黑色素及谷胱甘肽通过抑制NF-κB途径的激活可有效抑制H_5N_1禽流感病毒感染

我国是H5N1高致病性禽流感频发区.为筛选天然药物用于H5N1禽流感的防治并研究其抗病毒感染的作用机制,本研究选取黑色素及谷胱甘肽(GSH)为候选药物,通过Hoechst33258荧光染色,观察了禽流感病毒(AIV)感染后的细胞形态变化;细胞凋亡流式细胞术定量分析表明,H5N1AIV感染可诱导宿主狗肾上皮细胞(MDCK)凋亡,而黑色素及GSH对其具有显著抑制作用(P<0.01);当20μg/ml黑色素及10mmol/LGSH共同作用时,抑制率高达89%(P<0.01);采用MTT法检测,黑色素及GSH可增强AIV感染后的宿主细胞存活率;病毒血凝素(Ha)基因的RT-PCR检测结果表明,黑色素及GSH可显著降低AIV在宿主细胞内的增殖(P<0.01);一氧化氮(NO)毛细管电泳(CE)激光诱导荧光检测显示,黑色素及GSH均可显著降低病毒感染诱导宿主细胞内的NO释放量(P<0.05);RT-PCR技术结合ELISA方法,分别分析了病毒感染后宿主细胞的诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、环氧化酶(cyclooxygenase-2,COX-2)及核因子κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)在mRNA和蛋白水平表达的差异.结果表明,黑色素及GSH可抑制病毒感染诱导的iNOS与COX-2的基因及蛋白的表达(P<0.05),并进而抑制NF-κB途径的激活(P<0.01),从而可有效抑制HNAIV感染.

藤莓汤对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜TRAF3/NF-κB信号途径的影响

目的观察藤莓汤对胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)大鼠关节滑膜及血清肿瘤坏死因子受体作用因子3(tumor necrosis factor receptor-associated factor 3, TRAF3)、白细胞介素-23(interleukin-23, IL-23)、白细胞介素-17(interleukin-17, IL-17)、核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达及踝关节病理的影响,探讨该方抑制类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)滑膜免疫炎性损伤的分子机制。方法建立CIA大鼠模型,将成模大鼠随机分为模型组,阳性对照组,藤莓汤大、中、小剂量组,每组各6只,另设正常组6只。正常组与模型组予去离子水10 mL/(kg·d)灌胃,阳性对照组予来氟米特1. 87 mg/(kg·d)灌胃,藤莓汤大、中、小剂量组分别按照含生药量28、14、7 g/(kg·d)藤莓汤制剂灌胃,连续干预12周。分别采用Real-time PCR、Western blot、ELISA技术检测TRAF3、IL-23、IL-17、NF-κB、TNF-αmRNA及蛋白表达水平,采用光镜观察踝关节病理改变。结果与正常组比较,模型组TRAF3 mRNA转录及蛋白表达水平下调(P<0.01),IL-23、IL-17、NF-κB及TNF-αmRNA转录及蛋白表达水平上调(P<0.01)。与模型组比较,藤莓汤中剂量组TRAF3 mRNA转录及蛋白表达水平上调(P<0.01,P<0.05),藤莓汤大、中剂量组IL-23、NF-κB、IL-17、TNF-αmRNA转录及蛋白表达水平下调(P<0.01),藤莓汤小剂量组NF-κB、IL-17、TNF-α蛋白表达水平下调(P<0.01)。藤莓汤各剂量组CIA大鼠踝关节病理改变有不同程度改善。结论藤莓汤改善CIA模型大鼠滑膜免疫炎性损伤的机制可能与调节TRAF3/NF-κB信号通路相关。

NF—κB信号转导途径与炎症性疾病

核因子-κB广泛存在于胞浆中，通常以p65-pso二聚体的形式存在，与抑制物IKB结合而呈非活性状态。NF-κB信号转导途径能被TNF-α、IL-1、神经生长因子等多种因素激活。激活后NF—κB信号转导途径能够调节包括生长因子、转录因子、细胞素、趋化因子、抗凋亡蛋白等在内的基因转录。NF—κB信号转导途径参与了炎症、细胞凋亡、免疫反应等病理过程。其与炎症性疾病关系密切，深入了解NF—κB信号转导途径，有助于阐明某些炎症性疾病的发病机制以及为某些炎症性疾病提供新的治疗靶点。