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家蚕微孢子虫N.bombycis分离纯化方法的优化 被引量:15
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作者 周成 潘国庆 +1 位作者 万永继 周泽扬 《蚕学通讯》 2002年第1期7-9,共3页
对家蚕微孢子虫的分离纯化条件进行了探索。微孢子虫的分离 ,采用差速离心法或自然沉降法的效果均可。蔗糖平衡密度离心法的较优条件为 5 0 %~ 6 0 %的蔗糖连续梯度、2 30 0 0rpm离心 30min ,而Percoll法的最佳条件为 2 5 %、5 0 %、7... 对家蚕微孢子虫的分离纯化条件进行了探索。微孢子虫的分离 ,采用差速离心法或自然沉降法的效果均可。蔗糖平衡密度离心法的较优条件为 5 0 %~ 6 0 %的蔗糖连续梯度、2 30 0 0rpm离心 30min ,而Percoll法的最佳条件为 2 5 %、5 0 %、75 %和 10 0 %的Percoll不连续梯度、175 0 0rpm离心 2 0min ;两种纯化方法相比较 。 展开更多
关键词 优化 家蚕 微孢子虫 分离 纯化 微粒子病
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棉铃虫N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的分离纯化及酶学性质 被引量:20
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作者 黄小红 陈清西 +2 位作者 尤民生 王君 关雄 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期498-502,共5页
以棉铃虫Helicoverpa armigera蛹为材料,通过硫酸铵沉淀分级分离、Sephadex G-200分子筛柱层析和DEAE-32离子交换柱层析纯化,获得聚丙烯酰胺凝胶电泳纯的N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶酶制剂.纯酶的比活力为2 678.79 U/mg.以对硝基苯-N-乙... 以棉铃虫Helicoverpa armigera蛹为材料,通过硫酸铵沉淀分级分离、Sephadex G-200分子筛柱层析和DEAE-32离子交换柱层析纯化,获得聚丙烯酰胺凝胶电泳纯的N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶酶制剂.纯酶的比活力为2 678.79 U/mg.以对硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(pNP-β-D-GlcNAc)为底物,研究酶催化底物水解的反应动力学.结果表明:酶的最适pH为5.63,最适温度为55℃.该酶在pH 4~8区域较稳定,而在pH>8时能迅速失去活力;在50℃以下处理30 min,酶活力仍保持稳定,高于50℃,酶很快失去活力.酶促反应动力学符合米氏双曲线方程,测得米氏常数Km为0.16 mmol/L,最大反应速度Vm为10.73 μmol·L-1·min-1.酶催化pNP-β-D-GlcNAc反应的活化能为66.24 kJ/mol. 展开更多
关键词 棉铃虫 n.乙酰.p.D.氨基葡萄糖苷酶 分离纯化 动力学 稳定性
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中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的分离纯化及性质的初步研究 被引量:12
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作者 黄小红 陈宏惠 黄一帆 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期563-569,共7页
本研究以中华绒螯蟹内脏为材料,经过硫酸铵沉淀分级分离、两次DEAE-32离子交换柱层析和Sephadex G-100分子筛柱层析纯化,获得比活力为4490.79U/mg、纯化倍数为28.07倍的聚丙烯酰胺凝胶电泳纯的N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶制剂。酶分子... 本研究以中华绒螯蟹内脏为材料,经过硫酸铵沉淀分级分离、两次DEAE-32离子交换柱层析和Sephadex G-100分子筛柱层析纯化,获得比活力为4490.79U/mg、纯化倍数为28.07倍的聚丙烯酰胺凝胶电泳纯的N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶制剂。酶分子中各亚基的分子量分别为121.219、8.63和73.48 kD,等电点为4.5。以对-硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖为底物,进行酶催化底物水解的反应动力学研究,结果表明:酶催化底物反应的最适pH为5.5,最适温度为45℃。该酶在pH4.9—9.3区域或40℃以下处理30min,酶活力保持稳定。酶促反应动力学符合米氏双曲线方程,测得米氏常数Km为0.357 mmol/L,最大反应速度Vm为10.41μmol/L.min。酶催化pNP-β-D-GlcNAc反应的活化能为76.50kJ/mol。金属离子对酶的效应试验表明:Mg2+、Ca2+和Ba2+对酶活力没有影响。Na+对酶有激活作用,Li+、K+、Zn2+、Hg2+、Pb2+、Cu2+和Al3+对酶活力表现出不同程度的抑制作用。 展开更多
关键词 中华绒螯蟹 n-乙酰-Β-D-氨基葡萄糖苷酶 分离纯化 动力学 稳定性
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蝾螺(Turbo cornutus Solander)N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的分离纯化及性质的初步研究 被引量:5
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作者 林建城 陈清西 +1 位作者 李少伟 赵红 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期697-701,共5页
以蝾螺内脏为材料,通过硫酸铵沉淀分级分离、SephadexG 200分子筛柱层析和两次DEAE SephadexA 50离子交换柱层析纯化,获得聚丙烯酰胺凝胶电泳单一纯的N 乙酰 β D 氨基葡萄糖苷酶酶制剂.纯酶的比活力为1448U·mg-1.酶的紫外特征吸... 以蝾螺内脏为材料,通过硫酸铵沉淀分级分离、SephadexG 200分子筛柱层析和两次DEAE SephadexA 50离子交换柱层析纯化,获得聚丙烯酰胺凝胶电泳单一纯的N 乙酰 β D 氨基葡萄糖苷酶酶制剂.纯酶的比活力为1448U·mg-1.酶的紫外特征吸收峰在275nm处,内源荧光发射峰在340nm处.以对 硝基苯 N 乙酰 β D 氨基葡萄糖为底物,研究酶催化底物水解的反应动力学,结果表明:酶的最适pH为4.5,最适温度为45℃.该酶在pH3.5~6.0区域较稳定,而在pH>7能很快失活;在40℃以下处理30min,酶活力保持稳定,高于40℃,酶稳定性较差,很快失活.酶促反应动力学符合米氏双曲线方程,测得米氏常数Km为3.13mmol·L-1,最大反应速度Vm为17.68μmol·L-1·min-1. 展开更多
关键词 n-乙酰-Β-D-氨基葡萄糖苷酶 初步研究 离子交换柱层析 特征吸收峰 分离纯化 内脏 底物 米氏常数 内源荧光 最适PH
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中国明对虾体壁N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的分离纯化及酶学性质 被引量:3
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作者 林建城 林大河 林秀春 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期52-58,共7页
为了探讨对虾 N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(EC3.2.1.52, NAGase)的分离纯化及其酶学性质,作者以中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)体壁为材料,通过硫酸铵沉淀分级分离、SephadexG-100柱层析和 DEAE-32离子交换柱层析纯化,获得... 为了探讨对虾 N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(EC3.2.1.52, NAGase)的分离纯化及其酶学性质,作者以中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)体壁为材料,通过硫酸铵沉淀分级分离、SephadexG-100柱层析和 DEAE-32离子交换柱层析纯化,获得聚丙烯酰胺凝胶电泳纯的 N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶酶制剂,纯化酶比活力为3938.56U/mg。通过SDS-PAGE凝胶电泳,测得该酶亚基分子量为48.88 kD。酶的最适pH为6.0,最适温度为45℃;该酶在pH 6.0~9.0区域较稳定,温度稳定性范围是20~35℃,45℃下处理1 h酶活力丧失65.04%。酶水解对硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷的Km为0.229 mmol/L, Vmax为5.00μmol/(L?min)。进一步研究金属离子对酶活力的影响,结果表明: Li+、Na+和Ba2+对酶没有明显影响, Mg2+、Ca2+、Mn2+、Co2+、Fe3+和Al3+对酶均有不同程度的激活作用, Cu2+、Zn2+和Pb2+对酶呈抑制作用,1.0 mmol/L Hg2+对酶呈激活作用,而10 mmol/L Hg2+使酶活力降低42.37%。 展开更多
关键词 中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis) 体壁 n-乙酰-Β-D-氨基葡萄糖苷酶 分离纯化 酶学性质
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一种具有胰蛋白酶抑制活性的半夏蛋白的纯化与N端氨基酸序列分析 被引量:1
6
作者 王厚伟 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1320-1323,共4页
目的分离纯化具有胰蛋白酶抑制活性的半夏蛋白,分析其对胰蛋白酶的抑制活性、抑制机制与N端氨基酸序列。方法采用以胰蛋白酶为配体的亲和色谱和Sephadex G-50凝胶过滤法,从半夏蛋白粗提液的40%(NH_4)_2SO_4沉淀中分离纯化活性半夏蛋白;... 目的分离纯化具有胰蛋白酶抑制活性的半夏蛋白,分析其对胰蛋白酶的抑制活性、抑制机制与N端氨基酸序列。方法采用以胰蛋白酶为配体的亲和色谱和Sephadex G-50凝胶过滤法,从半夏蛋白粗提液的40%(NH_4)_2SO_4沉淀中分离纯化活性半夏蛋白;采用12%SDS-PAGE鉴定其纯度,并估算其相对分子质量;采用Ed-man降解法分析其N-端氨基酸序列。结果纯化的活性半夏蛋白经SDS-PAGE检测呈现单一条带,相对分子质量为1.4×10~4;比活力为1059.012U/mg,活力回收率为24.40%;对胰蛋白酶的质量抑制比为1:4.72,抑制常数(Ki)为7.17×10~(-6)mol/L;其N端前6个氨基酸残基顺序为DPVVDG。结论该活性半夏蛋白是一种丝氨酸蛋白酶抑制刺,为胰蛋白酶的竞争性抑制剂。 展开更多
关键词 半夏蛋白 胰蛋白酶抑制剂 分离纯化 n端氨基酸序列
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莆田黑猪精液中NAGase酶学特性研究 被引量:1
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作者 赖育河 林心宇 黄小红 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第11期160-165,共6页
试验对以莆田黑猪精液为材料分离纯化得到的N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)进行了理化特性研究。经硫酸铵分级沉淀、DEAE Sepharose Fast Flow离子交换层析和Sephadex G100分子筛层析获得PAGE电泳纯化的NAGase酶制剂。以对硝基苯... 试验对以莆田黑猪精液为材料分离纯化得到的N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)进行了理化特性研究。经硫酸铵分级沉淀、DEAE Sepharose Fast Flow离子交换层析和Sephadex G100分子筛层析获得PAGE电泳纯化的NAGase酶制剂。以对硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(pNP-GlcNAc)为底物,研究酶催化水解的相关性质。分离纯化获得的酶制剂比活力为1561.42U/mg,分子质量为58ku,只有1个亚基,等电点pI为9.13。酶的最适pH为5.6,最适温度为45℃,酶在pH3.6~7.8之间稳定,当pH〉8时迅速失活,在50℃以下处理30min酶活力保存稳定,高于50℃时,酶活力迅速降低。酶促反应动力学符合米氏双曲线方程,米氏常数Km为0.82mmol/L,最大反应速度Vm为39.23μmol/(L·min)。催化pNP-GlcNAc反应的活化能为27.30kJ/mol。金属离子中Na^+、K^+、Mg^2+、Ca^2+对酶活力无明显影响,Zn^2+、Cu^2+、Pb^2+对酶有抑制作用。 展开更多
关键词 莆田黑猪精液 n-乙酰-Β-D-氨基葡萄糖苷酶 分离纯化 动力学 金属离子
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Design a pediatric isolation bed and characterization of its purification efficacy in ambient air 被引量:1
8
作者 Tiantian Liu Xi Li +2 位作者 Mengyuan Xu Yubing Guo Rong Zhou 《Biosafety and Health》 CSCD 2021年第3期172-178,共7页
Patients with acute infectious respiratory illness may emit bio‐aerosols containing pathogens to infect susceptible hosts,including other patients and healthcare workers.This study aimed to design the pediatric isola... Patients with acute infectious respiratory illness may emit bio‐aerosols containing pathogens to infect susceptible hosts,including other patients and healthcare workers.This study aimed to design the pediatric isolation(PI)bed and evaluate its purification effect on aerosols and microorganisms in the air in experiment rooms and verify the general wards'purification efficiency.The PI bed is connected to a purification device that surrounds the child's head to prevent contaminants'spread into the room.We test the purification effect of the PI bed in the experiment room and verified the purification effect of the PI bed in the hospital.The results showed that PI beds in the demonstration ward presented purifying effects on both smoke particulates and microorganisms like Staphylococcus albus(S.albus)and H1N1 virus.The Aerosol in the room in the hospital was then detected to validity the purification rate.Therefore,Isolation beds could be used in hospitals to reduce the risk of nosocomial infection to protect the health of doctors,patients,and visitors. 展开更多
关键词 Pediatric isolation purification effect PARTICULATE AEROSOL Bacteria H1n1 viruses
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麻疯树核糖体失活蛋白的分离纯化和作用机制研究 被引量:52
9
作者 林娟 颜钫 +1 位作者 唐琳 陈放 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2002年第11期36-40,共5页
从麻疯树种子中分离纯化出一种核糖体失活蛋白 ,用SDS PAGE测定其相对分子量为 2 8 2kD ,IEF PAGE计算其等点电为 8 5 4左右。体外抑制实验表明 ,麻疯树核糖体失活蛋白对兔网织红细胞裂解液的蛋白质生物合成有较强的抑制活性。当麻疯树... 从麻疯树种子中分离纯化出一种核糖体失活蛋白 ,用SDS PAGE测定其相对分子量为 2 8 2kD ,IEF PAGE计算其等点电为 8 5 4左右。体外抑制实验表明 ,麻疯树核糖体失活蛋白对兔网织红细胞裂解液的蛋白质生物合成有较强的抑制活性。当麻疯树核糖体失活蛋白作用于大鼠肝核糖体经苯胺处理后 ,在聚丙烯酰胺的尿素变性胶电泳图上能观察到 4 5 0bp左右的特征性核酸条带 ,证明麻疯树核糖体失活蛋白是一种RNAN 糖苷酶 ,从而首次阐明了麻疯树核糖体失活蛋白失活核糖体的分子机制。 展开更多
关键词 作用机制 麻疯树 核糖体失活蛋白 分离纯化 RnA n-糖苷酶 相对分子量
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苦瓜子蛋白的分离纯化及其性质研究 被引量:18
10
作者 叶国杰 钱瑞卿 +3 位作者 卢保元 顾梓伟 金善炜 汪猷 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1998年第11期1135-1144,共10页
从苦瓜种子的粗提物苦瓜子蛋白丙酮分级沉淀干粉中,用CM-Sephadex C-50和SephadexG-75分离得到了两个核糖体失活蛋白,α-苦瓜子蛋白(α-momorcharin,α-MMC)和β-苦瓜子蛋白(β-momorcharin,β-MMC),其等电点分别为9.10(α-MMC),9.32(β... 从苦瓜种子的粗提物苦瓜子蛋白丙酮分级沉淀干粉中,用CM-Sephadex C-50和SephadexG-75分离得到了两个核糖体失活蛋白,α-苦瓜子蛋白(α-momorcharin,α-MMC)和β-苦瓜子蛋白(β-momorcharin,β-MMC),其等电点分别为9.10(α-MMC),9.32(β-MMC).用ESI-MS和MALDI-TOF-MS测定它们的分子量,分别为28625(α-MMC),29076(β-MMC)(+Na,29099);,28795(α-MMC),29074.7(β-MMC).它们都是糖蛋白.其生物活性的分析测定表明,都属于RNA N-糖苷酶.本文重点对β-苦瓜子蛋白的分离纯化及其性质进行详细报道,并对其N-端部分的氨基酸顺序进行了测定. 展开更多
关键词 苦瓜子蛋白 核糖体失活蛋白 糖苷酶 纯化 性质
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中国软珊瑚化学成分的研究(二十)——软珊瑚中的神经酸胺 被引量:24
11
作者 苏镜娱 李艳 余小强 《中山大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1989年第2期33-38,共6页
从中国南海采集的幼纯短指软珊瑚、螺旋短指软珊瑚中首次分离到一个新的神经酰胺Sinumeramide(1),利用波谱方法推导其结构;同时还通过臭氧化反应以及氘硼化反应在双键上引入氘原子后的质谱分析确定其双键的位置;应用核磁共振谱及构象分... 从中国南海采集的幼纯短指软珊瑚、螺旋短指软珊瑚中首次分离到一个新的神经酰胺Sinumeramide(1),利用波谱方法推导其结构;同时还通过臭氧化反应以及氘硼化反应在双键上引入氘原子后的质谱分析确定其双键的位置;应用核磁共振谱及构象分析确定1的赤型构型。此外,从短指软珊瑚(未定种)中首次分离得N-乙酰二氢鞘氨醇。 展开更多
关键词 软珊瑚 神经酰胺 n-酰基鞘氨醇
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石菖蒲正丁醇部位化学成分研究 被引量:8
12
作者 廖矛川 陈凤 +1 位作者 张雨馨 姚远 《中南民族大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2016年第1期64-66,74,共4页
采用现代分离技术对石菖蒲正丁醇部位的化学成分进行分离纯化,并运用波谱技术鉴定其结构.结果表明:从该植物的正丁醇部位分离得到6个化合物,分别为苄醇-β-D-木糖-(1→6)-β-D-葡萄糖苷(1)、5-羟甲基糠醛(2)、二聚5-羟甲基糠醛(3)、石... 采用现代分离技术对石菖蒲正丁醇部位的化学成分进行分离纯化,并运用波谱技术鉴定其结构.结果表明:从该植物的正丁醇部位分离得到6个化合物,分别为苄醇-β-D-木糖-(1→6)-β-D-葡萄糖苷(1)、5-羟甲基糠醛(2)、二聚5-羟甲基糠醛(3)、石菖蒲醇-12-β-D-葡萄糖苷(4)、赤式-1',2'-二羟基细辛醚(5)、苏式-1',2'-二羟基细辛醚(6),其中化合物1和化合物3为首次从该属植物中分得. 展开更多
关键词 石菖蒲 正丁醇部位 化学成分 分离纯化
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油茶炭疽病拮抗放线菌CF17发酵液的抑菌活性及活性成分的分离纯化 被引量:3
13
作者 邓雷 刘君昂 +2 位作者 周国英 张娜 何苑暤 《福建农林大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2017年第1期15-20,共6页
采用十字交叉法测定CF17发酵液的抑菌谱,并通过离心、旋转蒸发浓缩、丙酮沉淀、固相萃取以及半制备高效液相色谱法对抑菌物质进行分离纯化和鉴定.结果表明,CF17发酵液对油茶炭疽病、油茶叶枯病、油茶软腐病、杉木炭疽病、核桃壳梭孢、... 采用十字交叉法测定CF17发酵液的抑菌谱,并通过离心、旋转蒸发浓缩、丙酮沉淀、固相萃取以及半制备高效液相色谱法对抑菌物质进行分离纯化和鉴定.结果表明,CF17发酵液对油茶炭疽病、油茶叶枯病、油茶软腐病、杉木炭疽病、核桃壳梭孢、降香黄檀炭疽病、檀香炭疽病等的病原菌均有抑菌效果.50%丙酮分离纯化效果优于乙醇沉淀法与乙酸乙酯沉淀法;在固相萃取中,活性物质主要集中在60%乙腈梯度洗柱样品中,最后经HPLC分离收集到一个有明显抑菌圈的样品.经质谱鉴定抑菌成分为Tetramycin A. 展开更多
关键词 油茶炭疽病菌 拮抗放线菌 抑菌活性 分离纯化
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11例猪胰腺切取的配合
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作者 梁月娥 汤达承 王翀 《医学信息(下旬刊)》 2011年第5期47-47,共1页
目的:探索大规模猪胰岛细胞分离与纯化的动物实验研究,获取高纯度的胰岛细胞的猪胰腺.方法:通过配合11例成猪低温原位灌注,猪胰脾十二指肠切取术,获取成年猪胰腺.结果:热缺血时间0~3min,所获得胰腺外观胰腺,平均重量(90.5±8.3... 目的:探索大规模猪胰岛细胞分离与纯化的动物实验研究,获取高纯度的胰岛细胞的猪胰腺.方法:通过配合11例成猪低温原位灌注,猪胰脾十二指肠切取术,获取成年猪胰腺.结果:热缺血时间0~3min,所获得胰腺外观胰腺,平均重量(90.5±8.3)g,外观完整.结论:成功的猪胰岛细胞分离纯化的实验研究表明充分的术前准备和术中的原位低温灌注,缩短细胞热缺血时间,对提高猪胰岛细胞分离的数量和纯化的浓度至关重要. 展开更多
关键词 胰岛细胞 分离 纯化 灌注 护理
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一种连续分离纯化酪蛋白磷酸肽的新工艺 被引量:3
15
作者 徐桂敏 杨瑞金 +3 位作者 张文斌 赵伟 华霄 蒋孝燕 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第8期24-28,共5页
为建立一条制备酪蛋白磷酸肽(CPPs)的新工艺路线。采用酶解与超滤耦联技术初步分离制备酪蛋白生物活性肽,然后通过树脂层析将酪蛋白生物活性肽中的酪蛋白磷酸肽和非磷酸肽分离。选用碱性蛋白酶Alcalase在切向流酶膜反应器中(膜截留分子... 为建立一条制备酪蛋白磷酸肽(CPPs)的新工艺路线。采用酶解与超滤耦联技术初步分离制备酪蛋白生物活性肽,然后通过树脂层析将酪蛋白生物活性肽中的酪蛋白磷酸肽和非磷酸肽分离。选用碱性蛋白酶Alcalase在切向流酶膜反应器中(膜截留分子质量10kD)连续酶解3h、酶解温度50℃、pH8.5。重点研究大孔弱碱性阴离子交换树脂D303对酪蛋白生物活性肽的分离纯化工艺,并采用单因素试验优化CPPs的分离纯化工艺参数,确定D303树脂的较佳动态吸附解吸条件:上样流速1BV/h、上样量100mL、洗脱温度45℃、洗脱酸浓度0.15mol/L HCl,获得磷酸肽N/P比为7.21,P洗脱得率为93.11%。 展开更多
关键词 酶膜反应器 层析分离 酪蛋白磷酸肽 n/P 纯化
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豚鼠气单胞菌CB101中几丁质酶的纯化、鉴定及其基因克隆 被引量:4
16
作者 庄群川 王风平 《台湾海峡》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期362-369,共8页
豚鼠气单胞菌CB101在胶体几丁质诱导下产生多种分子量不同的几丁质酶,其中分子量最大的一个几丁质酶Chi1(约91.5kDa)的编码基因已经被克隆.本文报道从CB101发酵液经硫酸铵盐析,DEAE-纤维素柱层析和MonoQ离子交换柱层析,分离纯化出其中... 豚鼠气单胞菌CB101在胶体几丁质诱导下产生多种分子量不同的几丁质酶,其中分子量最大的一个几丁质酶Chi1(约91.5kDa)的编码基因已经被克隆.本文报道从CB101发酵液经硫酸铵盐析,DEAE-纤维素柱层析和MonoQ离子交换柱层析,分离纯化出其中的一个分子量约为60KDa的几丁质酶.N端测序的结果表明该酶是Chi1剪缺掉N末端信号肽部分、C末端A区和两个几丁结合区的产物.构建了CB101基因组的cosm id文库,从中筛选到9个产几丁质酶的克隆子,克隆子分析表明它们包含的几丁质酶基因都是chi1.蛋白分离、纯化和基因克隆的实验都暗示CB101的几丁质酶系统只包含一个几丁质酶基因. 展开更多
关键词 几丁质酶 离子交换层析 分离纯化 n端测序
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红凉伞根三萜类化学成分分离与鉴定 被引量:5
17
作者 叶洪波 周永强 +4 位作者 廖张蓉 殷鑫 魏鑫 雷传文 周英 《中药材》 CAS 北大核心 2022年第2期346-350,共5页
目的:研究红凉伞Ardisia crenata Sims var.bicolor(Walker)根正丁醇部位的三萜类化学成分。方法:正丁醇萃取部位分别采用硅胶柱色谱、ODS柱色谱及制备HPLC等多种色谱方法进行分离,结合~1H-NMR,C-NMR,MS等波谱技术和相关文献数据对化合... 目的:研究红凉伞Ardisia crenata Sims var.bicolor(Walker)根正丁醇部位的三萜类化学成分。方法:正丁醇萃取部位分别采用硅胶柱色谱、ODS柱色谱及制备HPLC等多种色谱方法进行分离,结合~1H-NMR,C-NMR,MS等波谱技术和相关文献数据对化合物结构进行解析。结果:从红凉伞正丁醇萃取物中分离纯化得到9个化合物,分别鉴定为:primulanin(1)、百两金皂苷A(2)、百两金皂苷B(3)、朱砂根皂苷A(4)、朱砂根皂苷C(5)、朱砂根皂苷D(6)、朱砂根皂苷G(7)、朱砂根皂苷K(8)、foegraecumoside D(9)。结论:分离得到的化合物均为五环三萜齐墩果烷衍生物,主要分为12-齐墩果烯型和13β,28-环氧-齐墩果烷型。其中,化合物2、6~9为首次从该植物中分离得到,化合物9为首次从紫金牛属植物中发现。 展开更多
关键词 红凉伞 正丁醇部位 分离纯化 结构鉴定 三萜类化学成分
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桑氏链霉菌KJ07抗菌蛋白的分离纯化及部分特性 被引量:6
18
作者 彭艳 朱天辉 +1 位作者 张博阳 龙旭梅 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1980-1987,共8页
【目的】桑氏链霉菌(Streptomyces sampsonii)KJ07对无性阶段的杨树紫纹羽病菌(Rhizoctonia violacea)有较强的拮抗作用。为研究其抗菌物质,对其发酵液中主要抗菌物质进行分离纯化并明确其部分性质。【方法】采用硫酸铵分级沉淀、DEAE S... 【目的】桑氏链霉菌(Streptomyces sampsonii)KJ07对无性阶段的杨树紫纹羽病菌(Rhizoctonia violacea)有较强的拮抗作用。为研究其抗菌物质,对其发酵液中主要抗菌物质进行分离纯化并明确其部分性质。【方法】采用硫酸铵分级沉淀、DEAE Sepharose Fast Flow离子交换层析、Sephadex G-50分子筛层析等方法进行分离纯化。【结果】获得单一抗菌活性蛋白,分子量约为28.4 k D。该抗菌蛋白抑菌谱较广,能使R.violacea菌丝畸形,菌丝隔膜不明显,细胞壁及胞内原生质开始降解,并产生黑色物质。稳定性试验显示抗菌蛋白最适温度为25°C,最佳p H为6.0,当温度≥60°C时,抑菌活性下降大于20%,当p H<4.0或≥8.0时,抑菌活性下降大于12%。其活性还受金属阳离子影响,但对蛋白酶K不敏感。利用自动Edman降解法测得抗菌蛋白N端10个氨基酸序列,但通过NCBI BLAST程序未检索到与其相似性较高的已知抗菌蛋白。【结论】推测该抗菌蛋白可能是一种新的蛋白质。 展开更多
关键词 桑氏链霉菌 抗菌蛋白 分离纯化 n端序列
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绛红褐链霉菌YSSPG3的鉴定及其抗菌蛋白纯化 被引量:6
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作者 张丽娜 朱天辉 李芳莲 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期242-251,共10页
从四川碧峰峡撑×绿杂交竹健康植株根际分离到对杂交竹梢枯病菌(Arthrinium phaeospermum)有强拮抗作用的放线菌菌株YSSPG3,该菌株的无菌发酵液对多种真菌和细菌具有抗菌活性。通过对菌株YSSPG3的形态特征、培养特性、生理生化特性... 从四川碧峰峡撑×绿杂交竹健康植株根际分离到对杂交竹梢枯病菌(Arthrinium phaeospermum)有强拮抗作用的放线菌菌株YSSPG3,该菌株的无菌发酵液对多种真菌和细菌具有抗菌活性。通过对菌株YSSPG3的形态特征、培养特性、生理生化特性、细胞壁组分与16S rDNA序列分析,确定为绛红褐链霉菌(Streptomyces purpeofuscus)。采用硫酸铵沉淀和柱层析法对发酵液中起主要抑菌作用的抗菌物质进行分离纯化,获得单一的抗菌蛋白AMP,分子量为5 075.619 Da,等电点为6.77。抗菌蛋白在温度≥60℃和pH<7,以及紫外线照射时间≥12 h的环境下抑菌活性均明显下降,但受蛋白酶K、胰蛋白酶和氯仿影响不大,无几丁质酶、葡聚糖酶等水解酶活性。利用Edman降解法测定抗菌蛋白N末端25个氨基酸序列,与来自Streptomyces tendae Tü901的chitin-binding protein AFP1的同源性较高,为81.00%。 展开更多
关键词 绛红褐链霉菌 杂交竹梢枯病菌 抗菌蛋白 分离纯化 n端序列
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