植物NAC膜结合转录因子的研究进展

NAC膜结合转录因子(NTLs)是NAC转录因子家族中一类带有跨膜结构蜮的转录调控因子,其N端含有高度保守的NAC结构域,C端含有跨膜结构域,在植物的生长发育、逆境胁迫应答中具有重要作用。主要介绍了植物NAC膜结合转录因子结构特点、生物学功能、作用机制等方面的最新研究进展。

巴西橡胶树膜结合NAC转录因子HbNTL1的克隆及生物信息学分析

根据巴西橡胶树胶乳cDNA文库中筛选到的NAC EST序列,克隆了橡胶树膜结合NAC转录因子,HbNTL1的cDNA和基因组DNA序列。生物信息学分析显示HbNTL1基因包含6个外显子和5个内含子,开放阅读框(ORF)为1704bp,编码了567个氨基酸。HbNTL1编码蛋白的相对分子量为62.52kDa,理论等电点PI为4.62,N-端具有保守的NAC结构域,高度变异的C-端有一个跨膜结构域(TM)。序列比对和系统进化分析表明,HbNTL1蛋白属于NAC转录因子家族中的NAC2亚族,推测其可能与橡胶树生长发育和胁迫应答有关。

植物NAC转录因子的研究进展

NAC转录因子是特异存在于植物中的具有多种生物功能的新型转录因子.其家族成员N端含有保守NAC结构域(约150个氨基酸),C端为高度变异的转录激活区.NAC基因表达特异,功能涉及植物生长发育、激素调控和胁迫响应等重要方面.现综述植物NAC转录因子的基本结构、生物功能及新型膜相关转录因子的研究.

梭梭NAC转录因子HaNAC38功能及特性分析

从梭梭干旱转录组中获得与干旱相关的NAC转录因子基因HaNAC38,为了研究其功能,以过表达HaNAC38基因拟南芥纯合株系作为对象,比较转基因株系与野生型间的差异,并利用酵母单杂交技术对HaNAC38转录因子可能结合的DNA核心序列进行验证。结果表明,在自然干旱和模拟盐胁迫条件下,过表达HaNAC38基因拟南芥株系生长状况显著优于野生型拟南芥。过表达HaNAC38基因拟南芥株系的种子发芽率、幼苗叶片脯氨酸含量及过氧化氢酶活性均显著高于野生型拟南芥株系,丙二醛含量和过氧化氢含量显著低于野生型拟南芥。由此表明HaNAC38显著增强了拟南芥对于干旱和盐胁迫的耐受能力。酵母单杂交试验结果表明,HaNAC38转录因子可以在酵母体内特异性结合TTGCGT核心序列,并激活下游报告基因的表达。以上结果为明确梭梭HaNAC38转录因子的功能及其调控网络奠定了基础。

橄榄苦苷调节Hippo-YAP/TAZ信号通路对膝骨关节炎大鼠滑膜炎症的影响

目的探讨橄榄苦苷(OL)通过调节Yes相关蛋白(YAP)/转录共激活因子PDZ结合基序(TAZ)信号通路对膝骨关节炎(KOA)大鼠滑膜炎症的影响。方法采用改良的Hulth法构建KOA大鼠模型,并随机分为Model组、低剂量OL组(20 mg/kg)、高剂量OL组(40 mg/kg)、高剂量OL+VT103组(40 mg/kg+10 mg/kg YAP/TAZ抑制剂),每组12只,另取12只大鼠作为正常对照组(NC组)。观察各组大鼠的情况,Lequesne MG评分对各组大鼠行为学进行评估;ELISA试剂盒检测大鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)的表达;苏木精-伊红(HE)染色检测大鼠滑膜组织的病理损伤;qRT-PCR法检测滑膜组织中YAP和TAZ mRNA的表达;Western blot检测大鼠滑膜组织中YAP、磷酸化YAP(p-YAP)、磷酸化TAZ(p-TAZ)、TAZ、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达。结果与NC组比较,Model组大鼠Lequesne MG评分升高、血清中TNF-α和IL-6的表达增加、YAP和TAZ mRNA表达增加、p-YAP/YAP、p-TAZ/TAZ、Bax蛋白表达升高(P<0.05);与Model组比较,低剂量、高剂量OL组大鼠Lequesne MG评分降低、血清中TNF-α和IL-6的表达减少、YAP和TAZ mRNA表达减少、p-YAP/YAP、p-TAZ/TAZ、Bax蛋白表达降低(P<0.05);VT103可明显减弱OL对KOA大鼠滑膜组织的保护作用(P<0.05)。结论OL可能通过激活YAP/TAZ信号通路减轻膝骨关节炎大鼠滑膜炎症。

甘草素调节Hippo/YAP/TAZ信号通路对高糖诱导的肾小球系膜细胞炎症反应及纤维化的影响

目的探讨甘草素(LQ)调节Hippo/Yes相关蛋白(YAP)/含有PDZ结合位点转录共激活因子(TAZ)通路对高糖(HG)诱导的肾小球系膜细胞炎症反应及纤维化的影响。方法将HBZY-1细胞分为对照组(Ct组)、高糖组(HG组)、低剂量LQ组(LQ-L组,20μmmol/L)、高剂量LQ组(LQ-H组,40μmmol/L)、pcDNA3.1组(转染pcDNA3.1)、pcDNA3.1-YAP/TAZ组(转染pcDNA3.1-YAP/TAZ)、LQ-H+pcDNA3.1组(40μmmol/L+转染pcDNA3.1)、LQ-H+pcDNA3.1-YAP/TAZ组(40μmmol/L+转染pcDNA3.1-YAP/TAZ)。qRT-PCR、Western blot检测转染效果。CCK-8法检测细胞增殖;ELISA检测细胞上清中TNF-α、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、IL-1β水平;免疫荧光检测IV型胶原纤维(Collagen IV)、纤连蛋白(FN)蛋白表达;Western blot检测结缔组织生长因子(CTGF)、TGF-β1、YAP1、TAZ蛋白表达。结果HBZY-1细胞成功高表达YAP1/TAZ;与Ct组比较,HG组HBZY-1细胞OD450值、TNF-α、MCP-1、IL-1β、Collagen IV、FN蛋白相对荧光强度、CTGF、TGF-β1、YAP1、TAZ蛋白表达升高(P<0.05);与HG组比较,LQ-L组、LQ-H组HBZY-1细胞OD450值、TNF-α、MCP-1、IL-1β、Collagen IV、FN蛋白相对荧光强度、CTGF、TGF-β1、YAP1、TAZ蛋白表达降低(P<0.05);与HG组、pcDNA3.1组比较,pcDNA3.1-YAP/TAZ组HBZY-1细胞OD450值、TNF-α、MCP-1、IL-1β、Collagen IV、FN蛋白相对荧光强度、CTGF、TGF-β1、YAP1、TAZ蛋白表达升高(P<0.05);pcDNA3.1-YAP/TAZ减弱了高剂量LQ对HG诱导的HBZY-1细胞炎症反应及纤维化的抑制作用。结论LQ可能通过抑制Hippo/YAP/TAZ通路抑制HG诱导的HBZY-1细胞炎症反应及纤维化。

植物膜结合转录因子与胁迫响应

植物膜结合转录因子(membrane-bound transcription factors,MTFs)是植物转录因子家族中一类带有跨膜结构域的转录调控因子。通常它们以休眠的形式定位在细胞膜结构上,在体内或体外信号的作用下,从膜上释放到细胞核中,行使转录因子功能。现就植物膜结合转录因子的结构特点、在环境胁迫响应中的作用及释放机制等最新研究进展进行概述,并对植物膜结合转录因子今后的研究方向和在植物耐逆基因工程中的作用提出展望。

固醇调节元件结合蛋白在肿瘤代谢与肿瘤进展中的作用

肿瘤细胞中的脂质代谢改变是肿瘤细胞重要特征。肿瘤细胞中脂肪酸从头合成途径的增加为肿瘤细胞的增殖提供了生物膜合成所需要的基质、信号脂质等,进而促进肿瘤的侵袭和转移。固醇调节元件结合蛋白（sterol regulatory element-binding proteins,SREBPs）是一种核转录因子,能直接激活参与脂肪酸、三酰甘油、胆固醇合成及磷酸脂合成与摄取等30多个基因的表达。

糖尿病伴乳腺癌患者硫氧还蛋白结合蛋白、前列腺跨膜上皮抗原2、转录因子家族中成员GATA3的表达及血清氧化应激指标的变化

目的研究硫氧还蛋白结合蛋白(TXNIP)、前列腺跨膜上皮抗原2(STEAP2)、转录因子(GATA)家族中成员GATA3与糖尿病伴乳腺癌的关系,并分析患者术前及术后的血清氧化应激指标变化。方法检测45例糖尿病伴乳腺癌患者癌组织及对应癌旁组织中TXNIP、STAMP2、GAT.A3 mRNA表达量、蛋白水平及蛋白阳性表达情况,分析其临床病理特征,以及血清氧化应激指标的变化。结果乳腺癌组织中TXNIP mRNA、STAMP2 mRNA、GATA3 mRNA的相对表达量均下降(P<0.05)。TXNIP、STAMP2、GATA3蛋白在乳腺癌组织中的表达低于癌旁正常组织(P<0.05),且3个指标的表达阳性率为60%、66.7%、73.3%,均高于对应癌旁正常组织中的TXNIP蛋白表达阳性率(2.2%)(P<0.05)。乳腺癌组织中TXNIP、STAMP2、GATA3蛋白表达阳性率均与分化程度、淋巴结转移与临床分级相关(P<0.05)。患者术后血清MDA、髓过氧化物酶(MPO)均呈现先上升后下降变化趋势,SOD及总抗氧化力(TAC)呈现先下降后上升的变化趋势,术后6 d为转折点。结论 TXNIP、STAMP2、GATA3及血清氧化应激指标可能成为糖尿病伴乳腺癌患者诊断及治疗的参考指标。

内质网应激中膜结合转录因子的活化机制研究进展

当细胞遭受各种压力刺激后,内质网会积累大量未折叠蛋白,产生内质网应激,对细胞产生损害。为了削弱这种损害,细胞会通过启动未折叠蛋白应答途径,促进下游基因表达来帮助细胞生存。近年来报道发现膜结合转录因子在其中发挥重要作用。膜结合转录因子是一种特殊的转录因子,具有核定位信号和跨膜域,在内质网应激中被活化进入到细胞核启动未折叠蛋白反应帮助细胞度过不良环境,因此了解这类转录因子的活化机制至关重要。本综述就膜结合转录的3种活化机制:泛素化蛋白酶体介导的RUP途径、胞内蛋白酶介导的RIP途径以及mRNA水平的非常规剪切途径进行概述,并对未来的研究提出展望。

拟南芥和玉米中膜结合bHLH转录因子的鉴定与分析

碱性螺旋-环-螺旋(bHLH)转录因子是一类重要的转录因子,在逆境胁迫响应中起着重要的调控作用。本研究利用5个不同的网站预测拟南芥(Arabidopsis thaliana)和玉米(Zea mays)中的膜结合bHLH转录因子及其跨膜区,并对它们的进化关系、基因结构、保守结构域、启动子顺式作用元件及逆境表达模式等进行了分析。结果表明, 5个网站中预测到的58个假定的膜结合bHLH转录因子(包括22个AtbHLHs和36个ZmbHLHs)被分成2个亚组,相同亚组的膜结合成员在结构及不同发育阶段的表达模式等方面相似;启动子分析及非生物逆境下转录组数据分析表明这些膜结合成员在非生物胁迫响应过程中发挥重要作用。目前对拟南芥和玉米中膜结合bHLH转录因子的研究较少,本文拟为深入研究膜结合AtbHLHs和ZmbHLHs的功能提供参考。

转录因子C/EBPβ在蜕膜化过程中的功能研究及进展

转录因子CCAAT增强子结合蛋白β(CCAAT enhancer-binding proteinβ,C/EBPβ)是一类与DNA增强子区域结合的反式作用因子。近年来研究表明C/EBPβ在子宫中的表达参与了妊娠早期的胚胎发育和蜕膜化过程。C/EBPβ敲除小鼠表现为不孕和对蜕膜化刺激无反应,说明C/EBPβ是调节蜕膜化反应的一个重要调节因子。C/EBPβ调节蜕膜化过程中子宫内膜基质细胞的增殖和分化,促进蜕膜化标志分子催乳素(prolactin,PRL)和胰岛素样生长因子结合蛋白1(insulin-like growth factor binding protein 1,IGFBP-1)的表达。此外,C/EBPβ还可与蜕膜化相关的甾体激素、c AMP、FOXO1等分子相互作用进而调节蜕膜化。本文综述了C/EBPβ在调控蜕膜化过程的研究进展。

巴西橡胶树HbNTL2基因的克隆和表达分析

利用RT–PCR和实时荧光定量PCR技术,对巴西橡胶树膜结合转录因子Hb NTL2进行克隆和表达,并通过酵母试验进行转录激活功能分析。结果表明,Hb NTL2基因的开放阅读框为1 380 bp,编码一个由459个氨基酸组成的蛋白,该蛋白属于NAC转录因子家族中的ANAC001亚族;在第6~172位氨基酸之间含有典型的NAC结构域,第433~453位氨基酸具有跨膜结构域,是膜结合NAC转录因子;Hb NTL2具有转录激活功能,转录激活区在C–末端;Hb NTL2在叶片的表达高于在橡胶树的其他部位,受割胶、茉莉酸（JA）和乙烯（ET）处理以及低温胁迫诱导。综合分析结果表明,Hb NTL2可能参与调控巴西橡胶树的生长发育和胁迫应答过程。

非小细胞肺癌患者血浆 RUNX3、RASSF1A、3-OST-2、DAPK、PTPRO 基因甲基化状态观察

目的观察非小细胞肺癌(NSCLC)患者血浆抑癌基因runt相关转录因子3(RUNX3)、ras相关结构域家族基因1A(RASSF1A)、3-0-硫基转移酶-2(3-OST-2)、死亡相关蛋白激酶(DAPK)、膜结合受体型蛋白酪氨酸磷酸酶O(PTPRO)等基因启动子区域的甲基化状态。方法采用甲基化特异PCR技术对63例NSCLC患者血浆中RUNX3、RASSF1A、3-OST-2、DAPK、PTPRO基因是否甲基化进行观察,并以25例健康人作对照。结果 NSCLC患者血浆中甲基化RUNX3、RASSF1A、3-OST-2、DAPK、PTPRO基因检出率分别为46.0%、50.8%、26.9%、34.9%、41.3%;健康人血浆中甲基化PTPRO基因检出率为12.0%,而甲基化RUNX3、RASSF1A、3-OST-2、DAPK均未检出;两者甲基化RUNX3、RASSF1A、3-OST-2、DAPK、PTPRO基因检出率相比,P均<0.05。NSCLC患者血浆中上述5种甲基化基因联合检测的敏感度为88.9%、特异度为88.0%。血浆甲基化RUNX3基因检出率与NSCLC的病理类型、临床分期以及分化程度有关(P均<0.05);甲基化RASSF1A基因检出率与NSCLC的分化程度有关(P<0.05)。结论 NSCLC患者血浆中甲基化RUNX3、RASSF1A、3-OST-2、DAPK、PTPRO基因检出率明显高于健康人。联合检测血浆中甲基化RUNX3、RASSF1A、3-OST-2、DAPK、PTPRO基因有可能会有助于NSCLC的早期诊断及其生物学行为的判断。

mPGES-1、NF-κB p65在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达及临床意义

【目的】检测膜结合型前列腺素E2合酶1(mPGES-1)和核转录因子κB p65(NF-κB p65)在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)组织中的表达,探究两者与主要临床特征及预后关系,分析它们的潜在的临床价值。【方法】采用免疫组织化学方法,检测83例DLBCL组织中mPGES-1和NF-κB p65的表达,分析两者与临床特征及预后关系。【结果】DLBCL组织中mPGES-1、NF-κB p65高表达所占的比例分别为65.1%(54/83)和73.5%(61/83),且两者的表达水平呈正相关(P<0.05)。这两个蛋白的高表达与B淋巴细胞瘤/白血病蛋白-2(BCL-2)、高Ki-67、高乳酸脱氢酶(LDH)、淋巴结外侵犯、临床晚期和国际预后指数(IPI)评分高有关(P<0.05)。此外,NF-κB p65与多发性骨髓瘤癌基因1(MUM1)、病理类型也有关(P<0.05)。生存分析提示,mPGES-1和NF-κB p65是总生存期(OS)的不良因素,其中NF-κB p65是OS的独立预后因素(P<0.05)。【结论】mPGES-1和NF-κB p65在DLBCL高表达,且两者之间呈正相关,这两种蛋白与DLBCL患者的肿瘤进展和不良预后密切相关。

植物内质网胁迫应答研究进展

内质网是所有分泌蛋白和大部分膜蛋白合成和折叠的场所。当植物处于逆境时,错误折叠和未折叠蛋白会大量积累在内质网,导致内质网胁迫,为了缓解胁迫,细胞会启动保守的未折叠蛋白应答途径去帮助蛋白折叠,或将错误折叠蛋白降解。内质网胁迫应答在植物发育、抗逆、抗病等过程中发挥了重要的作用。总结了近年来内质网胁迫在植物中的相关报道,对膜结合转录因子和内质网胁迫之间的关系进行了阐述,并提出在研究内质网胁迫途径中未解决的问题,以期为进一步理解内质网胁迫和抗逆的关系提供一些参考。

蛋白质

0224066 高半胱氨酸:硫的火焰/Hajjar KA∥J Clin Invest.-2001,107(6).-663～664 医科图0224067 C 反应蛋白在人呼吸道中的表达/Gould J M∥Infect Immun.-2001,69(3).-1747～1754 医科图0224068 兔小肠 M 细胞上的多糖-蛋白质复合物(细胞被膜)可展示 Muc

外文索引

7050→二苯胺/类似物和衍生物;异硫氰酸盐类α4-β1 ntegrin→淋巴细胞归巢受体;结合素类ABPA→变应性支气管肺曲霉病ABT-089→吡啶类;吡咯烷类ABT 538→缬氨酸/类似物和衍生物;噻唑类Acarbose(阿卡波糖)→三糖类Acarbose(拜糖平)→三糖类Aceclofenac(醋氯芬酸)→二氯酚酸Acetamidase(乙酰胺酶)

糖尿病肾病模型中NF-κB与甘露聚糖结合凝集素途径补体激活的关系

目的通过链脲佐菌素(STZ)制备糖尿病肾病大鼠模型,了解糖尿病肾病时甘露聚糖结合凝集素(MBL)途径补体激活情况及其与核转录因子κB(NF-κB)的关系。方法将SD大鼠分为正常对照组(N组)和糖尿病肾病组(DN组)。DN组按55 mg/kg体质量一次性腹腔注射1% STZ,N组一次性腹腔注射等量柠檬酸缓冲液。于实验1、2、4、8周分别处死两组各5只大鼠,测量大鼠的血糖、24 h尿量、24 h尿白蛋白量、24 h尿肌酐、血清肌酐、体质量和肾脏质量,计算肌酐清除率和肾脏肥大指数,采用免疫组化SP法观察各组大鼠1、2、4、8周肾组织MBL,膜攻击复合物(MAC)及NF-κB的表达。结果与正常组相比,DN组大鼠肾小球MBL沉积增多,MAC,NF-κB表达明显增多(P<0.05),并随时间推移继续增高,各时间点差异有统计学意义(P<0.05)。STZ腹腔注射所致DN组大鼠的肾小球MBL,NF-κB的表达水平成显著正相关(r=0.973,P<0.01)。结论甘露聚糖结合凝集素途径的补体激活参与了糖尿病肾病的发生发展,可能为下一步的诊断治疗提供新的方向。