N6-甲基腺嘌呤甲基化:中医药防治疾病的新兴靶点

N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m6A)修饰是真核细胞信使RNA(messenger RNA,mRNA)最常见的一种表观遗传修饰方式,近年来发现其在疾病的发生发展中扮演重要角色。通过国内外权威数据库检索分析,阐述了m6A修饰的概念、作用机制及其研究背景,介绍了参与调控m6A的三大类甲基化酶在m6A修饰过程中扮演的角色及其在疾病发生发展中的作用,并对近年来中药及其有效成分通过干预m6A修饰防治疾病的相关研究成果进行了系统地梳理和归纳发现,中药及其有效成分是宝贵的天然m6A调节剂,其在防治癌症、心血管疾病、生殖系统疾病及骨相关等疾病中具有较好的干预作用,但其干预m6A修饰防治疾病的研究正处于探索阶段,进一步探析其具体网络调控机制无疑是未来中医药研究的热门方向。为今后进一步探索中医药通过m6A修饰治疗疾病的潜在价值,挖掘开发可调控表观遗传的中药提供理论参考及依据。

信使RNA N6-甲基腺嘌呤甲基化修饰在血管性痴呆中的作用机制研究进展

信使RNA(mRNA)中的腺苷酸可发生甲基化转化为N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m^(6)A)进而调节mRNA的功能和代谢,这是一种高度动态可逆的表观转录组修饰方式。血管性痴呆(vascular dementia,VD)是由多种脑血管原因(如动脉粥样硬化、淀粉样改变等)引起的一种神经退行性疾病,近年来,有研究发现m^(6)A与VD的发病和进展密切相关,m^(6)A甲基化在调节神经元氧化应激、炎症反应、脑血管内皮损伤、线粒体功能障碍和突触可塑性等方面具有较大影响。文章对近几年关于m^(6)A甲基化修饰在VD中的潜在作用机制进行综述,以期为后续研究和靶向治疗VD提供新的科学思路。

N6-甲基腺嘌呤相关长链非编码RNA对卵巢癌患者预后的预测价值及免疫功能分析

目的研究N6-甲基腺嘌呤(m6A)相关长链非编码RNA(lncRNA)对卵巢癌预后的预测价值及免疫功能分析。方法通过癌症基因组图谱(TCGA)数据库获取卵巢癌患者转录组数据及临床数据,采用相关性分析筛选出与m6A共表达的lncRNA。通过Cox回归分析、最小绝对收缩和选择算子(LASSO)分析及随机森林模型确定构建预后风险评估模型的m6A相关lncRNA,利用受试者工作特征(ROC)曲线、Kaplan-Meier生存曲线、主成分分析(PCA)、Cox回归分析、列线图验证模型的预后价值及独立性。采用免疫相关性分析探究模型与免疫治疗的关系。采用实时定量聚合酶链反应验证卵巢癌细胞中m6A相关lncRNA的表达。结果共得到4个m6A相关lncRNA(AL138820.1、AC019080.1、AC007637.1、RFX3-AS1),其中,AL138820.1、AC007637.1高表达是卵巢癌患者预后的危险因素(HR﹥1),而RFX3-AS1高表达是卵巢癌患者预后的保护因素(HR﹤1)。卵巢癌患者预后影响因素分析结果显示,风险评分、年龄及肿瘤分期均为卵巢癌患者预后的独立影响因素(P﹤0.05)。构建列线图用于预测卵巢癌患者1、3、5年总生存率,该列线图的校准曲线在实际观测值和预测值之间表现出很高的准确性。实时定量逆转录聚合酶链反应结果显示,与人正常卵巢细胞株IOSE80比较,卵巢癌细胞系SKOV3中AL138820.1、AC019080.1、AC007637.1表达升高,RFX3-AS1表达降低,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。结论本研究确定了卵巢癌中4个m6A相关lncRNA并构建了验证稳健的风险模型。该模型具有一定预测预后及免疫功能的价值,为基于m6A的卵巢癌早期诊断及治疗提供新的思路。

3-甲基腺嘌呤对转化生长因子-β诱导大鼠肝脏星形细胞株HSC-T6活化及自噬的影响观察

目的观察3-甲基腺嘌呤(3-MA)对转化生长因子-β(TGF-β)诱导的大鼠肝星形细胞株HSC-T6活化及自噬的影响。方法取对数生长期的HSC-T6细胞分为空白组、TGF-β+PBS组、TGF-β+3-MA组。TGF-β+3-MA组细胞加入浓度为2 ng/mL TGF-β培养72 h后加入3-MA(0.5 mg/mL)处理24 h,TGF-β+PBS组细胞加入浓度为2 ng/mL TGF-β培养72 h后加入等量PBS处理24 h,空白组加入等量PBS处理,采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞活化标志物α-SMA、TGF-βmRNA和自噬标志物LC3、Beclin-1、Atg5 mRNA,采用Western blotting法检测各组细胞活化标志物α-SMA、TGF-β蛋白和自噬标志物LC3、Beclin-1、Atg5蛋白。结果TGF-β+PBS组、TGF-β+3-MA组细胞活化标志物α-SMA、TGF-βmRNA和蛋白均高于空白组,且TGF-β+3-MA组均低于TGF-β+PBS组(P均<0.05)。TGF-β+PBS组、TGF-β+3-MA组细胞自噬标志物LC3、Beclin-1、Atg5 mRNA和蛋白均高于空白组,且TGF-β+3-MA组均低于TGF-β+PBS组(P均<0.05)。结论3-MA可抑制TGF-β诱导的大鼠肝星形细胞株HSC-T6活化及自噬。

N6-甲基腺苷甲基化相关因子在小鼠骨骼肌损伤修复中的表达及机制

目的探讨N6-甲基腺苷(m6A)甲基化相关因子在骨骼肌损伤后修复过程中的时间动态表达及其对损伤过程中巨噬细胞炎症反应的调控作用。方法建立BaCl2损伤小鼠腓肠肌模型,对照组和损伤组每组4只小鼠。分别于小鼠损伤后第1、3、5、7、9天取腓肠肌组织进行实验;分离培养原代腓肠肌肌组织细胞,肌卫星细胞,肌细胞和培养成肌细胞系C2C12细胞,添加地塞米松(DEX,50μmol/L)处理细胞模拟损伤;脂多糖(LPS,100μg/L)处理巨噬细胞系RAW264.7细胞模拟骨骼肌损伤后的炎症反应,LPS处理前添加STM2457(30μmol/L)抑制m6A甲基转移酶3(Mettl3)的作用。利用Real-time PCR和Western blotting方法检测m6A甲基化相关因子(Writers,Erasers,Readers)的表达和炎症因子的表达。结果肌纤维随着损伤时间的延长,出现溶解后逐渐修复,单核/巨噬细胞数量先增加后减少,配对盒7(Pax7)mRNA水平随着损伤时间的变化先升高后降低。与对照组相比,腓肠肌中的m6A甲基化相关因子的mRNA水平和蛋白水平在损伤第1天时变化不显著,到损伤第3天显著升高(P<0.05);损伤后第5天与第3天相比显著下降(P<0.05);损伤后第7天和第9天与对照组相比差异无显著性。DEX降低了原代肌卫星细胞和C2C12细胞m6A甲基转移酶因子的mRNA表达水平(P<0.05),升高了甲基化识别酶因子的mRNA表达水平(P<0.05)。骨骼肌肌组织细胞和肌细胞中m6A甲基化相关因子的mRNA水平在DEX处理后均显著升高(P<0.05)。LPS导致巨噬细胞中m6A甲基化相关因子的mRNA和蛋白水平及炎症因子白细胞介素(IL)-6和IL-1β的mRNA表达水平显著升高(P<0.05),而抑制Mettl3之后,巨噬细胞炎症因子mRNA水平显著下降(P<0.05)。结论m6A甲基化相关因子在受损的肌细胞和巨噬细胞炎症反应中被激活,抑制m6A甲基转移酶能够减弱巨噬细胞炎症反应。

N6-甲基腺嘌呤甲基化转移酶3在肾脏缺血再灌注损伤中动态变化分析

目的分析N6-甲基腺嘌呤(m6A)甲基化转移酶3(METTL3)在肾脏缺血再灌注损伤(IRI)大鼠动物模型中的动态变化.方法取健康成年雄性SD大鼠20只,根据随机数字法将大鼠分为IRI组及假手术组,IRI组根据缺血再灌注后不同时间分为IRI 24 h组、IRI 48 h组和IRI 72 h组,每组5只大鼠.测定大鼠血清肌酐和尿素氮水平,并进行肾组织HE染色.采用实时定量聚合酶链式反应检测METTL3 mRNA相对转录水平,采用蛋白质印迹法检测METTL3蛋白相对表达量.使用单因素方差分析进行多组间比较,组间两两比较采用LSD法;当数据不满足正态分布和方差齐性时,使用Kruskal-Wallis H检验进行多组间比较,两两比较采用Bonfferoni检验进行分析.使用Pearson法进行相关性分析.P<0.05为差异有统计学意义.结果假手术组以及IRI 24 h、48 h和72 h组大鼠血清肌酐分别为(15.8±2.28)、(57.8±6.50)、(37.0±6.00)和(29.8±5.02)μmol/L,尿素氮分别为(3.86±0.45)、(16.48±2.49)、(7.09±0.91)和(5.49±0.75)mmol/L,差异均有统计学意义(F=56.44和81.83,P均<0.05).大鼠肾脏组织病理染色提示假手术组大鼠肾脏组织形态正常,IRI 24 h时已出现急性病变,IRI 48 h时急性病变加重,IRI 72 h时急性病变仍明显.假手术组以及IRI 24 h、48 h和72 h组大鼠总m6A相对修饰水平分别为(1.00±0.36)、(8.53±3.29)、(4.41±1.12)和(2.40±0.93),METTL3蛋白相对表达量分别为(1.00±0.29)、(6.37±2.59)、(2.06±0.76)和(1.55±0.63),METTL3 mRNA相对转录水平分别为(1.00±0.04)、(2.52±0.67)、(1.86±0.21)和(0.84±0.22),差异均有统计学意义(F=16.43、15.54和13.56,P均<0.05).总m6A修饰水平与血清肌酐和尿素氮均呈正相关(r=0.7963和0.7670,P均<0.05);METTL3 mRNA水平与血清肌酐、尿素氮和总m6A修饰水平均呈正相关(r=0.7208、0.7957和0.8313,P均<0.05).结论在IRI早期,METTL3表达水平和总m6A修饰水平均升高,提示METTL3和总m6A修饰水平对早期实时评估IRI可能具有重要意义.

化学干预N^(6)-甲基腺嘌呤修饰的研究进展

信使RNA(Messenger RNA,mRNA)上存在众多修饰,包括N^(6)-甲基腺嘌呤修饰(N^(6)-methyladenosine,m^(6)A)、N1-甲基腺嘌呤修饰(N1-methyladenosine,m^(1)A)及胞嘧啶甲基化(5-methylcytosine,m^(5)C)等.其中,m^(6)A是mRNA内部修饰碱基中占比最高的一种,影响着mRNA的5′和3′端加工、在细胞中的定位、降解和翻译等过程,并在转录后调控基因表达水平,以此参与胞内的多种生理活动.本文综合评述了m^(6)A修饰的分子机制及其与多种疾病的关系,概述了m^(6)A鉴定技术的发展历程,重点讨论了m^(6)A化学干预的最新研究进展,以期让读者全面了解m^(6)A修饰,并为后续开发针对m^(6)A修饰的小分子药物提供参考.

N6-甲基腺苷修饰在呼吸系统疾病中的研究进展

慢性呼吸系统疾病已成为影响我国居民健康的重要因素,给患者、社会带来沉重的经济负担。表观遗传因素在呼吸系统疾病的发生发展中有重要作用,RNA甲基化是重要表观遗传修饰方式之一,其中6-甲基腺嘌呤(m6A)作为一种转录后修饰方式在真核生物中广泛存在。关注m6A修饰在肺部疾病中的功能,对深入理解m6A表观遗传学调控规律,阐明肺部疾病的发病机制,提供药物治疗靶点,指导临床诊治具有重要意义。将对RNA m6A修饰在呼吸系统疾病中的研究进展作一综述。

N6-甲基腺嘌呤修饰在恶性肿瘤发生发展及治疗中的研究进展

近年来RNA修饰引起了全世界生物学家的广泛关注。到目前为止已发现170余个RNA修饰,其中N6-甲基腺嘌呤(m^(6)A)是mRNA最主要的修饰方式之一。它调节RNA的剪接、转位、翻译和稳定性,在细胞的生长、分化和代谢中起着至关重要的作用。作为一种动态、可逆的修饰,m^(6)A的表达水平受RNA甲基转移酶、去甲基酶以及m^(6)A结合蛋白的共同调节。越来越多的研究表明m^(6)A基因修饰与人类癌症的发生发展关系密切。本文就m^(6)A异常修饰在多种恶性肿瘤发生发展及治疗中的研究进展进行综述,旨在为癌症治疗提供新的思路。

N6-甲基腺嘌呤调控因子对宫颈癌预后及免疫浸润的作用

目的:探究N6⁃甲基腺嘌呤(m6A)RNA甲基化调控因子对宫颈癌预后及肿瘤免疫微环境的潜在作用及机制。方法:从TCGA和GEO数据库下载宫颈癌转录组表达数据和相应临床数据,通过生物信息学方法和组织验证实验分析m6A调控因子表达及相关性,LASSO Cox回归分析建立m6A预后相关风险预测模型,一致性聚类分析确定2种m6A修饰模式,ssGSEA分析两组间免疫细胞浸润相对丰度。结果:与正常组织相比,宫颈癌组织RBM15、IGF2BP2、IGF2BP3、FMR1、YTHDF1、METTL3和YTHDF2表达显著上调,而ZC3H13、METTL14、YTHDC1、FTO和ALKBH3表达显著下调。选择5个m6A调控因子HNRNPC、LRPPRC、METTL3、ELAVL1和FMR1建立风险预后模型,HPA数据库和qRT-PCR验证其在宫颈癌组织中的表达,该模型具有较好的预测价值,可作为独立的预后指标(AUC=0.734)。基于25个m6A调控因子表达确定了2种m6A修饰模式,即m6Aclus⁃ter A和m6Acluster B,两组生物学功能及信号通路和肿瘤微环境中免疫细胞浸润水平存在差异。结论:m6A RNA甲基化调控因子与宫颈癌预后及免疫浸润密切相关,为免疫治疗策略提供了指导依据。

N6-甲基腺嘌呤修饰在胃癌发生发展中作用的研究进展

N6-甲基腺嘌呤修饰(N6-methyladenosine,m6A)是在真核细胞中最广泛的RNA修饰,属于表观遗传学修饰的一种,参与多种肿瘤的发生发展。胃癌是全球癌症死亡率排名第三的恶性肿瘤,目前对于胃癌的发生发展机制了解不完全,早期胃癌难发现,进展期胃癌手术机会少且药物治疗效果欠佳。而在胃癌中,m6A修饰相关因子表达异常,引发了m6A修饰失调,进而影响到胃癌的进展,这也提示我们m6A修饰相关因子有作为胃癌治疗靶点或诊断标志物的潜力。因此,本文就m6A修饰在胃癌发生发展过程中的作用以及可能涉及到的治疗方法予以综述。

脂肪量和肥胖相关基因修饰N6-甲基腺嘌呤调控肿瘤发生发展的作用机制研究进展

脂肪量和肥胖相关基因(FTO)最初被认为是一种与成人和儿童的早发及严重肥胖密切相关的肥胖敏感基因,后来研究发现,FTO能够作为RNA的去甲基化酶,在N6-甲基腺嘌呤(m6A)修饰中作为调控因子发挥作用,其功能障碍与多种恶性肿瘤的发生发展有关。FTO可以通过修饰m6A影响细胞周期与细胞增殖、逃避细胞凋亡信号、逃避自体免疫微环境、诱导血管生成、激活肿瘤细胞侵袭和转移,调节肿瘤干细胞干性,从而在肿瘤中发挥促癌因子或抑癌因子的作用,有望成为肿瘤分子诊断的潜在生物标志物及肿瘤治疗的新靶点。

N6-甲基腺嘌呤修饰在卵子发生及早期胚胎发育中的调控作用

N6-甲基腺嘌呤(N^(6)-methyladenosine,m^(6)A)是指RNA腺苷第6位氮(N)原子的甲基化修饰,是哺乳动物mRNA中最为丰富的表观转录组学修饰。m^(6)A依赖于甲基转移酶(Writer)、去甲基化转移酶(Eraser)和m^(6)A结合蛋白(Reader)的共同调控作用。诸多研究表明m^(6)A及其调节酶几乎存在于各个发育阶段的卵泡及早期胚胎组织中,凭借其动态、可逆、敏感的特性广泛地参与mRNA的代谢过程,在转录后水平调控卵子发生,早期胚胎的核重编程、谱系分化、种植以及妊娠维持,在很大程度上决定了女性的生育能力和妊娠结局,并有望成为诸多生殖障碍相关疾病的诊断、预后标志物以及新的治疗靶点。

前列腺癌患者外周血DNA腺嘌呤N6甲基化修饰的研究

目的本研究分析前列腺癌(PCa)患者外周血DNA腺嘌呤N6甲基化(6mA)修饰的水平,从而探讨6m A修饰与PCa的关系,为PCa寻找新的诊断和预后标志物。方法分别检测PCa组与对照组的外周血6mA,筛选差异基因6mA热点,通过生物信息学分析方法,在全基因组范围对疾病相关位点进行筛选与鉴定。结果与正常组比较,PCa组中6mA表达上调基因有2558个,表达下调基因有1106个,主要分布在内含子上。功能富集与信号通路富集分析结果显示,钙离子信号通路和T细胞受体信号通路富集倍数最高,此通路中PLCG1、ITPR1、PPP3C和CAMK2等上调基因与上游T细胞受体调控基因共同作用调控钙离子信号转导。结论钙离子信号通路和T细胞受体信号通路6m A修饰异常可能与PCa的发生、发展相关。

N6-甲基腺苷甲基化与老年急性心肌梗死的相关性研究

目的探讨N6-甲基腺苷(m6A)甲基化与老年急性心肌梗死(AMI)的相关性。方法收集新疆医科大学第五附属医院2016年12月至2022年9月收治的老年AMI患者108例(观察组)及同期住院体检的102例无心血管疾病老年人(对照组)的临床资料行回顾性分析。对比2组一般资料及血生化指标。比色法测定2组外周血单个核细胞总RNA的m6A水平进行比较,实时荧光定量聚合酶链反应及蛋白质免疫印迹法检测2组m6A修饰相关酶甲基转移酶[甲基化转移酶3(METTL3)、METTL14、肾母细胞瘤1关联蛋白(WTAP)]和去甲基转移酶[肥胖相关蛋白(FTO)、烷烃羟化酶同源5基因(ALKBH5)]mRNA及蛋白相对表达量的差异,分析其与老年AMI的相关性。结果观察组体重指数、糖尿病史比例、空腹血糖及低密度脂蛋白胆固醇水平显著高于对照组(均P<0.05)。观察组外周血单个核细胞总RNA的m6A水平显著高于对照组[(0.56±0.03)比(0.48±0.28)],差异有统计学意义(P<0.001)。二元Logistic回归分析结果显示m6A为老年AMI的危险因素(比值比=4.338,95%置信区间:1.571~11.975,P=0.005),m6A水平预测老年AMI的曲线下面积为0.982,敏感度为91.11%,特异度为95.56%。观察组METTL3、METTL14 mRNA和蛋白相对表达量显著高于对照组,WTAP、FTO及ALKBH5 mRNA和蛋白相对表达量显著低于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.001)。结论m6A为老年AMI的危险因素,m6A对老年心肌梗死具有一定的预测价值;m6A甲基化与老年AMI存在相关性,老年AMI患者METTL3与METTL14表达量高,WTAP、FTO与ALKBH5的表达量低,m6A及其修饰相关酶有望为老年AMI患者诊治提供潜在新视角。

有氧运动调节circRNAs m6A甲基化修饰改善高脂饮食小鼠心脏病理性重塑研究

目的:通过甲基化RNA免疫沉淀测序(MeRIP-seq)和转录组测序(RNA-seq)绘制N6-甲基腺苷(m6A)修饰图谱,探讨环状RNA(circRNAs)m6A甲基化修饰在有氧运动改善高脂饮食小鼠心脏病理性重塑中的作用。方法:C57BL/6J野生型小鼠随机分为正常饮食安静(normal diet-sedentary,ND-SED)组、正常饮食运动(normal diet-exercise,ND-EX)组、高脂饮食安静(high-fat diet-sedentary,HFD-SED)组和高脂饮食运动(high-fat diet-exercise,HFD-EX)组。ND-SED组和ND-EX组小鼠给予普通饲料喂养,HFD-SED组和HFD-EX组小鼠给予60%脂肪供能高脂饲料喂养12周后,ND-EX组和HFD-EX组小鼠进行8周有氧运动。运动干预结束后,检测小鼠体重、体脂含量和心功能。采血、取心脏,检测血清TC和TG含量,酶联免疫吸附测定检测心脏组织TG含量,RT-qPCR检测m6A调节因子,Western blot检测METTL3和FTO蛋白表达,比色法检测心脏组织m6A RNA甲基化含量,MeRIP-seq检测HFD-SED组和HFD-EX组小鼠心脏circRNAs m6A甲基化修饰,SRAMP预测发生m6A甲基化差异和表达差异的circRNA甲基化位点,MeRIP-qPCR验证其m6A水平。结果:8周有氧运动显著降低了高脂饮食小鼠体重和体脂含量,提高了左心室射血分数和短轴缩短率,抑制心脏纤维化和脂质沉积,改善心脏病理性重塑。有氧运动可以显著降低高脂饮食小鼠心脏m6A甲基化水平,甲基转移酶METTL3在其中发挥了重要作用。MeRIP-seq显示,HFD-SED组和HFD-EX组小鼠心脏受m6A修饰的circRNAs大部分都只具有1个m6A修饰位点,且m6A circRNAs主要来自重叠区和外显子。与HFD-SED组比较,HFD-EX组小鼠心脏有13个circRNAs发生了甲基化上调,19个circRNAs发生了甲基化下调,两组差异甲基化的circRNAs大部分来源于重叠区,长度主要富集在1~10000 bps,大部分位于1号、7号和13号染色体上。RNA-seq显示,与HFD-SED组比较,HFD-EX组小鼠心脏有40个circRNAs发生差异表达,其中22个显著上调,18个显著下调。MeRIP-seq和RNA-seq联合分析发现,只有circRNA_4614|Chr7:127484542_127486889_+(以下简称“circRNA_4614”)同时发生m6A甲基化差异和表达差异,其m6A水平和表达水平均显著上调。SRAMP预测显示,circRNA_4614存在8个潜在的m6A位点,其中1个位点具有非常高置信度,2个位点具有高置信度。MeRIP-qPCR验证显示,与HFD-SED组比较,HFD-EX组小鼠心脏circRNA_4614的m6A水平显著上调,其趋势与MeRIP-seq测序结果一致。结论:有氧运动可以显著降低高脂饮食小鼠心脏m6A甲基化水平,调节心脏circRNAs表达谱和m6A修饰谱。circRNA_4614介导的m6A修饰在有氧运动改善肥胖性心脏重塑中可能发挥重要作用。

N6-甲基腺苷甲基化修饰在多种肿瘤中的调控作用及机制

N6-甲基腺苷(N6-methyladenine,m6A)甲基化修饰是最常见的表观遗传修饰之一,近年来越来越多的研究表明失调的m6A甲基化修饰参与肿瘤的发生、发展并和肿瘤的预后密切相关。m6A甲基化修饰由甲基化转移酶、去甲基化酶和甲基化识别蛋白动态调节。本文主要对近年来m6A甲基化修饰在肿瘤中的相关研究进行综述,以期为m6A甲基化领域的基础研究提供思路,同时也为肿瘤的预防和治疗提供参考。

3-甲基腺嘌呤对风湿性心脏病瓣膜纤维化的影响

目的 探讨3-甲基腺嘌呤(3-MA)对风湿性心脏病(RHD)瓣膜纤维化相关指标的影响。方法 取30只Lewis雌性大鼠,利用电脑随机数将大鼠分为正常组、模型组和实验组,每组10只。模型组和实验组通过后足垫、腹部皮下注射抗原Ⅰ、抗原Ⅱ造模,大鼠多处关节出现红肿,B超检查显示二尖瓣有不同程度反流,表明RHD模型建立成功。建模成功后,第8~9周,实验组大鼠于腹部皮下注射3-MA 2.5 mg/kg, 1次/周,模型组大鼠腹部皮下注射等量生理盐水;第10~24周,模型组、实验组大鼠腹部皮下注射0.5 mL抗原Ⅱ,1次/周,正常组大鼠在相同时间以同样方式注射等量生理盐水。采用免疫印迹(Western blot)法检测3组大鼠二尖瓣组织中PI3K、Akt、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、LC3Ⅱ及Ⅰ型胶原蛋白的相对表达量;采用ELISA法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)水平。结果 正常组、实验组、模型组大鼠的二尖瓣组织中PI3K、Akt、LC3Ⅱ的相对表达量依次升高,组间差异均有统计学意义(均P<0.05);模型组α-SMA、Ⅰ型胶原蛋白的相对表达量均高于正常组、实验组,差异均有统计学意义(均P<0.05);正常组与实验组的α-SMA、Ⅰ型胶原蛋白相对表达量比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。正常组、实验组、模型组大鼠的二尖瓣组织中TNF-α、IL-6、IL-8水平依次升高,组间差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 3-MA能够有效抑制RHD大鼠二尖瓣组织自噬,减轻心脏瓣膜纤维化;调控PI3K/Akt信号通路可能是3-MA起抑制纤维化的作用机制之一;自噬作用的调控可能与TNF-α、IL-6及IL-8水平具有一定的相关性。

N6-甲基腺苷甲基化在卵巢癌中的作用机制研究进展

目的 探讨N6-甲基腺苷(m6A)甲基化在卵巢癌中的作用机制。方法 检索相关文献,总结m6A甲基化调节蛋白在卵巢癌发生、发展和化学治疗(简称化疗)耐药中的作用及机制。结果 m6A甲基化调节蛋白m6A甲基转移酶、m6A去甲基转移酶和m6A结合蛋白在卵巢癌的发生、发展中参与调控卵巢癌的增殖、侵袭、凋亡等生物学过程,并与卵巢癌的化疗耐药及预后密切相关。结论 m6A甲基化相关研究可为改善卵巢癌化疗耐药性及指导新型靶向药物的研究提供参考。

N6-甲基腺苷甲基化修饰在胃癌转移中的作用及机制研究进展

N6甲基腺苷(m6A)甲基化修饰是一种动态可逆的转录后修饰,主要由甲基转移酶催化mRNA上腺苷酸发生甲基化,去甲基转移酶将甲基去除,然后m6A甲基结合蛋白特异性结合mRNA从而完成m6A甲基化修饰。m6A甲基化修饰通过调控RNA的代谢影响肿瘤细胞的增殖、侵袭、转移以及对化学治疗药物的耐药性,进而调控肿瘤的发生发展进程。胃癌位居全球常见癌症的第5位,其相关病死率位居世界第4位,严重危害人类健康。最新研究报道,m6A甲基化修饰在调控胃癌转移中发挥重要作用。本文就近年来m6A甲基化修饰在胃癌转移中的作用相关研究进展进行综述,以期为今后胃癌转移机制的阐明、新的候选治疗靶点的发现及抗癌药物的研发提供理论基础。