己酮可可碱联合骨髓间充质干细胞对高糖诱导的肾小球系膜细胞炎症因子及NF-κB信号通路的影响

目的探讨己酮可可碱(pentoxifylline,PTX)联合骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)对高糖作用下肾小球系膜细胞炎症因子及NF-κB信号通路的影响。方法体外高糖培养小鼠肾小球系膜细胞,分为6组:对照组、糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)组、MSCs组、MSCs+PTX 0.1 mmol·L^−1组、MSCs+PTX 0.3 mmol·L^−1组和MSCs+PTX 1 mmol·L^−1组。采用ELISA检测各组系膜细胞IL-6和TNF-α含量,采用Western blotting检测各组系膜细胞中NF-κB p65,IKKα及IKKβ蛋白的表达。结果与对照组相比,DN组系膜细胞的IL-6和TNF-α含量显著增高(P<0.05),NF-κB p65、IKKα及IKKβ蛋白相对表达量显著升高(P<0.05)。与DN组相比,MSCs组及MSCs组联合不同浓度PTX干预组的系膜细胞分泌的IL-6及TNF-α含量出现明显降低(P<0.05),NF-κB p65、IKKα及IKKβ蛋白表达量显著降低(P<0.05)。与MSCs组比较,MSCs+PTX 0.1 mmol·L^−1组、MSCs+PTX 0.3 mmol·L^−1组及MSCs+PTX 1 mmol·L^−1组的IL-6和TNF-α含量显著下降(P<0.05),NF-κB p65、IKKα和IKKβ的蛋白相对表达量明显降低(P<0.05),且呈现PTX浓度依赖性。结论PTX联合MSCs通过抑制高糖诱导下肾小球系膜细胞中NF-κB信号通路的表达及炎症因子水平对DN具有一定的治疗作用。

海菖蒲黄酮FEA对LPS诱导RAW264.7细胞炎症反应的改善作用研究

目的研究海菖蒲黄酮FEA(Enhalus acoroides flavonoids,FEA)对LPS刺激RAW264.7细胞引起的炎症反应的改善作用。方法用1µg/mL的LPS刺激RAW264.7细胞6 h后,用含有不同浓度的海菖蒲黄酮FEA作用RAW264.7细胞20 h,采用ELISA方法测定RAW264.7细胞分泌的NO、TNF-α、IL-1β和IL-6的含量,采用western-blot方法检测NF-ĸB信号通路中IĸBα、P-IĸBα、p65、P-p65的蛋白表达含量。结果海菖蒲黄酮FEA可以抑制由LPS刺激RAW264.7细胞引起的NO、TNF-α、IL-1β和IL-6细胞因子的分泌,减少磷酸化蛋白IĸBα和p65的表达量。结论海菖蒲黄酮FEA可以减少细胞炎症因子的产生和抑制NF-ĸB信号通路的活化来改善炎症作用。