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2014-2018年新疆人感染H7N9禽流感分子流行病学特征分析
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作者 郜振国 马合木提 +6 位作者 赵俊 黄佳 张璇 陈媛 丽娜·吐尔逊巴依 李泉希 马鑫 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期774-781,共8页
目的分析2014-2018年新疆14例人感染H7N9禽流感病例的分子流行病学特征,为防控及治疗提供科学依据。方法提取核酸后采用高通量基因测序技术获得基因组序列,并用生物信息学分析软件对基因组序列进行同源性分析、进化分析、变异位点分析... 目的分析2014-2018年新疆14例人感染H7N9禽流感病例的分子流行病学特征,为防控及治疗提供科学依据。方法提取核酸后采用高通量基因测序技术获得基因组序列,并用生物信息学分析软件对基因组序列进行同源性分析、进化分析、变异位点分析及同源建模。结果14例人感染H7N9禽流感病毒HA基因核苷酸同源性介于97.39%~100%,氨基酸同源性介于98.38%~100%;NA基因核苷酸同源性介于97.73%~100%,氨基酸同源性介于97.73%~100%,均属于长江三角洲谱系和低致病性禽流感病毒,分属于2个亚分支,与A/Hunan/02650/2016疫苗株最为接近。HA蛋白G186V、T160A全部发生了变异,Q226L中13株病毒发生了变异,NA蛋白4个关键的神经氨酸酶抑制剂耐药位点全部未发生变异。M2蛋白S31N和V27A位点全部发生了突变,PB1蛋白T368V位点全部发生了突变,PA蛋白位点K356R全部发生了突变。结论新疆H7N9禽流感病毒具有双受体结合性,对金刚烷胺类药物耐药,对神经氨酸酶抑制剂敏感,可在疾病发生早期及时使用神经氨酸酶抑制剂。需加强禽流感病毒基因组变化的监测,做好基因突变的应对措施。 展开更多
关键词 禽流感 H7n9 分子流行病学
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抗H7N9流感病毒的单克隆抗体与胃组织的交叉反应研究
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作者 孙晶莹 张海祥 +4 位作者 冯杨萌 封青 李研 孙丽君 徐翠香 《中国实验诊断学》 2024年第9期1107-1111,共5页
目的筛选鉴定与胃组织交叉反应的抗H7N9流感病毒的单克隆抗体,初步探讨流感病毒感染会引发肠道相关疾病的可能致病机制。方法利用H7N9流感病毒制备了大量的单克隆抗体,对制备的单克隆抗体运用ELISA方法进行亚型和效价测定,免疫组化对制... 目的筛选鉴定与胃组织交叉反应的抗H7N9流感病毒的单克隆抗体,初步探讨流感病毒感染会引发肠道相关疾病的可能致病机制。方法利用H7N9流感病毒制备了大量的单克隆抗体,对制备的单克隆抗体运用ELISA方法进行亚型和效价测定,免疫组化对制备的单克隆抗体与组织的反应性进行筛选,巢式PCR分子生物学技术克隆单克隆抗体轻重链可变区序列。结果制备的单克隆抗体H7N9-71和H7N9-78均能与H7N9抗原特异性结合,抗体效价达1∶10~5,免疫组化结果表明H7N9-71、H7N9-78与人的胃组织能发生特异性反应,进一步的研究发现这两株单抗与小鼠胃组织能特异性结合。轻重链可变区序列结果证实二者为两株不同的单抗。结论H7N9流感病毒可能与胃组织之间存在异嗜性抗原,提示流感病毒感染可能与胃肠道疾病的发生存在某些关联。 展开更多
关键词 H7n9流感病毒 单克隆抗体 交叉反应 抗体可变区
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中国H7N9禽流感遗传演化趋势及防控措施 被引量:1
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作者 吴永帅 张馨 +6 位作者 修仰 史健全 吴金燕 丁茹 兰嘉琪 尹煜翔 曾祥伟 《今日畜牧兽医》 2024年第2期29-31,共3页
H7N9禽流感病毒(AIV)感染人类的情况最先出现在中国,而且具有很高的突变性。2013年首次在人类身上分离出的是低致病性H7N9禽流感病毒,发展到2017年,已经出现高致病性H7N9禽流感病毒,严重威胁动物和人类的生命健康安全,同时,还会对社会... H7N9禽流感病毒(AIV)感染人类的情况最先出现在中国,而且具有很高的突变性。2013年首次在人类身上分离出的是低致病性H7N9禽流感病毒,发展到2017年,已经出现高致病性H7N9禽流感病毒,严重威胁动物和人类的生命健康安全,同时,还会对社会的稳定和经济发展有一定的影响。综述通过NCBI(National Center for Biotechnology Information)和GISAID数据库收集了中国国内2001~2021年共4641条有关H7N9的数据,拟通过流行病学的角度来说明H7N9禽流感病毒在中国的发生、发展以及在时间、空间和种群间的分布情况,同时总结中国对H7N9所引起的大流行所采取的防控措施,以期为后续的疫情防控措施规划提供依据。 展开更多
关键词 H7n9 禽流感病毒 流行病学 分布 防控
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Antibodies elicited by Newcastle disease virus-vectored H7N9 avian influenza vaccine are functional in activating the complement system
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作者 Zenglei Hu Ya Huang +3 位作者 Jiao Hu Xiaoquan Wang Shunlin Hu Xiufan Liu 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2024年第6期2052-2064,共13页
H7N9 subtype avian influenza virus poses a great challenge for poultry industry.Newcastle disease virus(NDV)-vectored H7N9 avian influenza vaccines(NDV_(vec)H7N9)are effective in disease control because they are prote... H7N9 subtype avian influenza virus poses a great challenge for poultry industry.Newcastle disease virus(NDV)-vectored H7N9 avian influenza vaccines(NDV_(vec)H7N9)are effective in disease control because they are protective and allow mass administration.Of note,these vaccines elicit undetectable H7N9-specific hemagglutination-inhibition(HI)but high IgG antibodies in chickens.However,the molecular basis and protective mechanism underlying this particular antibody immunity remain unclear.Herein,immunization with an NDV_(vec)H7N9 induced low anti-H7N9 HI and virus neutralization titers but high levels of hemagglutinin(HA)-binding IgG antibodies in chickens.Three residues(S150,G151 and S152)in HA of H7N9 virus were identified as the dominant epitopes recognized by the NDV_(vec)H7N9 immune serum.Passively transferred NDV_(vec)H7N9 immune serum conferred complete protection against H7N9 virus infection in chickens.The NDV_(vec)H7N9 immune serum can mediate a potent lysis of HA-expressing and H7N9 virus-infected cells and significantly suppress H7N9 virus infectivity.These activities of the serum were significantly impaired after heat-inactivation or treatment with complement inhibitor,suggesting the engagement of the complement system.Moreover,mutations in the 150-SGS-152 sites in HA resulted in significant reductions in cell lysis and virus neutralization mediated by the NDV_(vec)H7N9 immune serum,indicating the requirement of antibody-antigen binding for complement activity.Therefore,antibodies induced by the NDV_(vec)H7N9 can activate antibody-dependent complement-mediated lysis of H7N9 virus-infected cells and complement-mediated neutralization of H7N9 virus.Our findings unveiled a novel role of the complement in protection conferred by the NDV_(vec)H7N9,highlighting a potential benefit of engaging the complement system in H7N9 vaccine design. 展开更多
关键词 H7n9 subtype avian influenza virus NDV vector vaccine antibody immunity COMPLEMENT protection
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奇耐^(®)N9在全钢载重子午线轮胎胎面胶中的应用
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作者 刘琦 李祥 +2 位作者 张洪 胡录伟 杨利伟 《轮胎工业》 CAS 2024年第5期295-298,共4页
研究奇耐^(®)N9在全钢载重子午线轮胎胎面胶中的应用。结果表明:在胎面胶生产配方中添加2份奇耐^(®)N9,胶料的密度增大,物理性能相当,但气孔率明显下降,工艺性能改善。采用试验胶料制备的315/80R22.520PR全钢载重子午线轮胎... 研究奇耐^(®)N9在全钢载重子午线轮胎胎面胶中的应用。结果表明:在胎面胶生产配方中添加2份奇耐^(®)N9,胶料的密度增大,物理性能相当,但气孔率明显下降,工艺性能改善。采用试验胶料制备的315/80R22.520PR全钢载重子午线轮胎的耐久性能和高速性能与生产轮胎没有明显差异,生产成本降低。 展开更多
关键词 全钢载重子午线轮胎 奇耐^(®)n9 胎面胶 气孔率 工艺性能
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2022年湖南省家禽H7N9亚型禽流感监测与分析
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作者 黄建龙 郭永祥 +2 位作者 张朝阳 范仲鑫 鲁杏华 《中国动物检疫》 CAS 2023年第11期21-24,共4页
为了解湖南省家禽(鸡、鸭、鹅)H7N9亚型禽流感的免疫抗体水平及其流行情况,2022年在全省14个市州,采用配额抽样方法,在种禽场、商品代场、散养户和活禽市场共采集46112份禽血清和53246份禽拭子样品,通过血凝抑制试验、荧光定量PCR方法... 为了解湖南省家禽(鸡、鸭、鹅)H7N9亚型禽流感的免疫抗体水平及其流行情况,2022年在全省14个市州,采用配额抽样方法,在种禽场、商品代场、散养户和活禽市场共采集46112份禽血清和53246份禽拭子样品,通过血凝抑制试验、荧光定量PCR方法分别进行免疫抗体和病毒核酸检测。结果显示:H7N9亚型禽流感免疫抗体平均场群合格率为93.27%,平均个体合格率为90.60%,仅在活禽市场的1份鸡拭子样品中检测到病毒核酸阳性;鸡H7N9亚型禽流感免疫抗体平均场群合格率和个体合格率(94.66%和91.51%)均高于水禽(83.26%和81.86%);种禽场的免疫抗体平均场群合格率和个体合格率最高,活禽市场最低,两者差异具有统计学意义(P<0.05);全省14个市州的H7N9亚型禽流感免疫抗体平均场群合格率和个体合格率均在70%以上。结果表明:2022年湖南省家禽H7N9亚型禽流感免疫效果较好,在饲养场禽群中也未检出病原,发生大规模疫情的风险较低,但在活禽市场中仍检出病原,且水禽以及散养户和活禽市场禽群的免疫抗体水平略低,疫情散发风险依然存在。建议进一步加强对H7N9亚型禽流感的免疫监测以及动物检疫监管工作,不断提升公共卫生安全防护水平。 展开更多
关键词 H7n9亚型禽流感 家禽 监测 湖南省
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H7N9亚型禽流感病毒HA基因mRNA的构建
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作者 杨佳欣 刘文宇 +4 位作者 李炯颉 陈普成 柳金雄 陈化兰 姜永萍 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期771-778,共8页
H7N9亚型禽流感病毒(AIV)持续给家禽及人类健康造成威胁。为构建H7N9亚型AIV(简称H7N9 AIV)mRNA疫苗,本研究以AIV分离株A/chicken/Yunnan/SD024/2021(H7N9)(简称CK/YN/SD024/2021)的HA基因为目的基因、选择来自人β-球蛋白和非洲爪蟾β... H7N9亚型禽流感病毒(AIV)持续给家禽及人类健康造成威胁。为构建H7N9亚型AIV(简称H7N9 AIV)mRNA疫苗,本研究以AIV分离株A/chicken/Yunnan/SD024/2021(H7N9)(简称CK/YN/SD024/2021)的HA基因为目的基因、选择来自人β-球蛋白和非洲爪蟾β-球蛋白的不同编码基因序列作为HA基因的非翻译区(UTR),构建了中间转录质粒pGEM-YN和pXT7-YN,以2个质粒为模板通过体外转录制备了mRNA mH7-YN-pGEM和mH7-YN-pXT7;将2种mRNA转染HEK293T细胞,western blot鉴定结果显示2种mRNA转染的细胞均可检测到约为70 ku的HA蛋白条带和50 ku的HA1蛋白条带;通过间接免疫荧光试验(IFA)确定最适转染剂量和HEK293T细胞中HA蛋白的动态表达,结果显示,3μg mRNA转染106个细胞并于转染24 h后荧光信号强度均最强;将2种mRNA转染鸡胚成纤维细胞(CEF),均可通过IFA检测到HA蛋白的表达。以上结果表明,本研究正确构建了2种含H7N9 AIV HA基因的mRNA,且其均能够在HEK293T细胞和CEF中正确表达HA蛋白,3μg mRNA转染HEK293T细胞可获得最佳的蛋白表达水平,转染24 h后HA蛋白的表达水平达到最高。本研究基于UTR序列的差异首次正确构建了两种能在哺乳动物细胞和禽类细胞中高效表达H7N9 AIV HA蛋白的mRNA,为禽流感mRNA疫苗的研发和免疫效力评估奠定了良好的物质和技术基础。 展开更多
关键词 H7n9 禽流感病毒 MRNA UTR HA基因
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稳定表达H7N9亚型禽流感病毒HA蛋白的293T细胞株构建及应用 被引量:2
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作者 曹永忠 邓婧 +2 位作者 黄雅 薄宗义 胡增垒 《中国家禽》 北大核心 2023年第10期59-64,共6页
为获得用于评价H7N9亚型禽流感疫苗诱导的抗体Fc免疫效应的靶细胞,研究采用慢病毒包装与感染技术构建一株稳定表达H7N9亚型禽流感病毒(H7N9 AIV)HA蛋白的细胞株,并以该细胞株为靶细胞建立H7N9亚型禽流感疫苗免疫血清补体介导的细胞毒(AD... 为获得用于评价H7N9亚型禽流感疫苗诱导的抗体Fc免疫效应的靶细胞,研究采用慢病毒包装与感染技术构建一株稳定表达H7N9亚型禽流感病毒(H7N9 AIV)HA蛋白的细胞株,并以该细胞株为靶细胞建立H7N9亚型禽流感疫苗免疫血清补体介导的细胞毒(ADCML)活性的检测方法。结果显示成功包装了一株重组慢病毒,滴度可达108 FU/mL;构建了稳定表达H7N9 AIV HA蛋白的293T细胞株,HA蛋白主要在细胞膜上表达。基于新城疫病毒(NDV)载体的H7N9亚型禽流感疫苗免疫鸡后,诱导产生的HA结合性IgG抗体滴度为2180。以稳定细胞株为靶细胞,载体疫苗血清诱导的细胞死亡水平显著高于空载体与未免疫鸡血清(P<0.001);补体灭活后,载体疫苗血清诱导的细胞死亡水平显著降低(P<0.001)。研究表明,基于NDV载体的H7N9亚型禽流感疫苗免疫鸡血清具有较强的ADCML活性,稳定表达H7N9 AIV HA蛋白的细胞株可作为评价H7N9亚型禽流感疫苗免疫血清Fc免疫效应的靶细胞。 展开更多
关键词 H7n9亚型禽流感 HA蛋白 稳定细胞株 疫苗 Fc免疫效应 补体 抗体保护
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鸡鸭H7N9禽流感和新城疫抗体水平检测结果分析 被引量:2
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作者 蓝雅华 雷方玉 +2 位作者 王玉芳 江嘉程 叶天太 《浙江畜牧兽医》 2023年第1期7-9,共3页
为掌握衢州市衢江区鸡鸭H7N9禽流感和新城疫的免疫效果,笔者从2019至2021年连续3年对辖区内的规模养殖场及散养户鸡和鸭开展免疫抗体水平检测。检测结果表明,鸡H7N9禽流感、鸡新城疫及鸭H7N9禽流感的抗体合格率分别为93.91%、79.75%及90... 为掌握衢州市衢江区鸡鸭H7N9禽流感和新城疫的免疫效果,笔者从2019至2021年连续3年对辖区内的规模养殖场及散养户鸡和鸭开展免疫抗体水平检测。检测结果表明,鸡H7N9禽流感、鸡新城疫及鸭H7N9禽流感的抗体合格率分别为93.91%、79.75%及90.96%,均达到国家规定合格率,其中鸡H7N9禽流感的抗体合格率显著高于鸡新城疫的抗体合格率(P=0.014);规模场的新城疫抗体合格率为88.37%显著高于散养户的抗体合格率61.15%(P=0.012);H7N9禽流感抗体合格率与新城疫抗体合格率在上半年和下半年间没有显著差异,说明季节对抗体合格率的影响较小。 展开更多
关键词 H7n9 新城疫 免疫抗体水平
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普鲁卡因对缺氧诱导的N9细胞、PC12细胞损伤的影响及分子机制
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作者 陈基胜 符明君 林玉美 《中国动脉硬化杂志》 CAS 2023年第6期473-480,共8页
[目的]探讨普鲁卡因对缺氧诱导的N9细胞、PC12细胞损伤的影响及分子机制。[方法]N9细胞、PC12细胞分为对照组、缺氧组、低、中、高剂量普鲁卡因组(缺氧+2、6、18 mg/L普鲁卡因)、anti-miR-con组、anti-miR-369-3p组、miR-con+高剂量普... [目的]探讨普鲁卡因对缺氧诱导的N9细胞、PC12细胞损伤的影响及分子机制。[方法]N9细胞、PC12细胞分为对照组、缺氧组、低、中、高剂量普鲁卡因组(缺氧+2、6、18 mg/L普鲁卡因)、anti-miR-con组、anti-miR-369-3p组、miR-con+高剂量普鲁卡因组(转染miR-con+缺氧+18 mg/L普鲁卡因)、miR-369-3p+高剂量普鲁卡因组(转染miR-369-3p+缺氧+18 mg/L普鲁卡因)。流式细胞术检测细胞凋亡,试剂盒检测细胞中活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性,ELISA检测炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和白细胞介素6(IL-6)水平,RT-qPCR检测miR-369-3p表达水平。[结果]相比于对照组,缺氧组N9细胞、PC12细胞凋亡率升高,MDA、ROS含量升高,SOD活性降低,TNF-α、IL-1β、IL-6水平升高,miR-369-3p表达水平升高(P<0.05)。相比于缺氧组,低、中、高剂量普鲁卡因组N9细胞和PC12细胞凋亡率降低,MDA、ROS含量降低,SOD活性升高,TNF-α、IL-1β、IL-6水平降低,miR-369-3p表达水平降低,且均具有浓度依赖性(P<0.05);相比于anti-miR-con组,anti-miR-369-3p组N9细胞和PC12细胞凋亡率降低,ROS和MDA含量降低,SOD活性升高,TNF-α、IL-1β、IL-6水平降低(P<0.05)。相比于miR-con+高剂量普鲁卡因组,miR-369-3p+高剂量普鲁卡因组N9细胞和PC12细胞凋亡率升高,cleaved Caspase-3蛋白表达水平升高,MDA、ROS含量升高,SOD活性降低,TNF-α、IL-1β、IL-6水平升高(P<0.05)。[结论]普鲁卡因可减轻缺氧诱导的N9细胞和PC12细胞损伤,其机制可能与抑制miR-369-3p表达有关。 展开更多
关键词 普鲁卡因 miR-369-3p n9细胞 PC12细胞 细胞凋亡 缺血性脑卒中
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基于家禽和人感染H7N9禽流感病毒血凝素及其表达特性分析 被引量:3
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作者 张继荣 姚青 +1 位作者 高玉婧 王晓亮 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第5期13-15,共3页
为了研究家禽和人感染H7N9禽流感病毒血凝素及其表达特性的演变,试验从全球禽流感基因共享数据库(GISAID)和美国国家生物技术信息中心(Gen Bank)中获取我国家禽和人感染H7N9禽流感病毒血凝素(hemagglutinin,HA)核酸序列,用生物信息学软... 为了研究家禽和人感染H7N9禽流感病毒血凝素及其表达特性的演变,试验从全球禽流感基因共享数据库(GISAID)和美国国家生物技术信息中心(Gen Bank)中获取我国家禽和人感染H7N9禽流感病毒血凝素(hemagglutinin,HA)核酸序列,用生物信息学软件Clustalx 2.0分析以家禽H7N9病毒为参照人感染毒株HA蛋白氨基酸变化和HA核苷酸同源性,并探讨其表达特性的演化。结果表明:2014年部分人感染毒株发生氨基酸替换,且病毒出现地方区域分支;2015年毒株均发生氨基酸替换且替换位点数量多于2014年,病毒保持区域分化;2014年江西家禽感染毒株与2014年、2015年多地人感染毒株具密切亲缘关系。说明氨基酸替换增多可能增强了H7N9禽流感病毒对人的感染力,病毒基因演变表达特性显现地域性特征,应高度关注江西家禽中H7N9病毒的演化趋势。 展开更多
关键词 家禽H7n9 人感染H7n9 血凝素 氨基酸变化 病毒分化 地域特征
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葛根素对脂多糖诱导N9小胶质细胞激活的抑制作用 被引量:19
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作者 白群华 李文明 +3 位作者 刘洪涛 陈文娟 汪洋 于超 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期227-230,共4页
目的:探索葛根素对脂多糖(LPS)诱导N9小胶质细胞激活的抑制作用,为其在神经退行性疾病的防治方面提供依据。方法:用MTT法检测脂多糖和葛根素对小胶质细胞的细胞毒性作用;用流式细胞术(FCM)检测葛根素对LPS诱导N9细胞内活性氧(RO... 目的:探索葛根素对脂多糖(LPS)诱导N9小胶质细胞激活的抑制作用,为其在神经退行性疾病的防治方面提供依据。方法:用MTT法检测脂多糖和葛根素对小胶质细胞的细胞毒性作用;用流式细胞术(FCM)检测葛根素对LPS诱导N9细胞内活性氧(ROS)产生的抑制作用;分别用Griess法和FCM检测细胞培养液和细胞内一氧化氮(NO)含量;用HE染色法观察LPS激活N9细胞,及葛根素恢复细胞静息状态下细胞的形态;以FCM检测细胞凋亡和细胞周期。结果:葛根素(100~200μmol/L)能使LPS激活的N9细胞,从阿米巴样的活化形状明显恢复至静息态的圆形;LPS激活的N9细胞能产生大量的NO到培养液中,葛根素(50~200μmol/L)能使NO的产生减少,其中,高浓度组(200μmol/L)与LPS模型组相比,NO从23.45±0.19μmol/L降至12.43±0.11μmol/L(P〈0.01)。胞内ROS检测表明:葛根素(200μmol/L)同样明显降低ROS的产生。葛根素对激活的N9细胞胞内ROS的产生具有抑制作用,高浓度组(200μmol/L)能使其恢复至对照组水平;此外,葛根素能显著抑制LPS诱导的细胞凋亡,并恢复LPS对N9细胞G0/G1期的阻滞作用。结论:葛根素具有抑制小胶质细胞激活的作用。 展开更多
关键词 葛根素 n9小胶质细胞 脂多糖 一氧化氮 细胞凋亡
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H7N9病毒的来源和重组模式 被引量:40
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作者 张宝 黄克勇 +5 位作者 郭劲松 吴娴波 李凌 朱利 万成松 赵卫 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期1017-1021,共5页
目的通过序列分析揭示H7N9病毒的来源和重组产生模式。方法收集H7N9序列,运用BLAST、MEGA5.0等生物信息学软件分析序列相似性、多序列比对、构建进化树,确定H7N9病毒各节段序列的亲缘序列,模拟H7N9重组产生方式。结果系统进化树显示HA... 目的通过序列分析揭示H7N9病毒的来源和重组产生模式。方法收集H7N9序列,运用BLAST、MEGA5.0等生物信息学软件分析序列相似性、多序列比对、构建进化树,确定H7N9病毒各节段序列的亲缘序列,模拟H7N9重组产生方式。结果系统进化树显示HA、NA、PB2和NS节段最近缘关系序列只有一个;而PB1、PA、NP和MP节段序列,分布于不同的两个分枝。通过组合分析亲缘序列,可以将目前流行的H7N9病毒分为5型:A、B、A/Shanghai/1/2013-H7N9、A/Pigeon/Shanghai/S1069-H7N9和A/Zhejiang/HZ1/2013-H7N9。A型又可以分为A1和A2亚型。结论通过对序列的组合分析,推测此次H7N9病毒流行至少由5个病毒经过4次重组产生,产生两个主要流行株A和B型。A1和A2亚型的出现是同一次重组过程中产生两株不同产物;A/Pigeon/Shanghai/S1069-H7N9是A型H7N9病毒在流行期间与当地H9N2病毒的再一次重组产生。A/Zhejiang/HZ1/2013-H7N9是A2亚型和B型重组后产生的混合型。 展开更多
关键词 H7n9 禽流感 重组 生物信息学
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氯化钴诱导化学缺氧对N9小胶质细胞的损伤作用及机制 被引量:8
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作者 王国红 毕凌云 +3 位作者 李超堃 侯软玲 尹雅玲 李东亮 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期557-562,共6页
目的研究氯化钴(CoCl2)对N9小胶质细胞的损伤作用及机制。方法不同剂量CoCl2处理N9小胶质细胞后,XTT法检测细胞活力;倒置相差显微镜下观察细胞形态变化;硫代巴比妥酸(TBA)显色法检测细胞上清液中丙二醛(MDA)含量;Hoechst 33258染色检测... 目的研究氯化钴(CoCl2)对N9小胶质细胞的损伤作用及机制。方法不同剂量CoCl2处理N9小胶质细胞后,XTT法检测细胞活力;倒置相差显微镜下观察细胞形态变化;硫代巴比妥酸(TBA)显色法检测细胞上清液中丙二醛(MDA)含量;Hoechst 33258染色检测细胞凋亡;流式细胞术检测细胞周期变化。结果 CoCl2(50~1 000μmol.L-1)处理24 h后,细胞活力明显降低(P<0.01),且呈剂量依赖性。细胞形态发生明显改变,部分细胞出现皱缩、破碎,细胞密度减小,随CoCl2剂量增大,细胞形态损伤程度进一步恶化。MDA含量检测结果显示,氯化钴处理后,细胞上清液中MDA含量明显增多(P<0.05)。Hoechst 33258染色结果显示,氯化钴处理组的细胞凋亡比例较对照组明显增多(P<0.01),且比例随CoCl2剂量增大而增多。细胞周期检测结果显示,CoCl2可使细胞周期阻滞于G1/G0期。结论 CoCl2可呈剂量依赖性损伤N9小胶质细胞,机制与诱导细胞凋亡、引发氧化应激反应及细胞周期阻滞有关。 展开更多
关键词 氯化钴 诱导 化学缺氧 n9小胶质细胞 细胞损伤 模型
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H7N9禽流感病毒对人类致病的分子基础分析 被引量:24
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作者 于玉凤 郭晓兰 +5 位作者 王颖 周俊梅 方丹云 曾谷城 晏辉钧 江丽芳 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期657-665,共9页
【目的】了解H7N9禽流感病毒对人类致病的分子特征,为更好地预防与治疗H7N9人禽流感提供科学依据。【方法】从GISAID数据库中下载中国2013年分离的所有H7N9禽流感病毒株的基因及蛋白序列,并从NCBI数据库中下载其他相关的流感病毒序列,... 【目的】了解H7N9禽流感病毒对人类致病的分子特征,为更好地预防与治疗H7N9人禽流感提供科学依据。【方法】从GISAID数据库中下载中国2013年分离的所有H7N9禽流感病毒株的基因及蛋白序列,并从NCBI数据库中下载其他相关的流感病毒序列,运用生物信息学软件分析H7N9禽流感病毒基因的系统进化特征、受体结合位点、宿主特异位点、飞沫传播关键氨基酸位点、致病及毒力相关位点、耐药性位点及潜在糖基化位点等的变异情况。【结果】2013年中国流行的H7N9禽流感病毒为四源重组病毒,所有基因片段均来源于禽类,不含任何人流感病毒基因;病毒HA的受体结合位点发生了2个关键氨基酸的变异(G186V和Q226L);在与飞沫传播有关的关键氨基酸位点中,个别氨基酸已发生了变异(T160A、Q226L);该病毒具有8个毒力增强位点;所有分离株的M2均发生了S31N变异;分离株A/Shanghai/1/2013的NA的耐药位点发生了R294K变异;所有毒株的潜在糖基化位点均相对保守。【结论】H7N9禽流感病毒为四源重组的新型禽流感病毒。该病毒具有与人呼吸道上皮细胞SAa-2,6 Gal受体结合的分子基础,但目前尚未获得经飞沫传播的充分条件,人传人的可能性不大。该病毒具有低致病性禽流感病毒的分子特征,表明对禽类致病性不强,但其对人类呈高致病性,这可能与其毒力位点的特征有关。所有分离毒株均发生了对离子通道抑制剂金刚烷胺类药物的耐药性突变,个别毒株已发生了对神经氨酸酶抑制剂奥司他韦(达菲)的耐药性突变。 展开更多
关键词 H7n9禽流感病毒 致病性 分子基础 生物信息学
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H7N9亚型禽流感病毒RT-PCR检测方法建立 被引量:17
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作者 王云鹤 包红梅 +7 位作者 孙佳善 李雁冰 徐晓龙 王子龙 施建忠 曾显营 王秀荣 陈化兰 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第15期3050-3055,共6页
【目的】2013年3月,中国国家卫生和计划生育委员会宣布在上海、安徽地区发现了人感染H7N9亚型流感病毒事件,由于这种新型重组H7N9流感病毒未曾有过感染人或者动物的报道,因此出现了一系列亟待解决的问题,引起了全世界范围的广泛关注。根... 【目的】2013年3月,中国国家卫生和计划生育委员会宣布在上海、安徽地区发现了人感染H7N9亚型流感病毒事件,由于这种新型重组H7N9流感病毒未曾有过感染人或者动物的报道,因此出现了一系列亟待解决的问题,引起了全世界范围的广泛关注。根据H7N9亚型禽流感病毒HA和NA核苷酸序列,设计并合成靶基因为HA和NA的2对引物,建立快速检测H7N9亚型禽流感病毒的一步法RT-PCR检测方法。【方法】根据测序结果,用DNAStar生物软件进行同源性分析比较,选出H7和N9基因中高度保守且特异的核苷酸区域,用oligo6.0软件设计针对H7和N9基因的引物。用Trizol LS提取RNA,采用一步法Access RT-PCR扩增反应液,建立了一步法检测H7N9亚型禽流感病毒RT-PCR方法。以H7N9亚型流感病毒为阳性对照,其他亚型流感病毒以及新城疫、传染性支气管炎、传染性法氏囊等其他禽病病原作为阴性对照,按所建立的反应体系和反应程序进行RT-PCR反应,验证所建立方法的特异性。对病毒含量为106.5 EID50·m L-1的H7N9亚型禽流感病毒尿囊液依次进行10倍倍比稀释,提取RNA用RT-PCR方法检测,评价其敏感性。另外,采取双盲试验用荧光定量RT-PCR对该方法进行了比对验证。【结果】用H7亚型特异性引物检测H1—H15亚型禽流感病毒和鸡新城疫病毒等其他禽病病原,除H7亚型流感病毒外,其他样品均为阴性;用N9亚型特异性引物检测N1—N9亚型禽流感病毒和其他禽病病原,仅当前流行的H7N9亚型AIV样品有特异性目的条带,与其他N1—N9亚型禽流感病毒和鸡新城疫病毒等其他禽病病原均无交叉反应。通过对H7N9亚型禽流感病毒尿囊液进行10倍倍比稀释检测,证实该方法最低检出量为1.4×102.5 EID50·m L-1,并可以从阳性棉拭子浸出液中扩增出目的基因片段。【结论】该RT-PCR方法具有特异性强和准确率高的特点,可以作为H7N9亚型AIV核酸检测的一种有效候选方法。 展开更多
关键词 禽流感病毒 H7n9亚型 RT-PCR
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人感染H7N9禽流感流行特征与防控策略 被引量:36
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作者 陈健 毛盛华 +1 位作者 胡家瑜 吴凡 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期585-590,共6页
2013年3月31日中国大陆出现新型禽流感疫情,此次的H7N9禽流感病毒为全球首次发现的新亚型流感病毒,可能由3种流感病毒重组后产生。截至5月31日,我国内地共报告确诊病例131例,死亡39例。而在上海市报告的33例确诊病例中,29例发病于4月6... 2013年3月31日中国大陆出现新型禽流感疫情,此次的H7N9禽流感病毒为全球首次发现的新亚型流感病毒,可能由3种流感病毒重组后产生。截至5月31日,我国内地共报告确诊病例131例,死亡39例。而在上海市报告的33例确诊病例中,29例发病于4月6日上海市关闭活禽交易市场前,其余4例发病于关闭后的第一个潜伏期内。33例病例中60岁以上患者占66.7%(22/33);15例死亡病例中,60岁以上患者占80%(12/15);90.91%(30/33)的病例具有可疑的动物或环境暴露史。此次疫情呈散发,虽然出现了2起家庭聚集性病例,但目前还没有明确的人传人的证据。疫情发生后,上海市人民政府适时启动了流感流行应急预案Ⅲ级响应,通过突发公共卫生事件应急响应、关闭全市活禽交易、健康教育、风险沟通等手段,及时有效地控制了疾病的传播。本文分析这次疫情防控工作的得失并提出建议,供今后的防疫工作借鉴参考。 展开更多
关键词 禽流感 H7n9亚型流感病毒A型 流行病学 传染病控制
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福建省首例人感染H7N9禽流感病例实验室诊断和病毒序列分析 被引量:15
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作者 翁育伟 张拥军 +8 位作者 谢剑锋 黄萌 陈炜 张炎华 何文祥 吴冰珊 王金章 郑奎城 严延生 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期543-546,共4页
目的应用real-time RT-PCR和病毒序列测定等方法对福建省首例人感染H7N9禽流感病例开展实验室诊断。方法采集人感染H7N9禽流感病例呼吸道标本并提取RNA,分别采用甲乙型流感通用引物和探针、季节性流感(包括H3N2、H1N1、H1N1pdm)特异性... 目的应用real-time RT-PCR和病毒序列测定等方法对福建省首例人感染H7N9禽流感病例开展实验室诊断。方法采集人感染H7N9禽流感病例呼吸道标本并提取RNA,分别采用甲乙型流感通用引物和探针、季节性流感(包括H3N2、H1N1、H1N1pdm)特异性引物和探针以及H7N9特异性引物和探针进行real-time RT-PCR检测。利用自行设计的引物扩增病毒基因组节段,测定并分析病毒基因序列。结果 real-time RT-PCR结果表明,应用甲型通用引物扩增结果阳性,乙型及季节性流感(包括H3N2、H1N1以及H1N1pdm)扩增结果均为阴性,特异性H7N9亚型流感病毒扩增结果阳性。序列测定获得的病毒4个节段的序列与已公布的人感染H7N9禽流感病毒序列高度一致。结论病例呼吸道标本中存在人感染H7N9禽流感病毒,病毒的基因与近期国内流行的人感染H7N9禽流感病毒高度类似。 展开更多
关键词 禽流感 H7n9亚型 实验室诊断 序列分析
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两株人H7N9禽流感病毒的全基因组测序及分子特征分析 被引量:15
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作者 郭晓兰 司露露 +5 位作者 管大伟 王颖 于玉凤 方丹云 武婕 江丽芳 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期167-175,共9页
【目的】对两株从轻症病例和重症死亡病例中分离的人H7N9禽流感病毒进行全基因组测序,研究其来源、基因组特征以及相互间的分子差异,旨在了解毒株的遗传进化特征与其致病性及其所致疾病临床类型的关系,为进一步阐明H7N9禽流感病毒的致... 【目的】对两株从轻症病例和重症死亡病例中分离的人H7N9禽流感病毒进行全基因组测序,研究其来源、基因组特征以及相互间的分子差异,旨在了解毒株的遗传进化特征与其致病性及其所致疾病临床类型的关系,为进一步阐明H7N9禽流感病毒的致病机制提供科学依据。【方法】选取两株从轻症病例和重症死亡病例中分离的H7N9禽流感病毒进行全基因组序列测定;运用生物信息学软件比较分析两株病毒的遗传进化关系、基因组特征、受体结合位点、宿主特异性位点及致病相关位点等重要分子特征;从禽流感共享数据(GISAID)下载2013年至2014年10月轻症和重症病例的病毒分离株序列,分析致病相关关键位点差异,并分析这些变异与其致病性及所致疾病临床类型的关系。【结果】这两株H7N9禽流感病毒的HA、NA和M基因来源于2013年华东地区流行的H7N9禽流感病毒,NP、NS、PA、PB1和PB2基因来源于2013年在广东地区禽类中流行的H9N2禽流感病毒;H7N9禽流感病毒PA蛋白L336M和PB1蛋白I368V的突变率随流行时间的延长而逐渐上升,并存在地区差异;两株病毒各基因核苷酸同源性达到99.2%以上,氨基酸同源性在99.5%以上,但各基因节段存在个别氨基酸的差异,其中HA受体结合位点存在一个关键氨基酸的差异(226L和226 Q),宿主特异性位点存在两个关键氨基酸的差异(PB2-591L和PB2-591Q,PB2-627E和PB2-627K),毒力位点存在两个关键氨基酸差异(PA-353R和PA-353K,PB2-627E和PB2-627K);M2均发生了S31N突变;潜在糖基化位点均相对保守;2013年至2014年10月报道的重症病例病毒分离株PB2蛋白E627K突变率高于轻症病例分离株。【结论】两株来自不同临床类型的H7N9禽流感病毒是一种新的重组病毒,是由华东地区流行的人H7N9禽流感病毒和在广东地区禽类中流行的H9N2禽流感病毒基因重组而来;H7N9禽流感病毒的某些致病相关的关键氨基酸位点在流行的过程中不断发生变异,必须密切监测毒株的变异动向;两株致病力不同的病毒各基因节段虽然同源性较高,但存在关键氨基酸位点的差异,其中PB2蛋白627位氨基酸位点的差异可能对病毒的致病性起重要作用,与所致疾病临床类型相关。 展开更多
关键词 H7n9禽流感病毒 测序 进化特征 分子特征 致病性 临床类型
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H7N9事件网络舆情分析及其对突发公共卫生事件应对的启示 被引量:34
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作者 刘鹏程 孙梅 +6 位作者 李程跃 张建华 宁宁 应晓华 黄葭燕 陈文 郝模 《中国卫生事业管理》 北大核心 2014年第10期784-786,共3页
目的:分析H7N9事件网络舆情的发展演变规律,为突发公共卫生事件的处置提供参考。方法:以百度指数为工具,选择全国和江浙沪皖作为研究区域,研究时间跨度为2013年3月至6月H7N9事件的网络舆情状况。结果:网络舆情经历了明显的"从无到... 目的:分析H7N9事件网络舆情的发展演变规律,为突发公共卫生事件的处置提供参考。方法:以百度指数为工具,选择全国和江浙沪皖作为研究区域,研究时间跨度为2013年3月至6月H7N9事件的网络舆情状况。结果:网络舆情经历了明显的"从无到有,达到高峰,渐渐平息"的状态,网络关注热度与事件处置和信息发布密切关联。结论:政府在突发公共卫生事件处置中,应保证信息及时透明发布,对网络舆情及时监测预警并积极引导网络舆论。 展开更多
关键词 H7n9 网络舆情分析 突发公共卫生事件 应对
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