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酸枣仁皂苷A对缺血缺氧再灌注的H9C2细胞CD38/NAD^(+)信号通路相关因子表达的影响
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作者 胡怡然 瞿惠燕 +2 位作者 郭佳莹 杨涛 周华 《中国老年学杂志》 北大核心 2024年第2期382-387,共6页
目的观察酸枣仁皂苷A对缺血缺氧再灌注的H9C2细胞CD38/烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD^(+))信号通路相关因子表达的影响。方法建立H9C2细胞缺血缺氧再灌注模型,将H9C2细胞分为正常组、模型组、CD38抑制剂+中药单体组和中药单体组,使用CCK-8... 目的观察酸枣仁皂苷A对缺血缺氧再灌注的H9C2细胞CD38/烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD^(+))信号通路相关因子表达的影响。方法建立H9C2细胞缺血缺氧再灌注模型,将H9C2细胞分为正常组、模型组、CD38抑制剂+中药单体组和中药单体组,使用CCK-8法筛选中药单体干预的最佳浓度并检测细胞活力;生化法检测三磷酸腺苷(ATP)含量、活性氧(ROS)水平、NAD^(+)、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)含量和NAD^(+)/NADH比值;酶联免疫法吸附试验(ELISA)检测炎症因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α含量;Western印迹检测CD38、沉默信息调节因子2同源蛋白(SIRT)3和NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白(NLRP)3蛋白表达。结果与正常组相比,模型组细胞活力明显下降,ATP含量明显下降,ROS水平及炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α含量明显增加,NAD^(+)含量及NAD^(+)/NADH比值明显下降,CD38和NLRP3蛋白表达明显增加,SIRT3蛋白表达明显下降(均P<0.05);与模型组相比,中药单体组细胞活力明显上升,ATP含量明显增加,ROS水平明显下降,炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α含量明显减少,NAD^(+)含量及NAD^(+)/NADH比值明显增高,CD38和NLRP3蛋白表达下降,SIRT3蛋白表达明显增加(均P<0.05);与中药单体组相比,CD38抑制剂+中药单体组细胞活力明显上升,ATP含量明显增加,ROS水平明显下降,炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α含量明显减少,NAD^(+)含量及NAD^(+)/NADH比值明显增高,NLRP3蛋白表达明显下降,SIRT3蛋白表达明显增加(均P<0.05)。结论酸枣仁皂苷A能够改善H9C2细胞的缺血缺氧再灌注损伤,其机制可能与抑制CD38表达,改善能量代谢障碍和线粒体功能,减缓炎症反应有关。 展开更多
关键词 酸枣仁皂苷A 缺血缺氧再灌注 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD^(+)) CD38
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奇迹女侠NAD^(+)——烟酰胺腺嘌呤二核苷酸
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作者 李玫瑾 傅熙容 +2 位作者 郑雪 刘语涵 李宝 《大学化学》 CAS 2024年第9期35-39,共5页
NAD^(+)(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸)是一种重要的生物分子,它在细胞内起着关键的能量传递和代谢调控作用。近年来,NAD^(+)在医学和健康领域的研究备受关注,尤其是在衰老、代谢疾病和癌症治疗方面,与它相关的食物也逐渐变成了当代人们餐桌上... NAD^(+)(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸)是一种重要的生物分子,它在细胞内起着关键的能量传递和代谢调控作用。近年来,NAD^(+)在医学和健康领域的研究备受关注,尤其是在衰老、代谢疾病和癌症治疗方面,与它相关的食物也逐渐变成了当代人们餐桌上的新宠。本文用拟人化的口吻介绍了NAD^(+)的化学结构、生物功能以及与健康相关的最新研究发展,分析了它从抗衰老领域转型临床运用的潜力。 展开更多
关键词 NAD^(+)性质 氧化还原 抗衰老 炎症免疫 疾病治疗
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Dynamic Non-Invasive Detection of NADH Based on Blood Flow-Mediated Skin Fluorescence (FMSF) Method
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作者 Peng Liu Tengfei Bi +2 位作者 Gongzhi Du Long Yan Huayi Hou 《Open Journal of Applied Sciences》 2024年第6期1437-1453,共17页
Nicotinamide adenine dinucleotide (NADH/NAD+) is involved in important biochemical reactions in human metabolism, including participation in energy production by mitochondria. The changes in fluorescence intensity as ... Nicotinamide adenine dinucleotide (NADH/NAD+) is involved in important biochemical reactions in human metabolism, including participation in energy production by mitochondria. The changes in fluorescence intensity as a function of time in response to blocking and releasing of blood flow in a forearm are used as a measure of oxygen transport with blood to the tissue, which directly correlates with the skin microcirculation status. In this paper, a non-invasive dynamic monitoring system based on blood flow-mediated skin fluorescence (FMSF) technology is developed to monitor the NADH fluorescence intensity of skin tissue during the process of blocking reactive hyperemia. Simultaneously, laser speckle contrast imaging (LSCI) and laser Doppler flowmetry (LDF) were used to observe blood flow, blood oxygen saturation (SOt2) and relative amount of hemoglobin (rHb) during the measurement process, which helped to explore NADH dynamics relevant physiological changes. A variety of parameters have been derived to describe NADH fluorescence curve based on the FMSF device. The experimental results are conducive to understanding the NADH measurement and the physiological processes related to it, which help FMSF to be a great avenue for in vivo physiological, clinical and pharmacological research on mitochondrial metabolism. 展开更多
关键词 Reduced Nicotinamide Adenine Dinucleotide (nadh) Flow-Mediated Skin Fluorescence (FMSF) Laser Doppler Flowmetry (LDF) Blood Flow
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高效液相色谱法测定骨骼肌ATP、ADP、AMP、NAD^+、NADH含量 被引量:25
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作者 洪平 刘虎威 +2 位作者 靳光华 黎燕 杨奎生 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期57-60,共4页
采用高效液相色谱法测定骨骼肌腺嘌呤核苷酸和辅酶Ⅰ含量。高压液相系 统包括:惠普公司ZOBAX-C18反相柱5mm×12cm,590UV检测器。流动相为220mmol/L磷酸钾缓冲液,内含10%甲醇,用四丁基氢氧化... 采用高效液相色谱法测定骨骼肌腺嘌呤核苷酸和辅酶Ⅰ含量。高压液相系 统包括:惠普公司ZOBAX-C18反相柱5mm×12cm,590UV检测器。流动相为220mmol/L磷酸钾缓冲液,内含10%甲醇,用四丁基氢氧化胺TBAH调pH至65。等比洗脱,流速为08ml/min。检测波长为254nm。所有样品和标准品在进样前均用045μm孔径的虑膜过滤后进样5μl作色谱分析。结果表明:HPLC可以同时测定ATP、ADP、AMP、NAD+、NADH,分离效率高,操作简便,快速每个样品仅需15分钟,而且,重现性好,定性可靠,定量准确。 展开更多
关键词 高效液相色谱法 骨骼肌 ATP ADP AMP NAD^+ nadh 含量测定
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NAD^+/NADH代谢机制研究进展 被引量:12
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作者 李达 伦永志 周士胜 《生物技术通讯》 CAS 2010年第1期98-102,共5页
NAD+/NADH是细胞能量代谢所必需的辅酶,小到细胞的各种生命活动,大到整个生命结构的平衡,都需要能量来维持。同时,细胞的氧化还原状态,特别是NAD+/NADH的水平直接影响着细胞的节律、衰老、癌变和死亡等重大生命过程。故而有关细胞内NAD+... NAD+/NADH是细胞能量代谢所必需的辅酶,小到细胞的各种生命活动,大到整个生命结构的平衡,都需要能量来维持。同时,细胞的氧化还原状态,特别是NAD+/NADH的水平直接影响着细胞的节律、衰老、癌变和死亡等重大生命过程。故而有关细胞内NAD+或NADH代谢的研究近年在国际上形成了一个新的热点。我们以NAD+/NADH代谢为重点,综述国内外关于该机制的研究现状。 展开更多
关键词 NAD+ nadh 代谢
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乙醇发酵中酿酒酵母辅酶NAD^+及NADH测定方法 被引量:6
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作者 李骆冰 王永红 +2 位作者 庄英萍 储炬 张嗣良 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期287-294,共8页
乙醇发酵过程中酿酒酵母细胞辅酶NAD+和NADH质量分数及其比例反映了胞内的氧化还原状态和细胞代谢活性,具有重要的生理意义。作者主要研究了加热萃取、珠磨破碎、反复冻融破碎3种方法对乙醇发酵过程酿酒酵母细胞辅酶NAD+和NADH提取和测... 乙醇发酵过程中酿酒酵母细胞辅酶NAD+和NADH质量分数及其比例反映了胞内的氧化还原状态和细胞代谢活性,具有重要的生理意义。作者主要研究了加热萃取、珠磨破碎、反复冻融破碎3种方法对乙醇发酵过程酿酒酵母细胞辅酶NAD+和NADH提取和测定的影响,提出基于珠磨破碎、辅以加酸或碱并加热的萃取模式,以及合适的酶循环反应体系,从而建立了高效的胞内NAD+和NADH检测方法。 展开更多
关键词 酿酒酵母 NAD+/nadh 珠磨破碎法 酶循环法
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臭氧参与NAD^+/NADH氧化还原反应机理的理论研究
7
作者 田文欣 《重庆理工大学学报(自然科学)》 CAS 2013年第8期62-65,共4页
NAD+/NADH是细胞能量代谢所必需的辅酶,NAD+/NADH的水平对细胞的节律、衰老、癌变和死亡等重大生命过程有着直接的影响。臭氧作为外来因素可使NADH进行刺激响应。介绍了NADHHE臭氧对生物分子的作用机理,对臭氧直接参与NAD+/NADH氧化还... NAD+/NADH是细胞能量代谢所必需的辅酶,NAD+/NADH的水平对细胞的节律、衰老、癌变和死亡等重大生命过程有着直接的影响。臭氧作为外来因素可使NADH进行刺激响应。介绍了NADHHE臭氧对生物分子的作用机理,对臭氧直接参与NAD+/NADH氧化还原反应的机理进行了理论研究,为进一步的实验研究提供参考。 展开更多
关键词 nadh 臭氧 氧化还原反应
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调控NADH/NAD^+对重组谷氨酸棒杆菌产L-丝氨酸的影响 被引量:2
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作者 朱加粉 陈紫薇 +2 位作者 张晓梅 史劲松 许正宏 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期54-59,共6页
在谷氨酸棒杆菌中,L-丝氨酸由糖酵解中间产物3-磷酸甘油酸经过3步反应生成,这个过程产生2个NADH,而L-丝氨酸的合成过程并不涉及NAD^+的生成,多余的NADH是否会影响菌株的生长及产L-丝氨酸?该研究通过外源添加NAD^+的前体物质烟酸,内源表... 在谷氨酸棒杆菌中,L-丝氨酸由糖酵解中间产物3-磷酸甘油酸经过3步反应生成,这个过程产生2个NADH,而L-丝氨酸的合成过程并不涉及NAD^+的生成,多余的NADH是否会影响菌株的生长及产L-丝氨酸?该研究通过外源添加NAD^+的前体物质烟酸,内源表达NADH氧化酶编码基因nox A,考察调控NADH/NAD^+对Corynbacterium glutamicum SYPS-062 33aΔSSAAI生长和产L-丝氨酸的影响。结果表明,添加不同浓度烟酸,菌株的L-丝氨酸产量、生物量及糖耗较未添加时略有提高。而通过加强表达NADH氧化酶编码基因nox A,构建重组菌Corynbacterium glutamicum SYPS-062 33aΔSSAAI-nox A,重组菌中NADH氧化酶比酶活是出发菌的11.6倍,L-丝氨酸产量达到28.93 g/L,较出发菌提高9.0%,糖酸转化率达到0.29 g/g蔗糖,较出发菌提高7.4%,OD562最大值为51.38,较出发菌提高6.6%,说明NADH氧化酶的过表达能够促进重组菌株的生长及碳源利用,提高菌株的L-丝氨酸产量。 展开更多
关键词 谷氨酸棒杆菌 L-丝氨酸 nadh氧化酶 nadh NAD+
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NAD^(+)代谢机制及其对衰老相关疾病影响研究进展
9
作者 杨鸿辉 孙媛 +1 位作者 王新博 延卫 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期101-108,共8页
综述NAD^(+)代谢机制及其对衰老相关疾病的影响研究进展。重点从NAD^(+)的生物合成途径、消耗途径及其调控机制等方面阐述NAD^(+)参与的信号通路和细胞过程,以及它在健康与疾病中的作用,并且以NAD^(+)代谢网络中前体物质和关键酶的作用... 综述NAD^(+)代谢机制及其对衰老相关疾病的影响研究进展。重点从NAD^(+)的生物合成途径、消耗途径及其调控机制等方面阐述NAD^(+)参与的信号通路和细胞过程,以及它在健康与疾病中的作用,并且以NAD^(+)代谢网络中前体物质和关键酶的作用机理为依据,探讨NAD^(+)代谢调控在衰老相关疾病中的潜在治疗方法,为理解NAD^(+)水平下降和衰老相关疾病之间复杂的因果关系提供新的视角;同时从NAD^(+)及其前体的分布和运输、有毒代谢物的产生和修复、NAD^(+)代谢动态的监测和测量等方面阐述NAD^(+)研究发展过程中存在的瓶颈。最后展望以NAD^(+)为靶点进行疾病治疗和药物开发的广阔前景。 展开更多
关键词 NAD^(+) 生物合成 辅酶 衰老
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基于线粒体NADH1基因对棘胸蛙养殖群体的遗传多样性分析
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作者 章海鑫 丁国栋 +3 位作者 吴子君 习宏斌 史小元 张燕萍 《江西水产科技》 2023年第6期1-6,共6页
以江西省峡江、靖安、金溪、明月山、于都5个地理群体138只棘胸蛙为研究对象,通过PCR扩增获得序列长度为1187 bp的线粒体NADH1基因全序列,共检测出变异位点101个,其中简约信息位点96个,单突变位点5个,无缺失和插入。138条序列共定义了4... 以江西省峡江、靖安、金溪、明月山、于都5个地理群体138只棘胸蛙为研究对象,通过PCR扩增获得序列长度为1187 bp的线粒体NADH1基因全序列,共检测出变异位点101个,其中简约信息位点96个,单突变位点5个,无缺失和插入。138条序列共定义了41个单倍型,平均单倍型多样性为0.956;平均核苷酸多样性为0.0232,平均核苷酸差异数(K)为27.514。群体间的平均遗传距离为0.024~0.035,除峡江群体与于都群体外遗传分化指数F_(st)值均大于0.05,群体间存在显著的遗传分化。AMOVA结果显示,江西省棘胸蛙变异主要来源于群体内(63.06%)。单倍型系统发育树显示,41个单倍型NJ聚类为3个分支。中性检验结果表明5个棘胸蛙养殖群体历史上未经历种群扩张。 展开更多
关键词 棘胸蛙 nadh1 养殖群体 遗传多样性
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滑液囊支原体NADH氧化酶单克隆抗体的制备
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作者 刘晓涵 祁晶晶 +9 位作者 胡增金 李浩然 宋翠萍 尚原冰 王少辉 田明星 李涛 丁铲 蔡玉梅 于圣青 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2023年第6期20-27,共8页
为制备滑液囊支原体NADH氧化酶(NOX)的单克隆抗体。将本实验室前期构建好的重组菌株E.coliBL21(pET28a-NOX),进行诱导表达,经过纯化后免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经间接ELISA筛选结合有限稀释法克隆化,得到1株... 为制备滑液囊支原体NADH氧化酶(NOX)的单克隆抗体。将本实验室前期构建好的重组菌株E.coliBL21(pET28a-NOX),进行诱导表达,经过纯化后免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经间接ELISA筛选结合有限稀释法克隆化,得到1株稳定分泌抗MSNOX抗体的杂交瘤细胞株,命名为2F4。单克隆抗体亚型鉴定结果显示,该单克隆抗体为IgG2b亚类,间接ELISA测定单克隆抗体腹水效价为1∶2048000。经Westernblot和悬浮免疫荧光试验鉴定,该株单克隆抗体与MS不同分离株均发生特异性反应,与其他禽致病菌不发生反应。通过染色体分析,该杂交瘤细胞株2F4有98±5条染色体,符合杂交瘤细胞染色体的数目,证实细胞融合成功。本研究成功制备NADH氧化酶单克隆抗体,为建立滑液囊支原体的检测方法及进一步研究NADH氧化酶在MS致病机制中的作用提供了重要的生物材料。 展开更多
关键词 滑液支原体 nadh氧化酶 单克隆抗体
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基于NAD^+/NADH比率荧光探针的乳酸检测法
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作者 汪道成 朱倩 +1 位作者 赵玉政 杨弋 《华东理工大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期570-575,共6页
结合氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸/还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+/NADH)比率荧光探针SoNar与酶法分析技术,建立了一种灵敏的乳酸检测方法,并进一步对影响检测性能的几个因素,如pH、温度、底物浓度、SoNar浓度等进行了优化.结果显示,... 结合氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸/还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+/NADH)比率荧光探针SoNar与酶法分析技术,建立了一种灵敏的乳酸检测方法,并进一步对影响检测性能的几个因素,如pH、温度、底物浓度、SoNar浓度等进行了优化.结果显示,该方法的检测限(LOD)为2.60μmol/L,定量限(LOQ)为8.67μmol/L,不同时间重复测定的标准偏差(RSD)为2.37%,乳酸质量浓度0~1000μmol/L范围内的Z因子值为0.82,表明该方法具备很好的稳定性和重复性.与目前常用的基于MTT-PMS的酶偶联分析法相比,本文所建立的乳酸检测法灵敏度更高,特异性更好,且生物兼容性更强. 展开更多
关键词 NAD^+/nadh比率荧光 SONAR 酶分析法 乳酸检测
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具有电子转移路径的金属化氮化碳选择性再生NADH和光酶偶联CO_(2)还原
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作者 张鹏业 董文锦 +7 位作者 张媛媛 赵立楠 苑华磊 王传军 王文硕 王含笑 张洪禹 刘健 《Chinese Journal of Catalysis》 SCIE EI CAS CSCD 2023年第11期188-198,共11页
将CO_(2)转化为燃料和化学品被认为是缓解能源危机的一种有效策略.受自然光合作用的启发,光酶偶联结合了光催化和酶催化的优点,在绿色生物制造中具有较好的应用前景.铑(Rh)络合物是选择性再生还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(M-NADH)的关键... 将CO_(2)转化为燃料和化学品被认为是缓解能源危机的一种有效策略.受自然光合作用的启发,光酶偶联结合了光催化和酶催化的优点,在绿色生物制造中具有较好的应用前景.铑(Rh)络合物是选择性再生还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(M-NADH)的关键介体,其固定化可以提高体系的可持续性,并有效缩短电子传递路径,因而受到广泛关注.本文制备了联吡啶功能化的金属化氮化碳(PCNRhbpy_(4)),用于光酶偶联催化CO_(2)还原.首先以双氰胺为前驱体,通过两步退火法制备氮化碳(PCN),再与5,5’-二氨基-2,2’-联吡啶(DABP)进一步热缩合,然后锚定[Cp*RhCl2]2获得PCNRhbpy4,并通过透射电镜、扫描电镜、粉末X射线衍射、紫外可见光吸收光谱、瞬态表面光电压和荧光发射光谱等进行表征.结果表明,合成的PCNRhbpy4材料具有掺杂石墨烯结构,且通过残余的末端联吡啶结构均匀地固定了Rh络合物.以PCNRhbpy4作为光催化剂实现了1,4-NADH的100%选择性再生,并在2.0 min内实现了80%的NADH再生.进一步耦合固定在疏水膜上的甲酸脱氢酶,可以有效地将CO_(2)还原为甲酸盐,48 h内甲酸盐浓度达到7 mmol L^(-1).此外,光催化剂的循环实验结果表明,PCNRhbpy4具有较高的稳定性.反应机理研究结果表明,光生电子经N-掺杂石墨烯传递到Rh活性位点,并结合溶液中的质子,随后氢负离子通过环滑移机制传递到NAD+,高选择性再生1,4-NADH.综上,本文为Rh的固定化开辟了一条新路径,实现了光酶催化CO_(2)还原,为光酶催化在绿色生物制造的实际应用提供参考. 展开更多
关键词 仿生金属化 nadh再生 光酶偶联催化 CO_(2)还原 电荷转移
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一例基于NADH5标记的豹亚种鉴别
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作者 肖锐 周言言 +2 位作者 侯超鹏 田军东 田澍辽 《中文科技期刊数据库(全文版)自然科学》 2023年第6期70-73,共4页
以动物园为代表的圈养环境是开展野生动物迁地保护、繁育、科普宣传的重要场地,亦为开展科学研究等提供了宝贵资源。而圈养环境中的国家一级重点保护动物豹(Pantera pardus)的遗传资源则为了解其野生种群提供了窗口。本研究以郑州市动... 以动物园为代表的圈养环境是开展野生动物迁地保护、繁育、科普宣传的重要场地,亦为开展科学研究等提供了宝贵资源。而圈养环境中的国家一级重点保护动物豹(Pantera pardus)的遗传资源则为了解其野生种群提供了窗口。本研究以郑州市动物园圈养的1只雌性豹为对象,通过提取该个体的基因组DNA并进行PCR扩增与测序,利用所获得的NADH5基因片段探究该个体属何豹亚种。经与NCBI数据库比对以及系统发生分析,本研究显示该个体属于豹华北亚种(P. p. fontanierii)。基于本研究,建议开展国内圈养豹遗传资源调查,以便系统地开展圈养豹的保护、繁育工作。 展开更多
关键词 豹华北亚种 郑州市动物园 nadh5基因
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辅酶Ⅰ(NAD^+—NADH)与运动能力
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作者 冯连世 杨奎生 《山东体育科技》 1992年第2期35-41,共7页
辅酶Ⅰ在细胞内以氧化型(NAD^+)和还原型(NADH)两种形式存在。前者主要分布在细胞浆内,后者主要分布在线粒体内。在细胞代谢中辅酶Ⅰ和辅酶Ⅱ(NADP^+—NADPH)的氧化型和还原型之间的相互转化,起着调节代谢的核心作用。肌肉收缩时的能量... 辅酶Ⅰ在细胞内以氧化型(NAD^+)和还原型(NADH)两种形式存在。前者主要分布在细胞浆内,后者主要分布在线粒体内。在细胞代谢中辅酶Ⅰ和辅酶Ⅱ(NADP^+—NADPH)的氧化型和还原型之间的相互转化,起着调节代谢的核心作用。肌肉收缩时的能量代谢中尤其以 NAD^+—NADH 的相互转化及有关调节机制显得更为重要;NA-DH 的再氧化可以给运动肌提供能量,因此, 展开更多
关键词 nadh 辅酶Ⅰ 细胞代谢 运动强度 细胞浆 氧化型 线粒体膜 辅酶Ⅱ 呼吸链 还原型
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浅谈NADH与NADPH
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作者 刘爽 《中学生物学》 2023年第4期3-4,共2页
NADH和NADPH是细胞代谢过程中的重要辅酶,从物质本质角度认识两种辅酶的作用机理,解答教学过程中学生提出的问题。
关键词 nadh NADPH 辅酶Ⅰ 辅酶Ⅱ [H]
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过量表达NADH氧化酶加速光滑球拟酵母合成丙酮酸 被引量:5
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作者 董志姚 李秀芬 +2 位作者 刘立明 堵国成 陈坚 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期1061-1066,共6页
【目的】进一步提高光滑球拟酵母(Torulopsis glabrata)发酵生产丙酮酸的生产强度。【方法】将来源于乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)中编码形成水的NADH氧化酶noxE基因过量表达于丙酮酸工业生产菌株T.glabrata CCTCCM202019中,获得了一... 【目的】进一步提高光滑球拟酵母(Torulopsis glabrata)发酵生产丙酮酸的生产强度。【方法】将来源于乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)中编码形成水的NADH氧化酶noxE基因过量表达于丙酮酸工业生产菌株T.glabrata CCTCCM202019中,获得了一株NADH氧化酶活性为34.8U/mg蛋白的重组菌T.glabrata-PDnoxE。【结果】与出发菌株T.glabrata CCTCC M202019相比,细胞浓度、葡萄糖消耗速率和丙酮酸生产强度分别提高了168%、44.9%和12%,发酵进行到36h葡萄糖消耗完毕。补加50g/L葡萄糖继续发酵20h,则使丙酮酸浓度提高到67.2g/L。葡萄糖消耗速度和丙酮酸生产强度增加的原因在于形成水的NADH氧化酶过量表达,导致NADH和ATP含量分别降低了18.1%和15.8%,而NAD+增加了11.1%。【结论】增加细胞内NAD+含量能有效地提高酵母细胞葡萄糖的代谢速度及目标代谢产物的生产强度。 展开更多
关键词 光滑球拟酵母 nadh氧化酶 nadh
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甲酸脱氢酶用于辅酶NADH再生的研究进展 被引量:27
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作者 黄志华 刘铭 +2 位作者 王宝光 张延平 曹竹安 《过程工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第6期1011-1016,共6页
NADH依赖型氧化还原酶广泛应用于精细化学品和手性化合物的生物合成,其中辅酶NADH作为还原当量起着关键的作用,NADH的再生关系到生物氧化还原过程能否进行.甲酸脱氢酶在辅酶NADH再生中的应用是目前代谢工程领域研究的热点之一.本工作回... NADH依赖型氧化还原酶广泛应用于精细化学品和手性化合物的生物合成,其中辅酶NADH作为还原当量起着关键的作用,NADH的再生关系到生物氧化还原过程能否进行.甲酸脱氢酶在辅酶NADH再生中的应用是目前代谢工程领域研究的热点之一.本工作回顾了甲酸脱氢酶的来源和氨基酸序列、酶的理化性质和催化机理等方面的研究进展,从化学稳定性、热稳定性和成本等方面阐述了甲酸脱氢酶在辅酶再生系统中的应用,讨论了甲酸脱氢酶用于辅酶再生的代谢工程平台的发展趋势,并对研究发展方向提出了一些设想. 展开更多
关键词 甲酸脱氢酶 辅酶(nadh)再生 氧化还原反应
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利用光驱动的生物杂合系统实现CO_(2)转化生产化学品
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作者 干雅梅 柴甜甜 +5 位作者 张健 高聪 宋伟 吴静 刘立明 陈修来 《Chinese Journal of Catalysis》 SCIE CAS CSCD 2024年第5期294-303,共10页
太阳能作为清洁能源之一,为缓解化石燃料枯竭和温室气体排放等问题提供了一种高效、经济、可持续的解决方案.自然界中的植物和光合微生物通过自身的光合系统收集并转化太阳能,从而生产生物燃料和生物化学品.然而,由于自然光合系统存在... 太阳能作为清洁能源之一,为缓解化石燃料枯竭和温室气体排放等问题提供了一种高效、经济、可持续的解决方案.自然界中的植物和光合微生物通过自身的光合系统收集并转化太阳能,从而生产生物燃料和生物化学品.然而,由于自然光合系统存在光吸收范围相对较窄、光生电子在传输过程中易损耗等问题,限制了太阳能到化学品的转化效率.为了解决上述难题,科研人员模仿自然光合作用中的关键部分,探索构建人工光合系统,相关研究引起了广泛关注.本文通过将碲化镉量子点(CdTe QDs)与大肠杆菌(E.coli)相耦合,构建了一种光驱动无机-生物杂合系统(IBPHS),用于捕获太阳能并驱动CO_(2)转化合成高价值化学品.该系统主要由光催化模块和生物催化模块组成.在光催化模块中,通过生物合成CdTe QDs进行光能捕获,并将其转化为电子.通过敲除E.coli的Cd2+外排蛋白(ZNTA)编码基因,实现了E.coli胞内Cd2+过量积累.通过“时空耦合”方式,并借助共聚焦显微镜、高分辨率透射电镜和X射线能谱分析,确认了CdTe QDs在E.coli胞内的组装合成.利用紫外-可见分光光度计研究了光催化模块对光子的吸收能力.结果表明,光催化模块的吸收峰位于400-420 nm.利用瞬时光电流,评估了光催化模块的光生电子能力.实验发现,该模块可以产生0.07μA光电流,表明完成了光催化模块的构建.在生物催化模块中,将光催化模块产生的电子用于还原NAD+再生NADH.采用NADH生物传感器,分析了E.coli胞内NADH含量,结果表明,在蓝光照射下E.coli胞内NADH含量比黑暗条件下提高了5.1倍.在此基础上,通过表达NADH依赖型乳酸脱氢酶(LDH)将丙酮酸还原为乳酸,在蓝光光照下乳酸积累量达到了0.44 g/L,而黑暗条件下无乳酸积累,从而验证了生物催化模块的有效性.基于光催化模块和生物催化模块,进一步组装构建了IBPSH,用于驱动CO_(2)还原合成甲酸和丙酮酸.在蓝光照射下,IBPHS能够合成0.65 g/L甲酸和0.18 g/L丙酮酸,其CO_(2)利用速率分别达到51.98 mg/gDCW/h和21.92 mg/gDCW/h,超过了光合细菌.综上所述,本文利用光催化模块与生物催化模块相耦合的方式,组装构建了一种新型的人工光合系统,实现了光驱动CO_(2)还原合成高附加值化学品,为理性设计材料-生物杂合系统提供了借鉴,同时也为挖掘绿色生物制造潜力、开发太阳能化学制造平台提供参考. 展开更多
关键词 人工光合系统 CO_(2)利用 光能转换 CdTe生物合成 nadh再生
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阿魏酸聚合修饰玻碳电极的制备及其对NADH的催化氧化 被引量:16
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作者 张玉忠 赵红 袁倬斌 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2003年第10期1765-1769,共5页
研究了阿魏酸修饰电极的制备、性质及对 NADH的电催化作用 .该电极在 0 .1 mol/L磷酸缓冲溶液( p H =6.60 )中 ,于 -0 .1~ +0 .5 0 V ( vs. Ag/Ag Cl)电位范围内呈现一对氧化还原峰 ,其式量电位 E0 为+0 .1 88V( vs.Ag/Ag Cl) ,且 E0 ... 研究了阿魏酸修饰电极的制备、性质及对 NADH的电催化作用 .该电极在 0 .1 mol/L磷酸缓冲溶液( p H =6.60 )中 ,于 -0 .1~ +0 .5 0 V ( vs. Ag/Ag Cl)电位范围内呈现一对氧化还原峰 ,其式量电位 E0 为+0 .1 88V( vs.Ag/Ag Cl) ,且 E0 随 p H增加而负向移动 .电子转移系数为 0 .496,表观电极反应速率常数( ks)为 6.6s-1.电极反应的电子数为 1且有 1个质子参与 .该修饰电极对 NADH氧化具有很好的催化作用 .在 NADH存在下 ,电极过程由扩散控制 ,扩散系数为 1 .76× 1 0 -6cm2 /s.NADH浓度在 0 .0 1~ 5 .0 mmol/L范围内与峰电流呈现良好的线性关系 .通过计时安培法测得催化速率常数为 6.82× 1 0 3 mol-1· L· s-1. 展开更多
关键词 阿魏酸 电聚合 修饰玻碳电极 制备 nadh 催化氧化 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 电催化
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