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产NDM-1和产KPC-2耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌临床及分子流行病学特征比较
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作者 殷丽军 卢露 +2 位作者 何磊燕 武娜娜 王传清 《中国感染控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期556-562,共7页
目的比较产NDM-1和产KPC-2耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)的临床及分子流行病学特征。方法回顾性分析2017—2020年某儿童医院非重复儿童住院患者临床分离的CRKP,查阅菌株来源患者的病历资料获得患者的基本临床特征。对CRKP进行药敏试... 目的比较产NDM-1和产KPC-2耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)的临床及分子流行病学特征。方法回顾性分析2017—2020年某儿童医院非重复儿童住院患者临床分离的CRKP,查阅菌株来源患者的病历资料获得患者的基本临床特征。对CRKP进行药敏试验及多位点序列分型(MLST)分析,比较产NDM-1和产KPC-2的CRKP临床及分子流行病学特征。结果2017—2020年共收集164株CRKP菌株,其中96株携带bla NDM-1,68株携带bla KPC-2,产NDM-1的CRKP主要分布在新生儿科室,产KPC-2的CRKP以非新生儿科室居多,两组在标本来源、患者年龄、科室分布和预后情况方面比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);产NDM-1的CRKP菌株以ST 17型和ST 278型为主,分别为40.63%、18.75%;而产KPC-2的CRKP菌株以ST 11为主,达73.53%。产KPC-2的CRKP分离株对头孢吡肟、氨曲南、亚胺培南、阿米卡星、庆大霉素、呋喃妥因和磷霉素的耐药率均高于产NDM-1的CRKP分离株,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论产NDM-1和产KPC-2的CRKP菌株在临床及分子流行病学方面均存在差异,产KPC-2的CRKP菌株表现出更严重的耐药性,感染KPC-2 CRKP的患者预后较差,应引起临床和感控的重视。 展开更多
关键词 耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌 KPC-2 ndm-1 ST 11 ST 17 CRKP 流行病学特征
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blaNDM-1 Carried by a Transferable Plasmid in a Salmonella Strain Isolated from Healthy Individuals
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作者 Wei Zeng Ming Luo +12 位作者 Pengcheng Du Zhenpeng Li Yao Peng Mengyu Wang Wenxuan Zhao Huayao Zhang Yang Li Pengjie Luo Yannong Wu Jialiang Xu Xu Li Xin Lu Biao Kan 《Biomedical and Environmental Sciences》 SCIE CAS CSCD 2024年第11期1252-1261,共10页
Objective Our study aimed to conduct genomic characterization of Salmonella strains carrying the blaNDM-1 gene in the intestinal tract of healthy individuals.The objectives were to underscore the importance of genomic... Objective Our study aimed to conduct genomic characterization of Salmonella strains carrying the blaNDM-1 gene in the intestinal tract of healthy individuals.The objectives were to underscore the importance of genomic surveillance for drug resistance in both commensal and pathogenic bacteria among healthy populations,and to establish protocols for regulating drug resistance plasmids based on the completion of a comprehensive map of drug resistance plasmid genomes.Methods We performed antimicrobial susceptibility testing and employed second-and third-generation sequencing techniques to analyze Salmonella strains harboring the blaNDM-1 gene,to surveil drug-resistant bacteria in the intestines of healthy subjects.Sequence comparison was conducted using both core-and pan-genome approaches.Concurrently,conjugation experiments were carried out to assess the efficiency of plasmid transfer.Results We isolated a carbapenem-resistant Salmonella enterica serovar Typhimurium strain from a healthy food worker in China.This strain harbored an IncHI2/IncHI2A plasmid carrying blaNDM-1 along with multiple antibiotic resistance genes(ARGs).Our findings highlight the potential for asymptomatic carriers to facilitate the transmission of ARGs.Pan-genomic analysis revealed that blaNDM-1-positive plasmids could traverse bacterial species barriers,facilitating cross-host transmission.Conclusion This study marks the first detection of blaNDM-1 in Salmonella strains isolated from healthy individuals.We underscore the risk associated with the transmission of conjugative hybrid plasmids carrying blaNDM-1,which have the potential to be harbored and transmitted among healthy individuals.Enhanced surveillance of drug-resistant pathogens and plasmids in the intestinal microbiota of healthy individuals could provide insights into the risk of ARG transmission and pathways for population-wide dissemination via ARG transfer factors. 展开更多
关键词 CARBAPENEMS ndm-1 IncHI2/IncHI2A plasmid Salmonella Typhimurium Healthy individual
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pH响应型Thanatin纳米抗菌药物的构建及其抑制产NDM-1酶耐药菌活性的研究
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作者 卢泽星 储著飞 +1 位作者 王海波 邓晓军 《中国医药科学》 2024年第20期161-164,共4页
目的 设计一种纳米药物递送系统,以解决抗菌肽Thanatin因静脉注射生物利用度差而不能应用于治疗全身性感染疾病的限制。方法 以葡聚糖为基本骨架制备一种苯硼酸和原酸酯功能化的葡聚糖嵌段聚合物用于包载亲水性的Thanatin。结果 通过氮... 目的 设计一种纳米药物递送系统,以解决抗菌肽Thanatin因静脉注射生物利用度差而不能应用于治疗全身性感染疾病的限制。方法 以葡聚糖为基本骨架制备一种苯硼酸和原酸酯功能化的葡聚糖嵌段聚合物用于包载亲水性的Thanatin。结果 通过氮-硼配位作用实现Thanatin的有效封装,得到了一种粒径为190.8 nm、包封率和载药量分别为73.2%和11.6%的纳米药物;该纳米药物细胞毒性低,在pH为5.5、6.5的PBS中的半数释放时间分别为10 min和25 min,累积释放率超过90%。相对于游离的Thanatin,Thanatin纳米药物对产新德里金属-β-内酰胺酶-1(NDM-1)大肠杆菌感染所致败血症小鼠的治疗效果得到显著增强。结论对Thanatin进行纳米封装可增强循环稳定性,从而提高对败血症小鼠的治疗效果。 展开更多
关键词 ndm-1 THANATIN 纳米药物 酸性pH响应 抗菌活性
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原薯蓣皂苷体外抗产NDM-1耐碳青霉烯Raoultella ornithinolytica B1645-1B的机制研究
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作者 余春芳 严廷苇 +6 位作者 妥娟 彭紫晶 张思涵 胡景秀 何浩 张涵肃 孟丽雪 《湖北医药学院学报》 CAS 2024年第5期463-469,共7页
目的:研究原薯蓣皂苷(protodioscin,PD)对产碳青霉烯酶NDM-1解鸟氨酸乌拉尔菌(carbapenem-re⁃sistant Raoultella ornithinolytica)B1645-1B的体外抑菌作用及逆转耐药性机制研究。方法:采用微量肉汤稀释法测定PD对B1645-1B的最低抑菌浓... 目的:研究原薯蓣皂苷(protodioscin,PD)对产碳青霉烯酶NDM-1解鸟氨酸乌拉尔菌(carbapenem-re⁃sistant Raoultella ornithinolytica)B1645-1B的体外抑菌作用及逆转耐药性机制研究。方法:采用微量肉汤稀释法测定PD对B1645-1B的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)。应用棋盘法测定中药单体PD联合亚胺培南(Imipenem,IMP)对B1645-1B的MIC,计算抑菌浓度指数(fractional inhibitory concentration,FIC)。采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测PD作用菌株B1645-1B后NDM-1 mRNA合成。利用MOE(Molecular Operating Environment)软件预测PD与NDM-1蛋白分子对接。通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)检测PD作用纯化后菌株B1645-1B的NDM-1蛋白表达。结果:PD对B1645-1B的MIC为10000μg/mL。PD联合IMP对B1645-1B的FIC为0.75,出现协同作用。PD作用后菌株B1645-1B的NDM-1 mRNA合成抑制和酶活性降低。结论:PD可能是一种很有前途的新型有效的协同抗菌剂及NDM-1酶抑制剂。 展开更多
关键词 原薯蓣皂苷 耐碳青霉烯解鸟氨酸乌拉尔菌 ndm-1 亚胺培南 体外抑菌实验
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鲍曼不动杆菌bla_(NDM-1)基因序列分析及表达 被引量:11
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作者 陈硕 邱少富 +7 位作者 夏力亮 王中强 刘军 柳楠 祝令伟 孙洋 宋宏彬 冯书章 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期471-473,482,共4页
目的研究NDM-1鲍曼不动杆菌厦门分离株耐药性产生的分子机制。方法 Vitek32测定耐药谱。根据Gen-Bank发表blaNDM-1基因序列设计合成引物,利用PCR技术扩增NDM-1鲍曼不动杆菌的blaNDM-1结构基因及其上下游调控序列片段,连接T载体,转化至... 目的研究NDM-1鲍曼不动杆菌厦门分离株耐药性产生的分子机制。方法 Vitek32测定耐药谱。根据Gen-Bank发表blaNDM-1基因序列设计合成引物,利用PCR技术扩增NDM-1鲍曼不动杆菌的blaNDM-1结构基因及其上下游调控序列片段,连接T载体,转化至大肠杆菌E.coli DH5α,序列测定并进行BLAST分析比对。测定始发菌株与重组菌株对美洛培南的最小抑菌浓度。结果药敏试验结果显示,该菌株对碳青霉烯类及β-内酰胺类抗生素耐药。NDM-1鲍曼不动杆菌厦门分离株blaNDM-1基因与HK-01同源性为100%;与KP-05-506相比,在blaNDM-1和trpF之间有24bp的插入。美洛培南最小抑菌浓度测定结果表明,重组菌株E.coli DH5α(pMD18-T::blaNDM-1)MIC值比始发菌株E.coli DH5α升高256倍。结论获得blaNDM-1基因的大肠杆菌能够表达碳青霉烯酶,该基因是碳青霉烯类抗生素耐药性产生的分子基础,该基因具有跨种水平传播的可能。 展开更多
关键词 ndm-1 鲍曼不动杆菌 blaNDM_-1基因 序列分析
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臭鼻克雷伯和鲍曼不动杆菌中检出NDM-1型金属β内酰胺酶基因 被引量:32
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作者 杨银梅 叶惠芬 +2 位作者 张伟红 陈惠玲 周小棉 《国际检验医学杂志》 CAS 2011年第13期1407-1409,共3页
目的调查对碳青霉烯类抗菌剂敏感性降低的肠杆菌和鲍曼不动杆菌中NDM-1型金属β内酰胺酶基因的存在情况。方法应用改良Hodge试验和EDTA协同试验对2007~2010年本院收集的对碳青霉烯类抗菌剂敏感性降低的肠杆菌和鲍曼不动杆菌进行碳青霉... 目的调查对碳青霉烯类抗菌剂敏感性降低的肠杆菌和鲍曼不动杆菌中NDM-1型金属β内酰胺酶基因的存在情况。方法应用改良Hodge试验和EDTA协同试验对2007~2010年本院收集的对碳青霉烯类抗菌剂敏感性降低的肠杆菌和鲍曼不动杆菌进行碳青霉烯酶筛选。PCR法扩增NDM-1基因,并对PCR扩增阳性产物进行DNA测序分析。对NDM-1基因阳性菌株用PCR方法检测armA和rmtB16S rRNA甲基化酶基因,VIM、SPM、IMP和KPC碳青霉烯酶基因以及Ⅰ类整合子。Etests法进行药敏试验。结果 70株肠杆菌中10株Hodge Test和EDTA协同试验阳性,55株鲍曼不动杆菌中6株EDTA协同试验阳性。其中1株臭鼻克雷伯和3株鲍曼不动杆菌PCR扩增出NDM-1型金属β内酰胺酶基因目的片段,经测序比对为NDM-1型基因。其中1株臭鼻克雷伯和1株鲍曼不动杆菌检测出armA型16S rRNA甲基化酶基因,1株鲍曼不动杆菌检测出2000 bp左右的Ⅰ类整合子,未检出除NDM-1型外的其他碳青霉烯酶基因。NDM-1基因阳性菌除对替加环素、多黏菌素B敏感外,对其他检测的抗菌剂均耐药。结论臭鼻克雷伯和鲍曼不动杆菌中存在NDM-1型金属β内酰胺酶基因,有的携带armA型16S rRNA甲基化酶基因和Ⅰ类整合子,为该地区首次报道。 展开更多
关键词 碳青霉烯酶 ndm-1型金属β内酰胺酶基因 抗药性 细菌 革兰氏阴性菌
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细菌NDM-1质粒耐药表型与其表达的相关性研究 被引量:3
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作者 冯伟 欧阳净 +3 位作者 程林 袁慊 王瑜 孙凤军 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 2020年第5期477-481,共5页
目的探讨NDM-1质粒携带菌株耐药表型与其基因表达的相关性,为临床抗菌药物选择提供理论参考。方法携带NDM-1的质粒电转化入大肠埃希菌TOP10,采用琼脂平板倍比稀释法测定碳青霉烯类药物对野生株和电转化子的最低抑菌浓度(minimal inhibit... 目的探讨NDM-1质粒携带菌株耐药表型与其基因表达的相关性,为临床抗菌药物选择提供理论参考。方法携带NDM-1的质粒电转化入大肠埃希菌TOP10,采用琼脂平板倍比稀释法测定碳青霉烯类药物对野生株和电转化子的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC),TaqMan RT-PCR检测碳青霉烯类耐药菌株的blaNDM-1基因表达及亚-MIC亚胺培南诱导对blaNDM-1基因表达的影响。结果12株产NDM-1菌株中共有8株电转化成功,电转化子对碳青霉烯类药物的耐药性与野生菌株基本一致。细菌对碳青霉烯类的耐药性与blaNDM-1基因表达成正比。亚-MIC亚胺培南诱导后菌株对碳青霉烯类药物的MIC值和blaNDM-1基因表达均显著高于野生株。结论碳青霉烯类耐药菌株耐药表型与blaNDM-1基因表达具有正相关性,TaqMan RT-PCR检测可快速准确地为临床治疗提供依据。 展开更多
关键词 ndm-1 质粒 碳青霉烯酶 TaqMan RT-PCR 耐药
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同时产碳青霉烯酶NDM-1和NDM-5的猪源大肠埃希氏菌的鉴定及耐药性研究 被引量:2
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作者 李海利 郎利敏 +5 位作者 张青娴 游一 朱文豪 王治方 张立宪 王克领 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期106-115,共10页
为了解携带碳青霉烯酶NDM-1及其亚型在猪场的流行情况,对来自猪场产房仔猪腹泻病例分离鉴定的87株大肠杆菌进行了碳青霉烯酶NDM-1和NDM-5的耐药基因扩增及测序。从87株大肠杆菌中分离鉴定出一株同时携带碳青霉烯酶NDM-1和NDM-5的大肠埃... 为了解携带碳青霉烯酶NDM-1及其亚型在猪场的流行情况,对来自猪场产房仔猪腹泻病例分离鉴定的87株大肠杆菌进行了碳青霉烯酶NDM-1和NDM-5的耐药基因扩增及测序。从87株大肠杆菌中分离鉴定出一株同时携带碳青霉烯酶NDM-1和NDM-5的大肠埃希菌(Escherichia coli),并命名为HN2106。为深入了解HN2106全基因组及其携带的质粒和耐药基因情况,对NH2106进行了16S rRNA菌种鉴定,bla耐药基因确认,全基因组测序,应用BLAST和MEGA软件对序列进行生物信息学分析、系统进化树分析。结果显示,该菌株含有7个质粒(plasmid A、plasmid B、plasmid C、plasmid D、plasmid E、plasmid F 和plasmid G),3种类型,分别为Col、IncFII、IncQ1。同时携带NDM-1和NDM-5基因,属B族β-内酰胺酶,其中bla位于质粒pNDM-HN2106(plasmid C)上,bla位于质粒pNDM5-HN2106(plasmid B)上,分别介导bla和bla耐药基因,是耐药菌传播的重要载体。全基因组耐药基因预测HN2106同时还携带21种类型的抗生素耐药基因。对HN2106菌株进行了85种抗菌药物敏感性测试,结果显示,HN2106菌株对亚胺培南、青霉素G等均耐药,对磺胺甲恶唑、头孢美唑等敏感。研究结果表明,养殖场NDM-1耐药质粒是NDM-1及其亚型耐药基因的重要载体,对养殖产业健康养殖和公共卫生安全带来较大隐患和威胁,应加强抗菌药物的合理应用和感染的防控措施,重视细菌耐药性的监测工作,以期为临床耐药菌株感染的防治提供理论参考。 展开更多
关键词 碳青霉烯酶 ndm-1 ndm-5 大肠埃希氏菌 细菌耐药
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河北省发现携带NDM-1型金属β-内酰胺酶基因的阴沟肠杆菌临床分离株 被引量:4
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作者 时东彦 曹丽君 +3 位作者 杨靖 李志荣 强翠新 赵建宏 《现代检验医学杂志》 CAS 2013年第3期32-34,共3页
目的 对河北省细菌耐药监测网收集的耐碳青霉烯类抗生素肠杆菌进行筛查与鉴定,以了解其耐药机制.方法 选择2011年10月~2012年10月河北省细菌耐药监测网收集的耐碳青霉烯类抗生素的肠杆菌临床菌株,采用纸片扩散法和E-test法检测耐药性,... 目的 对河北省细菌耐药监测网收集的耐碳青霉烯类抗生素肠杆菌进行筛查与鉴定,以了解其耐药机制.方法 选择2011年10月~2012年10月河北省细菌耐药监测网收集的耐碳青霉烯类抗生素的肠杆菌临床菌株,采用纸片扩散法和E-test法检测耐药性,改良Hodge试验和金属酶试验检测产酶类型,聚合酶链反应(PCR)检测耐药基因并进行测序.结果 50株耐碳青霉烯类抗生素的肠杆菌中检测到一株对亚胺培南和美洛培南高度耐药的阴沟肠杆菌,亚胺培南和美洛培南对阴沟肠杆菌的抑菌环直径均为6 mm.E-test法测得亚胺培南和美洛培南的MIC均>32 μg/ml,改良Hodge试验结果阳性,金属酶表型初筛试验阳性.经上海生物工程公司ABI测序仪测序后,并与GeneBank比对,表明与NDM-1基因有99%的相似性.结论 河北省发现1株对碳青霉烯类抗生素高度耐药的阴沟肠杆菌,经进一步试验证实为产NDM-1金属酶. 展开更多
关键词 阴沟肠杆菌 碳青霉烯类抗生素 ndm-1
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浙江省首次检出1株携带NDM-1基因的肺炎克雷伯菌 被引量:3
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作者 朱水荣 商小春 +3 位作者 帅慧群 潘军航 梅玲玲 张政 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期30-34,共5页
目的对浙江省不同地区上送的临床分离株进行NDM-1基因筛检,初探浙江省NDM-1基因携带菌阳性菌存在现状。方法应用TaqMan-MGB荧光定量PCR方法对2013年度收集的所有临床株进行NDM-1基因筛检;利用普通PCR方法对阳性株进行NDM-1基因测序、MLS... 目的对浙江省不同地区上送的临床分离株进行NDM-1基因筛检,初探浙江省NDM-1基因携带菌阳性菌存在现状。方法应用TaqMan-MGB荧光定量PCR方法对2013年度收集的所有临床株进行NDM-1基因筛检;利用普通PCR方法对阳性株进行NDM-1基因测序、MLST分型及其它30种耐药基因检测;使用VITEK 2Compact高级专家系统对阳性株进行微生物鉴定与耐药表型MIC测试;采用改良Hodge实验及亚胺培南-EDTA双纸片法协同试验,分别对阳性株进行碳青霉烯酶及金属β-内酰胺酶检测。结果经对1 450株菌株进行筛检,仅从1株来自疑似病毒腹泻11月大幼儿患者粪便中分离的肺炎克雷伯菌中检出该基因,基因序列同源性为100%,该菌MLST序列型为ST1416,产碳青霉烯酶及金属β-内酰胺酶,对Levofloxacin、Trimethoprim/Sulfa敏感,对Ciprofloxacin中敏,但对其他18种所检药物均显示耐药,另携带SHV、CTX、DHA、TEM、CMY2、IMP、GES、GIM、OXA-48、SPM、AmpC、aadA1、aacA4、aphA1共14种耐药基因,结果表明该菌株的耐药表型与基因型较为符合。结论本次从肠杆菌科肺炎克雷伯菌中检出NDM-1基因,应为浙江省首次报道,鉴于肠杆菌科细菌耐药速率传播更快,警示相关部门应重视并加强对NDM-1基因携带菌的监测与筛查。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 肠杆菌科 ndm-1基因 耐药基因
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基于HDA的超级细菌耐药基因NDM-1检测方法的建立 被引量:3
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作者 梁炜 张京宣 +4 位作者 张云霞 魏晓棠 杨伟克 林黎明 曹际娟 《食品安全质量检测学报》 CAS 2011年第3期152-158,共7页
本研究以建立解旋酶DNA恒温扩增(HDA)检测方法为目的,选择三种超级细菌NDM-1基因(metallo-beta-lactamase 1 gene)为目的基因,设计并合成特异性引物,建立和优化了可快速检测该种基因的HDA检测方法。特异性和灵敏度检测结果表明:该方法对... 本研究以建立解旋酶DNA恒温扩增(HDA)检测方法为目的,选择三种超级细菌NDM-1基因(metallo-beta-lactamase 1 gene)为目的基因,设计并合成特异性引物,建立和优化了可快速检测该种基因的HDA检测方法。特异性和灵敏度检测结果表明:该方法对NDM-1基因检测具有特异性,最低检测限可达10fg/μL,灵敏度高于普通PCR。提示HDA是一种针对NDM-1的快速、灵敏、便捷的非PCR核酸扩增技术。 展开更多
关键词 超级细菌 ndm-1基因 检测 解旋酶DNA恒温基因扩增
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新型携带blaNDM-1基因的超级细菌的研究进展 被引量:5
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作者 杨艳 王厚照 张玲 《国际检验医学杂志》 CAS 2013年第18期2440-2442,共3页
2010年8月11日,一篇发表在英国权威医学杂志《The Lancet Infectious Diseases》上的论文称发现了多重耐药性的NDM-1型"超级细菌"[1],引起了全球各界的密切关注。NDM-1型超级细菌并不是一种新型细菌,而是一类携带blaNDM-1基因对绝大... 2010年8月11日,一篇发表在英国权威医学杂志《The Lancet Infectious Diseases》上的论文称发现了多重耐药性的NDM-1型"超级细菌"[1],引起了全球各界的密切关注。NDM-1型超级细菌并不是一种新型细菌,而是一类携带blaNDM-1基因对绝大多数抗菌药物都有强劲耐药性多种细菌的统称。研究发现,携带blaNDM-1基因的主要是大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌这两种最常见的革兰阴性菌。 展开更多
关键词 ndm-1 超级细菌 药物耐受性 多粘菌素 替加环素
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弗劳地枸橼酸杆菌中质粒介导的KPC-2和NDM-1型碳青霉烯酶基因结构分析 被引量:4
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作者 林迪 方颍 +1 位作者 张嵘 陈功祥 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2016年第6期423-427,共5页
目的对携带bla_(NDM-1)和bl_(aKPC-2)的弗劳地枸橼酸杆菌的碳青霉烯酶基因结构进行分析。方法收集4株耐碳青霉烯类药物弗劳地枸橼酸杆菌(CF-05、CF-17、CF-35、CF-43),琼脂稀释法测定抗菌药物敏感性;脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析细菌同源性... 目的对携带bla_(NDM-1)和bl_(aKPC-2)的弗劳地枸橼酸杆菌的碳青霉烯酶基因结构进行分析。方法收集4株耐碳青霉烯类药物弗劳地枸橼酸杆菌(CF-05、CF-17、CF-35、CF-43),琼脂稀释法测定抗菌药物敏感性;脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析细菌同源性;特异性PCR扩增和序列测定分析碳青霉烯酶耐药基因和ESBLs耐药基因、接合试验、耐药基因周围序列分析对菌株的耐药机制进行分子水平研究。结果 4株细菌仅CF-05对阿米卡星敏感,所有菌株对其他检测药物全部耐药;PFGE结果显示4株细菌不同源;特异性PCR扩增和序列分析显示2株(CF-35、CF-43)同时携带blaNDM-1和blaKPC-2、另2株(CF-05、CF-17)仅携带blaNDM-1,CF-35同时携带bla_(CTX-M-15);其中3株细菌(CF-05、CF-17、CF-43)接合成功,CF-05、CF-17接合子(CF-05-1和CF-17-1)携带bla_(NDM-1),CF-43获得2种接合子(CF-43-1携带bla_(KPC-2)、CF-43-2同时携带bla_(NDM-1)和bla_(KPC-2));分析blaNDM-1和blaKPC-2周围序列发现,4株细菌周围序列分别与国内报道携带bla_(NDM-1)和bla_(KPC-2)的肺炎克雷伯菌质粒pNDM-HN380和PK048周围序列高度相似。结论在4株弗劳地枸橼酸杆菌中检测到NDM-1型碳青霉烯酶,其中2株同时携带KPC-2型碳青霉烯酶,bla_(NDM-1)周围序列和bla_(KPC-2)周围序列与国内已知肺炎克雷伯菌相关耐药基因周围序列高度相似。 展开更多
关键词 弗劳地枸橼酸杆菌 碳青霉烯酶 ndm-1 KPC-2
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6株超级细菌NDM-1基因环境研究 被引量:7
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作者 程灿灿 芮勇宇 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2014年第11期1820-1823,共4页
目的:研究6株超级细菌NDM-1基因环境,探讨耐药基因水平转移机制。方法:收集耐碳青霉烯的G-杆菌400株,利用PCR方法检测NDM-1基因,并测序验证。根据目前报道的NDM-1基因环境常见类型设计系列引物,步移法特异性扩增NDM-1基因上下游序列,并... 目的:研究6株超级细菌NDM-1基因环境,探讨耐药基因水平转移机制。方法:收集耐碳青霉烯的G-杆菌400株,利用PCR方法检测NDM-1基因,并测序验证。根据目前报道的NDM-1基因环境常见类型设计系列引物,步移法特异性扩增NDM-1基因上下游序列,并对扩增产物测序和序列分析。步移法检测阴性的菌株进行全基因组HindⅢ酶切,将NDM-1基因及基因环境克隆到pET28a质粒后再测序。结果:400株对碳青霉烯类耐药的G-杆菌中有6株NDM-1阳性。步移法检出其中5株菌的基因环境,包括不动杆菌基因种13TU、产酸克雷伯菌、不动杆菌基因种3、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌。这5株菌的基因环境与文献报道基本一致。产气肠杆菌的NDM-1基因环境经DNA克隆测序获得,从上游至下游为:部分缺失的转座酶Tn3、IS26及ISAba125,blaNDM-1,ble,部分缺失的异构酶trpF和SSen4元件。结论:NDM-1基因上下游常包含转座子或插入序列等元件,为其水平转移奠定基础。 展开更多
关键词 超级细菌 ndm-1 基因环境
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黄芩苷对一株产NDM-1大肠埃希菌体内外抗菌作用的研究 被引量:2
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作者 刘志远 潘健 +2 位作者 齐杰 张婷菊 马玉芝 《现代检验医学杂志》 CAS 2016年第3期124-126,共3页
目的观察黄芩苷对产 NDM-1大肠埃希菌的体内外抗菌作用。方法肉汤稀释法测定黄芩苷的最小抑菌浓度(MIC)、最小杀菌浓度(MBC);棋盘联合药敏试验检测黄芩苷与亚胺培南的协同作用;通过小鼠菌血症模型,观察黄芩苷对感染模型的保护作... 目的观察黄芩苷对产 NDM-1大肠埃希菌的体内外抗菌作用。方法肉汤稀释法测定黄芩苷的最小抑菌浓度(MIC)、最小杀菌浓度(MBC);棋盘联合药敏试验检测黄芩苷与亚胺培南的协同作用;通过小鼠菌血症模型,观察黄芩苷对感染模型的保护作用。结果黄芩苷的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度相同,均为8 mg/ml;黄芩苷与亚胺培南呈明显的协同作用(FIC=0.125),单独使用黄芩苷使菌血症小鼠死亡率降低25%。结论黄芩苷体内、外均具有一定的抗产 NDM-1大肠埃希菌活性。 展开更多
关键词 黄芩苷 大肠埃希菌 ndm-1 金属酶 抗菌作用
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NDM-1基因DHPLC快速检测体系的建立 被引量:1
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作者 吴兴海 张云霞 +5 位作者 杨伟克 封立平 房保海 庞国兴 曹际娟 林黎明 《食品安全质量检测学报》 CAS 2011年第3期-,共6页
NDM-1基因是一种专属于"超级细菌"的重要特有的耐药基因,在食品潜在污染病原微生物的检测中着重要的作用。本研究以实现食品中超级细菌的快速检测为目标,初步建立了NDM-1基因的PCR-DHPLC快速检测鉴定方法,根据NDM-1基因序列,... NDM-1基因是一种专属于"超级细菌"的重要特有的耐药基因,在食品潜在污染病原微生物的检测中着重要的作用。本研究以实现食品中超级细菌的快速检测为目标,初步建立了NDM-1基因的PCR-DHPLC快速检测鉴定方法,根据NDM-1基因序列,设计、合成了PCR引物(ND-D-F和ND-D-R),并分别对NDM-1质粒DNA及其他11个标准菌株进行了PCR扩增和DHPLC检测。结果表明,携有NDM-1基因的质粒DNA经过PCR-DHPLC反应扩增出特异性样品吸收峰,而其他对照菌均未出现相应吸收峰,提示本文中设计和应用的PCR引物具有NDM-1基因检测的特异性;灵敏度测定结果显示,此体系检测下限可达100fg/μL,提示PCR-DHPLC方法是一种特异、灵敏、快速的NDM-1基因检测方法。 展开更多
关键词 ndm-1 PCR-DHPLC 检测
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NDM-1基因PCR检测技术的研究 被引量:1
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作者 吴兴海 张云霞 +4 位作者 封立平 邓明俊 张治宇 祝素贞 曹际娟 《食品安全质量检测学报》 CAS 2011年第3期130-135,共6页
NDM-1基因是一种"超级细菌"特有的耐药基因,对于菌体的广谱抗药性起着决定性的作用。本研究以实现该基因的快速检测为目的,初步建立了NDM-1基因的PCR快速检测鉴定法。选取肺炎克雷伯氏菌ADB65的NDM-1基因为目的基因,设计并合... NDM-1基因是一种"超级细菌"特有的耐药基因,对于菌体的广谱抗药性起着决定性的作用。本研究以实现该基因的快速检测为目的,初步建立了NDM-1基因的PCR快速检测鉴定法。选取肺炎克雷伯氏菌ADB65的NDM-1基因为目的基因,设计并合成了PCR检测引物(ND-319-F和ND-319-R),并以另外11种标准菌株为对照,分别进行了PCR检测。结果表明,携有NDM-1基因的质粒DNA经过PCR反应都扩增出长为319bp的特异性片段,而其他对照病菌均未出现相应片段,证明这对引物具有NDM-1基因检测的特异性。灵敏度测定结果,此体系可检出100fg/μL质粒DNA模板。研究表明,PCR方法是一种特异、灵敏、快速的NDM-1基因检测方法。 展开更多
关键词 ndm-1 PCR 检测
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携带NDM-1阴沟肠杆菌尿路感染株临床特点回顾性报告 被引量:4
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作者 曹丽军 杨靖 +3 位作者 耿凤珍 李慧卿 史峥 时东彦 《医学研究与教育》 CAS 2014年第1期33-36,共4页
目的对2012年7月分离自住院患者尿液标本携带NDM-1阴沟肠杆菌的临床特点、检测过程进行回顾性分析,探讨其耐药特征及产生机制,对控制"超级细菌"的流行提出意见。方法依照CLSI标准,采用K-B法和MIC法检测耐药性,改良Hodge试验... 目的对2012年7月分离自住院患者尿液标本携带NDM-1阴沟肠杆菌的临床特点、检测过程进行回顾性分析,探讨其耐药特征及产生机制,对控制"超级细菌"的流行提出意见。方法依照CLSI标准,采用K-B法和MIC法检测耐药性,改良Hodge试验和金属酶试验检测产酶类型,聚合酶链反应(PCR)检测耐药基因并进行测序。结果此株阴沟肠杆菌对亚胺培南和美罗培南等15种7个类别抗生素均显示耐药,改良Hodge试验阳性,金属酶表型初筛试验阳性,经基因扩增并测序后,与Genebank比对,表明与NDM-1基因有99%的相似性,并经河北省CDC确证报告该菌株为携带NDM-1阴沟肠杆菌。结论该尿路感染携带NDM-1基因金属酶的阴沟肠杆菌株,其产生可能与患者年老体差、恶性肿瘤伴长时滞留尿管并长时多次应用过多种抗生素有关,因此特别强调严格侵入性导尿及滞留时限指征、规范抗生素使用,做好重点消毒、隔离,控制多重耐药株发生。 展开更多
关键词 阴沟肠杆菌 碳青霉烯类抗生素 ndm-1基因检测 回顾性报告
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产NDM-1弗劳地枸橼酸杆菌整合子和插入序列共同区1检测及分型 被引量:1
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作者 杜娜 卯建 +4 位作者 刘淑敏 牛敏 尧静 张孟爽 杜艳 《中国感染与化疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期523-526,共4页
目的研究临床分离产NDM-1弗劳地枸橼酸杆菌中整合子和插入序列共同区1(ISCR1)移动元件的分布和携带耐药基因盒情况,以及菌株的同源性。方法收集昆明医科大学第一附属医院2012年6月-2014年10月产NDM-1弗劳地枸橼酸杆菌18株,采用VITEK 2... 目的研究临床分离产NDM-1弗劳地枸橼酸杆菌中整合子和插入序列共同区1(ISCR1)移动元件的分布和携带耐药基因盒情况,以及菌株的同源性。方法收集昆明医科大学第一附属医院2012年6月-2014年10月产NDM-1弗劳地枸橼酸杆菌18株,采用VITEK 2全自动药敏鉴定仪进行菌种鉴定和药敏试验;PCR及测序法检测Ⅰ~Ⅲ类整合酶基因和ISCR1元件保守区,以及可变区携带的耐药基因盒;采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术对菌株进行分型研究。结果检测菌株中77.8%(14/18)菌株Ⅰ类整合子保守区阳性,27.8%(5/18)菌株ISCR1元件保守区阳性,未检测到Ⅱ、Ⅲ类整合子;72.2%(13/18)菌株Ⅰ类整合子可变区阳性,未检测到ISCR1元件的可变区;整合子可变区含有编码对氨基糖苷类抗生素耐药的基因盒(aad A1、aad A5、aac(6')-Ib-cr)和编码对磺胺类抗菌药物耐药的基因盒(dfr A、dfr A15、dfr A17),可变区基因盒未检测到NDM-1耐药基因;PFGE分型将18株菌分成17种型。结论产NDM-1弗劳地枸橼酸杆菌克隆播散趋势不明显,Ⅰ类整合子广泛存在于此类菌中,ISCR1元件携带率较低,并且这两类移动元件与我院NDM-1基因的传播无关。 展开更多
关键词 整合子 插入序列共同区1 ndm-1弗劳地枸橼酸杆菌 克隆传播
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NDM-1型金属-β-内酰胺酶及其抑制剂研究进展 被引量:2
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作者 孙影 周紫薇 +2 位作者 冯迪 刘湲 郑珩 《国外医药(抗生素分册)》 CAS 2018年第2期91-98,共8页
金属β-内酰胺酶(MBLs)尤其是NDM-1型金属酶介导的细菌耐药性在全球范围内不断扩散,给人类健康带来日益严重的威胁。虽然使用抑制剂阻止酶的水解作用是临床上应对产β-内酰胺酶耐药菌的重要手段,并已成功上市了奥格门汀等药物,但临床所... 金属β-内酰胺酶(MBLs)尤其是NDM-1型金属酶介导的细菌耐药性在全球范围内不断扩散,给人类健康带来日益严重的威胁。虽然使用抑制剂阻止酶的水解作用是临床上应对产β-内酰胺酶耐药菌的重要手段,并已成功上市了奥格门汀等药物,但临床所用抑制剂仅对丝氨酸β-内酰胺酶有效,对MBLs尤其是NDM-1没有效果。本综述概述了近年来NDM-1抑制剂的研究进展,介绍了MBLs抑制剂筛选新方法,以期为研究者们提供新的思路,更有效地设计或筛选出活性较好的MBLs抑制剂。 展开更多
关键词 金属酶 ndm-1 抑制剂 筛选方法
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