大鼠肺巨噬细胞iNOS电镜细胞化学定位显示法

目的 对大鼠肺泡巨噬细胞NOS进行细胞内定位显示。方法 由大鼠支气管肺泡灌洗液中获取肺泡巨噬细胞 ,富集制备成单层细胞爬片。在 37℃ ,5%CO2 的二氧化碳培养箱中 ,用LPS ( 1g L)刺激 2 4h以诱导肺泡巨噬细胞NOS表达。采用NADPH d电镜细胞化学术对肺泡巨噬细胞NOS进行定位显示。结果 活化的AM胞浆内可见大量颗粒状电子密度沉淀。结论 NADPH

心肌缺血再灌注损伤肌浆网钙泵活性变化电镜酶细胞化学研究

目的 :研究心肌缺血再灌注损伤肌浆网、肌膜钙泵 (Ca2 + ATPase)功能变化。方法 :采用大鼠离体心脏模型应用电镜酶细胞化学及生化技术 ,研究缺血再灌注心肌肌浆网、细胞膜原位钙泵分布及活性变化。结果 :心肌细胞钙泵以高电子密度颗粒主要分布于肌浆网、肌膜等膜结构 ,缺血 30min钙泵反应产物显著减少 ,再灌注 30min及 6 0min酶进一步减少或缺失。生化钙泵活性测定显示心肌缺血 30min时为 (0 .0 48± 0 .0 10 ) μmol/mg·h-1,再灌注 6 0min为 (0 .0 6 9± 0 .0 18) μmol/mg·h-1,酶活性较对照组显著降低 (P <0 .0 1,P <0 .0 5 )。结论 :本研究揭示钙泵活性降低发生在心肌缺血期 ,钙泵功能抑制是心肌缺血再灌注损伤的重要环节 ,是亚细胞Ca2 +

魏氏拟尾柱虫休眠包囊细胞器的电镜酶细胞化学研究

为研究纤毛虫在休眠状态下细胞生命活动的特征及细胞器的功能 ,应用电镜酶细胞化学方法显示 ,魏氏拟尾柱虫 (Paraurostylaweissei)休眠包囊中 ,在自噬泡位置 ,酸性磷酸酶反应颗粒形成多种形态的泡状体 ,ATP酶反应颗粒聚集形成泡状体或球状体 ,在分散分布的线粒体中于内膜位置形成少数琥珀酸脱氢酶反应颗粒。由所得结果推测 ,纤毛虫休眠包囊中的自噬泡消化现象是细胞在特殊生理条件下的重要生命活动 ,是休眠细胞中物质利用和能量获得的主要途径 ;自噬泡消化中也进行着对能量的利用过程 ;分散分布的线粒体是功能细胞器 ,它们与提供细胞生命活动能量有关。

兔圆小囊产溶菌酶细胞的免疫电镜组织化学观察

采用免疫组织化学和免疫电镜细胞化学的方法 ,对兔圆小囊组织中产溶菌酶细胞进行了观察。免疫组织化学观察发现 ,产溶菌酶阳性细胞在兔圆小囊的粘膜上皮、圆顶上皮以及淋巴组织的滤泡生发中心、圆顶区和帽区均有分布 ,且受到多杀性巴氏杆菌感染后 ,阳性细胞增多 ,阳性反应增强。免疫电镜结果显示 ,在兔圆小囊的淋巴组织DNES细胞的颗粒中发现溶菌酶免疫组织化学阳性反应物。这一重要发现为神经 内分泌 免疫网络学说提供了新的证据。

四君子汤抗骨骼肌疲劳作用的定量细胞化学和电镜观察

本文采用细胞化学技术及单细胞定量对运动疲劳小鼠股四头肌不同类型肌纤维的成分进行分析，实验结果显示：经服四君子汤恢复后的三种肌纤维类型的糖原含量、琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）的活性明显高于疲劳组，超微结构的改变则位于线粒体的变化，提示四君子汤对解除骨骼肌的高度疲劳、增强体质具有非常重要的作用。

人胎儿胸腺哺育细胞的组织化学和电镜观察

本研究用组织化学法、扫描和透射电镜观察了人胎儿胸腺哺育细胞(thymic nurse cell,TNC)。结果表明,TNC 的 ANAE、AcP、AIP、ATPase、5′-Nase 和 PAS 均呈阴性反应,TNC胞质内含有数量不等的淋巴细胞,其中少数淋巴细胞的 ANAE、AcP、AIP 和 ATPase 呈阳性反应。TNC 内的淋巴细胞 ANAE 阳性率为26.8%。TNC 外的淋巴细胞 ANAE 阳性率为51.3%,两者的结果比较,有显著性差异(P<0.01,u=11.23)。扫描电镜观察,TNC 为球形,细胞表面较光滑,有少量短微绒毛。1μm 半薄切片显示,胸腺皮质内可见 TNC 样细胞,细胞界限清楚,核圆或椭圆形,染色淡。胞质中可见数量不等的淋巴细胞。透射电镜观察,TNC 胞质内可见张力丝,表明这些细胞具有上皮细胞特征。TNC 胞质内的淋巴细胞可见正常的线粒体、游离核糖体等细胞器。本文对上述结果与胸腺巨噬细胞作了比较和讨论。

干旱逆境下小麦幼苗细胞叶绿体内钙离子浓度变化的电镜细胞化学研究

采用改进的焦锑酸钙沉淀的细胞化学方法 ,探讨了在干旱逆境条件下叶绿体与Ca2 + 水平变化的关系。结果表明 :在正常水分下生长的小麦幼苗 ,其叶绿体中含有少量Ca2 + ;水分胁迫 2 4、4 8h ,叶绿体膜上密布Ca2 + ;随着胁迫时间的增加 ,叶绿体超微结构受到的伤害越发严重 。

贻贝棘尾虫休眠包囊胞质的电镜酶细胞化学

该文应用电镜酶细胞化学方法显示 ,贻贝棘尾虫休眠包囊中 ,在胞质嗜锇粒和拟糖原粒区 ,酸性磷酸酶反应颗粒聚集于具有消化泡作用的泡状体上 ,葡萄糖 6 磷酸酶反应也定位在自噬泡膜位置。作者据所得结果推测 ,嗜锇粒可能是棘尾虫休眠包囊中用于自噬作用的主要结构成分 ,休眠细胞代谢过程中胞质膜结构也具有补充形成消化泡膜的作用。

脊髓背角5-羟色胺纤维的来源和超微结构分布——HRP与免疫细胞化学结合法研究和免疫电镜观察

本文用HRP与免疫细胞化学结合法研究和免疫电镜观察进一步证实了脊髓背角内5-羟色胺(5-HT)能末梢的来源及其超微结构特征。结果表明:脊髓背角内5-HT能轴突末梢主要来自延髓中缝大核及腹侧网状结构。脊髓背角内5-HT免疫反应阳性结构见于Ⅰ层及Ⅱ层外带,为细的无髓纤维和有髓纤维。标记末梢与未标记末梢之间主要形成轴-轴突触(标记末梢可为突触前成分,也可是突触后成分),偶尔可见轴-树突触,未见非突触释放的形态学图象。根据其超微结构特征,我们推测脊髓背角内5-HT能系统不是以弥散的非突触方式影响有关结构,而是以突触方式直接或间接影响背角中间神经元的兴奋性,和直接抑制一级传入冲动而发挥其镇痛作用。

兔圆小囊及肠道组织中抗菌肽的免疫组织化学和免疫电镜细胞化学定位

采用免疫组织化学和免疫电镜细胞化学技术观察了兔圆小囊及其他肠道组织中产抗菌肽细胞的分布定位。免疫组织化学观察发现,产抗菌肽细胞在兔圆小囊的黏膜上皮、圆顶上皮以及淋巴组织的滤泡生发中心、圆顶区和帽区均有分布;在兔感染多杀性巴氏杆菌后,圆小囊及其他肠道组织中的抗菌肽免疫组织化学阳性细胞数量明显增多,阳性反应增强。免疫电镜细胞化学观察结果显示,除肠道黏膜上皮细胞、异嗜性白细胞、巨噬细胞中存在抗菌肽免疫组织化学阳性反应信号外,在淋巴细胞内也发现阳性反应信号,尤其是在圆小囊淋巴组织中的DNES细胞内发现抗菌肽免疫组织化学阳性反应信号。表明圆小囊的DNES细胞和淋巴细胞均可产生抗菌肽。

高压、高压氧对小鼠大脑皮质酶活性的影响——电镜细胞化学研究

用ICR纯种雄性小鼠24只,分空白对照组、高压和高压氧三组。后两组置于同一动物加压舱内,而高压氧组动物又在其中的小套舱内。前者给予5 ATA空气,后者吸入5ATA纯氧,停留37分钟。动物出舱后,迅速断头取材,分别按电镜形态观察和电镜细胞化学要求处理。1)超微结构变化高压组只有少数线粒体有轻度变化,其他细胞器与空白对照组无明显差别。高压氧组神经元结构有不同程度变化,少数线粒体肿胀,约1/4线粒体的嵴消失,基质清亮呈空泡,还有少数树突和线粒体内有致密物质。2)电镜细胞化学酶活性变化高压组毛细血管内皮AKP和G-6-P及神经元内的LDH活性比空白对照组稍增强。高压氧组LDH活性比高压组增强。三组实验中,高压氧组毛细血管内皮细胞的AKP、G-6-P活性反应最强。

肿瘤细胞表面蛋白多糖的电镜细胞化学观察

本文用正电荷试剂(红Ruthenium,Red.RR,胶体铁Collodial Iron,(I)和凝集素(刀豆球蛋白AConcanavalin A,麦芽凝集素wheat Germ Agglwinin,WGA)显示蛋白多糖的电镜细胞化学方法,较细致地观察了Ehrlicb腹水癌细胞膜表面蛋白多糖的定位、分布及其超微结构。结果表明:蛋白多糖清楚地定位于细胞膜表面,形成细胞外衣,尤其在癌细胞微绒毛表面较其它部分有较高的负电荷密度。RR和CI法分别显示带负电荷的氨基多糖和涎酸蛋白,在高倍电镜下它们呈高电子密度的球状小颗粒和丝状颗粒。ConA和WGH分别特异地显示甘露糖和N-2酰半乳糖或涎酸。

不同年龄人牙龈肥大细胞的组织化学和电镜研究

取40例临床正常的人牙龈组织,按年龄不同分为2～16岁、17～60岁、61～65岁三组,对每组肥大细胞进行光镜与电镜观察.结果发现:随着年龄增长,肥大细胞数量表现为由少到多,又由多到少的变化;Alcian蓝-藏红组化染色后,三组均以蓝染的肥大细胞为主,呈红蓝混合色的肥大细胞亦随年龄增长出现由少到多,又由多到少的变化;临界电解质浓度的测定结果显示,三组均较高,但随年龄增长仍有增高趋势;电镜下多数肥大细胞渐增大,核异染色质增多,颗粒增多,且逐渐形成有一定构型的颗粒结构.以上结果提示,不同年龄组的牙龈肥大细胞在数量、颗粒的组化性质及超微结构方面均发生了改变,表明同一组织的肥大细胞在不同年龄组表型不同,呈现出异质性.

X射线能谱分析方法及其在电镜酶细胞化学中的应用

近年来,X射线能谱分析和电镜酶细胞化学在许多领域中得到了广泛的应用。两者的结合把超微分析和超微观察密切结合起来,为超微结构的研究提供了可靠的分析手段。本文对X射线能谱分析的原理作简单地介绍,同时对X射线能谱分析在电镜酶细胞化学中的应用和实验方法进行了分析和讨论。

下丘脑弓状核儿茶酚胺能神经支配的电镜细胞化学研究

将6-OHDA 注入大鼠第三脑室,24小时后用电镜细胞化学方法观察下丘脑弓状核内溃变的 CA 能神经元。结果表明:在弓状核内有大量溃变终末,其特征为:轴浆电子密度增高,突触囊泡及线粒体崩解,致密小体形成及多房形溃变图象。大多数溃变终末均不同程度地被胶质细胞突起所围绕。部分弓状核神经元核周质也出现溃变迹象(粗面内质网减少、线粒体变性及致密小体形成等)。溃变的 CA 能神经终末可形成轴树、轴体、轴轴及轴突-伸长细胞突触联系。上述溃变图象符合 DA 能神经的化学损毁表现,故作者认为这些溃变的终末主要属于 DA 能纤维。它们通过多种突触机制调节和影响下丘脑弓状核的功能。弓状核的 DA 能神经支配可能来自下丘脑本身的 A_(12)、A_(14)或 A_(15)细胞群。

微波固定对琥珀酸脱氢酶细胞化学影响的电镜观察

对浸泡在四种不同液体（生理盐水、０．２５％戊二醛、２．５％戊二醛、５％戊二醛）中的鼠肝组织进行微波照射固定，并按琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ）常规孵育、制片、电镜观察。结果表明：四个组都随微波照射时间增加，液体温度不断升高，肝细胞内线粒体ＳＤＨ酶活性由强逐渐减弱，定位趋于稳定；其中生理盐水ＳＤＨ酶活性保存最好，且以微波照射４０ｓ时，ＳＤＨ酶活性及定位最佳，超微结构清晰。

甜菊叶片细胞过氧化氢酶电镜细胞化学定位

应用DAB法,探讨甜菊叶肉细胞内过氧化氢酶的亚细胞定位,证明了过氧化氢酶特异性定位于微体的晶格区或基质内,其他细胞器均未观察到该酶的反应产物。

采用双重免疫组织化学及免疫电镜方法可将α-平滑肌肌动蛋白定位于乳腺癌间质新生血管周细胞

目的 观察周细胞形态特点 ,并寻找其标记物。方法 应用双重免疫组织化学及免疫电镜方法 ,观察α -平滑肌肌动蛋白 (α -SMA)在周细胞内的表达情况。结果 免疫组织化学染色发现α -SMA在周细胞内表达 ,而在内皮细胞内不表达 ;免疫电镜可见α-SMA仅定位于周细胞。结论 免疫组织化学方法和免疫电镜方法是一种有效的实验手段 。

前列腺病变组织中神经内分泌细胞的电镜与免疫组织化学特征及意义

目的 应用透射电镜技术及免疫组织化学技术对正常前列腺组织、前列腺增生及前列腺癌中神经内分泌细胞 (N ECs)进行观察 ,并探讨其超微形态诊断特点及意义。方法 对 10名正常前列腺组织、2 0例前列腺增生症及 4 0例前列腺癌组织中神经内分泌细胞通过透射电镜进行观察并与嗜铬素 (Cg A)、神经元特异性烯醇化酶 (NSE)和其他 6种激素抗体免疫组织化学染色进行对比观察。结果 前列腺癌中 32例含有神经内分泌细胞 ,依内分泌颗粒的形态不同可分为三种类型 ,前列腺增生症中神经内分泌细胞的形态与正常前列腺组织相似 ,但数量有明显变化。Cg A和 NSE的阳性率随着前列腺癌的组织学分化程度由高到低而逐渐增高 ;随着 Whitmore临床分期由 A到 D期 ,Cg A、NSE抗体的阳性率及其他 6种抗体的阳性率也逐渐增高。结论 不同的前列腺病变组织中 N ECs的类型及数量不同 ,前列腺增生症 NECs数量明显高于正常前列腺组织 ,含有 NECs的前列腺癌较不含 NECs的前列腺癌更易发生癌转移。

组织化学染色与免疫电镜双标记方法在检测大鼠脑干前包钦格复合体细胞色素氧化酶活性中的应用

目的研究脑干前包钦格复合体(pre-B9t C)细胞色素氧化酶(COX)的活性变化。方法采用COX的组织化学染色与pre-B9t C的标记物神经激肽1受体(NK1R)纳米金-银加强免疫组织化学染色双标法,进行pre-B9t C特定神经核团尤其是不同亚细胞结构的COX活性检测,并进行COX活性的半定量分析。结果光镜下NK1R免疫反应性(NK1R-ir)产物主要分布于pre-B9t C神经细胞膜,清晰勾勒神经元轮廓,COX组织化学染色呈棕色,弥漫表达于NK1R-ir神经元胞质及突起内。电镜下NK1R-ir金颗粒主要分布于pre-B9t C神经元胞体和树突膜内表面,胞质内也可见金颗粒标记。pre-B9t C神经元不同亚细胞结构(胞体、轴突终末、树突)线粒体的形状和分布均有不同,在胞体和轴突终末线粒体多为圆形和椭圆形,在树突则以长杆状线粒体多见,胞体线粒体多为管泡状嵴,而板层嵴线粒体以轴突终末和树突多见。轴突终末内线粒体多聚集分布,树突内线粒体多近胞膜散在分布,但在突触部位,线粒体分布密集,且局部膨大接近突触后膜,这与突触的信息传递功能需要大量ATP产生密切相关。COX活性反应产物分布于线粒体嵴上,线粒体嵴电子密度不同表明COX活性不同。轴突终末和树突线粒体COX活性明显高于胞体。结论 pre-B9t C神经元不同亚细胞结构能量代谢不同,其中轴突终末和树突线粒体COX活性明显高于胞体,尤其突触部位线粒体分布密集,且表达高COX活性。将COX组织化学技术和免疫电镜技术相结合,为检测区域性COX活性,尤其是区域内不同亚细胞结构的COX活性提供了新方法。