淫羊藿苷对哮喘大鼠醌氧化还原酶1及谷胱甘肽还原酶表达及氧化应激的影响

目的探讨淫羊藿苷对哮喘大鼠醌氧化还原酶1(NQO1)及谷胱甘肽还原酶(GR)表达及氧化应激的影响。方法选取40只健康雌性Wistar大鼠,随机将其分为正常组、模型组、布地奈德组及淫羊藿苷组,每组10只。除正常组外,其余组大鼠采用卵蛋白溶液造成慢性大鼠哮喘模型。实验期间正常组及模型组每天灌胃生理盐水,淫羊藿苷组每天灌胃淫羊藿苷120 mL/kg,布地奈德组致敏2周后在卵蛋白溶液雾化吸入后给予布地奈德吸入。于末次激发后24 h内处死各组(正常组同期处死)大鼠并取出右肺组织,以ELISA方法检测各组氧化因子活性氧(ROS)表达水平,采用RT-PCR法检测各组GR mRNA表达水平,采用Westernblot方法检测各组NQO1蛋白表达水平。结果模型组大鼠肺组织中ROS表达水平明显高于正常组(P<0.05),GR mRNA及NQO1蛋白表达水平均明显低于正常组(P均<0.05)。淫羊藿苷组及布地奈德组大鼠肺组织中ROS表达水平均明显低于模型组(P均<0.05),GR mRNA及NQO1蛋白表达水平均明显高于模型组(P均<0.05),淫羊藿苷组与布地奈德组各指标比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论淫羊藿苷可上调哮喘大鼠GR mRNA及NQO1蛋白的表达,减轻哮喘大鼠氧化应激反应。

醌氧化还原酶1抑制剂双香豆素促进HBV X蛋白降解进而抑制cccDNA转录的机制研究

【据Journal of Hepatology2021年3月报道】题:醌氧化还原酶1抑制剂双香豆素促进HBV X蛋白降解进而抑制ccc DNA转录的机制研究(作者Cheng ST等)HBV ccc DNA在肝细胞核内持续稳定的存在,被认为是HBV感染慢性化、抗病毒治疗无法彻底清除以及停药后肝炎复发的最主要原因。HBV X蛋白(HBx)对HBV ccc DNA的转录过程发挥关键作用;促进HBx降解,则可能抑制ccc DNA转录。因此,开发靶向HBx的小分子化合物是达到"ccc DNA沉默清除"这一重要目标的可能途径。

抗氧化剂和低氧诱导醌氧化还原酶1基因的表达及其机制

目的 探讨低氧和抗氧化剂诱导醌氧化还原酶1(NQO1 )基因表达及其与细胞增殖的关系和诱导表达的调节机制。方法 人肝癌细胞SMMC 772 1经抗氧化剂[酪醇(p Ty) ,丁基羟茴香醚(BHA) ,β萘黄酮(βNF) ]、低氧或两者共同处理2 4h ,分别采用微孔板测定法、RT PCR、结晶紫显色法、电泳迁移率变动试验(EMSA)测定MQO1 活力,NQO1 mRNA表达,细胞增殖和细胞核蛋白与抗氧化反应元件(ARE)的结合情况。结果 常氧下BHA ,βNF和p Ty均能诱导NQO1 比活力增加,酪醇诱导NQO1 mRNA表达呈剂量依赖性增加,且与酶比活力存在明显的相关性;酪醇在一定范围内,其抑制细胞增殖的能力呈剂量依赖性,且细胞增殖与酶比活力存在负相关。低氧与抗氧化剂共同处理比常氧下抗氧化剂诱导NQO1 比活力有增加(r=-0 41,P <0 0 1)。EMSA试验表明,ARE能与低氧、抗氧化剂或低氧+抗氧化剂诱导的核蛋白特异结合。结论 抗氧化剂在常氧下可诱导人肝癌细胞NQO1 活力增加,低氧加强其诱导能力。其中酪醇诱导NQO1 活力与NQO1 mRNA表达量增加相关,同时酪醇能抑制细胞的增殖,这种增殖抑制与酶活力诱导增加有关。ARE参与介导抗氧化剂和低氧诱导NQO1 基因表达的调节。

整合素连接激酶、醌氧化还原酶-1和增殖细胞核抗原在肝细胞癌中的表达及意义

目的检测肝细胞癌术后组织中整合素连接激酶(ILK)、NADPH:醌氧化还原酶(NQO)-1和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,关注三者的关系及临床意义。方法 79例肝细胞癌术后组织及临床资料作为观察组,55例正常肝组织作为对照组,采用免疫组化方法检测两组中ILK、NQO-1和PCNA的表达。结果肝细胞癌中ILK、NQO-1和PCNA表达阳性率明显高于对照组,观察组中ILK、NQO-1和PCNA的表达与肿瘤的分化程度、TNM分期、肿瘤最大径及Ki67的表达密切相关。相关性分析显示ILK和PCNA、NQO-1和PCNA的表达均具有正相关性。观察组中ILK、NQO-1和PCNA高表达患者生存时间明显短于低表达患者。结论肝细胞癌中ILK、NQO-1和PCNA高表达,对病变的进展有重要影响,术后联合检测ILK、NQO-1和PCNA的表达可能对判断生物学行为和生存时间有一定价值。ILK、NQO-1对PCNA表达的增殖有直接关系,这可能是两种蛋白的作用机制。

NAD(P)H:醌氧化还原酶1对多巴胺能细胞的保护作用

目的:研究多巴胺(DA)对多巴胺能细胞的毒性作用、NAD(P)H:醌氧化还原酶1(NQO1)的保护作用及其机制。方法:运用MTT法检测多巴胺对神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)活性的影响;运用脂质体转染或Ⅱ相酶诱导剂预处理的方法对细胞进行预处理,并用免疫荧光方法检测转染效率;运用蛋白质印迹(Western blotting)方法检测细胞经过不同处理后胞内NQO1蛋白的表达情况;运用醌蛋白检测方法(硝基四氮唑蓝/甘氨酸法)检测细胞经不同处理后胞内醌化蛋白含量的变化。结果:多巴胺对细胞具有剂量依赖性毒性,且与细胞内醌化蛋白的含量相关;脂质体转染和Ⅱ相酶诱导剂萝卜硫素(SF)均能使细胞内NQO1表达量增高;NQO1高表达能缓解多巴胺对细胞造成的毒性;细胞内NQO1表达量增高能减少多巴胺引起的细胞内醌化蛋白含量。结论:细胞内NQO1的过表达可以减轻多巴胺对细胞产生的毒性作用。

核因子E2相关因子2-醌氧化还原酶1抑制ferroptosis缓解肠缺血再灌注诱导的急性肺损伤

目的探讨核因子E2相关因子2(Nrf2)-酯氧化还原酶1(NQO1)对肠缺血再灌注所致急性肺损伤保护作用的机制。方法将32只健康的8周龄野生型(WT)C57BL/6雄性小鼠(简称WT小鼠)随机分为4组,即假手术组、模型组、模型+铁剂组(铁剂组)、模型+ferroptosis抑制剂组(ferroptosis抑制剂组),每组8只。假手术组暴露肠系膜上动脉,但不阻断;模型组用无创血管夹阻断肠系膜上动脉45 min,开放再灌注180 min,制备肠缺血再灌注肺损伤模型;铁剂组和ferroptosis抑制剂组在阻断肠系膜上动脉前经尾静脉分别注射柠檬酸铁15 mg/kg或ferroptosis抑制剂ferrostatin-15 mg/kg。另取Nrf2基因敲除小鼠(Nrf2-/-小鼠)32只,亦分为假手术组、模型组、铁剂组和ferroptosis抑制剂组,每组8只,各组处理方法与WT小鼠一致。各组于再灌注180 min后处死小鼠取其肺组织,称重后计算肺湿干比(W/D),分别采用Western印迹法和实时荧光定量PCR检测Nrf2、NQO1的蛋白质和mRNA表达。于光学显微镜下观察肺组织病理学表现。结果WT小鼠、Nrf2-/-小鼠模型组和铁剂组的肺组织W/D值和肺组织损伤病理学评分分别显著大于同种小鼠假手术组和ferroptosis抑制剂组(P值均<0.05),铁剂组的肺组织W/D值和肺组织损伤病理学评分分别显著大于同种小鼠模型组(P值均<0.05);Nrf2-/-小鼠模型组和铁剂组的肺组织W/D值和肺组织损伤病理学评分分别显著大于WT小鼠模型组和铁剂组(P值均<0.05)。WT小鼠模型组和铁剂组的肺组织Nrf2、NQO1蛋白质相对表达量和mRNA相对表达量均显著高于假手术组和ferroptosis抑制剂组(P值均<0.05),铁剂组的肺组织Nrf2、NQO1蛋白质相对表达量和mRNA相对表达量均显著高于模型组(P值均<0.05)。WT小鼠和Nrf2-/-小鼠模型组的肺组织NQO1蛋白质相对表达量分别显著高于同种小鼠假手术组(P值均<0.05),Nrf2-/-小鼠模型组的肺组织NQO1蛋白质相对表达量显著低于WT小鼠模型组(P<0.05)。结论Nrf2能够通过增加NQO1的表达有效抑制ferroptosis,减轻肠缺血再灌注所致的急性肺损伤。

中国云南汉族迟发性运动障碍与醌氧化还原酶1基因多态性的相关性研究

目的探讨醌氧化还原酶1[（NAD（P）H：quinone oxidoreductasel，NQ01]C609T基因多态性在精神分裂症迟发性运动障碍（tardive dyskinesia。TD）发病中的作用。方法采用病例一对照研究，运用聚合酶链反应一限制性片段长度多态性方法（PCR-RFLP）检测了233例精神分裂症患者（TD组55例和非TD组178例）NQ01C609T基因多态性。结果TD组中NQ01C609T位点CC，CT和TT基因型频率分别为45．5％，40．0％和14．5％；C和T等位基因频率分别为65．5％和34．5％。非TD组中CC，CT和TT基因型频率分别为36．0％，47．2％和16．8％；C和T等位基因频率分别为59．6％和40．4％。NQ01C609T基因型频率和等位基因频率在TD组与非TD组之间差异无统计学意义（x2=1．61，P=0．448；x2=1．23，P=0．267）。结论NQ01基因C609T位点在中国云南汉族人群中存在多态性，其基因多态性与中国云南汉族精神分裂症的迟发性运动障碍不存在关联，该基因多态性在迟发性运动障碍发病中的作用机制还有待进一步研究。

精神分裂症患者醌氧化还原酶1 C609T 多态性与血脂水平相关性研究

目的：探讨醌氧化还原酶1 C609 T 基因多态性与精神分裂症患者血脂水平的相关性。方法对328例精神分裂症患者血脂水平及醌氧化还原酶1 C609 T基因多态性进行检测分析。结果本组患者醌氧化还原酶1 C609T位点CC、CT 和 T T基因型频率分别为43．9％、42．1％和14．0％；C和T等位基因频率分别为66．3％和33．7％。醌氧化还原酶1 C609T基因型频率、等位基因频率与患者血脂水平均无显著相关性（P＞0．05）。结论醌氧化还原酶1基因C609T位点在精神分裂症患者中存在多态性，其基因型频率、等位基因频率与患者的血脂水平无显著相关性。

脂氧素类似物BML-111对炎症状态人单核细胞株U937氧化应激标志物表达的影响

目的观察脂氧素类似物BML-111预处理对炎症状态人单核细胞株U937氧化应激标志物表达的影响。方法培养U937细胞并分为对照组、模型组、实验组。对照组不加入药物;模型组加入1μg/L的脂多糖(LPS)制作炎症模型;实验组先加入200μg/L的BML-111预处理30 min后再加入1μg/L的LPS。采用细胞免疫荧光法检测各组U937细胞中的核因子E2相关因子2(Nrf2);采用RT-PCR法检测各组U937细胞中的Nrf2、醌氧化还原酶(NQO1)、血红素加氧酶1(HO-1)、TNF-αmRNA。结果对照组细胞中Nrf2蛋白主要定位于胞核与胞质;模型组细胞中Nrf2蛋白主要定位于胞核,即从胞质转位至核内;实验组Nrf2蛋白表达定位与对照组相近。模型组Nrf2蛋白相对表达量高于对照组、实验组Nrf2蛋白相对表达量低于模型组(P均<0.05),模型组中Nrf2、NQO1、HO-1、TNF-αmRNA相对表达量高于对照组、实验组细胞中Nrf2、NQO1、HO-1、TNF-αmRNA相对表达量低于模型组(P均<0.05)。结论 BML-111预处理后,炎症状态的U937细胞中Nrf2蛋白核转位受抑制,Nrf2蛋白及其下游基因表达下调,TNF-α基因表达下调;调节Nrf2蛋白及其下游基因表达、下调TNF-α表达可能是BML-111抗氧化应激作用机制的一部分。

血清NQO1、CRP/ApoA1、sRAGE与原发性高血压患者冠状动脉病变的相关性

目的 探究血清醌氧化还原酶(NQO1)、C反应蛋白与载脂蛋白A1比值(CRP/ApoA1)及可溶性晚期糖基化终末产物受体(sRAGE)与原发性高血压患者冠状动脉病变的相关性。方法 分析2021年6月至2022年12月期间广东药科大学附属第一医院就诊的原发性高血压患者资料122例。根据合并冠状动脉病变与否分为单纯高血压组(77例)和冠状动脉病变组(45例),并根据Gensini评分将冠状动脉病变组患者分为轻度组(14例),中度组(18例),重度组(13例)。比较两组患者血清NQO1、CRP/ApoA1、sRAGE水平差异;Pearson相关性检验分析NQO1、CRP/ApoA1、sRAGE与Gensini评分的关系;多因素Logistic回归模型分析高血压患者并发冠状动脉病变的影响因素。结果 病变组患者吸烟、合并糖尿病占比高于单纯高血压组(χ^(2)=22.215、9.872,P<0.05);病变组患者高血压病程、收缩压、舒张压、血清CRP、CRP/ApoA1均高于单纯高血压组(t=7.539、6.192、10.923、24.049、17.362,P<0.05);病变组患者NQO1、sRAGE低于单纯高血压组(t=11.530、6.746,P<0.05);Pearson分析显示血清NQO1、sRAGE与Gensini评分负相关(P<0.001),CRP/ApoA1则与Gensini评分呈正相关(P<0.001),多因素Logistic回归分析显示患者收缩压、舒张压、糖尿病史、血清CRP、ApoA1、NQO1、CRP/ApoA1、sRAGE均是其并发冠状动脉病变的影响因素(P<0.05)。结论 原发性高血压患者合并冠状动脉病变其血清NQO1、sRAGE水平与病变程度负相关,CRP/ApoA1与病变程度正相关,可作为高血压患者冠状动脉病变预测指标。

激活TGR5受体减轻ET-1致乳小鼠心肌细胞氧化应激损伤的作用及机制

目的:观察G蛋白偶联胆汁酸受体-1(G protein-coupled bile acid receptor 1,TGR5)激活后对内皮素-1(endothelin-1,ET-1)所致的乳鼠心肌细胞氧化应激损伤的作用,并探讨其可能的机制。方法:原代培养心肌细胞,ET-1浓度分别为10-8、10-7、10-6mmol/L,分别作用12、24、36、48 h,建立心肌细胞氧化应激损伤模型。建立氧化应激损伤模型后,分别给予INT-777(TGR5激动剂)、TGR5 siRNA(病毒干扰TGR5表达)及TGR5空病毒处理48 h。采用CCK-8法观察心肌细胞的存活率,生化试剂盒法检测丙二醛(malonaldehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)含量,Western blot检测细胞核中核因子相关因子-2(nuclear factor erythroid 2-related factor-2,Nrf2)蛋白的表达,Real-time PCR检测Nrf2下游抗氧化基因血红素加氧酶(heme oxygenase,HO-1)mRNA、醌氧化还原酶(quinone oxidoreductase,NQO-1)mRNA、硫氧化蛋白还原酶-1(thioredoxin reductase-1,Txnrd-1)mRNA的表达水平。结果:浓度为10-8、10-7、10-6 mmol/L的ET-1均可诱导SOD活力下降(P=0.000),MDA生成增加(P=0.000);且随着ET-1浓度增加和培养时间延长,心肌细胞氧化应激损伤程度越严重。ET-1(10-6 mmol/L)组MDA及LDH明显增加(均P=0.000),SOD活性明显下降(P=0.000),Nrf2、HO-1 mRNA、Txnrd-1mRNA表达增加(均P=0.000)。予以30μmol/L INT-777可有效改善ET-1诱导的氧化应激损伤,与ET-1组相比,心肌细胞存活率明显增加(P=0.000),MDA及LDH减少(均P=0.000),SOD活性增加(P=0.000),Nrf2、HO-1 mRNA、NQO-1 mRNA、Txnrd-1mRNA表达明显增加(均P=0.000);而病毒干扰TGR5组可部分阻断TGR5激动剂对心肌细胞损伤的改善作用,Nrf2、HO-1mRNA、NQO-1 mRNA、Txnrd-1 mRNA表达下降(均P=0.000)。结论:激活TGR5可能通过激活Nrf2其下游抗氧化基因HO-1、NQO-1及Txnrd-1减轻ET-1对心肌细胞的损伤作用。

萝卜硫素通过Keap1/Nrf2通路缓解OGD/R诱导的星形胶质细胞氧化应激

目的:研究萝卜硫素(SFA)对糖氧剥夺/再灌注(OGD/R)大鼠星形胶质细胞氧化应激的影响。方法:将新生大鼠脑组织中分离培养的星形胶质细胞分为3组,分别是对照组(control)、OGD/R处理组、OGD/R和SFA联合处理组(OGD/R+SFA),利用低氧培养箱及无糖DMEM培养基制备OGD/R细胞模型,OGD/R+SFA组细胞在制备OGD/R的同时给予终浓度为50μmol/L的SFA处理,用商品化试剂盒分别检测细胞活性和丙二醛(MDA)的含量,利用Western Blot检测大鼠细胞中核因子E2相关因子2(Nrf2)的核转位及血红素加氧酶-1(HO-1)和醌氧化还原酶1(NQO1)的表达。结果:SFA能够显著增加OGD/R诱导的星形胶质细胞活力(P<0.05),减少MDA的含量,同时促进Nrf2转位到细胞核并促进靶分子HO-1和NQO1表达(P<0.05)。结论:SFA通过激活星形胶质细胞中Keap1/Nrf2信号通路减轻OGD/R诱导的细胞损伤。

NAD（P）H：醌氧化还原酶1过表达在甲状腺髓样癌预后评估中的意义

甲状腺髓样癌（MTC）约占全部甲状腺癌的8％～10％，其临床表现复杂多样，易于局部扩散和远处转移，恶性程度高，预后差。因此，寻找MTC的早期诊断及预后评估的有效分子靶标是临床治疗MTC亟待解决的关键问题。NAD（P）H：醌氧化还原酶1（NQ01）可专一性的催化真核细胞内醌类物质及其衍生物发生双电子还原反应，从而对醌类物质的损伤形成一种保护机制。

虾青素调控Nrf2/HO-1/NQO1通路减轻心肌缺血再灌注大鼠氧化应激损伤

目的 研究虾青素对心肌缺血/再灌注(I/R)大鼠氧化应激损伤的影响及其机制。方法 将SD大鼠分为假手术组、心肌I/R组和虾青素低、中、高剂量组,采用冠状动脉结扎法建立心肌I/R大鼠模型,虾青素低、中、高剂量组分别灌胃25、50、100 mg/kg虾青素,其余组灌胃生理盐水。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌肌钙蛋白(cTn)I水平及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、丙二醛(MDA)含量;苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠心肌组织形态;TUNEL染色检测大鼠心肌组织中细胞凋亡率;Western印迹法检测大鼠心肌组织中核因子E2相关因子(Nrf)2/血红素加氧酶(HO)-1/醌氧化还原酶(NQO1)通路相关蛋白表达。结果 与假手术组相比,心肌I/R组血清CK-MB、cTnI水平、MDA含量及心肌组织中细胞凋亡率显著升高(P<0.05),血清GSH-Px活性及心肌组织中Nrf2、HO-1、NQO1蛋白水平显著降低(P<0.05),心肌组织出现明显的病理损伤;使用虾青素后,大鼠血清CK-MB、cTnI水平、MDA含量及心肌组织中细胞凋亡率显著降低(P<0.05),血清GSH-Px活性及心肌组织中Nrf2、HO-1、NQO1蛋白水平显著升高(P<0.05),且呈剂量依赖性(P<0.05),心肌组织病理损伤减轻。结论 虾青素能激活Nrf2/HO-1/NQO1通路发挥抗氧化作用,减轻心肌I/R大鼠氧化应激损伤。

NAD(P)H:醌氧化还原酶1C609T多态性与贲门癌发病风险

醌是一种有毒的化合物,能诱发哺乳动物细胞癌变、突变和坏死.研究显示NQO1 C609T多态性可能是某些肿瘤发病的易感因素.本文对中国北方地区124例贲门腺癌(GCA)患者NQO1 C609T多态性进行研究.

慢性氟中毒大鼠脑组织中依赖还原型辅酶/醌氧化还原酶1及血红素氧合酶1的表达

目的 观察慢性氟中毒大鼠脑组织中依赖还原型辅酶/醌氧化还原酶1 （quinone oxidoreductase-1,NQO1）和血红素氧合酶1（heme oxygenase-1,HO1）mRNA和蛋白表达水平的改变,以及对转录因子NF_E2相关因子2/抗氧化反应元件（Nrf2/ARE）信号通路的影响,探讨氟中毒性脑损伤的机制.方法 SD大鼠60只,采用随机数字表法,按照体质量分为对照组（饮水氟含量＜ 0.5 mg/L）、染氟组（饮水氟含量为50.0 mg/L）,每组30只,雌雄各半;实验期为10个月,观察氟斑牙情况,并收集大鼠24 h尿液;心脏灌流处死大鼠后,取后肢股骨和大脑组织.用氟离子选择电极法测定大鼠尿氟及骨氟;用蛋白印迹方法和实时荧光定量PCR分别检测脑组织中NQO1、HO1蛋白和mRNA表达水平.结果 染氟组大鼠出现不同程度的氟斑牙,对照组大鼠牙齿无异常改变;染氟组大鼠尿氟[（2.16±0.39）mg/L]及骨氟[（211.07±40.52）mg/kg]均高于对照组[（1.70±0.24）mg/L,（34.67±11.15）mg/kg,t=2.11、3.23,P均＜0.05].染氟组大鼠脑组织中NQO1、HO1蛋白表达[（255.2±14.3）％、（187.2±11.1）％]高于对照组[（100.0±12.2）％、（100.0±8.9）％,t=2.14、2.05,P均＜0.05].染氟组脑组织中NQO1、HO1 mRNA表达[（210.2±9.8）％、（154.5±7.4）％]高于对照组[（100.0±10.4）％、（100.0±9.7）％,t=2.33、2.75,P均＜0.05].结论 慢性氟中毒导致脑组织中NQO1及HO1表达水平升高,可能与Nrf2/ARE信号通路的开启有关,对代偿性增强细胞抗氧化能力有一定作用.

食管癌发病风险与NAD(P)H:醌氧化还原酶1C609T基因多态性

目的 研究 NAD(P) H:醌氧化还原酶 1[NAD(P) H:quinone oxidoreductase 1,NQO1]C6 0 9T基因多态性与食管鳞状上皮癌 (esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)发病风险的关系。方法应用聚合酶链反应 -限制性片段长度多态性方法检测 193例 ESCC患者及 14 1名正常对照的 NQO1C6 0 9T多态性位点的基因型。 结果 ESCC患者的突变型 (T)等位基因频率明显高于健康对照组 (χ2 =4 .86 ,P=0 .0 2 8)。ESCC患者的 NQO1C/ C和 C/ T基因型频率与健康对照组相比差异无显著性 (χ2 值分别为 2 .2 7和0 .12 7;P值分别为 0 .132和 0 .72 1) ,而 ESCC患者的 T/ T基因型频率明显高于对照组 (χ2 =4 .39,P=0 .0 36 )。与 NQO1C/ C及 C/ T基因型相比 ,T/ T基因型可明显增加患 ESCC的风险性 (校正 OR=1.81,95 % CI:1.0 4～ 3.15 ) ,且在有上消化道肿瘤家族史的患者中尤为明显 (校正 OR=2 .2 2 ,95 % CI:1.18～4 .17)。结论 对 NQO1C6 0 9T多态性位点的基因型检测可能对判断 ESCC高危个体具有指导意义。

基于Nrf2/NQO1/GCL信号通路探讨益肾健脑方对血管性痴呆大鼠神经元凋亡的影响

目的研究益肾健脑方对血管性痴呆(vascular dementia,VD)大鼠神经元凋亡的影响及作用机制。方法将60只SPF级大鼠随机分为模型制备组50只和空白组10只,模型制备组分时段结扎双侧颈总动脉,空白组仅分离双侧颈总动脉但不结扎。术后4周通过Morris水迷宫筛选出模型制备成功大鼠28只,随机分为模型组、多奈哌齐组(0.45 mg·kg^(-1)·d^(-1))、益肾健脑方高剂量组(24.3 g·kg^(-1)·d^(-1))、益肾健脑方低剂量组(12.15 g·kg^(-1)·d^(-1))各7只,加上空白组10只,共5组。给药4周后,行Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,HE染色观察大脑皮质和海马CA1区组织病理变化,TUNEL染色观察大脑皮质和海马CA1区神经细胞凋亡情况,免疫组织化学法检测大脑皮质和海马CA1区天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(cysteinyl aspartate-specific proteinase-3,Caspase-3)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-7(cysteinyl aspartate-specific proteinase-7,Caspase-7)蛋白表达水平,Western blot检测海马组织核因子E2相关因子2(nuclear factor-E2-related factor 2,Nrf2)、醌氧化还原酶1(quinone oxidoreductase 1,NQO1)、谷氨酰半胱氨酸连接酶(glutamate-cysteine ligase,GCL)蛋白表达水平。结果与空白组比较,模型组定位航行实验第5天逃避潜伏期明显增加,空间探索实验穿越平台次数明显减少,目标象限停留时间明显缩短(P<0.01);模型组脑组织病理损伤明显,神经细胞凋亡率显著升高(P<0.01);模型组大脑皮质区和海马CA1区Caspase-3、Caspase-7阳性表达显著升高(P<0.01);模型组海马组织Nrf2、NQO1、GCL蛋白表达显著降低(P<0.01)。与模型组比较,多奈哌齐组和益肾健脑方高、低剂量组定位航行实验中第5天逃避潜伏期明显缩短,空间探索实验中穿越平台次数增加,目标象限停留时间明显延长(P<0.05,P<0.01);多奈哌齐组和益肾健脑方高、低剂量组脑组织病理损伤减少,神经细胞凋亡率均显著降低(P<0.01);多奈哌齐组和益肾健脑方高、低剂量组Caspase-3、Caspase-7阳性表达均显著降低(P<0.01);多奈哌齐组和益肾健脑方高、低剂量组海马组织Nrf2、NQO1、GCL蛋白表达均显著升高(P<0.01)。结论益肾健脑方可以改善VD大鼠学习记忆能力、抑制Caspase-3和Caspase-7蛋白表达及减少神经元凋亡,其机制可能与激活Nrf2/NQO1/GCL信号通路有关。

姜黄素通过下调HO-1/NQO1保护肝癌模型小鼠

目的:观察姜黄素对N-亚硝基二乙胺(DEN)联合四氯化碳(CCl4)诱导的C57BL/6J小鼠肝癌模型的作用并探索其机制。方法:取14日龄雄性C57BL/6J小鼠腹腔注射DEN(25 mg/kg),随机分成模型组和姜黄素(100、200和400 mg/kg)给药组,另取同龄雄性小鼠10只作为正常对照组。模型组和姜黄素给药组从第8周开始灌胃给予10%CCl4(5 mL/kg),每周2次;同时,给药组开始灌胃姜黄素,正常对照组灌胃等体积的蒸馏水,每天1次,连续14周。给药结束后处死小鼠,检测小鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)活性,观察肝组织病理学变化,检测血红素加氧酶1(HO-1)和NAD(P)H-醌氧化还原酶1(NQO1)的mRNA表达水平,以及HO-1、NQO1和Ki67蛋白表达水平。结果:与正常对照组比较,模型组小鼠体重显著降低(P<0.01),肝脏指数显著增加(P<0.01),血清ALT和AST活性显著升高(P<0.01),HO-1和NQO1的mRNA表达水平无显著差异(P>0.05),HO-1和NQO1蛋白表达水平显著升高(P<0.05),Ki67阳性表达率显著增加(P<0.05)。姜黄素治疗后,小鼠体重显著升高(P<0.01),肝脏指数无明显变化(P>0.05),癌结节数量显著减少(P<0.05或P<0.01),血清AST活性显著降低(P<0.01),HO-1和NQO1的mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.05),Ki67阳性表达率显著降低(P<0.05)。结论:姜黄素对DEN联合CCl4诱导的肝癌模型C57BL/6J小鼠具有显著保护作用,其机制与抑制HO-1和NQO1表达有关。