血清miR-212-5p、miR-221-3p与AECOPD患者TLR4/NF-κB炎症信号通路和预后的关系研究

目的探讨血清微小核糖核酸(miRNA)-212-5p(miR-212-5p)、miRNA-221-3p(miR-221-3p)与慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性加重期(AECOPD)患者Toll样受体4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)炎症信号通路和预后的关系。方法选取2020年1月至2022年12月聊城市第二人民医院收治的298例COPD患者为研究对象,其中AECOPD患者175例(AECOPD组),COPD稳定期患者123例(COPD稳定期组),另纳入同期在该院体检健康者100例作为健康对照组。根据28 d预后情况,将AECOPD患者分为预后良好组和预后不良组。采用荧光定量聚合酶链反应检测血清miR-212-5p、miR-221-3p及TLR4/NF-κB信号通路相关指标的水平。采用Pearson相关分析AECOPD患者血清miR-212-5p、miR-221-3p水平与TLR4/NF-κB信号通路相关指标水平的相关性。采用多因素Logistic回归分析AECOPD患者预后不良的影响因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-212-5p、miR-221-3p水平对AECOPD患者预后不良的预测价值。结果COPD稳定期组、AECOPD组血清TLR4 mRNA、NF-κB信使RNA(mRNA)水平高于健康对照组,血清miR-212-5p、miR-221-3p水平低于健康对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);AECOPD组血清TLR4 mRNA、NF-κB mRNA水平高于COPD稳定期组,血清miR-212-5p、miR-221-3p水平低于COPD稳定期组,差异均有统计学意义(P<0.05)。随访28 d,AECOPD患者中预后不良62例(预后不良组),预后良好113例(预后良好组)。预后良好组血清miR-212-5p、miR-221-3p水平高于预后不良组,而血清TLR4 mRNA、NF-κB mRNA水平低于预后不良组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,AECOPD患者血清miR-212-5p、miR-221-3p水平与TLR4 mRNA、NF-κB mRNA水平均呈负相关(P<0.05)。预后良好组血清白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平低于预后不良组,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,IL-6、TNF-α、TLR4 mRNA和NF-κB mRNA水平升高是AECOPD患者预后不良的危险因素(P<0.05),miR-212-5p、miR-221-3p水平升高是AECOPD患者预后不良的保护因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清miR-212-5p、miR-221-3p联合预测AECOPD预后不良的曲线下面积(AUC)为0.862,明显高于miR-212-5p、miR-221-3p单独预测的0.722、0.755(P<0.05)。结论AECOPD预后不良患者血清miR-212-5p、miR-221-3p水平下调可能与调节TLR4/NF-κB炎症信号通路有关,且miR-212-5p、miR-221-3p联合检测对AECOPD患者的预后不良具有较高的预测价值。

丹红注射液联合替罗非班对急性脑梗死患者NF-κB炎症信号通路及疗效的影响

目的:探究丹红注射液联合替罗非班对急性脑梗死(ACI)患者核因子κB(NF-κB)炎症信号通路及疗效的影响。方法:选取2018年5月~2019年8月于我院神经内科接受治疗的ACI患者125例,按随机数字表法分为治疗组(n=65)和对照组(n=60)。对照组予以替罗非班治疗,治疗组在对照组的基础上给予丹红注射液治疗,治疗时间均为2周。记录两组临床疗效以及治疗期间的用药安全性,并于治疗前后检测两组患者生活质量及神经功能、炎症反应指标以及NF-κB p50、p65 mRNA和蛋白表达水平的差异。结果:治疗后,两组的NF-κB p50、p65 mRNA和蛋白均下降,且治疗组低于对照组(P<0.01)。两组的炎症反应指标TNF-α、IL-8、IL-1β均下降,且治疗组低于对照组(P<0.01)。两组的NHISS评分均下降,且治疗组低于对照组(P<0.01)。两组的ADL评分均上升,且治疗组高于对照组(P<0.01)。结论:丹红注射液联合替罗非班治疗ACI能进一步改善患者预后,其机制可能与抑制NF-κB炎症信号通路的活化及炎症因子释放有关。

消脂方调控NF-κB炎症信号通路对高脂饮食诱导肥胖小鼠糖代谢及胰岛素抵抗的影响

目的探讨消脂方对高脂饮食诱导肥胖小鼠糖代谢、胰岛素抵抗及慢性炎症的影响。方法将30只高脂饮食造模成功后的肥胖小鼠随机分为模型组、消脂方低剂量组、消脂方中剂量组、消脂方高剂量组、荷丹片组,每组6只,并选择C57BL/6J雄性正常小鼠6只作为正常组。模型组和正常组小鼠给予蒸馏水灌胃,消脂方低、中、高剂量组分别给予消脂方汤剂0.4583 g/mL、0.9165 g/mL、1.8330 g/mL灌胃,荷丹片组给予荷丹片药液0.0285 g/mL灌胃,均干预4周。观察比较各组干预后体质量、葡萄糖耐量实验血糖值、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、葡糖糖曲线下面积(AUC)、胰岛素耐量实验血糖比值、肝组织中炎症因子[白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)]及相关蛋白(IKBα、p65、p-IKBα、p-p65)表达水平。结果消脂方各剂量组小鼠体质量、葡萄糖耐量实验各时间点血糖、AUC、FINS、HOMA-IR、胰岛素耐量实验血糖比值及IL-1β、IL-6、TNF-α水平均明显低于模型组(P均<0.05),30 min胰岛素/空腹胰岛素比值(0.5hINS/FINS)、60 min胰岛素/空腹胰岛素比值(1hINS/FINS)及血清IL-10水平均明显高于模型组(P均<0.05);除消脂方低剂量组p-p65蛋白及其磷酸化比值外,消脂方各剂量组p-IKBα、p-p65蛋白表达水平及两者磷酸化比值均明显低于模型组(P均<0.05)。消脂方中、高剂量组体质量和消脂方高剂量组葡萄糖耐量实验各时间点血糖值、AUC、FINS、HOMA-IR、胰岛素耐量实验血糖比值(除血糖90 min/血糖0 min)、IL-6均明显低于荷丹片组(P均<0.05),消脂方高剂量组0.5hINS/FINS、1hINS/FINS均明显高于荷丹片组(P均<0.05)。消脂方各剂量组之间以高剂量组各指标改善最明显,低剂量组最次,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论消脂方可能通过抑制NF-κB炎症信号通路,减轻炎症反应,从而改善高脂饮食诱导肥胖小鼠的糖代谢及胰岛素抵抗。

思连康联合艾司奥美拉唑钠治疗幽门螺杆菌相关性胃炎疗效及对NF-κB炎症信号通路的影响

背景基于药理学和药物遗传学,质子泵抑制剂-阿莫西林的优化二联疗法开始运用于临床.近期共识报告指出益生菌对于幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)根除治疗亦有显著效果.但目前临床关于两者治疗H.pylori相关性胃炎治疗效果及可能作用机制的研究鲜有报告,值得进一步研究.目的思连康(双歧杆菌四联活菌片)联合艾司奥美拉唑钠治疗H.pylori相关性胃炎疗效及对核因子κB(nuclear factorκB,NF-κB)炎症信号通路的影响.方法选取2018-11/2019-12于我院接受治疗的64例H.pylori相关性胃炎患者临床资料,按照随机数字表法将纳入对象分为治疗组(32例)与对照组(32例).两组入院后均接受优化二联疗法,即艾司奥美拉唑钠肠溶片20 mg+阿莫西林胶囊1000 mg,均为bid,在此基础上,治疗组加用思连康进行治疗,两组均连续治疗14 d.比较两组临床疗效、胃黏膜改变情况、H.pylori根除率及药物相关不良反应情况,同时于治疗前后通过胃镜下病理活检后采用蛋白质定量(BCA)法进行NF-κB P50、P65蛋白定量,采用荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)法检测NF-κB P50、P65 mRNA,采用免疫组化检测白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-8、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α水平.结果治疗后,两组NF-κB P50、P65 mRNA和蛋白均呈下降趋势,同时治疗组较对照组更低(1.42±0.33 vs 1.10±0.24,1.27±0.26 vs 0.87±0.17,2.51±0.52 vs 1.94±0.28,2.33±0.37 vs 1.77±0.23)(P<0.01);两组IL-1β、IL-8、TNF-α均呈下降趋势,同时治疗组较对照组更低(11.50±3.40 vs 7.30±2.16,237.70±27.72 vs 193.68±19.88,19.30±3.41 vs 10.87±2.18)(P<0.01);此外,治疗组胃黏膜充血、水肿、糜烂和出血点好转例数均明显多于对照组(P<0.05),治疗组总有效率高于对照组(96.88%vs 78.13%,P<0.05),H.pylori根除率亦高于对照组(93.75%vs 75.00%,P<0.05).结论思连康联合优化二联疗法治疗可显著缓解H.pylori相关性胃炎症状,疗效显著,其机制可能与抑制NF-κB炎症信号通路的活化及炎性因子释放有关.

柚皮苷调控心肌核因子NF-κB炎症信号通路对糖尿病心肌病大鼠防治作用

目的:探讨柚皮苷调控心肌核因子NF-κB炎症信号通路对糖尿病心肌病大鼠防治作用。方法:高糖高脂喂养和一次性腹腔注射低剂量STZ建立糖尿病心肌病大鼠模型,分为模型对照组和柚皮苷高、中、低剂量治疗组,另设正常对照组。免疫组织化学法测定心肌组织NF-κB蛋白的表达,放射免疫分析法分别检测外周血TNF-α、IL-6、IL-1β含量,透射电镜观察心肌组织超微结构。结果:与正常对照组比较,糖尿病心肌病大鼠心肌组织核因子NF-κB蛋白以及外周血TNF-α、IL-6、IL-1β表达明显增加(均P<0.05),糖脂代谢紊乱,心肌超微结构损伤明显,而在高、中剂量柚皮苷治疗组则明显受到不同程度改善,并呈剂量依赖性。结论:柚皮苷呈剂量依赖性对糖尿病心肌病具有明显的防治作用,其可能机制是有效地改善心肌糖脂代谢,下调了转录因子NF-κB的表达,继而抑制了NF-κB通路的激活。

LPS诱导的HepG2细胞NOTCH与LPS-TLR4-NF-κB炎症信号通路的“会话”研究

目的探讨在脂多糖(LPS)刺激下HepG2细胞Notch与LPS-TLR4-NF-κB炎症信号通路的相互影响。方法给予LPS处理HepG2细胞,提取细胞RNA,采用qRT-PCR法检测HepG2细胞Notch信号通路受体及其配体mRNA水平,给予γ分泌酶抑制剂(DAPT)、LPS或LPS联合DAPT处理细胞,采用Western blot法检测Notch受体胞内区域(NICD)和LPS-Toll样受体4(TLR4)蛋白表达水平。结果经LPS处理HepG2细胞后,Notch 1和Jag 1 mRNA水平分别升高了2.25倍(P<0.001)和2.47倍(P<0.001),NOTCH 3仅增加的0.0700倍(P>0.05),Jag 2仅增加了0.420倍(P>0.05),Dll 4增加了0.947倍(P<0.01),而NOTCH 2却降低了0.857倍(P<0.01),NOTCH 4降低了0.283倍(P>0.05),Dll 1降低了0.750倍(P<0.01)、Dll 3降低了0.393倍(P>0.05);与对照组比,LPS处理组NICD和NF-κB蛋白表达水平显著增加,而DAPT处理组NICD和NF-κB蛋白表达显著减少。结论本研究结果揭示了在LPS刺激下,HepG2细胞Notch与TLR4-NF-κB信号通路之间的相互作用,抑制Notch信号通路可以显著改善LPS-TLR4引起的炎症反应。

NLRP3-NF-κB炎症信号通路在糖尿病足伤口细胞焦亡中的作用研究

目的:探讨NLRP3-NF-κB炎症信号通路在糖尿病足(DF)伤口细胞焦亡中的作用。方法:纳入30例DF患者为观察组,以30例无糖尿病创伤患者为对照组,比较两组患者临床资料;采集伤口组织标本,行组织学观察,免疫荧光检测iNOS水平,ELISA检测IL-1β和IL-18蛋白水平的变化,PCR检测核因子κB-p65(NF-κB p65)、核因子κB抑制蛋白α(IκB-α)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)水平,Western blotting检测NLRP3表达水平。结果:对照组创面炎症反应较观察组平缓。观察组IL-1β和IL-18水平明显高于对照组(P<0.05)。观察组患者伤口NLRP3、NF-κB p65、IκB-α、ASC及Caspase-1水平明显高于对照组。结论:NLRP3-NF-κB炎症信号通路与DF伤口炎症反应密切相关,可能为DF溃疡的治疗提供新靶点。

丹参多酚酸盐注射液联合瑞舒伐他汀治疗老年急性心肌梗死的疗效及对NF-κB炎症信号通路的影响

目的探究丹参多酚酸盐注射液联合瑞舒伐他汀治疗老年急性心肌梗死的疗效及对核因子(NF)-κB炎症信号通路的影响。方法选取老年急性心肌梗死患者76例,按照随机数字表法分为研究组(38例)与对照组(38例)。两组均接受吸氧、降压调脂、抗血小板聚集等常规治疗,在此基础上,研究组予以丹参多酚酸盐注射液联合瑞舒伐他汀治疗,对照组予以瑞舒伐他汀治疗,两组治疗时间均为2 w。记录两组临床疗效及随访期间不良心血管事件发生情况,并分别于治疗前后检测两组心肌酶谱指标、炎症反应指标、氧化应激指标及NF-κB p50、p65 mRNA和蛋白表达水平的差异。结果研究组临床疗效明显高于对照组(P=0.01);经过2 w的治疗,相比于对照组,研究组NF-κB p50、p65的mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P<0.01);研究组心肌酶谱指标肌酸激酶(CK)、CK同工酶(CK-MB)、心肌肌钙蛋白(cTn)I均明显低于对照组(P<0.01);研究组炎症反应指标肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-8、IL-1β均明显低于对照组(P<0.01);研究组氧化应激指标超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)明显高于对照组,而丙二醛(MDA)则显著低于对照组(P<0.01);两组间不良心血管事件发生率比较未见显著差异(P>0.05)。结论丹参多酚酸盐注射液联合瑞舒伐他汀对于减轻老年急性心肌梗死患者心肌损伤有显著效果,药物作用过程中炎性因子释放、NF-κB炎症信号通路活化受到抑制,机体氧化应激状态有所改善,进而减轻患者心肌损伤。

不同剂量天麻素对甲基苯丙胺依赖CPP大鼠海马中TLR4/MyD88/NF-κB炎症信号通路的影响

目的探讨不同剂量的天麻素(Gastrodin,Gas)对甲基苯丙胺(Methamphetamine,Meth)依赖条件性位置偏爱(Conditioned place preference,CPP)大鼠海马中TLR4/MyD88/NF-κB通路的作用。方法建立Meth(10 mg/kg,ip,14 d)依赖大鼠CPP模型,采用低中高剂量的天麻素(10、30、100 mg/kg)干预14 d后,采用Western blotting和RT-qPCR方法检测TLR4/MyD88/NF-κB信号通路中关键因子的蛋白和mRNA在海马中的表达水平。结果天麻素干预后TLR4、MyD88、NF-κB p65、TRAF6的蛋白和mRNA表达呈剂量依赖性降低(P<0.001、P<0.01或P<0.05)、p-NF-κB p65的蛋白表达呈剂量依赖性降低(P<0.01或P<0.05)、IκB-α的蛋白和mRNA表达呈剂量依赖性升高(P<0.01或P<0.05),天麻素干预后p-IκB-α的蛋白表达降低(P<0.01)。结论天麻素干预对甲基苯丙胺依赖CPP大鼠海马的神经炎症具有保护作用,且与TLR4/MyD88/NF-κB信号通路密切相关。

基于TLR4/NF-κB信号通路探讨大黄糖络丸对2型糖尿病大鼠肠道炎症损伤的影响

目的基于TLR4/NF-κB信号通路探讨大黄糖络丸对2型糖尿病(T2DM)大鼠肠道炎症损伤的影响及作用机制。方法将8只ZDF(fa/+)大鼠作为空白组,40只ZDF(fa/fa)大鼠经高脂饲料喂养后,随机分为模型组、二甲双胍组(0.18 g/kg二甲双胍)和中药高、中、低剂量组(2.16、1.08、0.54 g/kg大黄糖络丸),给药组分别以相应药液灌胃,连续12周。干预前后测定大鼠体质量和空腹血糖(FBG),干预结束后进行口服葡萄糖耐量试验(OGTT),检测血清葡萄糖(GLU)、糖化血清蛋白(GSP)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量,ELISA测定血清空腹胰岛素(FINS)、游离脂肪酸(FFA)及结肠组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-22、脂多糖(LPS)、肠道分泌型免疫球蛋白A(SIgA)含量,HE染色观察结肠组织形态,Western blot检测结肠组织Toll样受体4(TLR4)、核因子-κB p65(NF-κB p65)、p-NF-κB p65、核因子-κB抑制因子α(IκBα)、p-IκBα、髓样分化因子88(MyD88)、闭锁小带蛋白-1(ZO-1)表达。结果与空白组比较,模型组大鼠体质量、FBG显著升高(P<0.01),OGTT各时间点血糖显著升高(P<0.01),血清GLU、GSP、TG、TC、LDL-C、FINS、FFA和结肠组织TNF-α、IL-6、IL-22、LPS含量显著升高,血清HDL-C和结肠组织SIgA含量显著降低(P<0.01),结肠组织细胞核固缩,胞质溶解,炎性细胞浸润,结肠组织TLR4、NF-κB p65、p-NF-κB p65、p-IκBα、MyD88蛋白表达显著升高,IκBα、ZO-1蛋白表达显著降低(P<0.01);与模型组比较,二甲双胍组和中药高、中剂量组体质量、FBG显著降低(P<0.01),OGTT不同时间点血糖降低,血清GLU、GSP、TG、TC、LDL-C、FINS、FFA和结肠组织TNF-α、IL-6、IL-22、LPS含量显著降低,血清HDL-C和结肠组织SIgA含量显著升高(P<0.05,P<0.01),结肠组织结构明显改善,炎性细胞浸润减少,结肠组织TLR4、NF-κB p65、p-NF-κB p65、p-IκBα、MyD88蛋白表达显著降低,IκBα、ZO-1蛋白表达显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论大黄糖络丸可能通过抑制TLR4/NF-κB信号通路激活,减少炎症因子释放,改善肠道炎症损伤,恢复肠道内环境稳态,进而改善糖脂代谢,发挥治疗T2DM作用。

刺五加注射液通过抑制TLR4/NF-κB信号通路减轻糖尿病肾病小鼠肾损伤的研究

[目的]研究刺五加注射液(ASI)调控Toll样受体4/核因子-κB(TLR4/NF-κB)信号通路对糖尿病肾病(DKD)小鼠肾损伤的影响。[方法]采用高脂饮食结合腹腔注射链脲佐菌素的方法构建DKD小鼠动物模型,设正常对照组、模型组、ASI(75 mg/kg)组、ASI(75 mg/kg)+瑞沙托维(TAK-242,TLR4抑制剂,0.5 mg/kg)组和ASI(75 mg/kg)+脂多糖(LPS,TLR4激动剂,10 mg/kg)组,每组10只。持续给药8周后,检测小鼠空腹血糖(FBG)和肾功能指标[24 h尿蛋白量(24 h UTP)、尿酸(UA)、血尿素氮(BUN)和血清肌酐(Scr)],称量体质量、肾脏质量并计算肾脏系数,酶联免疫吸附法(ELISA)检测肾组织炎症因子[白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]含量,苏木精-伊红(HE)染色法观察肾组织病理改变,马森(Masson)染色和末端标记法(TUNEL)检查肾纤维化和肾细胞凋亡,逆转录实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肾组织TLR4、NF-κB p65 mRNA表达,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测肾组织TLR4、NF-κB p65、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、活化型Caspase-3(Cleaved Caspase-3)蛋白表达。[结果]与模型组相比,ASI组和ASI+TAK-242组小鼠FBG、24 h UTP、UA、BUN、Scr、肾脏质量、肾脏系数、IL-1β、IL-6、TNF-α均显著降低,体质量显著升高(P<0.05);肾组织病理改变、纤维化及肾细胞凋亡状况均明显改善,肾组织损伤评分、胶原容积分数(CVF)及细胞凋亡指数(AI)均显著降低(P<0.05);TLR4、NF-κB p65 mRNA和蛋白表达量显著降低,Bax/Bcl-2、Cleaved Caspase-3/Caspase-3蛋白表达比值显著降低(P<0.05)。TAK-242能够明显增强ASI对DKD小鼠FBG、肾功能、体质量、肾脏系数、肾组织病变、纤维化、细胞凋亡及TLR4/NF-κB信号通路相关mRNA和蛋白表达的作用;LPS则明显逆转ASI对DKD小鼠的上述作用。[结论]ASI具有减轻DKD小鼠肾损伤并改善其肾功能的作用,其机制可能与下调TLR4/NF-κB信号通路,进而抑制炎症、肾纤维化和细胞凋亡有关。

中药单体治疗脊髓损伤后神经炎症:核转录因子κB信号通路的作用

背景:基于核转录因子κB通路探究神经炎症的靶向治疗越来越值得探究,中药靶点多、范围广、机制丰富及不良反应少等优点在治疗各类疾病时都具有十分巨大的潜力。目的:基于核转录因子κB信号通路,对近年研究中出现的山奈酚、红花黄、汉黄芩苷及雷公藤甲素等中药单体治疗脊髓损伤后神经炎症的研究进展进行系统的阐述与归纳。方法:以“脊髓损伤,炎症,抗炎,中药单体,单体化合物,NF-κB信号通路,黄酮,糖苷,酚类,酯类,生物碱”为检索词在中国知网数据库中进行检索;以“Spinal cord injury,inflammation,anti-inflammatory,traditional Chinese medicine monomer,monomeric compound,NF-κB signaling pathway,flavonoids,glycosides,phenols,esters,alkaloids”为检索词在PubMed数据库中进行检索,最终共纳入67篇文献进行综述分析。结果与结论:①核转录因子κB信号通路在神经系统中的作用复杂多样,能够调控中性粒细胞、小胶质细胞、星形胶质细胞和巨噬细胞等,介导损伤后炎症的发生与发展;②中药单体如汉黄芩苷对核转录因子κB抑制蛋白的降解、红花黄素对核转录因子κB信号通路磷酸化过程的抑制、山奈酚对核转录因子κB信号通路p65核易位的抑制等作用可以降低炎症反应对机体造成的影响,从而促进神经功能恢复;③核转录因子κB信号通路在损伤早期能够促进炎症反应和免疫细胞迁移活化,在损伤中后期能够促进损伤部位的修复和纤维化的发生等,适当的激活核转录因子κB信号通路具有促进炎症因子的释放、提高细胞的抗氧化能力及促进免疫细胞的活化等能力,但过度激活的核转录因子κB信号通路则容易导致慢性炎症的发生和持续、细胞凋亡受到抑制等;④未来的研究可以进一步探索如何准确调控核转录因子κB信号通路的活化水平、如何实现对神经系统炎症和损伤的精准干预展开,也可围绕中药单体的制备及中药单体对信号通路的作用机制展开,以期为神经系统疾病的康复和功能恢复提供更有效的治疗策略。

乌司他丁抑制TLR4/NF-κB炎症信号通路对脓毒症大鼠肠道损伤的保护作用

目的 探讨不同剂量乌司他丁(UTI)对脓毒症大鼠肠道损伤的保护作用及对TLR4/NF-κB炎症信号通路的影响。方法 40只SPF级健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、脓毒症组、低剂量UTI组、高剂量UTI组各10只。脓毒症组、低剂量UTI组、高剂量UTI组采用盲肠结扎穿孔法制备脓毒症大鼠模型,假手术组开腹后行盲肠探查术。造模24 h内,低、高剂量UTI组每6 h分别腹腔注射UTI 5、10万u/kg,脓毒症组和假手术组腹腔注射等体积生理盐水。造模24 h, 4组麻醉后取腹主动脉血,采用ELISA法检测血清白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α、肠型脂肪酸结合蛋白、二胺氧化酶水平。采血后处死大鼠取小肠组织,HE染色观察组织病理学改变并行肠道黏膜损伤Chiu’s评分;采用免疫组织化学染色法检测claudin-1、occludin阳性面积百分比,TLR4、MyD88阳性细胞百分比;采用免疫荧光染色法检测p-NF-κB p65阳性细胞百分比;采用Western blot法检测小肠组织claudin-1、occludin、TLR4、MyD88、p-NF-κB p65蛋白相对表达量。结果 (1)脓毒症组及低、高剂量UTI组血清白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α、肠型脂肪酸结合蛋白、二胺氧化酶水平均高于假手术组(P<0.05),脓毒症组均高于低、高剂量UTI组(P<0.05),低剂量UTI组均高于高剂量UTI组(P<0.05)。(2)脓毒症组[5(5,5)分]、低剂量UTI组[3(3,3)分]、高剂量UTI组[2(2,2)分]肠道黏膜损伤Chiu’s评分均高于假手术组(0)(P<0.05),脓毒症组高于低、高剂量UTI组(P<0.05),低剂量UTI组高于高剂量UTI组(P<0.05)。(3)脓毒症组、低剂量UTI组、高剂量UTI组小肠组织TLR4、MyD88、p-NF-κB p65阳性细胞百分比及蛋白相对表达量均高于假手术组(P<0.05),低、高剂量UTI组均低于脓毒症组(P<0.05),高剂量UTI组均低于低剂量UTI组(P<0.05)。(4)脓毒症组、低剂量UTI组、高剂量UTI组小肠组织claudin-1、occludin阳性面积百分比及蛋白相对表达量均低于假手术组(P<0.05),低、高剂量UTI组均高于脓毒症组(P<0.05),高剂量UTI组均高于低剂量UTI组(P<0.05)。结论 UTI可剂量依赖性修复脓毒症大鼠受损的肠道黏膜屏障,其机制可能是通过抑制TLR4/NF-κB炎症信号通路的激活,抑制炎性反应,并间接上调肠道紧密连接蛋白claudin-1、occludin表达。

枸杞多糖对类风湿关节炎大鼠炎症反应及TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的 研究枸杞多糖对类风湿关节炎(RA)大鼠炎症反应及Toll样受体(TLR)4/核因子(NF)-κB信号通路的影响。方法 采用Ⅱ型胶原联合完全弗氏佐剂诱导建立关节炎大鼠模型,并随机分为模型组、枸杞多糖低、高剂量组及氨甲蝶呤组,另设正常组(不建模),每组10只。枸杞多糖低、高剂量组灌胃200、400 mg/kg的枸杞多糖,氨甲蝶呤组灌胃3.8 mg/kg氨甲蝶呤,1次/d,持续28 d。记录足趾肿胀度、关节炎评分、机械性痛阈及热刺激缩足反射潜伏期,苏木素-伊红染色观察足关节滑膜组织病理,酶联免疫吸附试验及实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-6含量及mRNA表达,Western印迹检测TLR4、髓样分化因子(MyD)88、磷酸化p-NF-κB蛋白表达。结果 与正常组比较,模型组足趾肿胀度、关节炎评分明显升高,机械性痛阈及热刺激缩足反射潜伏期明显降低,足关节滑膜组织病理形态明显,血清TNF-α、IL-1β、IL-6含量明显增加,足关节滑膜组织TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA及TLR4、MyD88、p-NF-κB蛋白表达明显增加(P<0.01);与模型组比较,枸杞多糖低、高剂量组足趾肿胀度、关节炎评分明显降低(P<0.05,P<0.01),机械性痛阈及热刺激缩足反射潜伏期明显升高,足关节滑膜组织病理形态明显减轻,血清TNF-α、IL-1β、IL-6含量明显降低(P<0.01),足关节滑膜组织TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA及TLR4、MyD88、p-NF-κB蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论 枸杞多糖可通过抑制TLR4/NF-κB信号通路介导的炎症反应,改善RA症状。

基于MAPK/NF-κB信号通路探讨调气止咳方对咳嗽变异性哮喘大鼠气道炎症的影响及机制

目的基于MAPK/NF-κB信号通路探讨调气止咳方(麻黄、苦杏仁、浙贝母、黄芩、瓜蒌子等)对咳嗽变异性哮喘大鼠气道炎症的影响及机制。方法采用卵清蛋白致敏复制咳嗽变异性哮喘大鼠模型。将SD大鼠随机分组为空白组、模型组、地塞米松组(0.5 mg·kg^(-1))、孟鲁司特组(1.0 mg·kg^(-1))及调气止咳方低、中、高剂量组(9.6、19.2、38.4 g·kg^(-1)),每组10只;灌胃给药,每日1次,连续14 d。观察大鼠一般状况并记录雾化后2 min内大鼠的咳嗽次数;采用HE染色、Masson染色法观察大鼠肺组织病理变化;ELISA法检测血清白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量;Western Blot法检测肺组织p38 MAPK、p-p38、NF-κB p65、p-p65蛋白表达水平;RT-qPCR法检测肺组织p38 MAPK、NF-κB p65 mRNA表达水平。结果与空白组比较,模型组大鼠的咳嗽次数显著增加(P<0.01),肺损伤病理评分及胶原纤维面积比显著升高(P<0.01);血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平均显著升高(P<0.01);肺组织中p-p38、p-p65、p-p38/p38、p-p65/p65蛋白表达均显著上调(P<0.01),p38 MAPK、NF-κB p65 mRNA表达显著上调(P<0.01)。与模型组比较,各给药组大鼠的咳嗽次数显著减少(P<0.01),肺损伤病理评分及胶原纤维面积比显著降低(P<0.01),血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平均显著降低(P<0.01),肺组织中p-p38、p-p65蛋白表达及p38 MAPK、NF-κB p65 mRNA表达均明显下调(P<0.05,P<0.01);调气止咳方高剂量组大鼠肺组织中p-p38/p38、p-p65/p65蛋白表达比值均显著下调(P<0.01)。与地塞米松组和孟鲁司特组比较,调气止咳方高剂量组大鼠的咳嗽次数明显减少(P<0.05);与地塞米松组比较,调气止咳方高剂量组大鼠的血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平明显降低(P<0.01);与孟鲁司特组比较,调气止咳方高剂量组大鼠的血清IL-1β、TNF-α水平明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论调气止咳方能够改善卵清蛋白诱导的咳嗽变异性哮喘大鼠的咳嗽症状,减轻气道炎症细胞浸润及气道重塑,降低炎症细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α水平,其机制可能与调控MAPK/NF-κB信号通路有关。

三黄益肾胶囊调控NF-κB信号通路减轻糖尿病肾病大鼠炎症反应的机制研究

目的:旨在探究三黄益肾胶囊治疗糖尿病肾病(DN)可能的炎症反应机制。方法:按照随机数字表法将60只大鼠分为正常组、模型组、厄贝沙坦组及三黄益肾低、中、高剂量组,每组10只。除正常组外,其余各组大鼠用高糖高脂饲料联合链脲佐菌素(STZ)注射建立DN模型。正常组和模型组给予生理盐水2 mL灌胃;厄贝沙坦组给予厄贝沙坦11.51 mg/kg灌胃;三黄益肾低、中、高剂量组分别给予三黄益肾胶囊0.41、0.81、1.62 g/kg灌胃。各组大鼠均1次/d,连续给药4周。比较各组大鼠空腹血糖(FBG)、体质量、24 h尿白蛋白、肾功能指标、肾组织病理学变化、肾组织抗氧化相关指标(SOD、GSH-Px活性及MDA水平)、肾组织炎症介质[白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)]、肾组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、肾组织CD68、CC趋化因子受体2(CCR2)表达、肾组织CC趋化因子配体2(CCL2)、NF-κB P65、p-NF-κB P65、IκB、p-IκB表达。结果:与模型组比较,各三黄益肾胶囊组大鼠体质量高,FBG、血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)及24 h尿蛋白水平低,肾脏组织病理变化减轻,三肾组织中SOD、GSH-Px活性高,MDA水平低,IL-6、IL-1β、TNF-α水平低,肾组织中iNOS水平低,肾组织CCR2与CD68共定位水平低,CCL2、p-NF-κB P65、p-IκB蛋白表达低。结论:三黄益肾胶囊治疗DN的机制可能与抑制肾组织中NF-κB信号通路激活,减轻肾脏氧化应激及炎症反应有关。

基于TLR4/MyD88/NF-κB信号通路探讨芪黄解毒化瘀饮治疗脓毒症急性肾损伤的作用机制

[目的]基于Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路探讨芪黄解毒化瘀饮治疗脓毒症急性肾损伤(AKI)的影响及作用机制。[方法]将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、芪黄解毒化瘀饮低、中、高剂量组,每组10只。通过盲肠结扎穿刺的方法构建脓毒症AKI大鼠模型,各组分别于造模前每12 h灌胃,连续3 d,造模后12 h灌胃。记录各组大鼠的一般状态,酶联免疫吸附法(ELISA)试剂盒检测各组大鼠血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、中性粒细胞明胶酶相关脂质释放素(NGAL)、肾损伤分子(KIM)-1、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-10、肿瘤坏死因子(TNF)-α、过氧化氢酶(CAT)、还原性谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、丙二醛(MDA)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)水平。苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠肾组织病理形态变化。蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠肾组织中TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达水平。[结果]与模型组相比,芪黄解毒化瘀饮低、中、高剂量组大鼠的一般状态均已改善;高剂量组血清Scr、BUN水平明显降低(P<0.05),中、高剂量组NGAL和KIM-1水平明显降低(P<0.05,P<0.01);低、中、高剂量组大鼠肾脏组织病理损伤明显改善;芪黄解毒化瘀饮低、中、高剂量组IL-1β、IL-6、TNF-α的水平降低(P<0.01或P<0.05),IL-10水平升高(P<0.01);芪黄解毒化瘀饮低、中、高剂量组MDA的水平明显降低(P<0.01),CAT水平明显升高(P<0.05或P<0.01);中、高剂量组GSH-PX水平明显升高(P<0.05);高剂量组T-SOD水平明显升高(P<0.05);芪黄解毒化瘀饮低、中、高剂量组TLR4、MyD88、NF-κBp65蛋白表达水平明显降低,差异具有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。[结论]芪黄解毒化瘀饮可以改善脓毒症AKI大鼠的一般状态,改善肾功能障碍和肾脏病理损伤,减轻炎症水平和氧化应激反应,其作用机制可能与抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路相关。

基于TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路探究白芍总苷对自身免疫性甲状腺炎大鼠炎症损伤的影响

目的探讨白芍总苷对自身免疫性甲状腺炎(AIT)大鼠炎症损伤及TLR4/NF-κB/NLRP3通路的影响。方法实验分为对照组(Control)、模型组(Model)、白芍总苷组(TGP)、TLR4抑制剂组(TLR4 inhibitor)和TGP+TLR4激动剂组(TGP+TLR4 agonist),每组各10只。除Control组外,其余各组大鼠采用皮下注射甲状腺球蛋白与弗氏佐剂诱导AIT大鼠模型。给药6周后,苏木精-伊红(HE)染色观察甲状腺组织病理学变化;酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清TPOAb、TgAb、TSH、T3、T4、TNF-α、INF-γ、IL-1β、IL-18水平;RT-qPCR和Western blot检测甲状腺组织TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路mRNA和蛋白表达。结果与Control组相比,Model组大鼠甲状腺滤泡上皮明显受损,TPOAb、TgAb、TSH、T3、T4、TNF-α、INF-γ、IL-1β、IL-18水平升高(P<0.01),TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路mRNA和蛋白表达升高(P<0.01)。与Model组相比,TGP组、TLR4 inhibitor组大鼠甲状腺滤泡上皮损伤减轻,TPOAb、TgAb、TSH、T3、T4、TNF-α、INF-γ、IL-1β、IL-18水平降低(P<0.01),TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路mRNA和蛋白表达降低(P<0.01)。与TGP组相比,TGP+TLR4 agonist组大鼠甲状腺滤泡上皮损伤加重,TPOAb、TgAb、TSH、T3、T4、TNF-α、INF-γ、IL-1β、IL-18水平升高(P<0.05或P<0.01),TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路mRNA和蛋白表达增加(P<0.05或P<0.01)。结论TGP通过抑制TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路,改善甲状腺组织炎症损伤发挥甲状腺保护作用。

清肺饮联合宣白承气汤治疗儿童大叶性肺炎的效果及对TLR4/NF-κB炎症信号通路的影响

目的分析清肺饮联合宣白承气汤治疗儿童大叶性肺炎的效果及对Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)炎症信号通路的影响。方法选取2022年2月~2024年2月在湖南中医药大学第一附属医院儿科就诊的286例大叶性肺炎患儿进行分析,根据治疗方案的差异,分为研究组(n=146)和对照组(n=140)。对照组给予常规治疗,研究组给予宣白承气汤联合清肺饮治疗。比较两组的临床疗效和不良反应发生率,并比较两组治疗前后的中医证候评分(咳嗽气短、壮热烦躁、痰黄黏稠)、炎症指标和TLR4/NF-κB炎症信号通路情况。结果研究组的临床总有效率(96.58%)高于对照组(89.29%)(P<0.05)。两组患者治疗后的咳嗽气短、中医证候评分、白细胞介素8(IL-8)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞(WBC)计数、血清TLR4、NF-κB水平均比治疗前下降,且研究组低于对照组(P<0.05)。两组患者总不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论清肺饮联合宣白承气汤对儿童大叶性肺炎的治疗效果显著,且能有效改善临床症状,降低炎症指标,可能与调节TLR4/NF-κB炎症信号通路有关。

中药靶向IκB/NF-κB信号通路干预脓毒症研究进展

脓毒症是临床感染、严重创伤、烧伤等疾病常见并发症。IκB/NF-κB介导脓毒症的炎症过程被认为是抗炎药物的新靶点。中药干预脓毒症具有多成分、多靶点且不良反应小等特点。本文通过梳理中药靶向IκB/NF-κB信号通路干预脓毒症相关研究,归纳总结中药单体及其提取物、中药复方及制剂通过靶向IκB/NF-κB信号通路而发挥减轻脓毒症的炎症反应和氧化应激、调节免疫、保护重要脏器免受损伤的作用机制研究,为中药治疗脓毒症提供参考。