CD40-P227A单核苷酸多态性与B细胞信号系统活化的研究

目的探讨CD40的单核苷酸多态性突变（CD40-P227ASNP）对B细胞核因子κB（NF—κB）和活化蛋白1（AP-1）信号系统和B细胞功能的影响。方法使用人RamosB淋巴瘤细胞株，分别将融合黄色荧光蛋白（CFP）的野生型CD40和突变型CD40-P227A质粒，连同表达荧光素酶的NF—κB或AP-1质粒，或融合绿色荧光蛋白（GFP）的NF—κB质粒共转染至Ramos细胞中。用荧光素测定法和流式细胞仪分析检测NF—κB和AP-1信号系统的活化水平。用免疫印迹和ELISA等方法检测IκBα的降解和NF—κB亚单位的核内转移情况。结果与野生型CD40比较，CD40-P227A可诱导增加NF—κB和AP-1的信号活化，并促进IκBα的降解和NF—κB亚单位的核内转移。转染CD40-P227A质粒的细胞分泌IL-6和TNF-α较转染野生型CD40质粒的细胞明显增多。结论CD40-P227ASNP是一种功能性突变，可诱导NF-κB和AP-1信号系统活化，可能为系统性红斑狼疮的易感因素。