NEB基因多态性与汉族成年人12周抗阻运动干预前后肌肉质量变化值的关联研究

目的:通过分析伴肌动蛋白(nebulin,NEB)基因多态性与12周抗阻运动干预后全身肌肉质量变化值的关联性,筛选NEB基因中可以作为预测抗阻运动干预引起的全身肌肉质量变化值个体差异的遗传分子标记。方法:共招募169名汉族大学生(男85人,女84人),年龄21.68±1.95岁,并在12周运动干预前后采用双能X线测试受试者的全身肌肉质量,抽取静脉血5ml,使用TIANGEN DNA提取试剂盒进行DNA提取;通过illumina CGA芯片技术完成基因分型;采用PLINK1.9、haploview4.1、SAS 9.3进行数据统计分析。基于HaploReg-v4.1在线分析工具,依据ENCODE TF数据库和GETxv6数据库验证阳性SNP的生物学功能。基于阳性SNP构建遗传预测分数模型(genetic predisposition scores,GPS),并采用逐步回归分析方式计算出GPS的解释度。结果:(1)NEB基因的3个SNP(rs2288200、rs7597735、rs73967578)与全身肌肉质量变化值存在关联(P<0.05)。(2)生物学分析发现,3个SNP可影响多个转录因子结合及基因表达,其中rs2288200影响GCNF、HDAC2_disc5、Irf_known3、Irf_known9、STAT_disc3与该区域DNA的结合;rs7597735影响Gfi1、HNF4、Mef2与该区域DNA结合,且该位点影响RIF1基因在13种组织中的表达;rs73967578影响转录调节因子DMRT2、PHA-4/FoxA、Foxd3、Mef2、Pou2f2、Pou3f2与该区域DNA的结合。(3)基于3个SNP构建GPS评分模型,经逐步回归发现GPS评分的R2值为0.0308(P=0.0020),GPS评分大于24.1的受试者肌肉质量变化值显著高于评分低于24.1的受试者(P=0.0050)。结论:NEB基因rs2288200、rs7597735、rs73967578多态性位点可以作为汉族成年人抗阻运动干预后全身肌肉质量变化值的遗传分子标记,基于NEB基因的3个SNP建立的GPS可以解释全身肌肉质量变化值个体差异的3.08%。

NEB基因杂合缺失和突变的2型杆状体肌病致成人睡眠低通气综合征1例

目的:探讨2型杆状体肌病(NM)的临床特征、无创通气的效果和远程管理的价值。方法:回顾分析1例中年女性2型NM的诊疗经过、无创通气治疗前后资料、导致呼吸衰竭的诱因和远程管理的疗效,并通过关键词“杆状体肌病”检索了中国学术期刊数据库(CSPD)、国家知识基础设施数据库(CNKI)等数据库,分析该病的临床特征及影响因素,分享互联网加医疗管理对提高依从性和疗效所发挥的价值。结果:46岁女性患者,身高150 cm,体质量45 kg,因呼吸困难伴双下肢无力入院,住院期间因为入睡困难口服唑吡坦出现高碳酸血症而昏迷,予气管插管、机械通气等治疗后病情好转拔管撤机转为家庭无创通气治疗。结论:本例2型NM累及呼吸肌出现呼吸困难多次昏迷,经过无创通气治疗,互联网加医疗远程管理2年未出现昏迷,低氧血症改善,生命质量提高,治疗有效。

NEB基因新复合杂合突变致儿童型杆状体肌病的临床特点(附1例报告)

目的探讨杆状体肌病的临床特点、肌肉MRI改变和基因突变。方法回顾性分析1例NEB基因新复合杂合突变致儿童型杆状体肌病患者的临床资料。结果本例患者为男性,6岁发病,以双下肢远端无力起病,逐渐向近端发展,14岁行肌肉活检在肌纤维内发现大量杆状体而被确诊,29岁复诊时做基因检测明确为NEB基因突变。双下肢肌肉MRI提示双侧股外侧肌、股中间肌、大收肌萎缩并脂肪变性。双侧比目鱼肌脂肪变性并萎缩,腓肠肌内侧头和胫前肌水肿。与文献报道不同的是本例患者双下肢远端无力明显重于近端,且发病23年仍未累及颈肌和上肢肌肉。基因检测发现NEB基因有两处杂合突变,c.2549delA发生移码变异,c.21522+3A>G发生点突变,家系验证结果显示这两处杂合突变分别来自其父亲和母亲。目前文献报道NEB基因已发现有312种突变,本例发生在第27号外显子上的c.2549delA突变,在人类基因数据库和HGMDpro数据库中亦均未见有报道,为新发现的突变位点。结论杆状体肌病临床表型异质性较大,肌肉病理和基因检测是诊断的重要依据,c.2549delA为NEB基因新发的突变位点。

杆状体肌病二家系临床及NEB基因突变分析

目的探讨NEB基因变异导致杆状体肌病的临床及遗传学特点。方法回顾分析2个家系的疑似杆状体肌病患者及其家庭成员的临床资料,以及利用靶向基因捕获二代测序方法进行的基因测序结果。结果两个家系的先证者发病年龄为均在2岁左右,因下肢肌无力、走路不稳就诊。患儿肌张力低下,四肢肌力Ⅳ级;肌电图未见肌源性损害;血清肌酸激酶(CK)轻度升高。基因检测发现,1例患儿NEB基因存在c.2227C>T及c.16972G>T复杂杂合突变,分别遗传自父母,哥哥为c.5971C>T杂合突变携带者;另1例患儿NEB基因存在c.6388G>C及c.17044A>T复杂杂合突变,分别遗传自父母,患者家属多为携带者。结论临床上存在肌无力、肌张力低下的患者应警惕先天性杆状肌病可能,基因检测有助于诊断;NEB基因c. 5971 C>T,c. 17044 A>T为新发现的突变位点。

NEB基因突变致杆状体肌病11例临床、病理和基因突变特点分析

目的:探讨NEB基因突变所致杆状体肌病患者的临床、病理和基因突变特点。方法:收集1997年1月至2020年1月于焦作市人民医院肌病中心,经肌肉活组织检查(活检)病理和基因检测明确诊断为NEB基因突变所致杆状体肌病患者的临床和病理资料,采用二代测序方法对所有患者进行NEB基因检测,并对基因突变特点进行分析。结果:共收集11例杆状体肌病患者,其中男性8例,女性3例,有6例分别来自2个家系。患者就诊年龄为11~52岁,发病年龄为6~23岁,病程为5~35年。神经系统检查:11例患者中8例有高腭弓长脸型,双上肢肌张力正常,腱反射减低,近端肌力Ⅲ~Ⅴ级,远端肌力Ⅴ级。双下肢肌张力减低,腱反射消失,近端肌力Ⅱ~Ⅳ级,远端肌力Ⅲ~Ⅴ级。均无吞咽困难和呼吸肌受累。11例患者中有7例行肌肉活检,病理检查可见肌纤维大小不等,有萎缩肌纤维和代偿性肥大纤维,偶见变性坏死肌纤维。7例患者均可见不同程度的杆状体聚集。5例患者行电镜检查,均发现肌原纤维间有杆状体聚集,且多位于Z带附近,未发现有核内杆状体。11例患者基因检测结果均发现致病基因NEB,并且共检测到9个不同的突变位点,其中外显子区域突变位点8个,内含子区域突变位点1个。其中c.21522+3A>G位点突变10例,c.1623delT位点突变3例,c.17611C>T位点突变3例。其余位点c.4417C>T、c.2549delA、c.21065dupA、c.3520G>A、c.20943G>A、c.192G>A突变各1例。结论:NEB基因突变所致杆状体肌病的临床表型有较大的异质性,肌肉病理检查发现杆状体聚集是诊断该病的重要依据。内含子区域的c.21522+3A>G位点是本组NEB基因最常见的突变位点,c.17611C>T、c.2549delA、c.3520G>A、c.21065dupA、c.20943G>A和c.192G>A为NEB基因新的突变位点。

NEB基因突变致杆状体肌病的临床、肌肉病理和基因突变特点

目的探讨NEB基因突变致杆状体肌病的临床、肌肉病理和基因突变特点。方法回顾性分析2019-2021年于山东大学齐鲁医院神经肌肉病理研究室确诊的3例杆状体肌病患者的临床表现、辅助检查、肌肉病理和基因检测的结果, 同时结合相关文献进行复习。结果 3例患者均为青春期起病, 起病症状均为双下肢无力, 体格检查均可见高腭弓和狭长脸, 肌电图提示肌源性损害。3例患者的肌肉活组织检查(活检)均可见肌营养不良样表现和肌纤维内杆状体结构堆积。病例1 ATP酶染色可见Ⅰ型纤维优势和群组化。基因检测发现病例1存在NEB基因c.21522+3A>G和c.3471dupC(p.N1158Qfs*5)2种突变;病例2存在c.21522+3A>G和c.1899118992delAG(p.Q6332Afs*8)复合杂合突变;病例3存在c.21522+3A>G和c.3448A>T(p.K1150*)复合杂合突变。3例患者的NEB基因均存在c.21522+3A>G突变, 文献复习发现该突变仅在中国人群中有报道;c.3471dupC(p.N1158Qfs*5)、c.1899118992delAG(p.Q6332Afs*8)和c.3448A>T(p.K1150*)经查阅文献目前国内外均无报道。根据美国医学遗传学与基因组学学会指南的相关内容, c.21522+3A>G、c.3471dupC(p.N1158Qfs*5)、c.3448A>T(p.K1150*)和c.1899118992delAG(p.Q6332Afs*8)均被评级为致病变异。结论杆状体肌病的起病年龄和症状表现具有异质性, 肌肉活检和基因检测是杆状体肌病最重要的诊断方法。NEB基因c.21522+3A>G突变可能在中国人群中是较常见的突变。

Nebulin突变与甲状腺癌发生相关性的探究

基因突变导致的基因功能异常是甲状腺癌发生的重要原因。在59例甲状腺癌患者中有20例患者的Nebulin(NEB)基因在V1696A位点发生了突变,突变比例显著高于正常人,这提示NEB突变与癌症的发生发展相关。因此,构建了NEB突变鼠来研究NEB突变对甲状腺的影响。利用高通量测序技术对野生型鼠和NEB突变鼠进行了转录组分析,选择差异基因通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)进行验证。在突变鼠中上调了217个基因以及下调了185个基因的表达。差异表达基因功能富集的通路及生物过程显示这些显著差异基因与甲状腺相关疾病、炎症、代谢途径和干扰素应答有关,并且在RT-qPCR结果中与癌症相关的基因表达差异显著,表明小鼠NEB突变与甲状腺癌的发生有关联,为后续功能性研究奠定了基础。