上皮性卵巢癌中ERCC1及转录因子Nanog蛋白的表达水平及意义

目的探讨上皮性卵巢癌中核昔酸切除修复交叉互补组1(ERCC1)及转录因子Nanog蛋白的表达水平及意义。方法收集2019年1月至2022年12月在连云港市肿瘤医院妇科行卵巢手术切除的组织标本,其中上皮性卵巢癌组织标本101例(上皮性卵巢癌组),良性卵巢肿瘤组织标本80例(对照组),采用免疫组化检测ERCC1及Nanog蛋白表达水平,并分析与临床病理指标的关系。分别用0mg/L、1mg/L、2mg/L、4mg/L不同浓度的顺铂处理人卵巢癌OVCAR-3细胞24h,以Western blot检测细胞中ERCC1、Nanog蛋白的相对表达量,比较两组间ERCC1及Nanog蛋白的表达水平。结果上皮性卵巢癌组ERCC1、Nanog蛋白的阳性率均明显高于对照组,差异均有统计学意义(χ^(2)值分别为49.960、39.941,P<0.05)。Spearman相关性分析显示,上皮性卵巢癌组中ERCC1与Nanog蛋白表达水平呈正相关(r=0.463,P<0.01);对照组中ERCC1与Nanog蛋白表达水平无相关性(r=0.125,P>0.05)。在上皮性卵巢癌临床病理指标中,FIGO分期为Ⅲ+Ⅳ期的ERCC1、Nanog蛋白的阳性率均明显高于Ⅰ+Ⅱ期(χ^(2)值分别为9.578、9.756),淋巴结转移阳性的ERCC1、Nanog蛋白阳性率均明显高于淋巴结转移阴性(χ^(2)值分别为3.018、2.389),经比较差异均有统计学意义(P<0.05)。1mg/L、2mg/L、4mg/L浓度顺铂处理的ERCC1和Nanog蛋白相对表达量均明显高于0mg/L浓度顺铂处理的相对表达量,经比较差异均有统计学意义(F值分别为8.564、6.571,P<0.05);在ERCC1、Nanog蛋白相对表达量中,顺铂处理浓度1mg/L与0mg/L相比(t值分别为17.236、5.381)、顺铂处理浓度2mg/L与0mg/L相比(t值分别为5.621、6.380)、顺铂处理浓度4mg/L与0mg/L相比(t值分别为12.813、6.810),差异均有统计学意义(P<0.05);且随顺铂浓度的增加,ERCC1、Nanog蛋白相对表达量逐渐升高。结论ERCC1及Nanog蛋白在上皮性卵巢癌中呈现出高表达,可能与该病的发病机理和病情发展具有相关性。顺铂可诱导卵巢癌细胞ERCC1及Nanog蛋白高表达,可能为化疗耐药的潜在机制。

Nanog蛋白在CD73^+小鼠脂肪源间充质干细胞中的表达

目的探讨Nanog蛋白在小鼠脂肪源间充质干细胞(ADMSCs)中的表达规律。方法体外分离培养ADMSCs,利用流式细胞仪从ADMSCs中分选出CD73+和CD73-两个细胞亚群。体外分别培养两组细胞,用免疫细胞化学和免疫荧光测定两组细胞Nanog蛋白的表达,并比较其差异。结果 CD73+ADMSCs细胞约占总细胞的5%,形态上分为大细胞和小细胞。Nanog蛋白在CD73+ADMSCs细胞中强阳性表达率(16.85±6.83)%,弱阳性表达率(81.78±7.19)%,阴性表达率(1.63±3.59)%;nanog蛋白在CD73-ADMSCs细胞中强阳性表达率(5.74±2.79)%,弱阳性表达率(85.84±37.31)%,阴性表达率(8.42±4.12)%。在Nanog阳性表达的细胞中可见不同分裂时相的有丝分裂细胞,CD73+细胞的分裂象明显多于CD73-细胞。结论 CD73和Nanog可能均是ADMSCs特异性表达的标志,Nanog蛋白强阳性的细胞可能更具幼稚性。通常采用分离培养方法获得的ADMSCs是多种细胞的复合物。

Nanog蛋白在小鼠心肌组织发育中的表达

目的:探讨Nanog蛋白在小鼠心肌组织发育中的表达规律。方法:利用ABC免疫组织化学法观察18 d胎鼠组、6 d和12 d新生鼠组心肌组织中Nanog蛋白的表达;利用计算机图像处理系统对Nanog蛋白进行定量分析。结果:Nanog蛋白在18 d胎鼠组心肌细胞质中呈云雾样强阳性表达。在6 d新生鼠组心肌细胞质中,Nanog蛋白较18 d胎鼠组阳性表达减弱,12 d新生鼠组的心肌细胞质呈现极弱阳性表达。3个年龄组心肌中的毛细血管内皮细胞均呈现强阳性表达。定量分析显示,胎鼠组心肌组织和6 d新生鼠组心肌组织的Nanog蛋白的含量无显著性变化,12 d新生鼠组心肌组织的Nanog蛋白比胎鼠心肌组织明显增加。结论:Nanog蛋白在小鼠心肌组织发育中表达规律是从胎期开始随着心发育,心肌细胞Nanog蛋白的含量逐渐减少,内皮细胞中Nanog蛋白逐渐增多。

干细胞Nanog蛋白在食管癌组织中的表达及意义

目的:通过分析干细胞Nanog蛋白在食管癌组织中的表达,进一步探讨其和食管癌病理特征存在的关系。方法:回顾性分析2012年1月-2014年1月在本院接受治疗的70例食管癌患者,收集其临床资料、癌组织及癌周围正常组织的标本等资料,采用免疫组化法检测其癌组织和癌组织周围正常细胞的干细胞Nanog蛋白,并用免疫荧光技术检测食管癌细胞系Eca-109及TE-1的Nanog蛋白表达。结果:经检测,食管癌组织中的Nanog蛋白表达水平显著高于癌周围正常组织,差异有统计学意义(P<0.05),且食管癌组织中的Nanog蛋白表达水平和食管癌病理分期、分化程度及淋巴结转移有明显关系(P<0.05)。结论:干细胞Nanog蛋白在食管癌组织中的表达水平,和食管癌病变的发生、发展及转移情况有密切关系。

新生大鼠多器官成纤维细胞nanog蛋白的表达差异

目的探讨新生大鼠心、肝、脾、肺、肾和皮肤中成纤维细胞nanog蛋白表达差异及其意义。方法用免疫组织化学、免疫荧光和体外细胞培养技术,对成纤维细胞进行nanog蛋白和波形蛋白(vimentin)标记,检测并比较新生大鼠不同器官中成纤维细胞nanog蛋白和vimentin表达及共表达特征。结果新生大鼠心、肝、脾、肺、肾和皮肤6种器官中均有nanog蛋白和vimentin表达,在每个器官中均有少数成纤维细胞共表达这两种蛋白,共表达率分别为心(10.07±0.77)%、肝(9.97±3.70)%、脾(11.23±2.98)%、肺(15.07±2.87)%、肾(11.75±2.76)%、皮肤(16.14±1.28)%,其中皮肤和肺的共表达率高于心、肝、脾、肾(P<0.05)。结论共表达nanog蛋白和vimentin的成纤维细胞可能更具有干细胞样特性;新生大鼠皮肤和肺的成纤维细胞可能更具有组织损伤修复潜能。

干细胞Nanog蛋白在食管癌组织中的表达及意义

目的探讨食管癌组织中干细胞Nanog蛋白表达,分析其与食管癌临床病理特征的关系。方法收集87例食管癌患者的癌组织及癌旁正常组织标本,采用免疫组化法检测癌组织及癌旁正常组织中的Nanog蛋白表达,同时用免疫荧光技术检测食管癌细胞系TE-1、Eca-109中的Nanog蛋白表达。结果 Nanog蛋白在食管癌组织中的表达水平高于癌旁正常组织(P<0.05),Nanog蛋白在食管癌组织中的表达与其病理分期、分化程度和淋巴结转移有关(P均<0.05)。食管癌细胞系TE-1、Eca-109中的Nanog阳性蛋白呈高表达,且表达存在异质性;多数细胞以细胞质表达为主,少数以细胞核表达为主,细胞核表达阳性率为10%。结论 Nanog蛋白在食管癌组织中的表达与食管癌的发生、发展及转移密切相关。

同源域蛋白Nanog与胚胎干细胞的自我更新研究进展

胚胎干细胞作为一种具有自我更新能力的细胞,可以在体外无限对称性分裂,同时保持未分化状态,具有向各种类型细胞分化的潜能。基于这一特性,胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES细胞)有着极其广阔的应用前景。维持ES细胞自我更新的机制至今尚未阐明,推测ES细胞的自我更新机制是一个包括细胞外刺激、细胞内多种因子共同参与的复杂的网络调节系统。近年来发现同源域蛋白Nanog在这个网络调节系统中处于中心地位,对ES细胞自我更新的维持起着关键作用。本文就近年来关于Nanog在ES细胞自我更新维持中的作用,以及它与其他信号通路之间的对话,阐明ES细胞自我更新的维持机制。

沉默NANOG表达对人肝癌细胞HepG2中cyclin D1表达及细胞增殖的影响

目的:探讨RNA干扰沉默NANOG表达后对肝癌细胞HepG2中细胞周期素D1(cyclin D1)表达及细胞增殖的影响。方法:将以NANOG基因为靶点的NANOG-siRNA瞬时转染肝癌细胞HepG2,real-time PCR和Western boltting检测NANOG、cyclin D1 mRNA和蛋白的表达,CCK-8和平板克隆形成实验检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期情况。结果:与mock组比较,转染NANOG-siRNA后,肝癌细胞HepG2中NANOG、cyclin D1mRNA和蛋白水平均下调(P<0.05),细胞增殖能力下降(P<0.05),进入G0/G1期的细胞比例增多(P<0.05)。结论:沉默NANOG表达可引起肝癌细胞HepG2中cyclin D1的表达下降,导致细胞增殖能力下降。

食管癌细胞系中Nanog基因沉默对顺铂敏感性的影响

目的:检测干细胞基因Nanog在食管癌细胞系TE-1中的表达及其对顺铂敏感性的影响。方法:通过细胞免疫荧光检测食管癌细胞系TE-1中Nanog蛋白的表达;应用Lipofectamine2000将荧光染料标记的Nanog siRNA转染进细胞中,通过荧光显微镜观察转染效率,再通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测小干扰RNA(siRNA)的沉默效率;转染后24h加入顺铂,继续孵育48h后测得不同转染组的半数抑制浓度(IC50),后加入相同浓度的顺铂5mg/L,48h后测得不同转染组的生存率。结果:Nanog蛋白在食管癌细胞系TE-1中高表达,以核表达为主;Nanog siRNA细胞转染率为(67.57±16.90)%,沉默效率可高达85%以上;转染24h后加入顺铂,继续孵育48h后测得Nanog siRNA组的IC50较阴性对照组和空白组相比均降低,差异有统计学意义。加入相同浓度顺铂5mg/L,48h后测得Nanog siRNA组细胞生存率明显低于阴性对照组和空白对照组,差异有统计学意义。结论:Nanog在食管癌细胞系TE-1中高表达,降低Nanog的表达后能够提高食管癌细胞对顺铂的敏感性。

食管鳞癌组织Nanog表达临床意义分析

目的研究食管鳞癌组织中Nanog蛋白表达情况及其与食管癌患者预后的相关性。方法收集河北北方学院附属第一医院2000-01-01-2005-12-31手术切除的食管癌存档标本蜡块69例及正常食管黏膜组织(距肿瘤组织>5cm)24例,应用免疫组化SP法检测食管鳞癌及癌旁正常黏膜组织中Nanog的表达,分析其与各临床病理因素的相关性;结合Nanog的表达情况及随访资料,Kaplan-Meier法和Log-rank检验分析Nanog与食管癌患者生存的相关性;并建立Cox回归模型评估Nanog及各临床病理因素与患者预后的相关性。结果食管鳞癌组织中Nanog表达阳性率为40.6%(28/69),显著高于正常组织的8.3%(2/24),χ2=8.473,P=0.004。Nanog的表达与组织分化程度(χ2=7.137,P=0.008)、淋巴结转移(χ2=4.947,P=0.026)、外膜浸润(χ2=11.110,P=0.001)和UICC分期(χ2=5.301,P=0.021)明显相关,而与患者年龄(χ2=0.238,P=0.626)和性别(χ2=1.229,P=0.268)无相关性;死亡患者Nanog的表达程度为49.0%(25/51),明显高于生存患者的16.7%(3/18),χ2=5.775,P=0.016;Nanog表达水平与食管癌患者预后明显相关,RR=1.913,P=0.002。结论 Nanog在食管鳞癌组织中呈高表达,与患者生存期相关,Nanog是影响食管癌患者预后的独立因素。