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pEGX-4T-2/NAP1融合蛋白的原核表达及鉴定 被引量：3
1
作者 李峰 田宗城 +3 位作者 赵东海 张建平 尹志华 姚开泰 《湖南文理学院学报（自然科学版）》 CAS 2005年第2期36-39,共4页
以鼻咽组织cDNA为模板,PCR扩增NAP1基因编码区,PCR产物克隆入pUCm-T载体,筛选阳性克隆.构建NAP1基因编码区的原核表达载体pEGX-4T-2/NAP1,转化大肠杆菌BL21.经IPTG诱导表达后,在不同时段收集菌体,提取细菌的全部蛋白.经12%SDS-聚丙烯酰... 以鼻咽组织cDNA为模板,PCR扩增NAP1基因编码区,PCR产物克隆入pUCm-T载体,筛选阳性克隆.构建NAP1基因编码区的原核表达载体pEGX-4T-2/NAP1,转化大肠杆菌BL21.经IPTG诱导表达后,在不同时段收集菌体,提取细菌的全部蛋白.经12%SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,发现细菌全蛋白中在35KD～36KD处多出一条明显条带.用兔抗人NAP1多克隆抗体,利用WesternBlotting对该融合蛋白的表达进行了鉴定,NAP1基因的融合蛋白表达成功,为制备NAP1单克隆抗体和获得有生物活性的NAP1蛋白,进一步研究NAP1蛋白的功能奠定了基础. 展开更多
关键词 nap1蛋白 原核表达 鉴定
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