葡萄糖胺糖基化修饰在神经退行性疾病中的研究进展
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作者 余婷 刘海军 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期370-376,共7页
O连接N-乙酰葡萄糖胺(O-GlcNAc)糖基化是一种由O-键连接的乙酰氨基葡萄糖和胞内蛋白上的丝氨酸/苏氨酸残基形成的蛋白质翻译后修饰。O-GlcNAc糖基化修饰在脑内普遍存在,其与转录、翻译和蛋白稳态等关系密切。O-GlcNAc糖基化修饰参与多... O连接N-乙酰葡萄糖胺(O-GlcNAc)糖基化是一种由O-键连接的乙酰氨基葡萄糖和胞内蛋白上的丝氨酸/苏氨酸残基形成的蛋白质翻译后修饰。O-GlcNAc糖基化修饰在脑内普遍存在,其与转录、翻译和蛋白稳态等关系密切。O-GlcNAc糖基化修饰参与多种神经系统变性疾病的发生发展,但其调控机制尚不清楚。现就O-GlcNAc糖基化修饰与神经系统退行性病变的关系作一综述。 展开更多
关键词 O连接N-乙酰葡萄糖胺糖基化 神经退行性变 O连接N-乙酰葡萄糖胺糖基转移酶 O连接N-乙酰葡萄糖胺糖苷酶 糖基化修饰
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Synthesis of 4-[F-18]Fluoro-4-Deoxy-N-Acetyl-1,3,6-Tri-O-Acetylglucosamine, a Potential Brain Imaging PET Agent
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作者 Murthy Akula Derek Cressy +2 位作者 Lee Collier George Kabalka Dustin Osborne 《Natural Science》 2024年第3期19-23,共5页
The synthesis of a promising brain imaging agent 4-[F-18]fluoro-4-deoxy-N-acetyl-1,3,6-tri-O-acetylglucosamine, 2, was successfully accomplished from commercially available N-acetyl glucosamine in 5 steps. The non-dec... The synthesis of a promising brain imaging agent 4-[F-18]fluoro-4-deoxy-N-acetyl-1,3,6-tri-O-acetylglucosamine, 2, was successfully accomplished from commercially available N-acetyl glucosamine in 5 steps. The non-decay corrected radiochemical yield and purity were found to be 31% ± 4% (n = 3) and >98% respectively. The total reaction time for radio labelling step was 50 min. 展开更多
关键词 n-acetylglucosamine AMYLOIDOGENESIS Lipase-Candida rugosa
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