产NDM-1和产KPC-2耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌临床及分子流行病学特征比较

目的比较产NDM-1和产KPC-2耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)的临床及分子流行病学特征。方法回顾性分析2017—2020年某儿童医院非重复儿童住院患者临床分离的CRKP,查阅菌株来源患者的病历资料获得患者的基本临床特征。对CRKP进行药敏试验及多位点序列分型(MLST)分析,比较产NDM-1和产KPC-2的CRKP临床及分子流行病学特征。结果2017—2020年共收集164株CRKP菌株,其中96株携带bla NDM-1,68株携带bla KPC-2,产NDM-1的CRKP主要分布在新生儿科室,产KPC-2的CRKP以非新生儿科室居多,两组在标本来源、患者年龄、科室分布和预后情况方面比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);产NDM-1的CRKP菌株以ST 17型和ST 278型为主,分别为40.63%、18.75%;而产KPC-2的CRKP菌株以ST 11为主,达73.53%。产KPC-2的CRKP分离株对头孢吡肟、氨曲南、亚胺培南、阿米卡星、庆大霉素、呋喃妥因和磷霉素的耐药率均高于产NDM-1的CRKP分离株,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论产NDM-1和产KPC-2的CRKP菌株在临床及分子流行病学方面均存在差异,产KPC-2的CRKP菌株表现出更严重的耐药性,感染KPC-2 CRKP的患者预后较差,应引起临床和感控的重视。

IL-1β、IL-18、PMN在老年重症碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌感染中的表达及其临床意义

目的 探讨老年重症碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)感染抗菌疗程中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)、中性粒细胞(PMN)变化及与疗效关联性。方法 选取2019年1月—2021年3月邯郸市第一医院收治的102例老年重症CRKP感染患者,均给予抗菌药物治疗,根据疗效分为无效组(n=25)、总有效组(n=77),比较两组基线资料、治疗前、治疗5 d后、治疗7 d后IL-1β、IL-18、PMN水平,应用皮尔森(Pearson)相关系数分析治疗5 d后、治疗7 d后IL-1β、IL-18、PMN与疗效关系,采用多因素Logistic回归方程分析疗效的相关影响因素。结果 总有效率组治疗5 d后、治疗7 d后IL-1β[(226.18±58.07)、(169.05±55.34)pg/mL]、IL-18[(57.07±12.29)、(42.66±13.27)ng/L]、PMN[(78.81±10.26)%、(65.48±12.30)%]均低于无效组[(275.34±51.96)、(273.82±49.72)pg/mL]、[(68.47±15.85)、(70.39±20.44)ng/L]、[(87.75±11.05)%、(88.37±10.99)%](F=12.365,P<0.001;F=20.072,P<0.001;F=18.974,P<0.001);治疗5 d后、治疗7 d后IL-1β(r=-0.729、-0.865,均P<0.001)、IL-18(r=-0.711、-0.804,均P<0.001)、PMN(r=-0.804、-0.967,均P<0.001)均与疗效相关;多因素Logistic回归分析显示,校正了混杂因素后,治疗7 d后IL-1β、IL-18、PMN仍是疗效的相关影响因素(P<0.05)。结论 老年重症CRKP感染抗菌疗程中IL-1β、IL-18、PMN变化情况与疗效有关,联合检测有望成为预测患者治疗反应性的生物标志物,从而为临床治疗提供参考。

mcr-1基因阳性禽源性大肠埃希菌耐药基因研究

目的调查鲁中地区禽源性大肠埃希菌mcr-1基因的携带情况,了解mcr-1基因阳性禽源性大肠埃希菌对常用β-内酰胺类药物、氨基糖苷类药物、喹诺酮类药物耐药基因的携带情况,掌握其耐药性。方法收集2020年4月至2021年10月鲁中地区3家大规模养殖场302份健康活鸡、鸭肛拭子新鲜粪便,对分离的大肠埃希菌用聚合酶链反应(PCR)检测mcr-1基因的携带率。对mcr-1阳性大肠埃希菌,采用BD凤凰hoenix TM 100 NMIC/ID-4复合板鉴定菌种及进行药敏试验,采用PCR检测各种β-内酰胺类药物耐药基因、氨基糖苷类修饰酶耐药基因、16S rRNA甲基化酶耐药基因和质粒介导的喹诺酮类药物耐药基因。结果302份样品中共分离出291株禽源性大肠埃希菌,其中27株携带mcr-1基因,mcr-1基因携带率为9.3%。27株mcr-1基因阳性禽源性大肠埃希菌中:超广谱β-内酰胺酶(ESBL)基因CTX-M-14、CTX-M-15、TEM-1携带率分别为100.00%(27/27)、70.37%(19/27)、74.07%(20/27);质粒介导AmpC酶耐药基因CMY-2携带率为14.81%(4/27);未检出bla SHV、bla DHA、OXA等β-内酰胺类药物相关耐药基因;未检出碳青霉烯酶基因;16S rRNA甲基化酶耐药基因rmtB及氨基糖苷类修饰酶耐药基因aac(6′)-Ⅰb-cr、ant(3″)-Ⅰ的携带率分别为25.93%(7/27)及25.93%(7/27)、92.59%(25/27);喹诺酮类药物耐药基因qnrS的携带率为81.48%(22/27),未检出qnrA、qnrB基因。对多黏菌素B、头孢噻肟、头孢西丁、左氧氟沙星、复方磺胺甲噁唑表现出了100.00%耐药,对头孢吡肟、头孢他啶、氨曲南、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星和庆大霉素的耐药率分别为85.19%、33.33%、62.96%、14.81%、25.93%和77.78%,未出现对碳青霉烯类药物耐药的菌株。结论禽源性大肠埃希菌mcr-1基因的携带率为9.3%,是引起多黏菌素耐药的主要耐药机制。mcr-1基因阳性禽源性大肠埃希菌同时携带多种耐药基因,表现出多重耐药的特征。

PCR/LAMP快速筛检NDM-1超级耐药菌的方法建立

目的:针对NDM-1超级耐药菌建立PCR/LAMP快速筛检方法。方法:根据GENBANK登录的NDM-1基因序列分别设计PCR/LAMP引物。分别优化PCR/LAMP反应条件和反应体系,并对已知特性的41株标准株、1株NDM-1阳参克隆株以及275株不同地区上送的地方株进行检测,验证两方法的特异性、敏感性。结果:两方法特异性均好,除阳参克隆株能扩增出阳性对应条带,其它标准株及地方上送株则检测不出相应条带;两方法检测限稍有差异,其中LAMP检测限为31 cfu/反应,PCR检测限为123 cfu/反应;LAMP法从菌株核酸提取至检测完成仅需1.5 h^2 h左右,实现反应及产物检测一步完成;PCR法因扩增产物需凝胶电泳再经紫外观察,故时间相对较长,共需3 h^4 h。结论:本研究针对超级耐药菌NDM-1基因建立的PCR/LAMP方法其特异性、灵敏度均相对较好,可用于今后应对NDM-1超级细菌应急检测技术储备以及目前针对超级细菌的监控防控。

5M1E护理管理分析法在预防ICU患者多重耐药菌院内感染中的应用

目的:探讨5M1E护理管理分析法在预防ICU患者多重耐药菌(MDRO)院内感染中的应用效果。方法:选择2019年11月1日~2022年12月31日ICU收治的86例患者,根据入院时间分为对照组(2019年11月1日~2021年6月30日)和观察组(2021年7月1日~2022年12月31日)各43例。对照组采用常规护理管理模式,观察组采用5M1E护理管理分析法;比较两组抗菌药物使用情况、MDRO感染发生情况及住院时间。结果:观察组抗菌药物使用率、MDRO感染发生率、住院时间均优于对照组(P<0.05)。结论:与常规护理管理模式相比,5M1E护理管理分析法在降低ICU患者抗菌药物使用率、MDRO感染发生率、住院时间等方面效果更佳。

山东省聊城地区耐碳青酶烯类肠杆菌目细菌黏菌素耐药基因mcr-1相关感染的分子机制及临床特征

目的 探讨携带mcr-1耐药基因的耐碳青酶烯类肠杆菌目细菌(CRE)相关感染的分子机制及临床特征,为该类菌株感染的临床诊疗及预防区域内传播与暴发流行提供参考依据。方法 收集聊城市第二人民医院2016年1月—2022年12月分离自临床的非重复CRE,采用乙二胺四乙酸碳青霉烯酶失活试验(eCIM)与改良碳青霉烯酶失活试验(mCIM)检测碳青霉烯酶表型;采用微量肉汤稀释法进行体外药敏试验;采用聚合酶链反应(PCR)扩增并测序分析与黏菌素耐药相关的mcr-1基因及碳青霉烯类耐药基因;采用多位点序列分型技术(MLST)确定菌株的序列分型(ST)。收集mcr-1基因阳性菌株感染患者的病历资料,统计相关信息并进行分析。结果 共分离CRE菌株127株,包括65株大肠埃希菌,52株肺炎克雷伯菌,3株阴沟肠杆菌,3株产酸克雷伯菌,2株奇异变形杆菌,以及产气肠杆菌、弗氏柠檬酸杆菌各1株。所有CRE菌株中有6株携带mcr-1基因,且同时为blaNDM-5基因阳性。携带mcr-1的6株CRE仅对替加环素具有较高的敏感性,表现为低水平耐药。MLST分型结果显示有4种不同的ST型别,其中2株为ST167,2株为ST410,其余2株分别株为ST48和ST361。6例患者的性别、年龄、抗菌药物使用史、基础疾病及病情严重程度均不同,各项感染指标有不同程度的升高,患者最终均治愈出院。结论 黏菌素耐药基因mcr-1在聊城地区临床分离的CRE中检出率较低且呈低水平耐药,但已发现该基因与碳青霉烯酶耐药基因共存的现象,需引起临床重视并加强监测。

基于5M1E分析法的护理管理在多重耐药菌感染患者中的应用效果

目的:观察基于5M1E分析法的护理管理在多重耐药菌感染患者中的应用效果。方法:回顾性分析2020年11月至2022年10月该院收治的260例多重耐药菌感染患者的临床资料,根据护理方案不同将其为对照组(n=130)与研究组(n=130)。对照组实施常规护理管理,研究组实施基于5M1E分析法的护理管理,比较两组管理质量评分、护理满意度。结果:研究组遵医隔离、隔离标识、手卫生设施、环境卫生、物品专用、医疗废物处理等管理质量评分均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);研究组护理满意度为98.46%,高于对照组的91.54%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:基于5M1E分析法的护理管理应用于多重耐药菌感染患者可提高管理质量评分和护理满意度的效果优于常规护理管理。

TaqMan-MGB荧光定量PCR快速筛检NDM-1超级耐药菌方法的建立

目的:针对NDM-1超级耐药菌建立TaqMan-MGB荧光定量PCR快速筛检方法。方法 :根据GenBank登录的NDM-1基因序列设计TaqMan-MGB荧光定量PCR引物与探针。分别优化TaqManMGB荧光定量PCR反应条件和反应体系,并对已知特性的41株标准株、1株NDM-1阳参克隆株以及715株不同地区上送的地方株进行检测,验证方法的特异性、敏感性。结果 :方法特异性好,除阳参克隆株能扩增出阳性对应条带,其它标准株及地方上送株均检测不出相应条带;方法敏感性好,检测限为8 cfu/反应;TaqMan-MGB荧光定量PCR法无需凝胶电泳、紫外观察,实现反应及产物检测一步完成,从菌株核酸提取至检测完成仅需1.5 h-2 h。结论 :本研究针对NDM-1超级耐药菌建立的TaqMan-MGB荧光定量PCR方法,其特异性、灵敏度均相对较好,可应用于针对NDM-1超级耐药菌的监测防控以及应急检测。

健康人肠道中肺炎克雷伯菌携带blaNDM-1耐药质粒并介导抗性转移

目的通过探究健康人群肠道中携带的blaNDM-1基因的肺炎克雷伯菌的基因组特征,明确健康人肠道定植菌及病原菌的耐药基因组,建立以耐药质粒基因组完成图为基础的耐药质粒监管体系。方法对健康人群肠道耐药菌监测中携带blaNDM-1基因的肺炎克雷伯菌开展抗菌药物敏感性实验,同时进行二代和三代测序以获得菌株及质粒全基因组完成图,利用核心基因组及泛基因组方法对该株菌进行序列比对分析,并进行接合转移实验确定质粒转移效率及最优转移条件。结果基于完成图的序列分析,发现本研究中所获得的肺炎克雷伯菌与来自公共数据库中的临床感染患者的菌株属于同一流行克隆,提示该克隆既可以引起人体感染,也可定植在健康人肠道内。明确blaNDM-1基因所在质粒为IncX3型,是易于携带blaNDM-1基因的流行质粒,泛基因组分析发现该类质粒可以突破宿主菌的种属屏障进行跨宿主传播;接合转移实验显示该质粒可转移、介导高水平的碳青霉烯类抗生素耐药性的传递。结论携带blaNDM-1基因的肺炎克雷伯菌可以在健康人肠道中定植,并通过耐药质粒实现耐药基因的跨宿主及宿主菌传播。因此有必要加强对健康人肠道定植菌群以及病原菌的耐药基因组监测、并建立以耐药质粒基因组完成图为基础的耐药质粒监管体系,能够从耐药基因转移因子的特征上进一步揭示耐药性传播的风险和人群扩散途径。

1株携带bla_(NDM-1)的临床多重耐药豚鼠气单胞菌的基因组及表型鉴定

目的分析从粪便筛查分离出的产NDM-1型碳青霉烯酶的豚鼠气单胞菌(XX182)的抗菌药物耐药表型和基因组特征,阐明该菌株的抗菌药物耐药机制及其耐药性转移的能力。方法肉汤微量稀释法检测该菌株的抗菌药物敏感性,PCR检测碳青霉烯酶耐药基因亚型(bla_(NDM)、bla_(VIM)、bla_(IMP)、bla_(KPC)),接合试验检测耐药基因的可转移性,通过全基因组测序(WGS)和生物信息学分析明确该菌株的基因组特征。结果该菌株对头孢菌素、碳青霉烯类、环丙沙星和多黏菌素耐药,对替加环素、阿米卡星和氨曲南敏感。该菌株携带多种抗菌药物耐药基因,主要包括bla_(NDM-1)、bla_(MOX-6)、bla_(RSA-1)、bla_(TEM-1)、aac(3)-Ⅱd、cmlA5、arr-2等。毒力因子分析发现其携带有极鞭毛、侧鞭毛、Ⅵ型分泌系统(T6SS)和溶血素A等毒力因子。结论该豚鼠气单胞菌对碳青霉烯类抗菌药物耐药主要由产NDM-1型碳青霉烯酶导致,且bla_(NDM-1)耐药基因位于不可接合质粒上。尽管目前气单胞菌属对碳青霉烯类耐药率较低,但仍应加强对该克隆菌株的监测。

“同一健康”理念应对抗菌药物耐药性全球危机

抗菌药物耐药性(antimicrobial resistance,AMR)已成为全球公共卫生危机。细菌可通过基因突变、水平基因转移等方式获得耐药性基因(antibiotic resistance genes,ARGs),而抗菌药的长期或不合理使用加速了ARGs的出现。ARGs在人-环境-动物间的循环传播,造成ARGs分布广泛,多重耐药菌株甚至泛耐药菌株不断出现,给全球公共卫生安全带来严重威胁。驱动耐药菌和ARGs传播的因素是多方面、复杂的,因此AMR治理需要全方位考虑,而“同一健康”理念是国际公认的解决重大和复杂健康问题的一种策略方法。本文在讨论ARGs获得、传播机制及其主要驱动因素的基础上,分析其在人-环境-动物间的循环传播过程,提出了在“同一健康”理念指导下的应对策略,以期为AMR治理提供参考。

利用交叉组装噬菌体示踪水环境中人源粪便来源的耐药细菌

人类粪便中的耐药细菌(antibiotic resistant bacteria,ARB)及其携带的耐药基因(antibiotic resistance genes,ARGs)可以通过城市污水处理系统排放进入当地水环境,因此,快速准确地探明水环境中粪便污染及ARB情况对于保护生态系统和居民健康具有重要意义。本研究借助噬菌体crAssphage作为新型人类粪便污染特异性指示标记,采集太原市健康人群粪便、晋阳湖、汾河水库、自来水和污水处理厂的样品,首先采用实时荧光定量PCR技术检测样品中人类粪便污染指示标记crAssphage、细菌核糖体16S rRNA基因与耐药基因bla TEM-1的存在情况;其次针对各类样品进行细菌分离培养与鉴定,完成样品中bla TEM-1耐药菌株及多重耐药细菌的筛选;最后通过构建系统发育树分析菌株的进化关系,探究不同环境介质中细菌之间的相互影响。结果显示crAssphage在晋阳湖、汾河水库和污水处理厂样品中被检出,证明太原市区水环境存在人类粪便污染。本研究共分离鉴定出254株细菌,氨苄青霉素耐药细菌占比最高(74.41%),环丙沙星耐药细菌占比最低(1.97%);耐药基因bla TEM-1在各类样品的菌株中都有检出(22.83%),多重耐药细菌共有79株(31.10%)。进化关系分析表明人体肠道与水环境中的耐药细菌具有亲缘关系。上述结果表明太原市水环境受到人类粪便污染的影响,并且可能促进了ARGs和ARB的传播扩散,对人体健康产生威胁。该研究为评估太原市水环境粪便污染情况及ARB分布提供基础数据,为水环境监测保护给出科学依据。

细菌NDM-1质粒耐药表型与其表达的相关性研究

目的探讨NDM-1质粒携带菌株耐药表型与其基因表达的相关性,为临床抗菌药物选择提供理论参考。方法携带NDM-1的质粒电转化入大肠埃希菌TOP10,采用琼脂平板倍比稀释法测定碳青霉烯类药物对野生株和电转化子的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC),TaqMan RT-PCR检测碳青霉烯类耐药菌株的blaNDM-1基因表达及亚-MIC亚胺培南诱导对blaNDM-1基因表达的影响。结果12株产NDM-1菌株中共有8株电转化成功,电转化子对碳青霉烯类药物的耐药性与野生菌株基本一致。细菌对碳青霉烯类的耐药性与blaNDM-1基因表达成正比。亚-MIC亚胺培南诱导后菌株对碳青霉烯类药物的MIC值和blaNDM-1基因表达均显著高于野生株。结论碳青霉烯类耐药菌株耐药表型与blaNDM-1基因表达具有正相关性,TaqMan RT-PCR检测可快速准确地为临床治疗提供依据。

同时产碳青霉烯酶NDM-1和NDM-5的猪源大肠埃希氏菌的鉴定及耐药性研究

为了解携带碳青霉烯酶NDM-1及其亚型在猪场的流行情况,对来自猪场产房仔猪腹泻病例分离鉴定的87株大肠杆菌进行了碳青霉烯酶NDM-1和NDM-5的耐药基因扩增及测序。从87株大肠杆菌中分离鉴定出一株同时携带碳青霉烯酶NDM-1和NDM-5的大肠埃希菌(Escherichia coli),并命名为HN2106。为深入了解HN2106全基因组及其携带的质粒和耐药基因情况,对NH2106进行了16S rRNA菌种鉴定,bla耐药基因确认,全基因组测序,应用BLAST和MEGA软件对序列进行生物信息学分析、系统进化树分析。结果显示,该菌株含有7个质粒(plasmid A、plasmid B、plasmid C、plasmid D、plasmid E、plasmid F 和plasmid G),3种类型,分别为Col、IncFII、IncQ1。同时携带NDM-1和NDM-5基因,属B族β-内酰胺酶,其中bla位于质粒pNDM-HN2106(plasmid C)上,bla位于质粒pNDM5-HN2106(plasmid B)上,分别介导bla和bla耐药基因,是耐药菌传播的重要载体。全基因组耐药基因预测HN2106同时还携带21种类型的抗生素耐药基因。对HN2106菌株进行了85种抗菌药物敏感性测试,结果显示,HN2106菌株对亚胺培南、青霉素G等均耐药,对磺胺甲恶唑、头孢美唑等敏感。研究结果表明,养殖场NDM-1耐药质粒是NDM-1及其亚型耐药基因的重要载体,对养殖产业健康养殖和公共卫生安全带来较大隐患和威胁,应加强抗菌药物的合理应用和感染的防控措施,重视细菌耐药性的监测工作,以期为临床耐药菌株感染的防治提供理论参考。

携带NDM-1基因合并膜孔蛋白OmpK36缺失肺炎克雷伯菌耐药性分析

目的对产新德里金属β-内酰胺酶(NDM-1)肺炎克雷伯菌耐药情况、分子分型特点,携带耐药基因、传播方式,及其膜孔蛋白表达情况进行分析,以探讨产NDM-1酶肺炎克雷伯菌耐药机制。方法实验菌分离自前列腺增生患者尿液的标本,对其进行细菌鉴定和药敏试验、改良Hodge试验、EDTA协同试验和多位点序列分型(MLST);采用聚合酶链技术检测β-内酰胺酶相关耐药基因和膜孔蛋白OmpK35、OmpK36基因,并对NDM-1和膜孔蛋白OmpK35、OmpK36基因进行序列分析;利用SDS-PAGE电泳检测膜孔蛋白OmpK35、OmpK36;菌株质粒接合实验分析传播方式,对受体菌和接合子进行药敏结果比较。结果实验菌改良Hodge试验阴性、EDTA协同试验阳性,鉴定为耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)株,对13种常见抗生素耐药,MLST基因分子分型为ST15;PCR检测其携带NDM-1基因,经序列测定比对确认,同时该菌株还携带KPC基因及SHV基因,未检测到VIM、IMP、OXA-48、GES、GIM基因;OmpK35、OmpK36基因存正点突变及片段缺失的现象,SDS-PAGE分析发现膜孔蛋白OmpK36缺失;质粒接合实验阳性,接合子E.coliJ53对3种碳青霉烯类药物的抑菌圈明显减小。结论了解NDM-1肺炎克雷伯菌携带耐药基因类型及传播方式、膜孔蛋白是否缺失以及分子分型,为指导临床正确使用抗菌药物及流行病学调查具有重要意义。

5M1E分析法联合多学科协作干预在ICU患者多重耐药菌感染防控中的应用

目的探讨5M1E分析法联合多学科协作干预在重症监护病房(ICU)患者多重耐药菌(MDRO)感染防控中的应用效果。方法选取2019年4月至2022年3月于徐州市铜山区人民医院ICU接受治疗的1120例患者为研究对象,将2019年4月至2020年9月采用常规护理干预的560例患者纳入对照组,将2020年10月至2022年3月采用5M1E分析法联合多学科协作护理干预的560例患者纳入观察组。比较2组的院内感染率、MDRO感染率、抗菌药物使用情况、MDRO感染防控落实情况和住院时间。结果干预后,观察组的院内感染率和MDRO感染率均低于对照组,抗菌药物使用率和抗菌药物使用强度均低于对照组,MDRO感染防控措施落实率均高于对照组(P均<0.05)。观察组的ICU住院时间和总住院时间均短于对照组(P均<0.05)。结论5M1E分析法联合多学科协作干预能够降低ICU患者的院内感染率、MDRO感染率、抗菌药物使用率和使用强度,提高医护人员MDRO感染防控措施落实率,并缩短患者住院时间。

临床分离的7株新德里金属β-内酰胺酶-1肠杆菌科细菌的耐药特点及分子生物学特点

目的探究临床分离的7株新德里金属β-内酰胺酶-1(NDM-1)肠杆菌科细菌耐药性,并分析其生物学特点。方法选取2020年1月~2021年5月临床分离的115株非重复碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌为研究对象,以全自动微生物分析系统完成菌株鉴定,分离出携带NDM-1基因阳性菌株,并对所有阳性菌株进行体外药物敏感试验,以聚合酶链反应(PCR)扩增β-内酰胺酶基因,将获取扩增产物应用接合转移试验、改良Hodge试验(modified Hodge test,MHT),分析其耐药性及耐药基因,以脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析其同源性。结果115株非重复碳青霉烯类耐药肠杆菌中,共分离出7株携带NDM-1基因菌株,包括2株(3.65%)肺炎克雷伯菌、3株(12.50%)阴沟肠杆菌、1株(5.56%)弗氏柠檬酸杆菌、1株(8.33%)大肠埃希菌;7株携带NDM-1基因菌株中,体外抗菌药物敏感性试验表现出对氟喹诺酮、氨基糖苷类药物具良好敏感性,对β-内酰胺类药物耐药性较高;接合转移试验中,除大肠杆菌外,其余菌株均与大肠埃希菌J53接合成功;改良Hodge试验中,所有菌株均表现为阳性;耐药基因中,除1株阴沟肠杆菌、1株弗氏柠檬酸杆菌耐药基因仅为NDM-1外,其余菌株均含多种耐药基因(SHV、DNA-1、CTX-M-1);PFGE同源性分析中,2株菌株PFGE谱带相同。结论NDM-1肠杆菌科细菌存在多种耐药基因,但对氟喹诺酮、氨基糖苷类药物具良好敏感性;NDM-1耐药基因有水平转移能力,部分菌株存在同源性。

8株携带bla_(NDM-1)基因阴沟肠杆菌耐药性研究

目的对南昌大学第一附属医院发现的8株携带blaNDM-1基因的阴沟肠杆菌进行相关耐药性研究。方法 2016年1月-2017年6月该院分离的501株阴沟肠杆菌中筛选145株对碳青霉烯类抗生素不敏感的阴沟肠杆菌,对其进行blaNDM-1基因筛查;运用改良碳青霉烯灭活试验(m CIM)进行碳青霉烯酶表型筛查;采用VITEK 2-Compact全自动微生物分析系统进行菌株体外药物敏感性试验;采用肠杆菌基因重复一致序列(ERIC)-PCR技术对blaNDM-1基因阳性菌株进行同源性分析。结果 145株对碳青霉烯类抗生素不敏感的阴沟肠杆中检出8株携带blaNDM-1基因的阴沟肠杆菌,未发现其同时携带其他碳青霉烯酶基因;8株携带blaNDM-1基因的阴沟肠杆菌m CIM表型试验显示产碳青霉烯酶。药敏结果分析发现其对碳青霉烯类、头孢菌素类和青霉素类抗生素耐药率高。ERIC-PCR结果显示这8株blaNDM-1基因阳性的阴沟肠杆菌可以大致分为4个不同的基因指纹图谱型,且其在该院内存在部分克隆传播。结论该院对碳青霉烯类耐药阴沟肠杆菌主要是因携带blaNDM-1基因,由此产生NDM-1型碳青霉烯酶致该类细菌高度耐药,当引起重视。

携带bla_(NDM-1)碳青霉烯类耐药雷极普罗威登斯菌耐药机制研究

目的研究碳青霉烯类耐药雷极普罗威登斯菌的耐药表型、耐药机制、传播方式及同源性。方法对分离自重症监护病房(ICU)的17株雷极普罗威登斯菌进行药物敏感性试验、耐药基因筛选、NP试验、脉冲场凝胶电泳(PFGE)、质粒可移动性及复制子分型分析。结果 17株雷极普罗威登斯菌均携带碳青霉烯类耐药基因bla_(NDM-1)。对厄他培南、美罗培南、亚胺培南、头孢唑林、头孢呋辛、头孢噻肟、头孢吡肟、头孢美唑、哌拉西林、甲氧苄啶-磺胺甲噁唑、阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素、卡那霉素、环丙沙星、呋喃妥因的耐药率为100.00%,对哌拉西林-他唑巴坦、氨曲南的耐药率为88.23%。PFGE同源性分析显示17株雷极普罗威登斯菌中有15株为ICU主要流行株;质粒分析显示bla_(NDM-1)存在于～160 kb接合性质粒上,复制子Inc分型为A/C型,质粒携带多种耐药基因,除对环丙沙星和呋喃妥因敏感外,介导对碳青霉烯类、头孢类、头霉素类、磺胺类和氨基糖苷类抗菌药物高水平耐药。结论携带bla_(NDM-1)的雷极普罗威登斯菌多重耐药,临床抗感染治疗难度较大。

产NDM-1阴沟肠杆菌的耐药性与毒力基因分布

目的了解产新德里金属β-内酰胺酶-1(NDM-1)阴沟肠杆菌(ECL)耐药性与毒力基因分布情况。方法收集2017年1月—2020年11月昆明医科大学第一附属医院分离的ECL,试验组为29株产NDM-1的耐碳青霉烯类ECL(CRECL),对照组为32株不产NDM-1的CRECL和35株碳青霉烯类敏感ECL(CSECL)。采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪(MALDI-TOF MS)、全自动微生物分析系统进行菌株鉴定和药敏试验,PCR方法检测NDM-1耐药基因、24对毒力基因,采用χ^(2)检验比较毒力基因分布差异。结果该院分离的CRECL菌株NDM-1基因检出率为47.5%,产NDM-1的CRECL对常用抗菌药物表现为多重耐药。96株ECL菌株中,毒力基因acr A、tol C、wca A、wca M、wza的检出率较高,分别为80.2%、90.6%、87.5%、75.0%、92.7%,clp B、icmf、V as D/L ip基因的检出率也均在60%以上,未检出esc V、nle B、pet、hly A等毒力基因。产NDM-1的CRECL组clp B、icmf、V as D/L ip、acr A基因检出率高于不产NDM-1的CRECL,CRECL组clp B、icmf、V as D/L ip基因检出率高于CSECL组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论产NDM-1 CRECL耐药形势严峻而且毒力基因的携带率也增高,临床用药应兼顾细菌的耐药性和毒力基因分布情况。