宣通三焦、活血通络方对膜性肾病大鼠肾保护作用及肾脏组织中Nephrin、NEPH1表达的影响

目的观察宣通三焦、活血通络方对膜性肾病大鼠血尿生化指标、肾脏病理及肾组织中Nephrin、NEPH1表达的影响。方法取40只清洁级健康SD雄性大鼠,随机选取10只作为正常组,其余大鼠采用阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)进行膜性肾病造模。将造模成功的大鼠随机分为膜性肾病组、雷公藤+激素组、中药组各10只。正常组、膜性肾病组给予生理盐水灌胃,雷公藤+激素组给予雷公藤多苷片和醋酸泼尼松片混悬液灌胃,中药组给予宣通三焦、活血通络方混悬液灌胃,均1次/d,连续4周。测定各组大鼠24h尿蛋白定量(24h UTP)及血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、白蛋白(ALB)、肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)水平,光镜、电镜、免疫荧光下观察各组大鼠肾脏病理改变,实时荧光定量PCR法测定肾组织中Nephrin和NEPH1 mRNA表达情况。结果与正常组比较,膜性肾病组、雷公藤+激素组、中药组大鼠24h UTP及血清TG、TC水平均明显升高(P均<0.05),血清ALB水平及肾组织中Nephrin和NEPH1 mRNA相对表达量均明显降低(P均<0.05),SCr、BUN无明显变化(P均>0.05);与膜性肾病组比较,雷公藤+激素组、中药组大鼠24h UTP及血清TG、TC水平均明显降低(P均<0.05),血清ALB水平及肾组织中Nephrin和NEPH1 mRNA相对表达量均明显升高(P均<0.05);中药组血清TC、TG水平均明显低于雷公藤+激素组(P均<0.05),雷公藤+激素组和中药组其余指标比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论宣通三焦、活血通络方可以降低膜性肾病大鼠蛋白尿,升高血ALB,调节脂代谢,改善肾脏病理改变,其机制可能与上调肾组织中Nephrin、NEPH1的表达有关。

Ezrin和NEPH1在多柔比星肾病大鼠肾组织中的表达及泼尼松对其表达的影响

目的 通过观察足蛋白Ezrin和NEPH1在多柔比星肾病大鼠肾组织中的表达及泼尼松对其表达的影响,探讨蛋白尿产生的机制及泼尼松对肾脏的保护作用.方法 将24只大鼠随机分为空白对照组、模型组、泼尼松干预组,通过分次尾静脉注射法建立多柔比星肾病大鼠模型,监测第4、8周时大鼠血生化及24 h尿蛋白变化.应用免疫组织化学两步法观察肾组织中足蛋白Ezrin和NEPH1表达的变化.结果 实验第4周,与空白对照组比较,模型组与泼尼松干预组均出现大量蛋白尿、低清蛋白血症和高脂血症（P均＜0.01）,提示模型建立成功；实验第8周,与模型组比较,泼尼松干预组24 h尿蛋白、总胆固醇、血肌酐水平显著降低（P均＜0.01）,清蛋白、总蛋白、内生肌酐清除率均增高（P均＜0.05）；免疫组织化学示模型组Ezrin和NEPH1的表达较空白对照组显著降低（P均＜0.01）,泼尼松干预组Ezrin和NEPH1的表达较模型组显著增加（P均＜0.01）,足蛋白Ezrin、NEPH1的表达与24 h尿蛋白均呈负相关（r=-0.838、-0.884,P均＜0.01）.结论 足蛋白Ezrin和NEPH1表达下降可能是多柔比星肾病大鼠蛋白尿产生的机制之一.泼尼松可能通过增加Ezrin和NEPH1的表达减少尿蛋白,起到保护肾脏的作用.

高糖对小鼠足细胞向间充质细胞转分化的影响

目的通过观察高糖环境下小鼠足细胞表达NEPH1、desmin、TGF-β1和Smad7的变化,探讨高糖损伤足细胞的机制。方法将培养成熟的小鼠足细胞用RandA 1.0软件完全随机分为高糖1、2、3组(葡萄糖浓度分别为15、25和30mmol/L)和对照组(葡萄糖浓度5mmol/L),倒置显微镜下观察高糖干预前后足细胞的形态变化,采用RT—PCR和Western blot技术分别检测足细胞NEPH1、desmin、TGF-β1和Smad7的mRNA和蛋白表达变化。结果与对照组相比,高糖环境下培养48h后,足细胞形态发生不同程度变化。NEPH1和Smad7的mRNA表达较对照组显著减少(P<0.05或0.01),desmin和TGF-β1的mRNA表达较对照组增加(P<0.05或0.01)。其中高糖2组的NEPH1和Smad7的蛋白表达较对照组显著减少(均P<0.01),而desmin和TGF—β1的蛋白表达较对照组显著增加(P<0.01)。小鼠足细胞在高糖培养下NEPH1 mRNA和desmin mRNA的表达呈显著负相关(r=-0.993,P<0.01);NEPH1 mRNA和TGF—β1 mRNA的表达呈显著负相关(r=-0.989,P<0.01);TGF-β1 mRNA的表达和Smad7 mRNA的表达呈显著负相关(r=-0.996,P<0.01)。结论高糖可能通过激活TGF—β/Smad信号通路诱导小鼠足细胞发生表型转化。

Exocyst敲减对肾足细胞缺失及功能紊乱的影响

目的:探讨Exocyst敲减对肾足细胞缺失及功能紊乱的影响。方法:采用对数生长期的人肾足细胞,分别转染对照组和shRNA Exoc5。流式检测细胞周期和凋亡,RT-PCR检测凋亡相关蛋白Caspase-3、Exoc1-8、裂孔膜蛋白Nephrin和肾小球蛋白Neph1的表达情况,免疫荧光检测细胞中裂孔膜蛋白Nephrin和Neph1定位情况,活细胞显微镜观察囊泡运动。结果:与对照组相比,Exocyst敲减肾足细胞细胞凋亡率明显升高、Caspase-3表达增加(P<0. 05);此外,Exocyst敲减导致Nephrin和Neph1错误定位和囊泡运动减少,过表达Exoc5可挽救Nephrin和Neph1定位。结论:本研究显示,Exocyst家族重要组分Exoc5敲减可导致肾足细胞凋亡增加,促使Nephrin和Neph1错误定位和囊泡运动减少,可能是肾足细胞损伤和功能紊乱的重要原因。

采血后不同时间内检测血小板聚集功能分析

目的通过检测血小板聚集功能,检测血小板功能缺陷,以及监测抗血小板药物使用。方法采用比浊法,将富血小板血浆(PRP)置于比色管中,加入诱聚剂后,用涂硅的小磁粒进行搅拌,血小板逐渐聚集,血浆浊度降低,透光度增加,记录此变化,形成血小板聚集的动态曲线。结果通过血浆浊度的变化,记录血小板最大聚集率,采血后不同时间内检测血小板聚集率结果有差异。结论为了准确地检测人体血小板的缺陷或监测抗血小板药物疗效,需要在采血后3h内进行血小板聚集试验。

肾素血管紧张素系统基因多态性与过敏性紫癜肾炎的相关性分析

目的:探讨肾素血管紧张素系统基因多态性与过敏性紫癜肾炎(HSPN)的相关性。方法:选择临床确诊的67例HSPN患儿(HSPN组),正常对照儿童60例(对照组),通过聚合酶链式反应(PCR)检测血管紧张素转换酶(ACE)、血管紧张素原(AGT)基因和血管紧张素受体型(ATIR)多态性。结果:ACE,AGT,ATIR基因型构成比在HSPN组与对照组之间差异均有统计学意义(χ2分别为7.293,15.85,8.234,P<0.05)。结论:肾素血管紧张素系统基因多态性可能与HSPN的发病有关。HSPN组患儿中ACE基因中D基因型表现有蛋白尿、血尿的频率明显高于对照组,但AGT,ATIR基因多态性与HSPN患儿的临床表现、血尿、蛋白尿无明显关联性。

褪黑素对多柔比星所致肾病的保护作用

本研究旨在观察褪黑素 ( MT)对大鼠“阿霉素肾病”的保护作用 .将所有受试动物分为 5组 ,即正常组 ,MT( d0 - d7,5mg·kg-1·d-1,ig)组 ,多柔比星模型组 ( d 1 ,Dox,5mg· kg-1,iv)组和MT( d 0 - d 7,0 .5,5mg· kg-1· d-1) + Dox( d 1 ,5mg· kg-1,iv)组 .检测大鼠 d7,d1 4,d2 1和 d2 8时尿蛋白 ,尿丙二醛排泄量和 d 2 8时血浆生化指标 .结果显示 ,Dox组大鼠呈典型的肾病综合征 ,MT+ Dox组大鼠尿蛋白减少 ,血浆蛋白明显回升 ,血脂降低 ;同时 ,Dox组动物尿丙二醛显著增加 ,MT+ Dox组丙二醛降低 .这些结果表明 ,MT可减轻“阿霉素肾病”大鼠肾损害 .

肾积水对结石患者微生物评价的影响

目的探讨肾积水对尿结石患者尿液微生物分布和药敏结果的影响。方法收集2012年1月~2015年2月于北京积水潭医院泌尿外科行经皮肾镜碎石术尿结石患者115例,按是否合并肾积水分为肾积水组和无肾积水组,比较两组患者之间膀胱尿培养、肾盂尿培养和血培养及药敏结果之间的差异。结果本组115例患者,92例(80%)患者伴有肾积水,肾盂尿培养阳性在肾积水组与无肾积水组之间比较,差异有统计学意义(P=0.044)。肾积水组膀胱尿培养阳性患者44例(38%),肾盂尿培养培养阳性21例(18%),系统炎症反应综合征31例(27%),血培养阳性5例(4%),在肾积水组,膀胱尿培养和肾盂尿液(k=0.176,P=0.049)以及血培养(k=0.012,P=0.88)培养结果一致性较差;肾盂尿培养与血培养结果一致性较好(k=0.467,P=0.002)。无肾积水组,只有1例患者肾盂尿培养阳性,与尿培养结果一致。肾积水组患者细菌培养最常见的细菌是革兰阴性菌:大肠埃希菌、奇异杆菌和铜绿假单胞菌;在无肾积水组患者尿培养最常见的细菌是革兰阳性菌:粪肠球菌和溶血葡萄球菌。在肾积水组和无肾积水组对革兰阳性菌株最有效的抗生素万古霉素、呋喃妥因、利福平。对革兰阴性菌株最有效的药物是美罗培南、哌拉西林他唑巴坦和阿莫西林-克拉维酸。结论在肾积水时肾盂尿液培养的微生物与膀胱尿液培养的微生物不一致,肾盂尿液培养结果对指导抗生素的使用更有意义。

碲镉汞雪崩焦平面器件

碲镉汞雪崩光电二极管以其高增益、高灵敏度和高速探测的优点成为第3代红外光电探测器的重要发展方向之一.制备了截止波长3.56μm的雪崩光电二极管焦平面器件,面阵规模为16×16.焦平面器件在0~6V偏压下有效像元率大于90%,非均匀性小于20%.6 V偏压下NEPh约为60,过剩噪声因子为1.2.

经尿道输尿管镜碎石术与经皮肾镜取石术治疗复杂性输尿管上段结石的疗效比较

目的比较经尿道输尿管镜碎石术(URL)和经皮肾镜取石术(MPCNL)治疗复杂性输尿管上段结石的治疗效果。方法将2007年5月至2009年4月潜江市中心医院住院治疗的85例复杂性输尿管上段结石患者根据随机数字表法分为两组:URL组(45例)采用经尿道输尿管镜碎石治疗,MPCNL组(40例)采用经皮肾镜取石术治疗,比较两组术后住院治疗时间、碎石成功率、一次性碎石清除率、并发症等情况。结果 URL组及MPCNL组术中各出现1例肾出血和1例尿外渗并发症;URL组碎石成功率、术后住院时间及一次结石清除率均显著低于MPCNL组[71.1%比85.0%,(4.2±1.6)d比(7.1±1.9)d]8.22%比92.5%],差异均有统计学意义(P<0.05)。结论对于复杂性输尿管上段结石的微创治疗,应根据患者临床情况及实际要求制订治疗方案。

超微经皮肾镜与输尿管软镜治疗直径2～3cm高CT值肾结石疗效对比

目的观察直径2~3 cm高CT值肾结石采取不同手术方式治疗的有效性及安全性。方法选取2016年12月至2017年12月行手术治疗的直径2~3 cm肾结石患者80例,采用随机数码表将其分为A组输尿管软镜组(RIRS)和B组超微通道经皮肾镜组(SMP),观察比较2组患者的手术时间、近期结石清除率(SF)、远期结石清除率(SF)、术后住院时间(d)和术后2 h降钙素原(PCT)>0.1μg/L、降钙素原>0.5μg/L、白细胞计数>10×109/L、体温>38.5℃、全身炎症反应(SIRS)的发生率等。结果 A组住院时间、手术时间高于B组,近期结石清除率(Stone Free SF)低于B组,差异有统计学意义(P<0.05);A组术后发热和相关感染指标发生率高于B组,差异有统计学意义(P<0.05);两组远期结石清除率差异无统计学意义(P>0.05)。结论随着输尿管软镜技术的不断发展,其在直径2~3 cm肾结石治疗中的安全性及有效性逐渐得到认可,但治疗高CT值的直径2~3 cm肾结石超微通道经皮肾镜(SMP)较输尿管软镜(RIRS)安全性、清石率均较高。

阿托伐他汀强化预防经皮冠状动脉介入治疗术后造影剂肾病及其相关危险因素的研究

目的研究强化阿托伐他汀钙治疗对经皮冠状动脉介入术后造影剂肾病的干预作用,并探讨其作用机制及其发生的相关因素。方法入选104例冠心病患者,根据围术期他汀治疗方案的不同,将其分为强化他汀治疗组(A组,54例)、常规他汀治疗组(B组,50例),所有患者经皮冠状动脉介入治疗术前及术后1 d均检测超敏C反应蛋白(hs-CRP)、胱抑素C(Cys-C)和血肌酐(Scr)水平。结果术前两组患者Scr、Cys-C、hs-CRP水平比较差异无统计学意义(P>0.05),术后第1天A组患者Cys-C、hs-CRP、Scr水平均显著低于B组(P<0.05)。术后A组有1例(1.85%)患者出现造影剂肾病,B组有4例(8.00%)患者出现造影剂肾病,差异有高度统计学意义(P<0.01)。经过Logistic回归分析显示,年龄、术前Cys-C、术前hs-CRP、高血压、糖尿病为造影剂肾病发生的危险因素。结论阿托伐他汀钙早期干预对经皮冠状动脉介入术后患者的肾功能具有保护作用;年龄、术前Cys-C、hs-CRP、高血压、糖尿病等为造影剂肾病发生的独立危险因素。

有限平板共线裂纹断裂过程的数值模拟和实验研究

采用有限元数值模拟和光弹实验方法分析了各向同性材料共线多裂纹应力场及其强度参量.建立了有限弹性平板内三条共线裂纹计算模型,应用ABAQUS软件的VCCT方法分析计算各向同性材料共线裂纹的裂纹尖端的应力场、应变场分布规律及应力强度因子.并通过光弹实验实测了6061铝板共线裂纹试件的裂纹尖端的应力强度因子.研究结果表明,实验和数值模拟所得的应力云图相似,应力强度因子值基本一致,验证了提出的应力强度因子计算模型的有效性.

白藜芦醇和SRT1720对糖尿病大鼠早期肾脏损伤的干预作用

目的研究白藜芦醇和SRT1720对糖尿病大鼠早期肾损伤的干预作用。方法采用高脂饮食+单侧肾切除+链脲佐菌素腹腔注射三联法诱导建立糖尿病大鼠模型,实验分为5组,分别为正常对照组,模型组,白藜芦醇组、SRT1720组和洛汀新组。实验结束留取24h尿和血,生化检测蛋白尿、空腹血糖、血清果糖胺、血脂等,取肾皮质,采用逆转录-实时荧光定量PCR技术检测足细胞裂孔隔膜分子NEPH1基因表达水平,化学比色对照法测定肾组织GSH和T-SOD,PAS染色检查肾组织糖原沉积。结果与正常对照组相比,模型组大鼠24h尿蛋白和尿蛋白/尿肌酐比值以及血糖等均显著增高,肾皮质中T-SOD水平显著降低,NEPH1基因表达显著降低,多糖沉积显著增加。白藜芦醇组各项检测指标均较模型组有所改善,蛋白尿、空腹血糖、血脂、T-SOD以及糖原沉积等与模型组均有统计学差异。SRT1720组和洛汀新组蛋白尿、血脂、NEPH1表达以及糖原沉积等方面均较模型组有显著改善,洛汀新血糖、氧化损伤等与模型组无统计学差异。结论白藜芦醇、SRT1720等Sirt1激活剂可显著改善血糖、血脂,降低糖尿病大鼠蛋白尿和足细胞损伤等,在糖尿病肾病的防治方面具有重要价值和应用前途。

人肾小管上皮细胞及正常肝细胞在药物毒性器官选择中的应用

目的探讨人肾小管上皮细胞(HK-2)及人正常肝细胞(L-02)在药物毒性器官选择中的应用。方法以肾毒性药物庆大霉素、顺铂、环孢素A及肝毒性药物硫唑嘌呤作用于HK-2及L-02细胞24 h,考察并比较药物对2种细胞的形态、存活、凋亡及酶学指标变化的影响。结果肾毒性药物在较低浓度下即可引起HK-2细胞的形态、存活、凋亡及酶学指标的显著性变化,肝毒性药物则在较低浓度下即可引起L-02细胞相关指标的显著性变化;比较4种药物的IC10值发现:3种肾毒性药物对HK-2的IC10值均小于对L-02的IC10值;而肝毒性药物硫唑嘌呤的IC10值则HK-2大于L-02。结论基于HK-2及L-02细胞评价药物的毒性器官选择性是可行性的。

重组人干扰素α-2b治疗慢性乙型肝炎引起肾病综合征1例

患者女性，28岁。因“双下肢水肿16d，蛋白尿3d”于2008年1月19日入院。发现HBV标志物（HBsAg、HBeAg和抗HBc）阳性6年，其母亲和姐姐HBV标志物均为阳性，母亲2年前死于原发性肝癌。患者3年前开始出现肝功异常，ALT轻度升高，间隙性对症治疗，定期随访。

原发性肾病综合征患儿肾组织P-gp170蛋白和mRNA表达与临床病理及预后的关系

目的观察原发性肾病综合征患儿肾组织中P-糖蛋白170的表达,分析肾组织中P-gp170表达与临床和病理的关系,探讨P-gp170表达在PNS患儿GC耐药中的作用。方法采用肾活检术取得96例处于不同病程的PNS患儿肾组织标本,进行常规病理学诊断和肾脏病理定量分析;应用免疫组织化学及原位杂交法分别检测PNS患儿肾组织中P-gp170蛋白及m RNA的表达,比较不同肾脏病理类型及病理积分患儿P-gp170的表达;比较未用GC与应用GC后PNS患儿肾组织Pgp170的表达。结果 (1)正常肾脏即有一定量的P-gp170表达;未用GC组即高于正常对照,差异有统计学意义(P<0.05);(2)病理积分较高者P-gp170表达阳性量高于病理积分低者,差异有统计学意义(P<0.05);不同病理类型P-gp170的表达有差异,局灶节段硬化(FSGS)、膜性肾病(MN)和硬化性肾病(SGN)表达较高,组间比较差异无统计学意义(P>0.05),微小病变(MCD)和系膜增生型(MsPGN)者表达较低,两者比较差异无统计学意义(P>0.05);而前三者与后两者差异有统计学意义(P<0.05);(3)未用GC者较应用GC后的PNS患儿肾组织P-gp170表达量低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 P-gp170在PNS患儿肾组织的表达可能与肾病病损有关,可结合病理类型和病理损伤程度同时检测肾组织P-gp170预测不同患儿GC反应性; P-gp170的表达增高可能与PNS活动和复发有关,可作为临床预测预后的指标。