目的观察C57BL/6N-Tg(1.28HBV)/Vst乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)转基因(HBV-Tg)小鼠模型的特征,并分析HBV-Tg小鼠模型的转录组学特点。方法以10只雄性HBV-Tg小鼠为实验组,10只野生型小鼠为对照组。以血清HBV DNA、HBsAg、HBeAg...目的观察C57BL/6N-Tg(1.28HBV)/Vst乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)转基因(HBV-Tg)小鼠模型的特征,并分析HBV-Tg小鼠模型的转录组学特点。方法以10只雄性HBV-Tg小鼠为实验组,10只野生型小鼠为对照组。以血清HBV DNA、HBsAg、HBeAg水平和肝组织HBsAg、HBcAg表达情况评价模型小鼠病毒学特征,检测血清ALT、AST,肝组织HE、天狼猩红染色及肝组织Hyp含量评估小鼠肝脏炎症及纤维化程度。两组各随机选择3例肝组织样本提取RNA进行高通量转录组测序。经R软件分析获得表达显著的差异基因,经GO和KEGG分析获得差异基因功能富集情况,再采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)对差异显著的基因进行验证。结果与正常组相比,模型组ALT、AST水平均有所升高,以ALT更为显著(P<0.05);模型组肝组织HE染色可见肝细胞核增大,个别肝细胞出现肿胀。天狼猩红染色结果显示,HBV转基因组汇管区及小叶间出现少量胶原沉积,呈细线状。通过筛选条件(|logFC|>2倍且P.adj<0.05)获得差异基因共计1352个,其中上调基因703个,下调基因649个。KEGG分析提示差异基因主要在PPAR信号通路、视黄醇代谢、脂肪酸降解等通路中富集(P.adj<0.05)。明显上调的差异基因主要有Cyp4a10、Cyp4a14、Acot1、Acot3、Ehhadh等,明显下调基因包括Scn5a、Apol10b、Igddc4、Cxcl1、9530077C05Rik等,经RT-qPCR验证趋势一致(P<0.05)。结论HBV-Tg小鼠具有自发纤维化的趋势,经转录组学分析,慢性乙型病毒性肝炎(chronic hepatits B,CHB)发生的潜在机制主要涉及PPAR信号通路、视黄醇代谢、脂肪酸降解、药物代谢等通路。展开更多