重组人Nm23-H1/NDPK-A蛋白抗血清的制备与鉴定

[目的 ]通过实验 ,制备出NDPK -A蛋白的抗血清 ,为国内NDPK -A的诊断试剂盒的研究开发提供基础条件。[方法 ]重组人肿瘤转移相关蛋白Nm2 3 -H1/NDPK -A蛋白经Macro -prepDEAE阴离子交换柱层析和CibacronBlue亲和层析 ,得到了电泳纯的NDPK -A蛋白 ,以此制备抗原 ,免疫新西兰纯种兔 ,进而得到NDPK -A蛋白的抗血清。 [结果 ]ELISA法检测所制备的抗体的反应效价为 :1:40 0— 80 0。 [结论 ]westernblot试验结果证实 ,该抗血清具备较好的特异性 ,能与NDPK -A蛋白发生反应 ,可应用于NDPK -A蛋白的实验检测利临床检测。

胃癌中nm23-h1/NDPK-A蛋白的表达

目的 探讨nm2 3 h1与胃癌之间的关系。方法 对 5 8例外科切除胃癌标本的肿瘤原发灶和淋巴结转移灶进行nm2 3 h1/NDPK A免疫组化染色 ,并用计算机图象分析仪测定其着色的灰度。结果 T1N1 2 M0 组肿瘤原发灶与T1N0 M0 组肿瘤灶之间存在显著差异 (P <0 0 5 ) ,T1N1 2 M0 组淋巴结转移灶较T1N0 M0 组肿瘤灶下调非常显著 (P <0 0 1)。T1N0 M0 组与T2 3 N0 M0 组肿瘤灶的nm2 3 h1/NDPK A蛋白表达水平之间无明显差异 (P >0 0 5 )。结论 nm2 3 h1/NDPK A蛋白表达水平与胃癌淋巴结转移程度呈负相关 。

HPLC法测定rhNDPK-a酶活性

目的:研究不同反应体系对NDPK酶活性测定结果的影响。方法:分别以(UTP+ADP)和(ATP+UDP)作为反应底物,加入自制的rhNDPK-A蛋白,以100mmol/L磷酸二氢钾、20mmol/L乙酸、5mmol/L四丁基溴化铵,pH 5 0作为流动相A液, A液+25%乙腈作为B液,等梯度混合,C18柱,柱温25℃,流速1 0ml/min,检测波长254nm。结果:以(UTP+ADP)和(ATP+UDP)作为反应底物测定的酶比活分别为210U/mg、860U/mg。结论:不同反应体系对HPLC法测定NDPK酶活性有显著差异。

多种肿瘤细胞表面超微结构的原子力显微镜观察及药物对细胞膜表面超微结构影响的初步研究

本文应用原子力显微镜对人胃癌SGC790 1、人肝癌HepG2、人肺癌AFTC A 1、人乳腺癌MCF_7_R和人肺腺癌A5 49等肿瘤细胞膜表面进行了超微结构的形态学观察和比较。并研究了Nm2 3 H1 NDPK A蛋白对人肺腺癌A5 49等细胞膜表面超微结构的影响。发现不同肿瘤细胞膜表面超微结构存在较大的差异 ,药物处理和对照组A5 49细胞膜的表面超微结构也存在较大差异 ,药物处理的A5 49细胞膜表面出现大量的疤痕状集聚物 ,而药物处理的其它几种肿瘤细胞膜表面未发现明显的变化。说明原子力显微镜具有发展为一种观察和鉴别某些细胞的有力工具的潜力 ,并有可能应用于病理学或药理学研究 ,但在这些研究中这种技术只能作为一种辅助手段。