大鼠局灶性脑缺血再灌注后缺血核心区NCCa-ATP通道的表达变化

日的了解局灶性脑缺血再灌注后磺酰脲类受体1（SURl）调控的非选择性阳离子通道（nonselectivecationchannel，NCCa—ATP通道）表达的变化与脑缺血损伤的关系，探索脑缺血的治疗时间窗．方法以颈内动脉线栓法建立大鼠大脑左侧中动脉梗塞模型，缺血2h后恢复再灌注．取实验性脑缺血再灌注损伤后3h、6h、8h、12h、24h等不同时间缺血核心区的脑组织，采用RT—PCR及Western—blot技术，测定SURl的mRNA及蛋白表达水平．采用免疫荧光双标法技术，观察SURl在缺血后脑微血管内皮细胞的表达情况．结果缺血再灌注核心区组织在缺血再灌注后3h、6h、8h、12h及24h各时间点SURlmRNA和SURl蛋白的表达量均上调，再灌注后8h达高峰（P〈0．05），缺血再灌注后12h，SURl在脑微血管内皮细胞的表达非常明显．结论局灶性脑缺血再灌注过程中SURl调节的NCCa～ATP通道参与了脑缺血损伤，在脑缺血再灌注后其mRNA和蛋白的表达量均上调．推测应用SURl受体的特异性抑制剂最佳时机在缺血再灌注后8～12h．

磺脲类药物对体外缺血再灌注大鼠脑微血管内皮细胞NC_(Ca-ATP)通道的影响

目的观察大鼠脑微血管内皮细胞(brainmicrovascular endothelial cells,BMECs)缺血再灌注损伤后磺酰脲类受体1(SUR1)调控的非选择性阳离子通道(nonselective cation channel,NCCa-ATP通道)表达的影响,探讨不同的磺脲类药物,即SUR1受体的高选择性抑制剂格列齐特和格列美脲对大鼠BMECs凋亡中的作用。方法体外分离培养大鼠BMECs,氧糖剥夺法(oxygen-glucose deprivation,OGD)模拟缺血再灌注损伤,采用RT-PCR和Western blot技术检测SUR1 mRNA及蛋白的表达。采用Annexin V-FITC试剂盒检测BMECs凋亡率。结果与正常对照组比较,模型组SUR1 mRNA和蛋白的表达明显增高(P<0.05);在格列齐特和格列美脲进行干预后,细胞凋亡率与模型组差异无统计学意义。结论在体外培养的缺糖缺氧的BMECs上有SUR1调节的非选择性阳离子通道的表达并上调;体外试验中未观察到磺脲类药物对"缺血再灌注"的BMECs有保护作用。

格列齐特对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制研究

目的：以大脑中动脉栓塞（MCAO）/再灌注模型为研究对象,探讨格列齐特对缺血性脑卒中的保护作用及机制。方法：雄性Wistar大鼠采用线栓法进行2 h左侧MCAO/再灌注,对不同再灌注时间点的梗死核心区样本检测mRNA水平及SUR1蛋白表达水平;不同剂量格列齐特静脉注射到右颈内静脉后灌注12 h,采用TUNEL法检测凋亡细胞数量、采用Bederson试验评价神经功能缺损、采用TTC染色法观察脑梗死体积。结果：SUR1 mRNA和蛋白水平在MCAO/再灌注组织中显著上调,在缺血后8~12 h达到最大水平。格列齐特可减少TUNEL阳性细胞数量,减轻神经功能损伤和脑梗死体积。结论：研究表明SUR1信号通路可能与MACO/再灌注损伤及梗死相关,静脉注射格列齐特可通过抑制SUR1的表达减轻梗死程度,减少MACO/再灌注造成的梗死面积及脑细胞凋亡程度。