不同分期痛风性关节炎患者NALP3炎性体及外周血γδT细胞水平观察

目的观察不同分期痛风性关节炎(GA)患者NALP3炎性体及外周血γδT细胞水平。方法回顾性选取2022年7月至2023年7月在河北省沧州中西医结合医院接受治疗的96例GA患者作为研究对象。依据GA临床分期,分为急性关节炎期组(n=38)、间歇期组(n=26)、慢性关节炎期组(n=32)。另选取同期于本院体检中心体检的健康者35名设为对照组。观察各组NALP3炎性体及外周血γδT细胞水平,分析各组GA患者的临床指标,包括血尿酸、血肌酐、总胆固醇、甘油三酯、血清C反应蛋白(CRP)水平及白细胞计数(WBC)。采用Pearson相关性分析急性关节炎期患者外周血γδT细胞及其亚型、NALP3炎性体与临床指标的关系。结果各组NALP3、γδT1细胞比较,差异均无统计学意义(P>0.05);各组Caspase-1、ASC、γδT细胞、γδT2细胞比较,差异均有统计学意义(P<0.05),其中,急性关节炎期组、间歇期组、慢性关节炎期组Caspase-1水平均高于对照组,γδT细胞和γδT2细胞比例均低于对照组,且病情程度越高,Caspase-1水平越高,γδT细胞和γδT2细胞比例越低;急性关节炎期组、间歇期组、慢性关节炎期组ASC水平均高于对照组,但急性关节炎期组低于间歇期组、慢性关节炎期组,差异均有统计学意义(P<0.05)。各组总胆固醇、甘油三酯、CRP水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);各组血尿酸、WBC、血肌酐水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05),其中,急性关节炎期组、间歇期组、慢性关节炎期组的血尿酸、WBC、血肌酐水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),且病情程度越高,血尿酸、WBC、血肌酐水平越高。相关性分析显示,γδT细胞在淋巴细胞中的比例及γδT1细胞在γδT细胞中的比例与血尿酸、血肌酐、总胆固醇、甘油三酯、WBC、CRP指标无明显相关性;γδT2在γδT细胞中的比例与甘油三酯、WBC呈负相关(P<0.05)。相关性分析显示,NALP3 mRNA表达与血肌酐、总胆固醇、甘油三酯、WBC指标无明显相关性;与血尿酸、CRP呈正相关(P<0.05)。结论NALP3炎性体及外周血γδT细胞参与GA的发展,Caspase-1、γδT细胞和γδT2细胞可作为痛风的急性炎症标记物,而ASC不能作为痛风的急性炎症标记物,同时γδT2在γδT细胞中的比例与甘油三酯、WBC呈负相关,NALP3 mRNA表达与血尿酸、CRP呈正相关,为临床病情评估和治疗提供参考。

痛风患者外周血NALP3炎性体与炎性因子、糖脂代谢的相关性

目的探讨痛风患者外周血NALP3炎性体与炎性因子、糖脂代谢的相关性。方法分别选择102例痛风患者(痛风组)、154例高尿酸血症患者(高尿酸血症组)和107例健康体检人群(对照组)作为研究对象,收集3组受试对象年龄、体质指数(BMI)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、尿酸(UA)、空腹血糖(FPG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)等临床资料,采用RT-PCR和Western blot检测各组患者外周血NALP3mRNA和蛋白表达。另利用100μg/mL尿酸盐刺激对照组全血6h,再次检测刺激组与未刺激组外周血单个核细胞(PBMCs)NALP3mRNA和蛋白表达。结果痛风组和高尿酸血症组BMI、FPG、LDL-C、TG、TC、UA、TNF-α、IL-1β、C反应蛋白(CRP)明显高于对照组,脂联素(APN)明显低于对照组,差异具有统计学意义(均P<0.05);痛风组FPG、LDL-C、TG、TC、UA、IL-1β、CRP明显高于高尿酸血症组,APN明显低于高尿酸血症组,差异具有统计学意义(均P<0.05)。NALP3mRNA在痛风组(0.846±0.130)、高尿酸血症组(0.700±0.126)的表达明显高于对照组(0.231±0.049),痛风组NALP3mRNA表达量明显高于高尿酸血症组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。对照组外周血经尿酸盐刺激后,刺激组NALP3mRNA和蛋白表达较相应空白组显著升高(均P<0.05)。痛风组和高尿酸血症组NALP3mRNA表达与FPG、UA、TNF-α、IL-1β、CRP呈正相关,与APN呈负相关(均P<0.05)。校正BMI、FPG、TG、TC等混杂因素后,结果显示NALP3mRNA不是高尿酸血症发生的危险因素,而NALP3mRNA表达≥0.808是痛风发生的危险因素(P<0.05)。结论痛风患者NALP3表达明显升高,NALP3可能参与痛风的发病和进展。

萆薢总皂苷对大鼠急性痛风性关节炎NALP3炎性体信号通路的影响

目的研究萆薢总皂苷对大鼠急性痛风性关节炎的防治作用及机制。方法 Wistar大鼠,♂,72只,随机分组后,各用药组大鼠预先灌胃给予不同剂量萆薢总皂苷,随后右侧踝关节腔注射尿酸钠诱导急性痛风性关节炎。观察大鼠步态,测定关节肿胀度,HE染色进行病理学分析。ELISA法检测血清TNF-α、IL-1β、IL-18表达。Western blot法检测滑膜组织中pro-IL-1β、NALP3炎性体相关蛋白变化。结果萆薢总皂苷各浓度和秋水仙碱均可改善大鼠步态。TSD高、中剂量组与秋水仙碱类似,可降低大鼠关节肿胀度,病理学检查踝关节病变好转,血清TNF-α、IL-1β、IL-18明显减少,滑膜组织pro-IL-1β、NALP3、ASC、caspase-1前体和活性形式蛋白表达降低。结论萆薢总皂苷对大鼠急性痛风性关节炎具有防治作用,机制可能是抑制NALP3炎性体装配和激活,以及抑制炎性细胞因子的表达。

P2X7/NALP3在急性肾小管坏死肾组织中的表达及意义

目的观察急性肾小管坏死(acute tubular necrosis,ATN)患者肾组织中P2X7/NALP3的表达情况,探讨其与肾小管损伤程度、肾小管间质炎症、肾小管上皮细胞凋亡情况及肾功能损害之间的关系。方法选取2011-2013年在我科住院治疗,经肾活检诊断为ATN的患者肾组织;以同期外科肾肿瘤切除时远离肾肿瘤的边缘正常肾,且经光镜证实为正常的肾组织为对照。免疫组化法检测ATN患者肾小管上皮细胞中P2X7/NALP3、caspase-1、caspase-3、IL-1β、IL-18的表达,以及肾小管上皮细胞的凋亡;半定量分析肾小管损伤程度及肾小管间质炎症细胞的浸润。收集患者入院第1天24 h的尿量、血肌酐(serum creatinine,Scr)及尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)等数据,计算肾小球率过滤(estimated glomerular filtration rate,eGFR),将P2X7/NALP3的表达与肾小管损伤程度、肾间质炎症反应、肾小管上皮细胞凋亡及ATN患者肾功能指标进行相关性分析。结果与对照组比较,ATN患者肾小管上皮细胞P2X7/NALP3表达明显升高(P<0.01),其与caspase-1、caspase-3、IL-1β、IL-18表达水平显著正相关,P2X7/NALP3与ATN患者肾小管损伤(r=0.787,r=0.530)、小管间质炎症细胞浸润程度(r=0.543,r=0.419)、肾小管上皮细胞凋亡程度(r=0.719,r=0.671)、血肌酐(r=0.707,r=0.706)、尿素氮(r=0.584,r=0.623)呈正相关(P<0.01),与肌酐清除率(r=-0.622,r=-0.59)、尿量(r=-0.659,r=-0.62)呈负相关(P<0.01)。结论 ATN患者肾组织中P2X7和NALP3的表达与肾小管上皮细胞凋亡、炎症反应及肾功能损害具有明显相关性,提示P2X7/NALP3可能参与ATN患者肾小管上皮细胞凋亡、炎症反应,进而导致肾小管损伤及肾功能受损。

NALP1:一种新的参与炎症和凋亡的胞内蛋白

NALP1(NACHT leucine-rich-repeat protein 1)属于NLRs(NOD-like receptors)家族中一员,主要参与炎症体(inflammasome)的组装活化以及凋亡体(apoptosome)的诱导形成,从而在炎症反应和细胞凋亡的调节机制中发挥着重要的生物学作用。此外,鉴于NALP1在神经变性性疾病、血液疾病、自身炎症性疾病以及感染性疾病中差异性表达以及致病性作用,将为NALP1相关疾病提供新的诊断和治疗依据。

补肾利湿法中药复方对大鼠痛风性关节炎NALP6信号传导通路调控作用的研究

目的探讨补肾利湿法中药复方对痛风性关节炎大鼠NALP6信号传导通路的调控作用。方法将84只SD大鼠随机分成空白对照组、模型组、中药痛风舒组、西药秋水仙碱组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组。每天1次进行药物灌胃。在第7天给药1 h后,采用改良复合氧嗪酸钾和尿酸钠造模方法制作痛风性关节炎大鼠模型。造模4 h后取材,观察各组大鼠滑膜组织病理变化,采用ELISA法检测血清血尿酸、caspase-1、IL-1β、IL-18的含量,并以Western blot法检测滑膜组织内NALP6蛋白的表达水平。结果经补肾利湿中药复方干预的中药中剂量组,其大鼠滑膜组织病理学改变减轻,体内血尿酸值明显下降,血清caspase-1、IL-1β和IL-18表达水平显著下降,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05);经补肾利湿中药复方干预的中药高剂量组,Western blot检测滑膜组织内NALP6蛋白的表达明显下调,与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论阻断NALP6-caspase-1-IL-1β这一炎症信号通路是补肾利湿中药复方防治痛风性关节炎的重要机制之一。

“火郁发之”法火针对大鼠急性痛风性关节炎NALP3炎性体的影响

目的在前期课题组成员广东省中医药局基金课题"基于NALP3的"火郁发之"法火针治疗急性痛风性关节炎的研究"(项目编号20161201)中发现,火针疗法对急性痛风性关节炎模型大鼠的NALP3炎性体有明显影响,由此进一步探讨火针疗法治疗急性痛风性关节炎的作用机制。研究火针疗法对大鼠急性痛风性关节炎的疗效及机制。方法 60只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、火针组、针刺组及秋水仙碱组各12只。除正常组外,其他四组采用氧嗪酸钾联合Coderre方法[1]造模,模拟人体以高尿酸血症为基础引起的内环境变化诱发的急性痛风性关节炎,除正常组及模型组外,另3组分别予火针、针刺及秋水仙碱干预治疗,通过分析各组血尿酸及关节滑膜嗜中性粒细胞碱性磷酸酶3(NALP3)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平变化,评估火针治疗急性痛风性关节炎的疗效,探讨火针治疗急性痛风性关节炎的可能作用机制。结果高尿酸血症(HUA)造模后,除正常组外,其他各组血尿酸均较正常组升高(P<0.05),疗程结束后,各组血尿酸水平均与正常组相当(P>0.05),且组间比较差别不大(P>0.05)。HUA造模后,除正常组外,各组关节滑膜IL-1β、NALP3水平均升高(均P<0.05);急性痛风性关节炎(AGA)造模后,3个干预组的IL-1β、NALP3水平明显低于模型组(P<0.05),但总体来说各组的IL-1β、NALP3水平仍较高。疗程结束后,3个干预组的IL-1β水平均明显下降(P<0.05),且水平与正常组相当,而模型组的IL-1β水平仍居高不下。疗程结束后,除模型组外,3个干预组的NALP3水平均较干预治疗前明显下降,但仍高于正常组的NALP3水平(P<0.05);火针组、针刺组及秋水仙碱组3组间疗程结束后的NALP3水平比较差别不大(P>0.05)。结论火针具有抑制NALP3的活化及IL-1β分泌的作用,效果与针刺及秋水仙碱相当,对大鼠急性痛风性关节炎有一定疗效,有一定临床参考价值。

NALP6信号转导通路在痛风性关节炎发病过程中的作用机制

目的:探讨NALP6信号转导通路在痛风性关节炎(GA)发病过程中的作用机制。方法:选取慢病毒转染技术干扰NALP6蛋白的基因表达,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)、蛋白质印迹法(Western blotting)、逆转录聚合酶链反应(RTPCR)等技术检测细胞中NALP6蛋白、caspase-1、IL-1β、核因子-κB的表达情况;结果:干扰成纤维滑膜细胞中NALP6基因的表达,能减低痛风性关节炎成纤维样滑膜细胞中NALP6蛋白的表达、降低caspase-1和核因子-κB的活性,降低IL-1β含量;结论:NALP6炎性反应信号转导通路参与了大鼠痛风性关节炎的发病过程,通过能够干扰NALP6基因表达的慢病毒转染技术能保护痛风性关节炎成纤维样滑膜细胞的炎性损伤。

沙眼衣原体pORF5质粒蛋白激活NALP3炎性复合体诱导THP-细胞产生IL-1β和IL-18

目的:探讨沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)pORF5质粒蛋白对IL-1β和IL-18等促炎性细胞因子的诱生作用,并初步分析其分子机制。方法:用0、3、6、12、24、36μg/ml不同浓度的pORF5蛋白刺激THP-1细胞,并于0、8、16、24、36 h收集上清及细胞,ELISA检测IL-1β和IL-18的含量;Realtime-PCR检测NALP3炎性复合体mRNA表达水平,Western blot鉴定Caspase-1活化状态;分别用NALP3 siRNA、ASC siRNA转染THP-1细胞24 h或用Caspase-1特异性抑制剂(Z-YVADFMK)预处理THP-1细胞30 min后,再用24μg/ml的pORF5质粒蛋白刺激THP-1细胞24 h,ELISA分析各处理因素对IL-1β和IL-18产生的影响。结果:pORF5质粒蛋白以浓度依赖的方式刺激THP-1细胞产生IL-1β和IL-18。当pORF5质粒蛋白浓度为24μg/ml时,IL-1β和IL-18的表达水平最高,分别为491 pg/ml、186 pg/ml;同时pORF5质粒蛋白以时间依赖的方式刺激THP-1细胞产生IL-1β和IL-18,两者分别在24 h和16 h达到峰值。pORF5质粒蛋白可增强THP-1细胞NALP3、ASC和Caspase-1 mRNA的表达,促进Caspase-1的活化;NALP3-siRNA、ASC-siRNA及Caspase-1抑制剂处理组IL-1β和IL-18的产生水平均显著低于对照组(P<0.05)。结论:pORF5质粒蛋白通过激活NALP3炎性复合体诱导THP-1细胞分泌IL-1β和IL-18。

NALP3炎性体活化对脓毒症发病过程中HMGB1释放的调节作用

失控性全身炎性反应和免疫功能障碍是脓毒症发生的主要病理生理过程。HMGB1是脓毒症致死效应的最重要的晚期炎性递质,HMGB1由病原体或早期炎性反应分子活化免疫细胞释放,在脓毒症的发生、发展过程中它不仅发挥促炎效应,而且还与细胞免疫功能障碍密切相关。脓毒症和内毒素血症中HMGB1的分泌和释放继发于NALP3炎性体的活化。越来越多的证据表明,炎性体(尤其是NALP3炎性体)对单核/巨噬细胞释放HMGB1起着重要的调节作用。在炎性反应过程中,免疫细胞主动释放HMGB1的过程主要以一种炎性反应小体参与的、依赖caspase活化的方式进行。通过调节NALP3炎性体活化,抑制HMGB1释放,调节免疫功能紊乱状态,为脓毒症等免疫紊乱相关疾病的治疗提供了新的策略。

基于NALP3炎性体信号通路观察火针对尿酸钠诱导的痛风性关节炎大鼠IL-1β表达的影响

目的基于NALP3炎性体信号通路观察火针对尿酸钠诱导的痛风性关节炎大鼠IL-1β表达的影响,探讨火针治疗痛风性关节炎抗炎机制。方法健康Wistar大鼠75只随机分为A、B、C、D、E 5组,每组15只,除A组空白组外分别参照氧嗪酸钾造模法、Coderre造模法依次制备高尿酸血症、急性痛风性关节炎大鼠模型,两次造模间隔2d,B组为模型组,C、D、E 3组分别予火针、普通针刺、秋水仙碱干预,治疗7d后处死大鼠,取右后踝关节行组织形态学检查和NALP3、IL-1β检测。结果与空白组对比,其它组滑膜组织、血管、胶原组织增生,炎性细胞浸润,关节软骨破坏;火针组、秋水仙碱组与针刺组、模型组对比,滑膜组织、血管、胶原组织增生较轻,炎性细胞浸润较少,关节软骨破坏较轻。高尿酸血症、急性痛风性关节炎造模成功后,与空白组比较,其他各组滑膜组织的NALP3、IL-1β水平均明显升高,P<0.05;治疗后火针组、针刺组、秋水仙碱组滑膜组织的NALP3、IL-1β水平显著低于模型组,P<0.05,火针组、针刺组、秋水仙碱组3组间比较差异无统计学意义,P>0.05。结论火针能有效抑制白细胞分裂和募集,抑制关节滑膜NALP3炎性体及IL-1β表达水平,从而改善病变关节的病理损伤,迅速止痛消肿。

NALP3炎性体与非感染性炎症疾病

在机体非感染性炎症疾病过程中,caspase-1的活化引起IL-1β、IL-18、IL-33等促炎细胞因子的分泌是一个重要的过程。而一个被称为NALP3炎性体的多蛋白复合物在caspase-1的活化过程中起到了重要的调节作用。各种外源或内源的刺激可通过不同的信号通路激活NALP3炎性体来活化caspase-1。本文就NALP3炎性体的结构和分布、活化和信号通路及对2型糖尿病、痛风、阿尔兹海默病和肾脏疾病等非感染性炎症疾病的近期研究作一综述。

NALP3炎性体在结直肠腺瘤样息肉与结直肠癌中的表达及意义

目的研究检测NALP3炎性体在癌旁正常组织、结直肠腺瘤样息肉及结直肠癌中的表达差异,揭示NALP3炎性体在慢性炎症向恶性肿瘤发展过程中的意义。方法 Real-time PCR及Western blot对人结直肠腺瘤样息肉、结直肠癌及癌旁正常组织炎性体成分NALP3、ASC、caspase-1基因及蛋白进行检测。结果 NALP3、ASC、caspse-1在结直肠癌组织中表达最低,在结直肠腺瘤样息肉中表达最高,各因子在各组间差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论 NALP3炎性体在正常组织—慢性炎症—恶性肿瘤发展中有着重要作用,变化可能与机体及肿瘤局部免疫状态相关。

NALP3/ASC/caspase-1在局灶节段性肾小球硬化肾组织中的表达变化

目的研究局灶节段性肾小球硬化(FSGS)肾病综合征(NS)患者肾组织中NALP3炎性复合体的表达变化与肾小管间质病理损害程度、炎性因子表达及临床生化指标之间的关系。方法应用免疫组化检测NS患者正常肾组织(对照组)及FSGS患者肾组织(FSGS组)肾小管上皮细胞NALP3/ASC/caspase-1及其下游效应分子IL-1β、IL-18表达变化,对肾小管间质损伤程度进行评分并检测肾小管间质活化巨噬细胞F4/80情况,收集患者血肌酐、血尿素、血浆总蛋白、清蛋白、24h尿蛋白等指标,计算肾小球滤过率(eGFR)。将NALP3/ASC/caspase-1和IL-1β、IL-18表达情况分别与肾小管间质损伤程度及各生化指标进行相关性分析。结果 FSGS组患者肾小管上皮细胞NALP3/ASC/caspase-1及下游效应分子IL-1β、IL-18的表达较对照组显著增高(P<0.01);NALP3/ASC/caspase-1表达强度与IL-1β、IL-18呈正相关(P<0.01);NALP3/ASC/caspase-1和IL-1β、IL-18的表达与肾小管间质损伤程度及F4/80的表达强度呈正相关(P<0.01),与24h尿蛋白量、血肌酐浓度呈正相关(P<0.05),与eGFR呈负相关(P<0.05),与尿素、血浆总蛋白、清蛋白浓度无明显相关性。结论 NALP3炎性复合体通过激活IL-1β、IL-18等下游炎症因子,参与FSGS的发病机制,其表达程度越高、肾组织病变程度越重,是否能作为FSGS预后的预警指标,还需进一步的临床验证。

Aβ_(1-42)寡聚体诱导的AD模型大鼠行为学观察与NALP1/Caspase-1表达分析

目的研究Aβ1-42寡聚体诱导的阿尔茨海默病(AD)模型大鼠认知功能损害,NALP1、细胞凋亡蛋白酶-1(Caspase-1)在AD模型大鼠大脑皮质和海马的表达。方法将Morris水迷宫初筛后的60只大鼠随机均分为:D-半乳糖组、Aβ1-42纤维组、Aβ1-42寡聚体组、假手术组。分别以Aβ1-42纤维和Aβ1-42寡聚体双侧海马注射建立AD大鼠模型,D-半乳糖组腹腔注射D-半乳糖,假手术组海马注射等量生理盐水。经Morris水迷宫检测其行为学变化,采用免疫组化法、RT-PCR法观察NALP1、Caspase-1在大鼠海马的表达。结果与假手术组相比,其余3组大鼠学习记忆能力明显下降(P<0.05),以Aβ1-42寡聚体组最明显;免疫组化法显示Aβ1-42寡聚体组海马Caspase-1免疫反应阳性神经元数目显著增加,RT-PCR法显示与Aβ1-42纤维组、D-半乳糖组和假手术组比较,Aβ1-42寡聚体组海马Caspase-1和NALP1 mRNA表达增强,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Aβ1-42寡聚体海马注射可导致大鼠认知功能障碍,上调NALP1及Caspase1表达。NALP1及Caspase1可能在Aβ1-42寡聚体介导的大鼠认知功能障碍起重要作用,其作用机制有待进一步研究。

苗药痛风汤方剂对痛风性关节炎大鼠炎症反应及NALP3炎性体信号的影响

目的探讨苗药痛风汤方剂对痛风性关节炎(GA)大鼠炎症反应及NALP3炎性体信号的影响。方法40只健康雄性SD大鼠随机分为5组,即空白组、模型组、双氯芬酸钠肠溶片组、苗药痛风汤方剂低、高剂量组,每组8只。采用踝关节腔内一次性注射尿酸钠构建急性GA大鼠模型,造模成功后,空白组、模型组给予生理盐水,双氯芬酸钠肠溶片组及苗药痛风汤方剂低、高剂量组分别按相应剂量给予双氧芬酸钠肠溶片及苗药痛风汤方剂连续灌胃5 d,处死大鼠,取膝关节滑膜组织。采用HE染色观察滑膜组织病理变化;ELISA检测血清TNF-α、IL-1β、IL-8、β-gal、NAG、SOD、MDA水平;qRT-PCR检测滑膜组织NALP3、Caspase-1、ASC mRNA表达;Western Blot检测滑膜组织NALP3、Caspase-1、pro-IL-1β蛋白表达。结果与空白组相比,模型组滑膜组织衬里下层大量炎性细胞浸润,关节肿胀指数明显增加,TNF-α、IL-1β、IL-8、β-gal、NAG、MDA、NALP3、Caspase-1、ASC、pro-IL-1β水平明显升高,SOD水平明显降低(均P<0.05);与模型组比较,苗药痛风汤方剂高剂量组TNF-α、IL-1β、IL-8、β-gal、NAG、MDA、NALP3、Caspase-1、ASC、pro-IL-1β水平明显降低,SOD水平明显升高(均P<0.05)。结论苗药痛风汤方剂可减轻GA大鼠组织炎症程度,下调NALP3及炎性细胞因子的表达,可能有抑制急性痛风性关节炎发作的重要作用。

IPAF和NALP1在RA-FLS中的蛋白表达情况及意义

目的:研究人IL-1β转换酶蛋白激活因子(IPAF)和富含亮氨酸重复结构域蛋白(NALP)1在类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLS)中的表达及其意义。方法:收集来自4例骨关节炎、6例RA患者、3例关节创伤患者的滑膜组织标本,分为骨关节炎组、RA组、正常对照组。分离培养FLS,应用蛋白免疫印迹法检测并比较3组IPAF、NALP1蛋白表达水平,比较3组FLS中IPAF和NALP1蛋白表达。6份RA-FLS分别加入胎牛血清培养液(空白对照组)、脂多糖、脂多糖加ZVAD-FMK、TNF-α、TNF-α加ZVAD-FMK处理24 h,比较各样本IPAF和NALP1的蛋白表达水平。结果:IPAF蛋白表达水平由高至低依次为骨关节炎组、RA组、正常对照组,骨关节炎组IPAF蛋白表达水平明显高于RA组及正常对照组(P<0.05)。NALP1蛋白表达水平由高至低依次为骨关节炎组、RA组、正常对照组,但3组比较差异无统计学意义(P>0.05)。RA-FLS经不同药物干预后,TNF-α处理组IPAF蛋白表达水平均高于其他4组(P<0.01或0.05);各组NALP1蛋白表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:RA-FLS中IPAF蛋白表达水平升高,TNF-α可促进RA-FLS中IPAF表达。

清远麻鸡NALP3基因部分cDNA序列克隆及组织表达差异分析

为了克隆NALP3基因的部分序列及检测其在鸡体内各组织中的表达情况,本试验选择12周龄的公、母清远麻鸡各3只,分别采集其心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胸腺、法氏囊、小肠、输卵管、卵巢、睾丸和脑12种器官,通过RT-PCR(Reverse transcription PCR)技术克隆NALP3部分cDNA序列,并采用Real time-PCR方法检测NALP3 mRNA的表达水平。结果显示,获得了清远麻鸡NALP3部分cDNA序列,序列长度为210 bp。在心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胸腺、法氏囊、小肠、输卵管、卵巢、睾丸和脑中均有NALP3 mRNA表达,其中在心脏中表达量最高,在小肠中表达量最低。

资生肾气丸对痛风模型大鼠IL-6、NALP2 mRNA表达水平的影响

目的:研究资生肾气丸对痛风模型大鼠血清中白介素6(IL-6)及大鼠滑膜组织中含有NACHT结构域、LRR结构域、PYRIN决定域的蛋白-2(NALP2)mRNA表达水平的影响,探讨资生肾气丸防治痛风的作用机制。方法:将105只SD大鼠随机分为空白组(BG)、模型组(MG)、中药对照组(CMCG)、西药对照组(WMCG)及资生肾气丸中药复方低、中、高剂量组(ZSD-L/M/HG)7组,每组15只。采用尿酸钠(MSU)联合氧嗪酸钾(OXO)注射建立大鼠痛风模型,检测各组大鼠血清中IL-6含量,检测大鼠滑膜组织中NALP2 mRNA含量。结果:ZSD-HG、ZSD-MG、ZSD-LG、WMCG与MG相比,尿酸值降低,差异有显著性(P<0.01);与CMCG相比,ZSD-MG与WMCG含量下降,具有显著性差异(P<0.01);MG和BG血清中的IL-6含量比较,差异有统计学意义(P<0.05);ZSD-HG、ZSD-MG、ZSD-LG血清中IL-6表达量与MG比较,差异有统计学意义(P<0.05),并且WMCG和ZSD-MG血清中IL-6表达量更低;CMCG、ZSD-MG与WMCG血清中IL-6表达量相比,差异有统计学意义(P<0.05);与ZSD-LG相比,ZSD-HG、ZSD-MG血清中IL-6表达量相对更低。就NALP2 mRNA的平均密度而言,MG相对于BG明显增高,各对照组均降低,但以WMCG与ZSD-MG明显降低,且二者的NALP2 mRNA的平均密度下降差异不显著。结论:资生肾气丸可调控痛风模型大鼠IL-6、NALP2 mRNA的表达,对痛风具有防治作用。

NALP3炎性体、骨形态发生蛋白在退变腰椎间盘髓核组织中的表达及意义

目的探究退变腰椎间盘髓核组织中NALP3炎性体、骨形态发生蛋白(BMP)的表达及意义。方法在我院选取2017年6-2018年6月接受治疗的80例腰椎间盘突出症患者,患者手术切除标本中取出退变椎间盘髓核组织块,另外选取在我院行前路减压内固定切除的脊柱骨折患者椎间盘的正常椎间盘髓核组织块制作标本待用。对待测标本进行免疫组化染色,使用Western Blot检测NALP3、BMP-2表达。分析NALP3、BMP-2与腰椎间盘突出症患者腰椎间盘退变等级、腰部负荷程度的关系,并分析NALP3、BMP-2之间相关性。结果腰椎间盘组患者中NALP3表达显著高于正常组(P<0.05),BMP-2表达低于正常组(P<0.05);Ⅴ级患者NALP3水平高于Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级(P<0.05),BMP-2水平低于Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级(P<0.05);重程度患者NALP3水平高于很轻、轻、中程度(P<0.05),BMP-2水平低于很轻、轻、中程(P<0.05);NALP3、BMP-2之间进行Pearson相关性分析,NALP3、BMP-2之间呈负相关(r=-0.269,P=0.016)。结论退变腰椎间盘髓核组织中NALP3升高,BMP-2降低,且与患者退变等级、病情严重程度密切相关,为临床上腰椎间盘突出症的诊治提供理论参考。