应用NADPH-d和HRP双重组织化学技术显示一氧化氮合酶阳性神经元的纤维投射

十多年来,大量的研究资料证实一氧化氮合酶(NOS)阳性神经元在脑内广泛分布,但对相关脑区(核团)内NOS阳性神经元的纤维投射方面的报道较少,且多采取霍乱毒素β亚单位作为逆行追踪剂结合神经型NOS(nNOS)双重免疫组织化学荧光染色方法[1].

免疫组织化学染色常见问题及解决方法

免疫组织化学将传统形态学与传统免疫学结合起来，既可以在光镜下或电镜下观察组织或细胞的形态，实现组织或细胞定位；同时又发挥了免疫学中对特异抗原抗体定性定量的作用。随着免疫组织化学技术的发展，其在临床病理诊断和形态学研究中得作用越来越显著，如辅助诊断、指导治疗、评估预后等。但由于免疫组织化学技术是一多步骤、多环节、多因素影响的实验技术，有很多干扰因素都可能影响最终的检测结果，并造成错误的判断。

免疫组织化学方法检测脑红蛋白在大鼠中枢神经系统的分布

目的 探讨脑红蛋白 (NGB)基因在中枢神经系统中的分布。方法用免疫组织化学ABC法研究了NGB蛋白在成年大鼠脑内的分布和定位。结果NGB蛋白在成年大鼠脑中有非常广泛的表达 ,其分布区域包括大脑皮质、海马、丘脑和下丘脑的部分核团、脑桥及小脑。NGB免疫反应阳性物质定位于神经元的细胞质。结论NGB蛋白在大鼠脑中有非常广泛的表达 。

免疫组织化学方法测定TGF-β_1在鼠根尖周炎中的表达

目的 了解TGF β1与大鼠急性根尖周炎的关系。方法 取 16只SD大鼠建立鼠根尖周炎动物模型 ,制作根尖周组织切片 ,用免疫组织化学方法测定TGF β1在根尖周炎中的表达。结果 免疫组化研究显示TGF β1阳性表达细胞分布于根尖周和牙槽骨缺损处 ,在急性期 (1～ 3周 )根尖炎症阶段有高表达 ,表达细胞多为巨噬细胞、淋巴细胞和成纤维细胞 ;而在急性期和慢性期 (第 4周 )均未见成骨细胞TGF β1表达。结论 在早期 (1～ 4周 )根尖炎症阶段未见成骨细胞TGF β1表达 。

细胞角蛋白单克隆抗体免疫组织化学染色方法检测大肠癌淋巴结微转移的研究

目的为研究角蛋白克隆抗体免疫组织化学法在检测淋巴结微转移灶上的意义。方法采用三种角蛋白单克隆抗体AE1,AE3、AE1/AE3,对我院47例大肠癌术后患者331个淋巴结用免疫组织化学法重新检查。结果36个淋巴结存在微转移灶(11.9%),Duke'sC期患者微转移灶检出率高于Duke'B期患者(P<0.05)。随访显示有微转移灶Duke'B期病人肿瘤复发、远处扩散转移均较无微转移病人高(P<0.05)。结论即使是组织学检查结果为阴性的淋巴结,也很有存在微转移的可能性。免疫组织化学法栓测单克隆抗角蛋白抗体,可详细阐明临床分期,并可提供大肠癌治疗的指征。

用组织化学方法鉴别日本血吸虫细胞来源的研究

目的 探讨用组织化学方法鉴别血吸虫体外培养细胞来源或种类的可能性。 方法 取日本血吸虫肝期童虫 ,经酶消化处理后取混合细胞涂片 ,用成虫制作组织切片。将细胞涂片和组织切片分别平行作高碘酸 希夫氏(PAS)、硫堇 (Thionin)、嗜银反应 (根据Grimeliu s)、苦味酸 酸性品红 (根据VanGieson ,VG)、甲苯胺蓝 (Tolui dineblue ,TB)和苏木素 伊红 (HE) 6种组织化学方法染色。光镜下比较观察 ,判定结果。 结果 PAS染色的大细胞呈亮红色与组织切片中卵黄腺着色接近 ,表明着色的大细胞来源于卵黄腺 ;含特有尼氏体的神经细胞胞浆被硫堇染色呈深蓝色 ;Grimeliu s染色的细胞和消化道上皮细胞均呈黑色 ;VG染色 ,部分细胞和虫体肌纤维组织均呈黄色 ;TB染色 ,细胞涂片仅见 1个紫红色细胞 ,组织切片未见相同颜色的组织和细胞。 结论 PAS、硫堇、Grimeliu s、VG、TB和HE 6种组织化学染色 ,对体外培养的血吸虫细胞的显色特征与虫体相应器官或组织细胞的化学染色定位相一致。本法可用于鉴别血吸虫体外培养细胞的来源或种类 ,且操作简便、快速。

禽流感病毒检测免疫组织化学染色改良方法的建立

目的 本研究对如何消除禽流感病毒检测免疫组织化学染色的非特异性反应进行探讨,从而建立一种免疫组化染色的改良方法。方法 对抗原修复方法、一抗孵育条件、内源性生物素封闭条件等进行优化,并用SABC检测系统对改良法和常规法进行比较。结果 采用微波炉加热法修复抗原、一抗在37℃孵育1.5～2 h、20%的蛋清液室温封闭20 min的改良法比常规法的染色效果好,可有效消除背景干扰,阳性表达清晰,对比度高。结论 建立的改良法特异性强,可用于禽流感病毒的基础研究和临床检验。

免疫组织化学显色反应强度定量方法研究（Ⅱ）

免疫组织化学显色反应强度定量方法研究（Ⅱ）申洪（广州第一军医大学病理学教研室，广州５１０５１５）在前一阶段的研究中，我们提出阳性单位（ＰｏｓｉｔｉｖｅＵｎｉｔ，ＰＵ）新概念，即将排除了切片或涂片本底因素后的纯免疫组化显色反应程度按灰度图像分析为０（白...