用NBT还原法检测细菌无细胞溶解物中SOD活性

目的：了解不同细菌无细胞溶解物中ＳＯＤ活性。方法：采用ＮＢＴ还原法检测２株大肠杆菌和８株沙门氏菌（其中７株伤寒沙门氏菌、１株鼠伤寒沙门氏菌）无细胞溶解物中ＳＯＤ活性。结果：２株大肠杆菌ＳＯＤ活性明显低于８株沙门氏菌（Ｐ＜０．０１）；鼠伤寒沙门氏菌ＳＯＤ活性明显高于伤寒沙门氏菌（Ｐ＜０．０１）；而伤寒沙门氏菌Ｌ型返祖株ＳＯＤ活性低于其它株伤寒沙门氏菌（Ｐ＜０．０１）。结论：不同细菌的ＳＯＤ活性有差异；

NBT还原法测糖化血清蛋白的方法学评价

目的对NBT法测糖化血清蛋白进行方法学评价。方法对受检者血清在Olympus AU640上进行糖化血清蛋白检测，系统研究了NBT还原法测糖化血清蛋白的精密度、稀释线性及干扰因素等。结果NBT法精密度较高，批内和批间变异系数（CV）分别为4．2％～5．52％和5．32％～7．3％，回收率为94．58％～100．98％。结论NBT法测糖化血清蛋白精密度较高，结果可靠，适合基层医院检验科应用。

嗜肺军团菌对人体中性粒细胞NBT还原作用的影响

以ＮＢＴ还原试验微量比色法测定嗜肺军团菌对人体中性粒细胞氧化代谢的影响，发现经洗涤的活菌能激发嗜中性多形核白细胞（ＰＭＮ）的ＮＢＴ还原作用，而细菌培养物滤液在对ＰＭＮ无细胞毒性的浓度表现抑制ＮＢＴ还原的效应。

中国对虾血细胞吞噬活动中超氧阴离子(O_2^-)的产生

用ZymosanA对中国对虾(Penaeuschinensis)血细胞进行体外刺激,用NBT还原法测定血细胞吞噬活动中产生O-2的产生;不同浓度2的过程。结果表明,中国对虾血细胞在经刺激诱导的吞噬活动中有明显的呼吸爆发和O-的ZymosanA对血细胞产生O-2的影响不同。ZymosanA在0.25～1.0mg/mL时随质量浓度的增加,产生O-2的量也增加,但当ZymosanA质量浓度继续增加到1.5和2.0mg/mL时,产生O-2的量反而下降。用同一浓度的ZymosanA对不同密度血细胞进行刺激产生O-2的强度也不同,随着密度的增加,血细胞产生O-2的量增加。SOD、NEM和碘代乙酰胺(Iodoacetamide)对血细胞吞噬过程中O-2的产生有抑制作用;Hg2+、Cr3+、Pb2+、Cu2+和Zn2+5种重金属离子也能抑制血细胞产生O-2;不同个体的中国对虾血细胞产生O-2的能力不同。NBT还原法测定中国对虾血细胞吞噬时产生的O-2可以作为检测对虾免疫状态的指标。

植物冻害和氧化胁迫——甘蓝叶冻-融循环中超氧的产生

为检验植物冻害的发生和氧化胁迫这一假说 ,在冰冻前把氮蓝四唑 (NBT)真空渗入到甘蓝叶圆片中 .在叶圆片冻 融循环中NBT被还原为甲 .把其中的单甲 用乙醇提取出来 ,在分光光度计上比色 ,可作为冻 融循环中产生的氧化胁迫的定量指标 .NBT本身作为氧化剂 ,使冻害稍有增加 .作为冰冻保护剂的二甲基亚砜真空渗入叶圆片使其抗冻性显著增加 ,而NBT还原则显著减少 ,表明二甲基亚砜在保护叶组织免受冻害上的作用和它减缓植物组织氧化胁迫的作用有关 .实验结果支持植物冻害的发生和氧化胁迫有关这一假说 .实验还表明还原NBT的还原剂很可能是超氧阴离子自由基 .

细胞因子对HL-60白血病细胞分化作用的研究

目的 研究细胞因子TNF -α、IFN -γ及IL -6对白血病细胞的分化作用的影响。方法 以HL -6 0白血病细胞为模型 ,采用几种细胞因子单一或联合作用于HL -6 0细胞。通过检测细胞表面分化抗原、NBT试验和细胞内酶α -NAE指标 ,观察细胞因子对白血病细胞的单一和联合促分化作用。结果 TNF -α可显著增加NBT还原率和α -NAE阳性细胞数 ,无分化抗原表达的改变 ;IFN-γ能诱导HL -6 0细胞表面分化抗原改变 ,同时显著增加NBT还原率和α -NAE阳性细胞数 ;IL -6无诱导HL -6 0细胞分化作用 ;IFN -γ和TNF -α可协同作用增加NBT还原率和α -NAE阳性细胞数 ,但对细胞表面分化抗原表达无明显协同作用。结论 不同类型的细胞因子对HL -6 0细胞分化作用的影响也不同。

放线菌素23-21对人早幼粒白血病细胞的杀伤和诱导分化

放线菌素23-21(Act23-21)对人早幼粒白血病细胞(HL-60)具有杀伤和诱导分化双重作用,其效应的强度和性质对剂量变化较敏感。采用Act23-21 5-50ng/ml处理24～72h,HL-60细胞的PC值有不同程度的降低,可低于10％,以集落形成法测得剂量—细胞存活率曲线为阈值指数型,杀伤指数达2以上。Act23-21在低浓度下(1.0～4.0ng/ml)能诱导HL-60细胞发生形态学和功能学分化,成熟细胞可达49％,细胞的分化性状能持续表达。Act23-21的诱导作用比放线菌素D(Act D)稍强,逊于二甲基亚砜(DMSO),而其诱导细胞分化性状持续表达的能力强于DMSO。

银杏叶提取物对氧自由基的影响

分别提取银杏叶脂溶性成分和水溶性成分,采用NBT(氯化硝基四氮唑蓝)光还原法检测银杏叶提取物消除氧自由基能力的大小,并计算出抑制率。结果表明:银杏叶脂溶性成分和水溶性成分均能消除氧自由基,水溶性成分消除氧自由基的能力强于脂溶性成分。水溶性提取物组的活力单位是0.167mg,脂溶性提取物NaOH组的活力单位是0.17mg,脂溶性提取物无水乙醇组的活力单位是0.795mg。

全反式维甲酸诱导分化对SH-SY5Y细胞拮抗细胞毒性研究的影响

[目的]观察全反式维甲酸(RA)诱导分化对以人神经母细胞瘤SH-SY5Y作为体外神经毒性研究模型的影响。[方法]RA诱导SH-SY5Y细胞分化并于相差显微镜观察细胞形态学变化;采用MTT法检测细胞活力;通过测定细胞内乳酸脱氢酶(LDH)的释放量观察毒性物质对SH-SY5Y细胞的作用;硝基蓝四氮唑(NBT)还原法检测细胞的还原能力;荧光探针(DCFH-DA)测定细胞内活性氧(ROS)荧光强度。[结果]MTT检测和LDH测定发现,RA诱导SH-SY5Y细胞分化,提高了细胞活力,使SH-SY5Y细胞拮抗其对毒性物质的反应。NBT还原实验和DCFH-DA测定显示,RA诱导分化可降低H2O2诱导的细胞内ROS的水平。[结论]RA通过提高细胞活力而拮抗毒性物质对SH-SY5Y细胞的毒性作用,其作用机制可能与细胞内ROS水平有关。未分化型SH-SY5Y细胞是进行PD疾病的神经毒性实验和神经保护研究的良好细胞模型。

热应激中蛋鸡血液和肝脏SOD活性的动态变化

人工气候室中 ,32 0日龄海赛褐蛋鸡 14 4只连续 10d热应激 2 7～ 38℃。用NBT光还原法测定持续高温下血液中红细胞SOD活性 ;用亚硝酸盐形成法测定组织SOD活性。结果表明 :高温组与常温组相比 ,血液中红细胞SOD动态活性降低 ,并维持在一个低于常温组的新水平上 ;肝脏SOD动态活性同时降低 ,其最低值低于常温组 ;肝脏和血液SOD活性呈显著正相关 ,相关系数为γ =0 .6 5。

几种芦荟SOD同工酶谱、酶活性比较

通过聚丙烯酰胺凝胶电泳法和NBT光化还原法,测定分析了9种芦荟的SOD同工酶酶谱和酶活性。结果表明,翠叶芦荟含6种SOD同工酶,蕃拉芦荟和中华芦荟均含有4种SOD同工酶,其余6种芦荟均含有3种SOD同工酶。SOD酶活性由强至弱依次为翠叶芦荟、蕃拉芦荟、中华芦荟、开普芦荟、日本芦荟、皂质芦荟、上农大叶芦荟、多肉芦荟、斑叶芦荟。供试的9种芦荟中,经济价值最高的是翠叶芦荟,其次是蕃拉芦荟、中华芦荟和开普芦荟。

水培条件下pH对大蒜生长趋势的影响

[目的]研究水培大蒜在不同pH条件下的生长发育及SOD活性变化。[方法]土壤溶液的pH对植物的生长发育有重要的影响,试验以不同梯度的pH水溶液水培大蒜,在不同生长阶段对其SOD活性进行测定。试验采用丙酮沉淀法分离纯化SOD沉淀,用NBT光还原法测定其活性。[结果]水培大蒜在pH为6.0时长势最好。在pH 4.55.5的生长环境下,大蒜的SOD活性相对稳定,但伴随着逐渐生长,SOD活性呈现上升趋势。酸性环境下,SOD活性相对较高。[结论]该研究可为大蒜的水培提供指导。

两种红细胞超氧化物歧化酶测活方法的比较

目的 比较两种红细胞超氧化物歧化酶 (SOD)活性测定方法 ,以便在实际工作中根据不同的试验条件选取最合适的测活方法。方法 用黄嘌呤氧化酶法和 NBT光化还原法分别对经甲醛染毒处理后的小鼠红细胞 SOD活性进行测定 ,将它们在耗时、耗材、条件控制和实验结果等方面的优缺点进行比较。结果 通过两种方法的比较 ,认为黄嘌呤氧化酶法是种比较好的 SOD测活方法。结论 在测定红细胞超氧化物歧化酶时 ,选取黄嘌呤氧化酶法比

[Co(NTB)Cl]_2[CoCl_4]·4CH_3OH的合成、晶体结构和超氧化物歧化酶模拟活性

合成和表征了一种超氧化物歧化酶(SOD)模型化合物[Co(NTB)Cl]2[CoCl4]·4CH3OH(NTB=三-(苯并咪唑-2-甲基)胺),并用NBT光照还原法对它进行了SOD模拟活性测试。结果表明,配合物中Co2+的配位构型有2种:一种是在[CoCl4]2-中,它与4个Cl-形成正四面体构型;另一种是在[Co(NTB)Cl]+中形成变形三角双锥结构。配合物具有一定的SOD模拟活性,它催化O·-2歧化分解的速度随着其浓度增加而增加,其IC50为0.884μmol·L-1。

温度对荒漠沙蜥肝脏组织中SOD活性的影响

利用NBT光化学还原法测定在4℃,25℃及35℃条件下驯化15天的荒漠沙蜥肝脏组织中SOD的活性.结果表明:4℃驯化的蜥蜴的SOD活性最低,为3 661.69±369.828 u／(h·gFW);25℃驯化的蜥蜴的SOD活性有所增高,为4263.17±269.124 u／(h·gFW);35℃驯化时,SOD活性最高,为4683.72±172.186 u／(h·gFW).各组间SOD活性差异显著(P<0.05).荒漠沙蜥肝脏组织中SOD活性与温度具有关联性,而这与机体在不同温度下的生理机能是密切相关的.

活性污泥中超氧化物歧化酶(SOD)活性测定影响因素

研究以污水生物处理中的活性污泥为对象,采用氮蓝四唑光还原法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性,从样品制备和保存方面探讨了是否添加溶菌酶液、细胞破碎时间、酶液保存时间与保存温度等因素对SOD活性测定的影响。研究表明,溶菌酶液的加入提高了细胞破碎效果;细胞破碎的条件为99次(工作3 s,停3 s),时间为40 min时破碎效果最好;酶液保存时间在4 h内最佳;-20℃保存比4℃保存对酶活性影响小。最佳检测条件为:取样量为1 mL时,反应温度为30℃,反应时间为20 min时,SOD酶活性最大。

新疆红景天根茎中超氧化物歧化酶活性的测定

超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase，简称SOD)，它在生物的细胞中广泛存在，并作为细胞保护酶被人们重视和研究。超氧化物歧化酶(SOD)能催化超氧化物阴离子自由基发生歧化作用而生成分子氧和过氧化氢，同时，SOD能防御活性氧对机体的伤害及机体衰老。本实验以新疆红景天根茎为原料，采用光化学方法测定其过氧化物歧化酶活性。用NBT光还原法从新疆红景天的根茎粗提取液中测出其根茎SOD活性为1333U／g鲜重。