探讨NADPH氧化酶NOX家族与高血压的关系

NADPH氧化酶介导的ROS在炎症反应、细胞增殖、血管硬化等疾病起着关键性作用,同时在高血压疾病的发生及发展过程中也起着重要作用。伴随NADPH氧化酶gp91phox亚基结构的发现,即NOX家族各个亚基的研究,对其结构、分布、功能的研究逐渐完善,对其在高血压中的作用机制也越来越趋于成熟。

NADPH氧化酶NOX家族基因在肾透明细胞癌中表达的临床意义

目的利用TCGA数据库分析NADPH氧化酶NOX家族基因在肾透明细胞癌(ccRCC)中表达的临床意义。方法收集TCGA数据库肾透明细胞癌数据集(TCGA-KIRC)中NADPH氧化酶NOX家族基因NOX1–5和DUOX1–2mRNA表达谱资料及临床病例资料。通过Cox回归模型、K-M曲线log-rank检验分析NADPH氧化酶NOX家族基因表达的预后意义,通过卡方检验分析NOX家族基因与ccRCC患者临床病例参数的相关性。采用基因集富集分析(GSEA)方法探讨NOX家族基因调控ccRCC可能的作用机制。结果年龄、T分期、M分期、NOX1mRNA和DUOX1 mRNA表达为ccRCC预后的独立风险因素。NOX1表达增加与ccRCC患者TNM分期和M分期相关。NOX1或DUOX1表达增加患者总生存期均明显短于表达减少患者(P=0.003),NOX1低表达样本富集了黏合连接、背腹轴形成等多种基因集。结论在ccRCC中,NOX1或DUOX1高表达是一种预后不良因素,可能成为预测ccRCC患者转移发生、判断预后的有效生物标志物。

NADPH氧化酶NOX酶家族与急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征研究进展

急性肺损伤（acute lung injury,ALI）和急性呼吸窘迫综合征（acute respiratory distress syndrome,ARDS）是临床常见危重症,目前仍具有较高的病死率。肺炎、胃内容物反流误吸、有毒气体吸入等直接肺损伤或者脓毒血症、

熊果酸(UA)对大鼠活化型肝星状细胞(HSC)的NADPH氧化酶(NOX)亚基及PI3K/Akt、P38MAPK信号通路活化的影响

目的观察熊果酸(ursolic acid,UA)对大鼠活化型肝星状细胞-6(hepatic stellate cell T6,HSC-T6)NADPH氧化酶(NAPDH oxidase,NOX)亚基及其调控的磷脂酰肌醇-3-羟激酶/蛋白激酶(phosphatidyl inosit013-kinase/Akt,PBK/Akt)、P38丝裂原活化蛋白激酶(P38 mitogen-activated protein kinase,P38MAPK)信号通路及其对基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)、基质金属蛋白酶-1(metalmatrix proteinase-1,MMP-1)蛋白表达的影响,并探讨其机制。方法取对数生长期的HSC-T6细胞,随机分成6组:空白对照组、瘦素组(100 ng/mL)、UA干预组(UA 50μmol/L+瘦素)、NOX抑制剂DPI干预组(DPI 20μmol/L+瘦素)、P38MAPK抑制剂SB203580干预组(SB203580 10μmol/L+瘦素)及PI3K抑制剂LY294002干预组(LY294002 10μmol/L+瘦素)。采用Western blot法分别检测NOX亚基gp91^(phox)、p22^(phox)、p67^(phox)、Rac1蛋白表达;信号通路PI3K、Akt、P38MAPK的活化及TIMP-1、MMP-1蛋白表达。结果 UA能显著抑制瘦素诱导的gp91^(phox)、p22^(phox)、p67p^(phox)、Rac1蛋白表达(P均<0.01),但UA对gp91^(phox)、p67^(phox)蛋白表达的抑制作用不及DPI和LY294002。UA能抑制瘦素诱导的PI3K蛋白表达及Akt、P38MAPK蛋白磷酸化(P均<0.01),与DPI及LY294002作用的差异无统计学意义。UA能抑制瘦素诱导的TIMP-1蛋白表达,同时促进MMP-1蛋白表达(P均<0.01)。结论 UA能抑制瘦素诱导的大鼠HSC-T6细胞NOX亚基gp91p^(phox)、p22ph^(phox)、p67p^(phox)、Rac1表达及PI3K/Akt、P38MAPK信号通路的活化;其下调TIMP-1蛋白及上调MMP-1蛋白表达的机制可能与UA抑制NOX调控的PI3K/Akt及P38MAPK信号通路有关。

NADPH氧化酶Nox4调控非诺贝特的抗高血压心肌肥大效应

目的拟阐明NADPH氧化酶Nox4与非诺贝特抗高血压心肌肥大效应的关系。方法构建腹主动脉缩窄(abdominal aorta coarctation,AAC)诱导的高血压大鼠模型,观察非诺贝特对高血压大鼠左心室肥大的影响。结果非诺贝特可显著抑制AAC高血压大鼠左心室肥大。与假手术组比较,AAC组左心室中NADPH氧化酶Nox4蛋白和mRNA水平均显著增加;与AAC组比较,非诺贝特剂量依赖性降低AAC高血压大鼠左心室中NADPH氧化酶Nox4蛋白和mRNA水平。结论降低NADPH氧化酶Nox4表达可能是非诺贝特发挥抗高血压心肌肥大效应的重要机制。

NADPH氧化酶家族成员促肝纤维化的研究进展

肝纤维化是由肝脏在各种慢性肝损伤条件下的损伤修复反应造成,以细胞外基质过度沉积为主要特征.许多证据表明NADPH氧化酶(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase,NOX)及其产生的活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)引起的氧化应激在肝纤维化中起关键作用.NOX是一个多亚基复合体,在肝脏中,吞噬细胞型和非吞噬细胞型的NOX均有功能性表达,并对引起肝纤维化的主要细胞-肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)均具有明显的促纤维化作用.本文就NOX家族在肝纤维化的发生、发展中的作用的近几年研究进展做一综述.

NADPH氧化酶Nox2和Nox4在小鼠肠炎中的表达及意义

目的探讨烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶家族的主要成员NADPH氧化酶2 (Nox2)和Nox4在小鼠肠炎模型结肠组织中的表达及意义。方法选用6～8周龄的129S/SV雄性小鼠建立结肠炎模型,将其随机分为对照组、1. 5%葡聚糖硫酸钠(DSS)组和3. 0%DSS组,对照组自由饮水,1. 5%DSS组和3. 0%DSS组分别给予含1. 5%DSS和3. 0%DSS饮用水自由饮用6 d。通过体质量变化、疾病活动指数(DAI)评分和组织病理学评分等方法评估肠道炎症程度。使用酶标仪间接测定小鼠血清中丙二醛(MDA)的含量,以评估实验小鼠的氧化应激程度。采用实时定量PCR技术检测结肠组织中促炎因子白介素-1β(IL-1β)、白介素-6 (IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)以及Nox2和Nox4 mRNA表达情况;采用免疫组织化学法检测结肠组织中Nox2和Nox4蛋白表达情况。结果对照组小鼠未见肠炎表现,1. 5%DSS组小鼠呈轻度肠炎表现,3. 0%DSS组小鼠呈重度肠炎表现。杯状细胞在1. 5%DSS组体积增大、数量减少,在3. 0%DSS组进一步减少,甚至消失(均P <0. 05)。MDA在1. 5%DSS组升高,在3. 0%DSS组进一步升高(均P <0. 05)。Nox2和Nox4 mRNA和蛋白的表达量在不同炎症程度时表达不同。两者mRNA和蛋白的表达量一致,炎症组均显著高于对照组,且均随炎症程度增加表达进一步增加(均P <0. 05)。Nox2蛋白主要表达于浸润的吞噬细胞和中性粒细胞等炎细胞中;Nox4蛋白表达于中性粒细胞和淋巴细胞等炎细胞中。结论 Nox2和Nox4在小鼠肠炎的发病过程中发挥重要作用。

NADPH氧化酶NOX1、NOX2和DUOX2在溃疡性结肠炎中的表达分析

目的探讨NADPH氧化酶家族(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidases,NOXs)的主要成员NOX1、NOX2和双氧化物酶(dual oxidase,DUOX)2(人:NOX1、NOX2和DUOX2;小鼠:Nox1、Nox2和Duox2)在人炎症性肠病和小鼠肠炎模型结肠中的表达。方法人结肠标本选自于通过结肠镜活检或手术切除的炎症性肠病组织及距离病变组织边缘5 cm以上正常组织;同时选用8~10周龄的C57BL/6雌性小鼠建立结肠炎模型,采用掷硬币法将其随机分为对照组和慢性肠炎组,慢性肠炎组先自由饮用1.0%(质量分数)葡聚糖硫酸钠7 d,然后自由饮水14 d,循环3次;通过体质量变化和HE染色方法评估肠道炎性反应程度。采用实时定量PCR技术和免疫组织化学方法分别检测结肠组织中NOX1、NOX2及DUOX2 mRNA和蛋白表达情况,并分析在人炎症性肠病中三者表达情况与临床特征之间的关系。结果 NOX1、NOX2和DUOX2 mRNA在人炎症性肠病结肠组织中的表达量均显著高于自身正常对照组织,分别增高2.8、2.0和3.3倍(P均<0.01);与人不同,Nox1和Duox2 mRNA在小鼠慢性肠炎结肠组织中的表达量差异无统计学意义,Nox2 mRNA增加2.4倍(P<0.01)。Nox1蛋白在正常结肠上皮细胞刷状缘和胞质中表达;Nox2蛋白主要表达于浸润的吞噬细胞和中性粒细胞;Duox2蛋白在正常结肠黏膜组织中低表达;三者在人炎症性肠病结肠组织中表达均上调(均P<0.01);在小鼠慢性肠炎模型中,Nox2和Duox2蛋白上调(均P<0.01),而Nox1无变化。除了NOX2 mRNA在男性病人表达高于女性病人外,未发现这些氧化酶与病人临床特征之间有关联。结论NOX1、NOX2和DUOX2不但在维持机体正常生理功能过程中发挥重要作用,而且在炎症性肠病初期阶段的发病中也起一定的作用。

NADPH氧化酶Nox1和Duox2在小鼠肠炎中的表达和意义

目的:探讨NADPH氧化酶Noxl和Duox2在小鼠肠炎发病中的表达及意义.方法:将6-8周龄的C57BL/6,小鼠随机分为正常组、1.5%葡聚糖硫酸钠(dextran sulphate sodium,DSS)组和3.0%DSS组,每组10只,正常组正常饮水,1.5%和3.0%DSS组分别自由饮用含有1.5%或者3.0%DSS的饮水,共6d建立小鼠急性肠炎模型.通过疾病活动指数(disease activity index,DAI)评分、结肠长度测定和HE染色等方法评估肠道炎症程度.利用生化方法检测血清丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量以及结肠组织中氧化型谷胱甘肽/还原型谷胱甘肽(oxidized glutathione/glutathione,GSSG/GSH)比率等氧化应激指标,以评估机体氧化应激程度.采用免疫组织化学方法和实时定量PCR技术分别检测小鼠结肠组织中NADPH氧化酶Nox1和Duox2蛋白及mRNA表达情况.结果:正常组小鼠无肠炎,1.5%DSS组、3.0%DSS组小鼠分别呈轻度和重度肠炎.氧化应激指标(MDA、GSSG/GSH)在1.5%DSS组升高,而3.0%DSS组进一步升高(均P<0.05).NADPH氧化酶Nox1与Duox2蛋白和mRNA在不同炎症程度时表达不同:Nox1蛋白和mRNA在正常组呈高表达,在1.5%DSS组表达下调(P<0.05),在3.0%DSS组进一步下调(P<0.05);Duox2蛋白和mRNA在1.5%DSS组表达较正常组明显上调(P<0.05),而在3.0%DSS组表达下调至正常水平.结论:Nox1主要在维持肠道正常生理功能中发挥作用,而Duox2除了维持正常生理功能外,可能还积极地参与肠炎发病过程.

NADPH氧化酶对ROS和铁死亡在骨稳态作用中的研究进展

NADPH氧化酶(NADPH Oxidase,NOXs)是产生超氧化物的酶,在机体防御、生物合成途径以及细胞信号传导中发挥作用。NOXs作为活性氧(ROS)的主要来源,已成为抗氧化应激、炎症、纤维化和肿瘤的热门靶点。文献提示,NOXs及其相关的氧化还原反应与破骨细胞和成骨细胞密切相关,它驱动膜相关活性氧(reactive oxygen species,ROS)及启动铁死亡,影响骨形成和骨吸收。本文拟综述NOXs对ROS和铁死亡在骨稳态中的作用为NOXs治疗骨代谢相关疾病提供文献参考。

NADPH氧化酶NOX2和NOX3基因在胃癌组织中表达的探讨

目的探讨NADPH氧化酶NOX2和NOX3基因在胃癌组织中的表达情况。方法收集在我院行胃癌根治术患者的胃癌及自身正常对照组织标本各15例,慢性胃炎患者胃镜下活检胃黏膜组织标本20例,采用实时定量PCR法检测NOX2和NOX3 mRNA的表达情况。结果 NOX2和NOX3 mRNA在胃癌组织中的表达量显著高于自身正常对照组织和慢性胃炎组织;NOX2 mRNA在胃癌自身正常对照组织与慢性胃炎胃黏膜组织中的表达无明显差异;NOX3 mRNA在后两者中的表达量均很少。结论 NADPH氧化酶NOX2和NOX3在胃癌的发生和发展过程中可能发挥重要作用。

灵芝多糖抑制NADPH氧化酶表达防治大鼠动脉粥样硬化

目的探讨灵芝多糖对食饵性实验动脉粥样硬化(AS)大鼠的防治作用及其作用机制。方法将40只大鼠随机分为正常对照组、动脉粥样硬化模型组、灵芝多糖低、中、高剂量预防组。12周末颈动脉取血检测血清丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量;处死大鼠,光镜观察各组主动脉粥样斑块形成情况;取主动脉测定活性氧(ROS)含量;免疫印迹观察其Nox4、p22phox蛋白表达情况。结果灵芝多糖各剂量组均可有效抑制动脉粥样硬化病理进程,降低血清MDA、SOD及主动脉ROS含量等氧化应激反应指标,减少主动脉Nox4、p22phox蛋白表达。结论灵芝多糖通过下调Nox4、p22phox等NADPH氧化酶蛋白表达水平抑制主动脉氧化应激反应,明显改善大鼠动脉粥样硬化。

辛伐他汀对内皮细胞NADPH氧化酶表达和活性氧生成的影响

目的探讨辛伐他汀对内皮细胞NADPH氧化酶表达及活性氧生成的影响。方法以不同浓度辛伐他汀和10-8mol.L-1辛伐他汀不同处理时间培养内皮细胞,用RT-PCR检测NADPH氧化酶各亚单位(NOX4、NOX2、p67phox、p22phox、RAC)表达的变化;用流式细胞仪检测细胞内活性氧的浓度。结果辛伐他汀能下调NOX4、p67phox、p22phoxmRNA表达,同时下调细胞内活性氧浓度。结论辛伐他汀可能通过下调NADPH氧化酶表达,以减少活性氧生成从而达到抗氧化损伤作用。

NADPH氧化酶亚基在心脏重构中作用的比较

早期研究证实,烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(还原型辅酶Ⅱ,NADPH)氧化酶在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)介导的心室重构中发挥重要作用,随着对NADPH氧化酶的深入研究,发现其共有5种亚基和两种相关的亚基,其中在心脏组织中表达的主要为Nox2与Nox4。Nox2在AngⅡ、心肌梗死及阿霉素介导的心室重构中具有重要的促进作用,而在压力负荷过大时引起的左心室肥大中Nox4 mRNA表达上调明显,由此可得出NADPH氧化酶亚基Nox2与Nox4在心室重构中的作用不同。因此,深入研究NADPH氧化酶亚基及其在心室重构中的作用,将成为改善心室重构新的治疗靶点。

NOX4介导的氧化应激参与垂体腺瘤出血性卒中的发生

目的探讨还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶4(NOX4)在垂体腺瘤出血性卒中(PA)中的作用。方法取厦门大学附属中山医院神经外科垂体腺瘤手术剩余标本,根据术后病理分为出血卒中(PA)组和非卒中(non-PA)组,每组18例。苏木精-伊红(HE)染色明确是否出血;免疫组织化学染色检测NOX4阳性细胞百分数;Western blot检测NOX4蛋白表达量;DCFH-DA探针检测活性氧(ROS)平均荧光强度;TUNEL法检测细胞凋亡率。结果出血卒中组组织间大量红细胞渗出,非卒中组未见红细胞。出血卒中组表达的NOX4阳性细胞百分数为21.53%±4.25%,显著高于非卒中组的4.29%±1.71%(P<0.001)。出血卒中组NOX4蛋白表达水平显著高于非卒中组(P<0.001)。出血卒中组ROS平均荧光强度显著高于非卒中组(P<0.001)。出血卒中组细胞凋亡率为38.64%±12.46%,显著高于非卒中组的6.19%±2.40%(P<0.001)。结论NOX4参与垂体腺瘤出血性卒中的发生。NOX4介导的氧化应激调控细胞凋亡可能是垂体腺瘤出血性卒中的潜在机制。

木薯NOX基因家族成员的生物信息学及其表达分析

【目的】搜索鉴定木薯还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(NOX)基因家族成员,分析其生物学信息及在不同组织和非生物胁迫下的表达模式,为深入研究该家族基因对木薯块根发育的调控机理及提高木薯抗逆性提供理论参考。【方法】从JGI数据库下载木薯的基因组序列,由pfam数据库下载4个NOX蛋白结构域相关的HMM文件,通过HMMER程序筛选NOX基因家族成员,利用生物信息学分析软件对该家族蛋白的理化性质、氨基酸序列和结构特征进行分析。基于GEO数据库的转录组测序(RNA-Seq)数据,对木薯NOX基因家族成员在不同组织和干旱胁迫下的表达模式进行分析。【结果】从木薯基因组中共鉴定到15个NOX基因家族成员,包括9个NOX基因和6个FRO基因(NOX祖先基因)。FRO基因的外显子数(6~9个)明显少于NOX基因的外显子数(11~14个),且FRO基因的内含子序列较NOX基因短,NOX基因的第一个外显子相对保守。15个NOX基因家族成员分布在木薯的9条染色体和1个结构支架上,且均被定位在染色体末端,除6号染色体有4个基因、8号和14号染色体有2个基因外,其他染色体均只有1个基因。木薯NOX蛋白的分子量和氨基酸数明显高于FRO蛋白,而理论等电点(pI)差异不明显。FRO蛋白含6~9个保守跨膜结构域,而NOX蛋白均只含4个跨膜螺旋区,且均位于第350~750位氨基酸残基。木薯NOX家族蛋白有10个保守结构域,其中Motif1和Motif8存在于所有的NOX和FRO蛋白中,Motif6为NOX蛋白所特有,Motif3只独立存在于FRO蛋白中。NOX蛋白均具有典型的保守结构域和相似的蛋白质结构,其脱氢酶结构域明显折叠成催化域裂缝结构,且C末端氨基酸极度保守。由RNA-Seq数据的基因表达谱可知,NOX基因家族成员在不同木薯叶片、中静脉、叶柄、茎、侧芽、茎尖分生组织、根尖分生组织、易碎胚性愈伤组织、胚性愈伤组织(OES)和贮藏根中均有表达,但呈不同的表达模式,其中,Manes.14G042600和Manes.S089900在储藏根中高表达,Manes.06G128700和Manes.09G172500在须根和根尖分生组织中高表达。在木薯品种KU50和新选048的叶片中,Manes.14G042600基因在干旱胁迫下呈上调表达,推测NOX基因在特定组织及响应非生物胁迫过程中扮演重要角色。【结论】木薯NOX基因家族成员具有保守基因结构,其编码蛋白具有保守的功能域,尤其是C端氨基酸序列;NOX基因表达具有组织特异性,部分成员的表达受非生物胁迫的影响。FRO蛋白和NOX蛋白具有较明显的共进化关系。

基于ROCK/NOX4信号通路探究刺芒柄花素对2型糖尿病大鼠内质网应激损伤及肾功能的影响

目的基于RAS同源基因家族成员相关激酶(ROCK)/烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(NOX)4信号通路探究刺芒柄花素对2型糖尿病大鼠内质网应激损伤及肾功能的影响。方法SPF级健康8周龄雄性C57BL/6大鼠60只,随机分为5组,各12只,健康组、模型组、刺芒柄花素低、中、高组,除健康组外均建立2型糖尿病大鼠模型,刺芒柄花素低组、刺芒柄花素中组、刺芒柄花素高组分别给予20、40、100 mg/kg刺芒柄花素灌胃,其余组别灌胃等体积生理盐水。采用自动生化分析仪测定肾功能指标。苏木素-伊红(HE)染色与Masson染色观察大鼠肾组织病形态。TUNEL检测肾小管上皮细胞凋亡。免疫组化检测RAS同源基因家族成员(Rho)A、NOX4、ROCK阳性表达。Western印迹检测内质网应激相关蛋白表达。结果HE染色结果显示:健康组肾脏组织结构正常;模型组肾小球有一定程度萎缩,组织结构排列不均匀,并且有肿胀、脱落现象、还存在空泡样变性、鲍曼囊腔扩,而经过刺芒柄花素干预后,上述情况有所改善,且呈现出明显的剂量依赖性。Masson染色结果显示:健康组肾组织正常;模型组肾小球、肾小管基底膜增厚,产生空泡样病变,肾间质胶原纤维沉积明显;在经过刺芒柄花素干预后上述状况明显改善,且呈现出明显的剂量依赖性。健康组24 h MAU、SCr、BUN、细胞凋亡率、RhoA、NOX4、ROCL、eIF2α、GRP78水平显著低于模型组(P<0.05)。模型组24 h MAU、SCr、BUN、细胞凋亡率、RhoA、NOX4、ROCL、eIF2α、GRP78水平显著高于刺芒柄花素低组(P<0.05)。刺芒柄花素低组24 h MAU、SCr、BUN、细胞凋亡率、RhoA、NOX4、ROCL、eIF2α、GRP78水平显著高于刺芒柄花素中组(P<0.05)。刺芒柄花素中组24 h MAU、SCr、BUN、细胞凋亡率、RhoA、NOX4、ROCL、eIF2α、GRP78水平显著高于刺芒柄花素高组(P<0.05)。结论刺芒柄花素可能是通过调控Rho/ROCK/NOX4信号通路抑制了2型糖尿病大鼠内质网应激,改善肾功能,对肾脏起保护作用。

黄芪皂苷Ⅱ通过阻断NOX/ROS/AKT/mTOR信号通路抑制低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞增生

目的探讨黄芪皂苷Ⅱ(AS-Ⅱ)对低氧诱导的肺动脉平滑肌细胞(PASMC)过度增生的抑制作用及相关机制。方法将大鼠原代PASMC分为常氧组、低氧组、低氧联合(20、40、80)μmol/L AS-Ⅱ处理组、低氧联合还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(NOX)抑制剂VAS2870处理组,在常氧(210 mL/L O_(2))或低氧(20 mL/L O_(2))条件下培养24 h。利用CCK-8法检测细胞增殖活性,二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)荧光探针检测细胞内活性氧(ROS),Western blot法检测细胞蛋白激酶B(AKT)、磷酸化的AKT(p-AKT)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化的mTOR(p-mTOR)、增殖细胞核抗原(PCNA)以及NOX1、NOX4的蛋白表达。结果与常氧组相比,低氧组PASMC明显增生,细胞内ROS含量显著升高,PCNA、p-AKT、p-mTOR、NOX1、NOX4蛋白均表达增加。AS-Ⅱ处理抑制低氧诱导的PASMC增生,降低细胞ROS水平,并抑制PCNA、p-AKT、p-mTOR、NOX1、NOX4的蛋白表达。VAS2870处理后也有类似改变。结论AS-Ⅱ抑制低氧诱导的PASMC增生,可能与阻断NOX/ROS/AKT/mTOR信号通路相关。

NOX4和eNOS在小鼠慢性缺氧肺血管重塑中的表达及意义

目的观察内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和NOX4在小鼠慢性缺氧肺动脉高压形成过程中的改变。方法用HE染色法和免疫组织化学法观察C57BL/6 J小鼠在常氧和慢性持续缺氧(10±0.5%O2)1、3、7、14 d后肺血管的改变及非肌型小血管α-SMA和eNOS蛋白表达的改变。用Real Time PCR法检测各组小鼠肺组织中eNOS和NOX4 mRNA的含量。结果 C57BL/6 J小鼠慢性缺氧后肺小动脉血管管壁增厚、肺泡内肺动脉α-SMA表达增加,肺组织eNOS和NOX4 mRNA以及肺动脉内皮细胞eNOS蛋白的表达随缺氧时间延长进行性升高。结论 eNOS和NOX4可能在慢性缺氧肺动脉高压的发病机制中发挥重要作用。

抑制NOX缓解酒精肝模型小鼠肝细胞损伤及脂代谢紊乱

背景:研究表明,应激状态下小鼠心肌、骨骼肌、肾脏及脑组织NOX蛋白过度上调,而NOX介导氧化应激在过量饮酒导致的酒精性肝损伤中的作用尚不清楚。目的:探讨NOX介导氧化应激在肝脏正常生理及酒精性肝损伤病理状态下的作用。方法:(1)6只雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组、正常药物组,每组3只;正常药物组腹腔注射NOX抑制剂夹竹桃麻素(10 mg/kg),正常对照组注射同等剂量溶剂,连续注射4 d;检测小鼠血清及肝组织脂代谢相关指标,并检测肝组织NOX2、NOX4蛋白表达;(2)18只C57BL/6J雄性小鼠随机分为普通对照组、饮酒对照组、饮酒药物组,每组6只;普通对照组喂养TP4030C对照液体饲料;饮酒对照组和饮酒药物组喂养Lieber-De Carli液体饲料构建酒精性肝细胞损伤模型,饮酒药物组在造模期间腹腔注射夹竹桃麻素(10 mg/kg,6 d/周,连续5周),其他两组小鼠给予同等剂量溶剂;(3)记录小鼠体质量、附睾脂肪相对质量、肝指数、骨骼肌相对含量,进行糖耐量实验,测定血清肝功能损伤及脂代谢指标,检测肝组织丙二醛、超氧化物歧化酶水平及三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇浓度,观察肝组织苏木精-伊红染色情况,测试肝组织NOX2、NOX4蛋白表达。结果与结论:(1)与正常对照组比,正常药物组小鼠肝组织三酰甘油水平、血清谷丙转氨酶及谷草转氨酶水平显著增加,肝组织高密度脂蛋白胆固醇浓度及NOX2、NOX4蛋白表达显著降低(均P<0.05或P<0.01);(2)与普通对照组比,饮酒对照组小鼠附睾脂肪相对质量、血清及肝组织高密度脂蛋白胆固醇浓度显著降低,肝组织三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇、血清谷丙转氨酶水平及NOX4蛋白表达显著增加;(3)与饮酒对照组比,饮酒药物组小鼠血清及肝组织高密度脂蛋白胆固醇浓度显著增加,血清谷丙转氨酶、肝组织低密度脂蛋白胆固醇水平和NOX4蛋白表达显著降低;(4)结果证实,抑制NOX缓解酒精性肝细胞损伤及脂代谢紊乱,夹竹桃麻素在肝脏生理及酒精性肝损伤病理状态下作用不同。