痘苗病毒天坛株N1L基因表达调控序列的克隆与特性分析

本研究以痘苗病毒天坛株(Vaccinia Virus Tian Tan Strain,VTT)为对象,旨在明确N1L基因的表达调控序列。我们克隆了N1L起始密码子ATG上游不同长度的调控序列片段,构建了表达载体,并利用报告基因萤火虫荧光素酶(Firefly luciferase,Fluc)的表达来确定N1L表达调控序列区域。通过PROMO在线预测网站,预测了与调控序列结合的转录因子。结果显示,VTT中N1L基因的表达受到上游调控序列的调控,其中以-404bp起始的片段启动的Fluc表达量最高。PROMO预测表明该区域存在多个转录因子结合位点。本研究为痘苗病毒基因表达特点的研究提供了实验依据,并为N1L基因功能及机制研究奠定了基础。

程序性细胞死亡1-配体1在不同免疫组织化学染色方法的一致性比较

目的:比较程序性细胞死亡1-配体1(programmed cell death 1-ligand 1,PD-L1,克隆号E1L3N、22C3、SP263)在不同免疫组织化学染色方法的一致性。方法:第一步,筛选最优流程:采用PD-L1(克隆号E1L3N)抗体分别按推荐流程、自建流程①、自建流程②与自建流程③,对5例扁桃体组织完成平行免疫组织化学染色,专科病理医生对全部切片进行质量评分(0~6分),筛选出评分最高的流程;第二步,用最优流程与两种标准流程的评分结果进行一致性比较:选取近两年北京大学第一医院病理最终诊断为非小细胞肺癌的标本共32例,用筛选出的自建流程①、与SP263标准流程及22C3标准流程对32病例各自进行平行染色,全部染色片由专科病理医师行阳性肿瘤细胞比例评分(tumor proportion score,TPS)。评分结果按<1%,≥1%至<10%,≥10%至<50%,≥50%分组,分析PD-L1检测抗体克隆号E1L3N与22C3、SP263染色结果的一致性。结果:扁桃体染色切片质量评分(0~6分)如下:推荐流程为5、5、5、5、5分;自建流程①为5、6、6、5、6分;自建流程②为4、4、4、4、4分;自建流程③为3、3、3、3、3分。自建流程①的结果总体评分最高,选用自建流程①完成32例非小细胞肺癌病例的免疫组组织化学染色,TPS评分为:自建流程①,<1%共6例,≥1%至<10%共5例,≥10%至<50%共10例,≥50%共11例;22C3标准流程,<1%共5例,≥1%至<10%共3例,≥10%至<50%共13例,≥50%共11例;SP263标准流程,<1%共7例,≥1%至<10%共4例,≥10%至<50%共11例,≥50%共10例。一致性检验结果为:自建流程①和22C3标准流程,κ值为0.736(P<0.001),一致性好;自建流程①和SP263标准流程,κ值为0.914(P<0.001),一致性极好。结论:采用PD-L1(克隆号E1L3N)抗体,在罗氏Ventana Benchmark GX平台,通过自建染色流程①完成,可获得良好质量的染色切片;在非小细胞肺癌病例的检测中,自建染色流程①与22C3标准流程和SP263标准流程一致性好。

LIX65N的界面特性和萃取铜的表面动力学

诸如Szyszkowski、Temkin、Frumkin、多项式和仿样函数那样各不相同的吸附等温线可以适用于LIX65N的实验界面张力等温线。在含溶剂化稀释剂的体系中,按照不同吸附等温线计算得到的各种表面过剩等温线是一致的。然而,在含非溶剂化稀释剂的体系中,按照Gibbs等温线和多项式计算得到的表面过剩等温线都有明显的最大值。显示最大值的那些函数可以用来进一步描述在有机相中的缔合度(3—1.5)。含Escaid100体系测定的吸附参数和表面过剩等温线的特性都与含甲苯体系中得到的相似。因此,基本上是脂肪族化合物的Escaid100在界面上却表现出芳香族化合物的特性。计算得到了表面过剩等温线,并将其用于预测LIX65N与铜进行界面反应的级数。形成稳定的2:1络合物的反应级数为1。吸附的1:1中间络合物与内层的羟基肟分子反应被认为是最慢的一步。预测的反应级数受羟基肟缔合作用的影响将仅是轻微的。

介绍比较对数值大小的一种策略

对于比较对数值大小的问题,利用中间变量和构造对数函数利用单调性进行比较是常用方法.但是当所给几个数在某个区间内且非常接近时.学生很难想到如何下手.在日常教学中发现,利用几个常用对数值和由不等式ln(l+x)≤x演绎变形的近似等式ln(l+n)≈1/n+Inn对对数值进行估算,过程简单,方便比较,本文结合实例进行说明.