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植物NADP^+-依赖型异柠檬酸脱氢酶的分子进化及功能研究进展 被引量:3
1
作者 王鹏 赵旵军 +1 位作者 翟羽佳 朱国萍 《生物学杂志》 CAS CSCD 2009年第3期45-48,共4页
高等植物NADP+-依赖型异柠檬酸脱氢酶(ICDHs)定位于细胞质、线粒体、叶绿体和过氧化物酶体等植物细胞的不同部位,由不同的基因编码,属于一个高度保守的多同工酶蛋白家族。对近年来关于植物NADP+-依赖型异柠檬酸脱氢酶的分子进化及功能... 高等植物NADP+-依赖型异柠檬酸脱氢酶(ICDHs)定位于细胞质、线粒体、叶绿体和过氧化物酶体等植物细胞的不同部位,由不同的基因编码,属于一个高度保守的多同工酶蛋白家族。对近年来关于植物NADP+-依赖型异柠檬酸脱氢酶的分子进化及功能研究进行综述,同时提出了未来植物ICDHs的研究重点和方向。最新的分子系统学分析显示,植物中不同细胞定位的ICDH同工酶聚在各自相应的进化枝上,动物或植物中不同细胞器的ICDH同工酶均来源于各自祖先ICDH基因的独立倍增。最新的功能研究表明,ICDHs催化合成的α-酮戊二酸可为植物细胞对氨的吸收同化提供碳骨架,而NADPH可以维系细胞内的氧化还原平衡,帮助植物抵御氧化胁迫。 展开更多
关键词 高等植物 异柠檬酸脱氢酶 NADP 分子进化 功能
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从头算分析NAD^+及NADP^+的电子传递 被引量:2
2
作者 宋远志 《淮阴师范学院学报(自然科学版)》 CAS 2004年第1期50-53,67,共5页
用HF从头算计算NAD+及NADP+及其还原产物NADH及NADPH分子的绝对能量、电荷分布、前线轨道能量、偶级距、键长、电子自旋伸展空间,并讨论了空间构形与电子传递的关系,提出了NAD+及NADP+在电极和生物氧化过程中传递电子的机理.
关键词 NAD^+ NADP^+ 电子传递 从头算
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外源NADP^+和NADPH缓解番茄幼苗NaCl胁迫伤害的初步研究 被引量:1
3
作者 莘冰茹 王松 +2 位作者 周艳 张健伟 刘慧英 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期420-428,共9页
采用营养液培法,以加工番茄品种‘里格尔87-5’为材料,通过对NaCl胁迫下加工番茄幼苗叶片分别喷施5、10、15μmol·L^(-1)NADP^+和NADPH,研究外源NADP^+、NADPH对NaCl胁迫下加工番茄幼苗生长及其抗逆生理指标的影响。结果表明:外源... 采用营养液培法,以加工番茄品种‘里格尔87-5’为材料,通过对NaCl胁迫下加工番茄幼苗叶片分别喷施5、10、15μmol·L^(-1)NADP^+和NADPH,研究外源NADP^+、NADPH对NaCl胁迫下加工番茄幼苗生长及其抗逆生理指标的影响。结果表明:外源喷施NADP^+、NADPH均能改善NaCl处理下加工番茄幼苗的生长性状,增加叶片叶绿素含量,提高根系活力和叶片过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性,降低丙二醛(MDA)质量摩尔浓度。通过不同处理综合指标总加权值比较评价得出:NaCl胁迫下喷施5μmol·L^(-1) NADPH的效果最佳,其次为10μmol·L^(-1)NADP^+。可见,外源喷施NADP^+、NADPH通过增加色素含量,可提高抗氧化酶活性,降低膜脂过氧化水平,在一定程度上缓解盐胁迫对植株的伤害,从而增强对盐胁迫的适应性。 展开更多
关键词 盐胁迫 加工番茄 NADP+ NADPH
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表达NADP^+型甲酸脱氢酶重组大肠杆菌的高密度发酵研究 被引量:5
4
作者 赵翔 钟浩 +2 位作者 孙超 汤利文 许岗 《发酵科技通讯》 CAS 2020年第2期72-75,共4页
采用5 L发酵罐对重组大肠杆菌E.coli BL21(DE3)/pET30-PFDH外源表达NADP^+型甲酸脱氢酶进行高密度发酵研究。通过对培养基、溶氧控制、诱导温度、诱导pH、诱导种类和时机的系统优化,在DO-star补料方式下,甲酸脱氢酶发酵液的酶活达到56.9... 采用5 L发酵罐对重组大肠杆菌E.coli BL21(DE3)/pET30-PFDH外源表达NADP^+型甲酸脱氢酶进行高密度发酵研究。通过对培养基、溶氧控制、诱导温度、诱导pH、诱导种类和时机的系统优化,在DO-star补料方式下,甲酸脱氢酶发酵液的酶活达到56.9 U/mL,相对于优化前提高了47.8%。在此基础上,利用200 L中试发酵罐对甲酸脱氢酶重组菌进行放大培养及工艺验证,重复6个批次,平均菌体质量浓度和平均酶活达到201.1 g/L和52.3 U/mL。优化后的高密度发酵条件放大重复性好,具备产业化前景。 展开更多
关键词 重组大肠杆菌 NADP^+型甲酸脱氢酶 高密度发酵 诱导
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GapN诱导型表达小白链霉菌的构建及其对ε-聚赖氨酸生产的影响
5
作者 毛佳琪 张敏 +1 位作者 代文娟 秦加阳 《滨州医学院学报》 2023年第4期241-245,共5页
目的构建NADP依赖型三磷酸甘油醛脱氢酶(GapN)诱导型表达的小白链霉菌基因工程菌,研究GapN不同表达水平对ε-聚赖氨酸(ε-PL)生产的影响。方法化学合成来自变异链球菌的gapN基因,利用DNA无缝克隆技术构建GapN诱导型表达载体pSET152-Cel-... 目的构建NADP依赖型三磷酸甘油醛脱氢酶(GapN)诱导型表达的小白链霉菌基因工程菌,研究GapN不同表达水平对ε-聚赖氨酸(ε-PL)生产的影响。方法化学合成来自变异链球菌的gapN基因,利用DNA无缝克隆技术构建GapN诱导型表达载体pSET152-Cel-RS2-gapN,再通过接合转移得到GapN诱导型表达的小白链霉菌基因工程菌Q-gapN-Cel;利用实时荧光定量PCR和摇瓶发酵比较等方法研究纤维二糖添加量对gapN基因表达水平、胞内NADPH浓度和ε-PL产量的影响。结果gapN基因的表达水平与纤维二糖的添加量呈正相关;gapN基因的表达能够显著提高胞内NADPH浓度;随着gapN基因表达水平的提高,ε-PL的产量先增加后降低,添加0.03 mM纤维二糖时产量最高,比对照菌株Q-152提高152.6%。结论GapN表达水平对小白链霉菌生产ε-PL有显著影响,通过控制GapN的表达水平能够有效提高小白链霉菌发酵生产ε-PL的能力。 展开更多
关键词 小白链霉菌 Ε-聚赖氨酸 NADP依赖型3-磷酸甘油醛脱氢酶 诱导表达 NADPH
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过量表达气囊蛋白强化茂原链霉菌合成胰蛋白酶
6
作者 苏莹莹 刘松 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2023年第14期1-8,共8页
气囊蛋白(gas vesicle protein, Gvp)组成的气体囊泡存在于蓝藻、嗜盐古菌等微生物中,为细胞提供浮力或抗胁迫能力。尽管gvp基因簇广泛存在于链霉菌,但其功能尚不明确。在该研究中,分别在茂原链霉菌(Streptomyces mobaraensis)DSM40587... 气囊蛋白(gas vesicle protein, Gvp)组成的气体囊泡存在于蓝藻、嗜盐古菌等微生物中,为细胞提供浮力或抗胁迫能力。尽管gvp基因簇广泛存在于链霉菌,但其功能尚不明确。在该研究中,分别在茂原链霉菌(Streptomyces mobaraensis)DSM40587谷氨酰胺转氨酶基因缺失菌株(smY2019Δtg)中表达了内源的gvpA、gvpO以及完整基因簇gvpOAFGJLSK(gvp40587),考察其对胰蛋白酶合成和宿主生理状态的影响。酶活力分析显示,过量表达gvp40587和gvpA使胞外最高胰蛋白酶活力分别提高64.3%和17.0%;过量表达gvpO未明显影响胰蛋白酶活力。SDS-PAGE分析发现,gvp40587和gvpA过表达菌株胞外上清液中的胰蛋白酶条带(26 kDa)较对照菌株明显增粗。同时,过量表达完整基因簇的菌株中8个gvp基因的转录水平均较smY2019Δtg有不同程度的提高。与对照菌相比,gvp40587过表达菌株的胞内ATP含量和NADPH/NADP^(+)分别提高1.4倍和0.4倍。上述结果表明,过量表达内源gvp基因簇能促进S.mobaraensis合成胰蛋白酶,能量代谢和蛋白质前体合成的增强可能是其产量提高的主要原因。研究结果首次报道了S.mobaraensis中gvp基因簇对酶蛋白合成的重要影响,为链霉菌蛋白表达调控提供了新思路。 展开更多
关键词 气囊蛋白 基因簇 Streptomyces mobaraensis 过量表达 胰蛋白酶 ATP NADPH/NADP^(+)
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模式蓝藻FNR蛋白的生物信息学及进化分析
7
作者 殷亮 王代玮 +3 位作者 韩雪雪 王丽娟 刘海燕 罗光宏 《河西学院学报》 2023年第5期45-53,共9页
FNR蛋白是蓝藻光能转换和能量代谢中的核心蛋白质,为了掌握该蛋白的生物信息学信息及其进化关系,选择具有研究和应用价值的7种模式蓝藻来源的FNR蛋白作为材料,以氨基酸序列为基础,采用ProtParam、Sompa、SWISS-MODEL及MEGA11等生物信息... FNR蛋白是蓝藻光能转换和能量代谢中的核心蛋白质,为了掌握该蛋白的生物信息学信息及其进化关系,选择具有研究和应用价值的7种模式蓝藻来源的FNR蛋白作为材料,以氨基酸序列为基础,采用ProtParam、Sompa、SWISS-MODEL及MEGA11等生物信息学工具对蓝藻FNR蛋白的结构、功能及进化关系进行分析。结果表明:蓝藻FNR蛋白均属于胞内表达的单亚基蛋白,无信号肽,无跨膜结构域。其氨基酸数目在370-440个之间,分子量在45 kD左右,理论等电点在5.5-6.0之间,不稳定性指数在40%左右,蛋白序列中存在保守的FAD及NADPH结合结构域及C末端的RWHVETY保守基序。蛋白的二级结构元件中,α-螺旋和β折叠比例在20%-30%之间,无规卷曲比例较高,普遍在47%左右。FNR蛋白的三级结构具有高度的结构相似性,蛋白质的N端普遍存在一段无序的无规卷曲结构,且暴露于蛋白质核心结构外侧。进化分析表明蓝藻FNR蛋白属于独立的进化分支,与高等植物来源的FNR蛋白的亲缘关系更近。本研究结果有助于深化对FNR蛋白的结构和功能的理解,同时也为FNR蛋白在藻类合成生物学的研究和应用提供参考。 展开更多
关键词 蓝藻 铁氧还蛋白-NADP+-氧化还原酶 生物信息学 多序列比对 进化分析
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NADH和NADPH代谢和功能的研究进展 被引量:19
8
作者 张姗姗 王彦 +2 位作者 李德东 曹永兵 姜远英 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1239-1243,共5页
近年来的研究发现,NADH和NADPH在机体生理与病理条件下都发挥重要的功能,本文综述了NADH和NADPH的合成和降解,重点阐述了NADH、NADPH和NADPH氧化酶的功能,并按炎症、心血管疾病、肿瘤、神经退行性疾病等不同病理状况分别叙述。当前对细... 近年来的研究发现,NADH和NADPH在机体生理与病理条件下都发挥重要的功能,本文综述了NADH和NADPH的合成和降解,重点阐述了NADH、NADPH和NADPH氧化酶的功能,并按炎症、心血管疾病、肿瘤、神经退行性疾病等不同病理状况分别叙述。当前对细胞内NADH(NADPH)作用和代谢的研究已成为国际性的研究热点,其相关机制的探讨将逐步深入。 展开更多
关键词 NAD NADP 代谢 功能
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苹果酸脱氢酶的结构及功能 被引量:42
9
作者 汪新颖 王波 +1 位作者 侯松涛 朱国萍 《生物学杂志》 CAS CSCD 2009年第4期69-72,共4页
苹果酸脱氢酶(MDH)可以催化苹果酸与草酰乙酸间的可逆转换,主要参与TCA循环、光合作用、C4循环等代谢途径。苹果酸脱氢酶可分为NAD-依赖性的MDH(NAD-MDH)和NADP-依赖性的MDH(NADP-MDH)。在所有真核生物和大部分细菌中,MDH通常形成同源... 苹果酸脱氢酶(MDH)可以催化苹果酸与草酰乙酸间的可逆转换,主要参与TCA循环、光合作用、C4循环等代谢途径。苹果酸脱氢酶可分为NAD-依赖性的MDH(NAD-MDH)和NADP-依赖性的MDH(NADP-MDH)。在所有真核生物和大部分细菌中,MDH通常形成同源二聚体,在少数细菌中为四聚体。不同来源的MDH催化机制和它们的动力学性质十分类似,显示了它们具有高度的结构相似性。MDH的功能多样,包括线粒体中的能量提供和植物的活性氧代谢等。回顾了苹果酸脱氢酶在生理学、医学、农学领域的研究进展,并针对其生化特性、空间结构特点、催化机理等生物学功能的分子生物学进展进行了综述。 展开更多
关键词 苹果酸脱氢酶 NAD NADP 催化机制 功能
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猪链球菌2型谷氨酸脱氢酶基因的克隆表达及酶活性测定 被引量:17
10
作者 赵华梅 潘秀珍 +3 位作者 王长军 郭恒彬 李先富 唐家琪 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期22-25,共4页
目的克隆表达猪链球菌谷氨酸脱氢酶(GDH),并测定其酶活性。方法设计引物采用PCR法自海安病人分离株Habb基因组扩增GDH的编码基因gdh,进行序列分析;构建重组表达质粒pGEX4T-2-gdh,转化E.coliBL21(DE3),IPTG诱导表达,PAGE检测;通过亲和层... 目的克隆表达猪链球菌谷氨酸脱氢酶(GDH),并测定其酶活性。方法设计引物采用PCR法自海安病人分离株Habb基因组扩增GDH的编码基因gdh,进行序列分析;构建重组表达质粒pGEX4T-2-gdh,转化E.coliBL21(DE3),IPTG诱导表达,PAGE检测;通过亲和层析纯化,获得融合蛋白GST-GDH,用凝血酶剪切去除GST,获得完整的GDH纯化蛋白后测定其酶活性。结果PCR法自猪链球菌菌株Habb基因组扩增出约1.3kb的目的片段;序列分析显示猪链球菌的GDH具有GDH蛋白家族I的典型保守序列;体外构建筛选原核表达质粒pGEX4T-2-gdh,诱导重组体,表达的蛋白经PAGE初步测定其相对分子质量(Mr)约为71×103;用凝血酶酶切去除融合蛋白中的GST标签后得到的蛋白相对分子质量为45×103;GDH活性测定显示猪链球菌GDH利用α-酮戊二酸做底物,用NADPH做辅酶催化氨的同化和谷氨酸的合成。结论克隆并表达出猪链球菌GDH;猪链球菌GDH属于GDH蛋白家族I,是NADP(H)-特异性GDH。 展开更多
关键词 猪链球菌2型 谷氨酸脱氢酶 GDH家族I NADP(H)一特异性GDH
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超高效液相色谱-质谱法测定细胞中嘌呤核苷酸的方法探究 被引量:7
11
作者 姜丹丹 李伟 +4 位作者 周怀彬 张婷 许芳 武佳 吕建新 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1202-1206,共5页
建立了检测细胞中嘌呤核苷酸(ATP、ADP、AMP、NAD+和NADP+)的超高效液相色谱-质谱(UP-LC-MS)分析方法.采用KinetexTM HILIC柱(50 mm ×4.6 mm,2.1 μm)进行分离,对细胞样品的萃取方法、流动相组成及质谱参数进行优化.方法... 建立了检测细胞中嘌呤核苷酸(ATP、ADP、AMP、NAD+和NADP+)的超高效液相色谱-质谱(UP-LC-MS)分析方法.采用KinetexTM HILIC柱(50 mm ×4.6 mm,2.1 μm)进行分离,对细胞样品的萃取方法、流动相组成及质谱参数进行优化.方法学确证表明:各待测物在1.0 ~ 100 μmol/L范围内线性关系良好,相关系数(r)均大于0.99,平均回收率为95.7%~101.1%,相对标准偏差为1.2%~6.1%.本方法的灵敏度高、简便快速、重复性好,可用于细胞中能量代谢的研究. 展开更多
关键词 超高效液相色谱-质谱法 细胞 ATP ADP AMP NAD+ NADP+
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干旱、盐、温度对植物体NADP-苹果酸酶的影响与机理 被引量:11
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作者 刘增辉 邵宏波 +1 位作者 初立业 张正斌 《生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期3334-3339,共6页
NADP-苹果酸酶是植物体代谢的重要酶之一,参与了多个代谢过程,在植物体内广泛存在,与各种环境胁迫关系密切。目前,胁迫条件下的植物体NADP-苹果酸酶基因的表达情况以及酶活性的变化是关注的重点,同时,NADP-苹果酸酶在抗胁迫方面的机理... NADP-苹果酸酶是植物体代谢的重要酶之一,参与了多个代谢过程,在植物体内广泛存在,与各种环境胁迫关系密切。目前,胁迫条件下的植物体NADP-苹果酸酶基因的表达情况以及酶活性的变化是关注的重点,同时,NADP-苹果酸酶在抗胁迫方面的机理研究也在逐渐的展开。综述了干旱、盐、高温和低温胁迫条件下NADP-苹果酸酶活性及该酶基因表达变化的特点,揭示了其在对植物体抵御各种胁迫带来的危害时所发挥的作用以及作用机理。 展开更多
关键词 NADP-苹果酸酶 胁迫 基因表达 生理生态机理
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甘蔗NADP异柠檬酸脱氢酶基因(SoNADP-IDH)的克隆与表达分析 被引量:5
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作者 谢晓娜 杨丽涛 +2 位作者 王盛 张小秋 李杨瑞 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期185-196,共12页
【目的】甘蔗是C4作物,是中国最重要的糖料作物和最有希望的能源作物。克隆甘蔗NADP异柠檬酸脱氢酶(So NADP-IDH)基因,为甘蔗的抗病乃至抗逆育种提供候选基因。【方法】采用双向电泳技术找到差异蛋白点,用质谱技术对相应蛋白点进行鉴定,... 【目的】甘蔗是C4作物,是中国最重要的糖料作物和最有希望的能源作物。克隆甘蔗NADP异柠檬酸脱氢酶(So NADP-IDH)基因,为甘蔗的抗病乃至抗逆育种提供候选基因。【方法】采用双向电泳技术找到差异蛋白点,用质谱技术对相应蛋白点进行鉴定,用RT-PCR技术从甘蔗中克隆So NADP-IDH,用在线软件对获得的氨基酸序列进行分析,并用q RT-PCR技术研究So NADP-IDH在不同组织和不同逆境胁迫条件下的表达特性。【结果】质谱成功鉴定出差异蛋白点并克隆获得该基因,命名为So NADP-IDH,Gen Bank登录号为KF808326。该c DNA全长1 497 bp,含有1个1 239 bp的完整开放阅读框(ORF),编码412个氨基酸。生物信息学分析表明,该蛋白为亲水蛋白,不含信号肽,为稳定蛋白,有跨膜区域,为可溶性蛋白,二级结构分析显示,含有α-螺旋、延伸链、β-转角、无规则卷曲,并且α-螺旋和无规则卷曲占据了该蛋白质二级结构的大部分构成。在线软件分析表明该基因含有19个磷酸化位点、4个N-糖基化位点、4个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点、4个N-肉豆蔻酰化作用位点、6个蛋白激酶C磷酸化位点和1个酪氨酸激酶磷酸化位点。多重序列和系统进化树分析表明,So NADP-IDH所编码的氨基酸序列与其他植物的异柠檬酸脱氢酶(IDH)蛋白有很高的同源性,与玉米的亲缘关系最近。实时荧光定量PCR(q RT-PCR)分析表明,So NADP-IDH在甘蔗的根、茎、叶中均有表达,在甘蔗体内为组成型表达,在生物胁迫(RSD病菌)和4种非生物胁迫下低温(4℃)、干旱(PEG)、高盐(Na Cl)和激素(ABA)均可影响So NADP-IDH在甘蔗体内的表达,且表达模式不同。在PEG模拟的干旱胁迫下,So NADP-IDH的表达表现出先上调后下调的表达模式,6 h表达量升到最高,之后又开始持续下降,在处理48 h时表达量降到最低;在4℃处理的低温胁迫下,3 h时,So NADP-IDH的表达量降到最低,之后随着处理时间的延长,So NADP-IDH的表达量增加,24 h升到最高点,48 h时,又有稍微下降;在ABA作用下,So NADP-IDH表现出"抑-扬-抑-扬"的表达模式,在处理3 h时So NADP-IDH表达量有所降低,6 h时升到最高,在处理24 h时降到最低,48 h又有所上升;在Na Cl模拟的高盐胁迫下,So NADP-IDH表现出"扬-抑-扬"的表达模式,So NADP-IDH的表达量在处理6 h时升到最高,之后开始急剧下降,24 h时降到最低,之后开始有所上升,48 h时基本与对照持平。【结论】从甘蔗中获得了NADP异柠檬酸脱氢酶(So NADP-IDH)基因,RSD病菌的侵染及上述4种非生物逆境胁迫均影响到So NADP-IDH在甘蔗体内的表达水平,该基因可能参与了甘蔗抵抗氧化胁迫的过程。 展开更多
关键词 甘蔗 NADP异柠檬酸脱氢酶 基因克隆 表达分析
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盐碱地土壤改良对银中杨叶片、树枝和树皮绿色组织色素和C_4光合酶的影响 被引量:3
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作者 王文杰 许慧男 +3 位作者 王莹 于兴洋 郑广宇 祖元刚 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期299-304,共6页
在松嫩平原重度盐碱地上,选择通过土壤改良使得盐碱成分降低、结构显著改善的土壤作为处理样地(pH值9.17;电导率388μscm-1;土壤紧实度1170kPa),邻近未改良重度盐碱地为对照样地(pH值10.15;电导率1220μscm-1;土壤紧实度2199kPa),对生... 在松嫩平原重度盐碱地上,选择通过土壤改良使得盐碱成分降低、结构显著改善的土壤作为处理样地(pH值9.17;电导率388μscm-1;土壤紧实度1170kPa),邻近未改良重度盐碱地为对照样地(pH值10.15;电导率1220μscm-1;土壤紧实度2199kPa),对生长在对照和处理样地上的银中杨不同器官叶绿素和C4光合相关酶研究发现:1)生长在处理样地的银中杨叶片叶绿素a+b、叶绿素a/b、类胡萝卜素含量显著高于对照未处理,但树枝和树皮绿色组织内这些指标的差异远小于叶片;2)所测定3种C4光合酶结果显示,当以单位鲜重表示时,3种器官以及盐碱化程度对结果影响较小;3)当以单位叶绿素酶活性表示时,不同器官以及盐碱化程度对酶活性影响显著:树皮和树枝磷酸烯醇式丙酮酸酶(PEPC)活性是叶片的4.4和3.1倍,盐碱地改良使这一差异变成8.6和2.6倍;对照样地内树皮、树枝的苹果酸酶(NADP-ME)活性是叶片的1.7和2.1倍,盐碱地土壤改良使得这一差异达到17.2和6.4倍;与此类似,在对照盐碱地上,树皮和树枝内苹果酸脱氢酶(NADP-MDH)活性是叶片的1.7和1.4倍,盐碱地土壤改良使得这一差异变为6.4和13.7倍。上述结果说明,银中杨树干和树枝绿色组织内C4相关酶含量较叶片高出很多,而且受盐碱胁迫程度影响显著,盐碱化程度轻的情况下,这种差异会增大,这些酶的变化可以作为植物响应土壤盐碱程度变化的一种生理生化指示指标。 展开更多
关键词 磷酸烯醇式丙酮酸酶 苹果酸脱氢酶 苹果酸酶 叶绿素 非同化器官
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草莓果实采后NAD激酶活性与NAD(H)、NADP(H)含量及活性氧代谢的关系 被引量:17
15
作者 顾采琴 朱冬雪 李棋 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期352-357,共6页
【目的】研究草莓采后成熟衰老过程中NADK活性与NAD(H)、NADP(H)及活性氧代谢和膜氧化产物变化的关系,以探讨NADK在非跃变型果实成熟衰老过程中的作用,为调控果实的成熟衰老提供理论依据。【方法】将从果园采回的草莓果实贮藏于不同的... 【目的】研究草莓采后成熟衰老过程中NADK活性与NAD(H)、NADP(H)及活性氧代谢和膜氧化产物变化的关系,以探讨NADK在非跃变型果实成熟衰老过程中的作用,为调控果实的成熟衰老提供理论依据。【方法】将从果园采回的草莓果实贮藏于不同的温度下并进行每天取样,研究草莓果实在低温(4℃)、常温(20℃)贮藏期间成熟衰老过程中NAD激酶(NADK)活性及其底物NAD(H)、产物NADP(H)以及超氧阴离子O2.-过氧化氢(H2O2)、膜氧化产物丙二醛(MDA)含量的变化并分析NADK与上述指标的关系。【结果】草莓果实在低温(4℃)贮藏时,其NADK活性比常温(20℃)贮藏的高,NAD(H)含量则相应比常温贮藏的低,NADP(H)含量则高于常温下的;同时,在常温贮藏期间果实O2-.生成速率和H2O2含量、膜氧化产物MDA含量均比低温贮藏的高,暗示NADK可能通过影响NAD(H)、NADP(H)的含量及比例来调控O2-.生成速率和H2O2含量,从而调控果实的成熟衰老。【结论】非跃变型果实草莓采后成熟衰老过程中,保持较高的NADK活性有利于延缓果实的成熟衰老,降低NADK活性可导致NAD和NAD(H)含量的积累,进而加速电子传递,产生大量的活性氧O2.-和H2O2,从而促进膜过氧化作用和积累较多的MDA,最终导致果实衰老变质。 展开更多
关键词 草莓 成熟衰老 NAD激酶 NAD(H) NADP(H) 活性氧
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草莓和番茄果实采后NAD激酶、NADP磷酸酶活性变化的研究 被引量:5
16
作者 顾采琴 关军锋 +1 位作者 席玙芳 李广敏 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2002年第11期1381-1384,共4页
研究了草莓和番茄果实采后在 4℃和 2 0℃下 ,NAD激酶 (NADK)、NADP磷酸酶活性变化及其与果实呼吸、乙烯释放率、钙调素拮抗剂三氟啦嗪 (Trifluoperazine ,TFP)的关系。结果表明 ,两种果实的NADK、NADP磷酸酶活性变化趋势存在显著差异 ... 研究了草莓和番茄果实采后在 4℃和 2 0℃下 ,NAD激酶 (NADK)、NADP磷酸酶活性变化及其与果实呼吸、乙烯释放率、钙调素拮抗剂三氟啦嗪 (Trifluoperazine ,TFP)的关系。结果表明 ,两种果实的NADK、NADP磷酸酶活性变化趋势存在显著差异 ,草莓果实采后NADK活性先下降、后上升 ,NADP磷酸酶活性出现第 1个峰后继续缓慢上升 ,而番茄果实NADK活性先上升、后下降 ,NADP磷酸酶活性在出现第 1个峰后继续下降 ;两种果实NADK活性变化与呼吸变化趋势相似 ,NADP磷酸酶变化与乙烯释放率变化趋势相似 ;低温激活NADK ,抑制NADP磷酸酶 ,TFP对NADK有激活作用 ,对NADP磷酸酶影响较小。表明果实后熟衰老过程与NAD激酶、NADP磷酸酶密切相关 ,激活NADK可能与延缓果实后熟衰老有关。 展开更多
关键词 酶活性 草莓 番茄 后熟衰老 NAD激酶 NADP磷酸酶 采后生理
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即时浸酸显著提高滞育性家蚕卵辅酶Ⅰ和Ⅱ含量 被引量:7
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作者 姚金美 万华星 +1 位作者 司马杨虎 赵林川 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期24-28,共5页
即时浸酸在阻止家蚕Bombyx mori卵滞育发动的同时,提高了其呼吸耗氧量,抑制了山梨醇积累。本研究利用HPLC法测定了家蚕滞育卵和5min即时浸酸滞育性卵中辅酶Ⅰ和Ⅱ含量。结果表明:产下后24-72h,家蚕滞育卵中NAD,NADH,NADP和NADPH含量分... 即时浸酸在阻止家蚕Bombyx mori卵滞育发动的同时,提高了其呼吸耗氧量,抑制了山梨醇积累。本研究利用HPLC法测定了家蚕滞育卵和5min即时浸酸滞育性卵中辅酶Ⅰ和Ⅱ含量。结果表明:产下后24-72h,家蚕滞育卵中NAD,NADH,NADP和NADPH含量分别下降了30%,37%,50%和4%;而即时浸酸滞育性卵中分别增加了77%,46%,142%和241%。不过,即时浸酸并未显著改变滞育性家蚕卵中NADH/NAD和NADPH/NADP比值。据此推测,即时浸酸提高滞育性家蚕卵辅酶Ⅰ含量与其呼吸耗氧量增加有关;即时浸酸显著提高辅酶Ⅱ含量与山梨醇积累抑制无关,而主要与生物合成加强有关。 展开更多
关键词 家蚕 滞育 滞育卵 即时浸酸 辅酶Ⅰ 辅酶Ⅱ
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谷子NADP-ME的鉴定及其对逆境胁迫的响应 被引量:4
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作者 赵晋锋 杜艳伟 +6 位作者 王高鸿 李颜方 赵根有 王振华 成凯 王玉文 余爱丽 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第22期3950-3963,共14页
【目的】鉴定谷子NADP-ME家族成员,研究不同成员对非生物逆境胁迫的响应,为揭示SiNADP-ME在谷子逆境应答信号途径中的作用奠定基础。【方法】利用生物信息学方法鉴定谷子基因组中的NADP-ME家族成员。采用GSDS2.0、plantCARE、Clustalx、... 【目的】鉴定谷子NADP-ME家族成员,研究不同成员对非生物逆境胁迫的响应,为揭示SiNADP-ME在谷子逆境应答信号途径中的作用奠定基础。【方法】利用生物信息学方法鉴定谷子基因组中的NADP-ME家族成员。采用GSDS2.0、plantCARE、Clustalx、MEGA6.0等软件及网站ExPASy对鉴定成员蛋白和基因序列进行生物信息学分析。采用qRT-PCR方法检测SiNADP-ME在苗期不同逆境、不同生育期干旱胁迫及不同光照强度下的表达情况。【结果】谷子NADP-ME家族由7个成员组成,它们在谷子的第2、3、5、7染色体上呈不均匀分布。保守功能域分析显示7个基因都含有NADP-ME特征保守功能域。序列比对发现谷子NADP-ME成员之间序列非常保守,相似性较高,7个谷子成员序列一致性为77.30%,而不同物种NADP-ME序列之间相似性为56.52%。序列分析显示SiNADP-ME1、SiNADP-ME4、SiNADP-ME5、SiNADP-ME6序列较长,分别编码576、639、652和636个氨基酸,而SiNADP-ME2、SiNADP-ME3、SiNADP-ME7序列较短,分别编码213、265和149个氨基酸。基因结构分析显示SiNADP-ME1有2个可变剪切,SiNADP-ME5有3个可变剪切,其他基因无可变剪切。SiNADP-ME1、SiNADP-ME2、SiNADP-ME3、SiNADP-ME7含内含子较少,而SiNADP-ME4、SiNADP-ME5、SiNADP-ME6含内含子较多。蛋白参数预测显示谷子NADP-ME成员间分子量跨度较大,在161.94—725.43 kD,等电点为5.32—8.05,不稳定指数为23.01—45.01,脂肪系数介于89.19—107.77,平均疏水指数介于-0.218—0.004。亚细胞定位预测显示SiNADP-ME成员主要被定位在叶绿体、线粒体和细胞质中。顺式元件分析显示SiNADP-ME成员启动子区域主要包括激素类应答、逆境应答、光应答以及其他类生长调控相关的顺式元件。聚类分析发现谷子SiNADP-ME基因在单、双子叶植物分离之前就已存在。不同物种同源基因对在进化树中广泛存在揭示它们在进化上可能存在共同祖先,也暗示它们在某些信号通路中可能具有相似的功能。苗期逆境表达分析表明所有谷子SiNADP-ME家族基因表达量在本文应用的4种逆境胁迫下都被明显诱导。SiNADP-ME1在ABA、低温、NaCl处理后被诱导的最高相对表达量分别为对照的460.53、411.50和15.24倍;SiNADP-ME6在ABA、低温、PEG、NaCl处理后被诱导的最高相对表达量分别为对照的211.13、15.21、772.41和643.99倍。进一步分析表明SiNADP-ME1和SiNADP-ME6在拔节期、抽穗期和灌浆期干旱胁迫下表达量上调。【结论】从谷子基因组中鉴定了7个NADP-ME基因家族成员;7个成员间序列非常保守并且都含有NADP-ME基因典型特征结构域;7个谷子NADP-ME家族基因参与了植物非生物逆境应答,特别是SiNADP-ME1和SiNADP-ME6可能在ABA、盐、干旱、低温等逆境应答信号途径中起重要作用。 展开更多
关键词 谷子 NADP依赖型苹果酸酶 基因表达 非生物逆境
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NADP-异柠檬酸脱氢酶的结构与功能 被引量:13
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作者 朱国萍 黄恩启 赵旵军 《安徽师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2007年第3期366-371,共6页
异柠檬酸脱氢酶(isocitrate dehydrogenase,IDH)在三羧酸(TCA)循环中催化异柠檬酸生成α-酮戊二酸,将NAD+或NADP+还原成NADH或NADPH.根据空间结构特点,NADP-依赖性IDH可分为同源二聚体IDH和单体IDH,它们对生物体的能量代谢、生物合成以... 异柠檬酸脱氢酶(isocitrate dehydrogenase,IDH)在三羧酸(TCA)循环中催化异柠檬酸生成α-酮戊二酸,将NAD+或NADP+还原成NADH或NADPH.根据空间结构特点,NADP-依赖性IDH可分为同源二聚体IDH和单体IDH,它们对生物体的能量代谢、生物合成以及抗氧化胁迫起重要作用.当碳源贫乏时,NADP-依赖性IDH的可逆磷酸化对TCA循环和乙醛酸旁路碳通量(carbon flux)的分配起关键性调控作用.因此目前IDH是研究蛋白质的结构与功能关系、酶的催化与调节机制、蛋白质功能进化的最好模型之一. 展开更多
关键词 异柠檬酸脱氢酶(IDH) NADP-依赖性IDH 同源二聚体IDH 单体IDH
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夹竹桃麻素对兔心房电重构的影响 被引量:5
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作者 张德贤 任凯 +3 位作者 官媛 张晔 王玉堂 单兆亮 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2011年第3期208-210,共3页
目的探讨烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶抑制剂夹竹桃麻素对兔心房急性电重构的预防作用。方法选择新西兰白兔18只,随机分为对照组、心房快速起搏组和夹竹桃麻素+心房快速起搏组(夹竹桃麻素组),每组6只。对照组和心房快速起搏组术前生... 目的探讨烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶抑制剂夹竹桃麻素对兔心房急性电重构的预防作用。方法选择新西兰白兔18只,随机分为对照组、心房快速起搏组和夹竹桃麻素+心房快速起搏组(夹竹桃麻素组),每组6只。对照组和心房快速起搏组术前生理盐水3 ml/(kg·d)灌胃3 d,夹竹桃麻素组予30 mg/(kg·d)药物灌胃3d。对照组术中不行心房快速起搏,心房快速起搏组与夹竹桃麻素组术中以最快的能维持心房1:1起搏的频率(500~600/min)给予快速刺激。分别在0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5和3.0 h时,测量基础刺激周长分别为200 ms和1 50 ms的右心房有效不应期(atrial effective rcfractory period,AERP),分析AERP频率适应性的变化,并记录心房颤动(房颤)的诱发情况。结果对照组和夹竹桃麻素组AERP_(200)和AERP_(150)无明显变化,心房快速起搏组AERP_(200)和AERP_(150)与心房快速起搏时间呈负相关(r=—0.650,P<0.01;r=—0.498,P<0.01);对照组和夹竹桃麻素组AERP频率适应性指标无明显变化,心房快速起搏组AERP频率适应性与心房快速起搏时间呈负相关(r=一0.341,P<0.05);心房快速起搏组和夹竹桃麻素组的房颤诱发率分别为66.67%和16.67%,平均房颤持续时间分别为37.75 min和0.67 min,差异有统计学意义(P<0.05)。结论夹竹桃麻素能够减缓心房电重构的发生、发展,降低房颤的持续时间。 展开更多
关键词 NADP 夹竹桃科 心房颤动 氧化性应激
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