裸鼠人胃癌MKN-45细胞核转录因子NF-κBP^(65)蛋白与增殖细胞核抗原表达的相关性

目的:通过观察胃癌细胞核转录因子NF-κBP65蛋白与增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白的表达及关系,探讨消痰散结方抑制胃癌细胞增殖的作用机制。方法:采用OB胶粘贴法建立裸鼠人胃癌MKN-45原位移植瘤模型,随机数字表法分成模型组,消痰散结低、中、高剂量组,5-Fu组,每组8只,观察消痰散结方干预对胃癌组织核转录因子NF-κBP65蛋白、增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响及相关性。结果:①消痰散结方中、高剂量组、5-Fu组NF-κB的P65蛋白的阳性表达与模型组相比P<0.05,有统计学意义;②消痰散结方低、中、高剂量组、5-Fu组的PCNA阳性表达率与模型组相比有统计学意义,P<0.05;③胃癌细胞NF-κBP65蛋白与PCNA表达存在正相关(r=0.857,P<0.01)。结论:胃癌MKN-45细胞中存在着活化的NF-κB及高表达的PCNA,并且存在线性相关,消痰散结方可能通过其抑制NF-κB活性,阻断了NF-κB对PCNA的活性调控,使胃癌细胞增殖受到抑制,控制胃癌复发与转移。

青蒿鳖甲汤加减治疗癌性发热疗效及对NF-κB p65蛋白、IL-6、IL-10、TNF-α的影响

目的 探讨青蒿鳖甲汤加减治疗癌性发热疗效及对核因子κB p65(Nuclear factor-kappaBp65,NF-kappaB p65)蛋白、白细胞介素-10(Interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-6(interleukin-10,IL-10)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)的影响。方法 选取诊治的癌性发热患者100例,随机分为对照组与观察组,每组50例,对照组常规西药治疗,观察组采用青蒿鳖甲汤加减治疗,治疗时间7 d,观察退热效果、治疗前血清总NF-κB p65蛋白及活性NF-κB p65蛋白、IL-6、IL-10、TNF-α变化。结果 观察组体温开始下降时间、体温恢复正常时间短于对照组,每次退热持续时间长于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组治疗前血清总NF-κB p65蛋白及活性NF-κB p65蛋白水平比较差异无统计学意义(P>0.05),治疗均下降,且观察组下降幅度大于对照组,比较差异有统计学意义(P<0.05);两组治疗前血清IL-6、IL-10、TNF-α水平比较差异无统计学意义(P>0.05),治疗均下降,且观察组下降幅度大于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组不良反应发生率为18.00%(9/50)、对照组为14.00%(7/50),差异无统计学意义(P>0.05);观察组治疗疗效整体优于对照组(P<0.05),治疗总有效率为96.00%(48/50),高于对照组的80.00%(40/50)(P<0.05)。结论 青蒿鳖甲汤加减治疗癌性发热退热效果显著,能够缩短患者体温恢复正常的时间,改善NF-κB p65蛋白、IL-6、IL-10、TNF-α水平。

推拿按揉环跳穴对坐骨神经痛大鼠脊髓背角NF-κB p65蛋白的干预作用

目的:观察推拿按揉环跳穴对坐骨神经慢性压迫损伤(chronic constriction injury,CCI)模型大鼠的镇痛作用,探讨推拿对坐骨神经痛大鼠的镇痛机制。方法:选用32只体重180~220g SPF级别的SD雄性大鼠,随机分成空白组(不予以任何处理)、假手术组(只暴露不结扎坐骨神经)、模型组(结扎坐骨神经)和推拿组(结扎坐骨神经后予以手法干预)。通过结扎大鼠右侧坐骨神经制备CCI模型,于造模第3天开始对推拿组大鼠推拿按揉环跳穴干预,连续干预14 d,观察造模前及造模后第1、3、7、10、14、17天大鼠机械痛域(paw withdrawal threshold,PWT)、热痛阈(paw withdrawal latency,PWL);观察造模前、造模后第1和17天右侧坐骨神经功能指数(sciatic functional index,SFI)的变化;用苏木精伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色方法观察坐骨神经形态学的变化;并观察大鼠右侧脊髓背角NF-κB蛋白表达的差异。结果:在造模后,空白组和假手术组的PWT、PWL和SFI差异均无统计学意义(P>0.05),造模后模型组和推拿组的PWT、PWL和SFI显著下降(P<0.01)。在手法干预后,推拿组大鼠的痛阈值上升,在手法干预第8天(即造模第10天),推拿组较模型组PWT显著上升,差异有统计学差异(P<0.01);在手法干预第5天(即造模第7天),推拿组PWL较模型组显著上升,差异有统计学意义(P<0.01);推拿组大鼠痛阈值随着手法干预持续而继续上升。手法干预14天后,推拿组大鼠坐骨神经功能指数显著上升(P<0.01)。与空白组、假手术组比较,模型组大鼠坐骨神经有髓神经纤维排列紊乱,轴索、髓鞘密度不均匀;与模型组比较,推拿组大鼠神经纤维逐渐连续,轴索、髓鞘较模型组均匀。与空白组、假手术组比较,模型组大鼠右侧脊髓背角NF-κB蛋白表达显著增加(P<0.01);与模型组比较,推拿组大鼠右侧脊髓背角NF-κB蛋白表达显著下降(P<0.01)。结论:推拿按揉环跳穴能恢复神经纤维的排列;并通过降低脊髓背角的NF-κB p65蛋白表达来提高CCI模型的PWT、PWL和SFI,从而起到镇痛的作用,并改善大鼠步态。

裸鼠人胃癌细胞核转录因子NF-κBP^(65)蛋白与端粒酶逆转录酶(hTERT)蛋白的表达及关系

目的:通过观察胃癌细胞核转录因子NF-κBP65蛋白与端粒酶逆转录酶(hTERT)蛋白的表达及关系,探讨消痰散结方抑制胃癌细胞增殖的作用机制。方法:采用OB胶粘贴法建立裸鼠人胃癌MKN-45原位移植瘤模型,随机数字表法分成模型组,消痰散结低、中、高剂量组,5-Fu组,每组8只,观察消痰散结方干预对胃癌组织NF-κBP65蛋白、hTERT蛋白表达的影响及相关性。结果:①消痰散结方中、高剂量组、5-Fu组NF-κBP65蛋白的阳性表达与模型组相比,P<0.05,有统计学意义;②消痰散结方中剂量组、5-Fu组hTERT蛋白的阳性表达率与模型组比较明显降低,P<0.05,有统计学意义;消痰散结方高剂量组hTERT蛋白的阳性表达率与模型组有显著差异,P<0.01;③胃癌细胞NF-κBP65蛋白与hTERT蛋白表达呈显著正相关(r=0.929,P<0.01)。结论:胃癌MKN-45细胞中存在着活化的NF-κB及高表达的hTERT蛋白,并且存在线性相关,消痰散结方可能通过其抑制NF-κB活性,阻断了NF-κB对hTERT的活性调控,使胃癌细胞增殖受到抑制,从而阻断胃癌发展,控制胃癌复发与转移。

红景天苷下调组织蛋白酶B和NF-κBp65水平改善大鼠肺纤维化

目的:探讨红景天苷改善大鼠肺纤维化的相关机制。方法:SD大鼠随机分为空白组、肺纤维化模型组、吡非尼酮组和红景天苷高剂量组、中剂量组、低剂量组。测定6组肺系数,血气分析,检测肺泡灌洗液中白蛋白(ALB)、碱性磷酸酶(ALP)、乳清脱氢酶(LDH)含量,肺组织羟脯氨酸(HYP)含量,血清III型前胶原(PC-III)和IV型胶原(COL4)含量,溶酶体组织蛋白酶B(cathepsin,CB)和NF-κBp65表达的水平。结果:模型组肺系数明显高于空白组(P<0.05),而氧分压明显低于空白组(P<0.05);吡非尼酮组、红景天苷高、中、低剂量组肺系数相比模型组均下降(P<0.05),氧分压则升高(P<0.05)。模型组中ALB,ALP,LDH含量较空白组升高(P<0.05);随着红景天苷浓度的增加,ALB,ALP,LDH呈下降趋势(P<0.05)。模型组谷胱甘肽(GSH)含量较空白组升高(P<0.05);随着红景天苷浓度的增加,GSH含量呈下降趋势(P<0.05)。模型组肺组织中HYP及血清PC-III和COL4含量较空白组升高(P<0.05);随着红景天苷浓度的增加,HYP及血清PC-III和COL4含量呈下降趋势(P<0.05)。模型组CB和NF-κBp65表达较空白组升高(P<0.05);随着红景天苷浓度的增加,CB和NF-κBp65表达呈下降趋势(P<0.05)。结论:红景天苷能改善大鼠肺纤维化,其机制可能与降低大鼠肺组织的CB和NF-κBp65的表达有关。

运动训练对2型糖尿病大鼠肾脏NF-κB-p65和相关蛋白表达的影响及机制研究

目的:研究运动训练对2型糖尿病大鼠肾脏NF-κB-p65及相关蛋白表达的影响,以探讨运动改善2型糖尿病大鼠肾损伤的可能作用机制。方法:SD大鼠通过高脂饲料喂养6周和低剂量腹腔注射STZ的方法复制2型糖尿病大鼠实验模型。实验分为正常对照组(A),糖尿病安静组(B)和糖尿病运动组(C)。C组进行6周的有氧游泳训练,其余两组不施加干预。实验结束后,测试随机血糖、24 h UAE、T-SOD、MDA、NF-κB-p65、Activated Caspase-3和Nephrin蛋白表达,并进行电镜观察肾脏显微结构的改变。结果:1)电镜下,运动干预的C组大鼠可见滤过膜3层结构较清晰,基底膜未见明显增加,足突稍肿大、足细胞融合等症状较B组大鼠均有所改善。2)运动干预后,C组大鼠的血糖浓度、24h UAE排泄量均降低,与B组比较,均有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。3)运动干预后,C组大鼠肾皮质T-SOD活性上升而MDA含量下降,与B组比较,亦有明显差异(P<0.05或P<0.01)。4)运动干预后,C组大鼠肾皮质NF-κB-p65和Activated Caspase-3蛋白表达均明显降低,而Nephrin蛋白表达明显增加,与B组比较,差异均呈显著性(P<0.05或P<0.01)。结论:运动能降低2型糖尿病大鼠血糖,减轻肾脏病理损伤,并提高肾功能,其机制可能与运动的下调氧化应激介导的2型糖尿病大鼠肾脏核转录因子NF-κB-p65的表达,以改善效应蛋白Activated Caspase-3异常表达和恢复足细胞特异标志物-Nephrin蛋白的表达,而改善大鼠肾脏损伤的保护作用有关。

瑞舒伐他汀对载脂蛋白E基因缺陷小鼠动脉粥样硬化及LOX-1、NF-κBp65表达的影响

目的探讨3-羟-3-甲基戊二酰辅酶A(HMG-Co A)还原酶抑制剂瑞舒伐他汀对载脂蛋白E(Apo E)基因缺陷小鼠动脉粥样硬化及主动脉凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)、核因子-κB p65(NF-κB p65)表达的影响。方法 20只6周龄雄性Apo E基因缺陷小鼠随机分为高脂模型组(n=10)、瑞舒伐他汀药物干预组(n=10),高脂饮食喂养13周;10只6周龄C57BL/6J(野生型,W T)雄性小鼠作为正常对照组,正常饮食喂养13周。13周后,摘眼球取血测定血浆总胆固醇(TCH)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)的水平。处死小鼠取主动脉,行HE染色;采用Western blotting和RT-PCR检测定量分析主动脉组织LOX-1、NF-κB p65表达变化。结果与高脂模型组比较,瑞舒伐他汀药物干预组血清中TCH、TG、LDL-C水平明显降低(P<0.05)。HE染色结果显示,与正常对照组相比,高脂模型组主动脉粥样硬化病变程度明显加重,瑞舒伐他汀药物干预组主动脉粥样硬化病变程度减轻。与正常对照组相比,高脂模型组主动脉LOX-1、NF-κB p65蛋白和m RNA的表达均明显增加(P<0.05),瑞舒伐他汀药物干预组LOX-1、NF-κB p65蛋白和m RNA的表达均减少(P<0.05)。结论瑞舒伐他汀可明显降低血脂,减轻Apo E基因缺陷小鼠主动脉组织粥样硬化病变程度,其抗动脉粥样硬化作用可能与下调LOX-1、NF-κB p65的表达有关。

电针预处理对心肌缺血再灌注无复流大鼠NF-kB p65蛋白及其磷酸化水平的影响

目的观察电针预处理对大鼠心肌缺血再灌注无复流现象及核转录因子-?B(NF-?B) p65蛋白及其磷酸化水平的影响。方法 48只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针预处理组、阿托伐他汀预处理组。除假手术组外,其余各组大鼠均采用结扎左冠状动脉45 min后再灌注120 min的方法复制急性心肌缺血再灌注无复流的模型。观察各组大鼠心肌梗死、缺血及无复流的范围,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清炎性因子白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子(TNF-?)的水平,蛋白质免疫印迹法(Western-blot)测定心肌组织中NF-?B p65及其磷酸化水平的表达。结果与模型组比较,电针预处理组和阿托伐他汀预处理组心肌梗死范围及无复流范围明显减小,电针预处理能显著升高心肌梗死大鼠血清IL-10水平,降低血清IL-6及TNF-?水平,下调心肌组织中NF-?B p65及phospho-NF-?B p65蛋白的表达,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。结论电针预处理能够显著降低心肌组织中NF-?B p65及其磷酸化水平的表达,从而改善心肌缺血再灌注后的无复流现象。

依达拉奉对脑出血大鼠血肿周围组织NF-κB p65蛋白表达的影响

目的探讨依达拉奉对脑出血大鼠血肿周围组织NF-κB p65蛋白表达的影响。方法 108只健康雄性Wistar大鼠随机分为正常组、假手术组、脑出血组和依达拉奉治疗组,其中脑出血组和依达拉奉治疗组又分为3 h、6 h、12 h、1 d、2 d、3 d、5 d、7 d 8个亚组,每组6只。采用大鼠尾动脉自体不凝血50μL注入尾状核区建立脑出血模型。依达拉奉治疗组于模型制作成功后2 h开始腹腔内注射3 mg/kg依达拉奉,1次/d。免疫组化法检测NF-κB p65蛋白表达变化。结果与脑出血组相比,依达拉奉治疗组于出血后6 h、12 h、1 d、2 d、3 d、5 d、7 d血肿周围组织NF-κB p65蛋白表达均减少(P<0.05或P<0.01)。结论依达拉奉对脑出血后血肿周围脑组织损伤有保护作用,可能与其抑制NF-κB p65蛋白表达有关。

NF-κB(p65)蛋白核转位与唾液腺腺样囊性癌侵袭和转移关系的研究

目的检测NF-κB p65蛋白在唾液腺腺样囊性癌(adenoid cystic carcinoma,ACC)临床组织标本中的表达水平和转位情况,分析其与ACC侵袭和转移之间的关系。方法应用免疫组织化学法,检测58例唾液腺腺样囊性癌石蜡标本中p65蛋白的表达和细胞定位,分析p65蛋白的表达、转位与ACC转移和其他临床病理参数的关系。结果在转移和非转移的ACC组,p65细胞表达阳性率无显著差异(P=0.2641);而p65蛋白的核阳性表达率ACC转移组明显高于非转移组(P=0.0261),并且与ACC神经浸润相关(P=0.0244)。结论 NF-κB通路的激活可能在唾液腺腺样囊性癌侵袭和转移中发挥重要作用。

大豆β-伴球蛋白对黄河鲤头肾TLR2/NF-κB p65及其炎性因子基因表达的影响

为研究大豆β-伴球蛋白水平对黄河鲤Cyprinus carpio haematopterus头肾TLR2/NF-κB p65信号通路和下游炎性细胞因子表达的影响,将225尾体质量为(41.00±0.12)g的黄河鲤随机分为5组,每组设3个重复,每个重复15尾鱼,分别饲喂含0%(对照)、1.0%、3.0%、5.0%和7.0%的大豆β-伴球蛋白(替代鱼粉)的等氮(粗蛋白质38.0%)、等能(脂肪6.0%)饲料,进行为期21 d的养殖试验,分别于试验开始的第1、7、14、21天取头肾进行实时定量PCR,分析各组TLR2、NF-κB p65、IL-1β、IL-6、TNF-α1、IFN-γ基因表达的变化。结果表明:黄河鲤头肾中TLR2、NF-κB p65、IL-1β、IL-6和TNF-α1的表达与大豆β-伴球蛋白添加剂量、饲喂时间显著相关(P<0.05),但无交互作用,而IFN-γ的表达只与剂量相关;3.0%及以上添加组,1~21 d内TLR2、NF-κB p65、IL-1β、IL-6和TNF-α1表达量均显著高于对照组(P<0.05),第21天时各因子表达量较第14天时总体上趋于下降;1.0%、3.0%、5.0%添加组IFN-γ表达在试验期内显著高于对照组(P<0.05)。研究表明,饲料中添加大豆β-伴球蛋白能促进黄河鲤头肾TLR2、NF-κB p65、IL-1β、IL-6和TNF-α1表达且具有剂量-时间依赖效应,但无交互作用,推测大豆β-伴球蛋白可引起鲤炎症反应,导致免疫功能紊乱。因此,鲤鱼日粮中不宜使用高水平的大豆β-伴球蛋白。

弥漫大B细胞淋巴瘤中NF-κB/p65、PD-1、PD-L1表达相关性研究及其蛋白表达的临床意义

背景与目的:弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)中NF-κB通路激活为重要发病机制,PD-1/PD-L1通路活化也与其相关,且NF-κB/p65、程序性死亡[蛋白]-1(programmed death-1,PD-1)、程序性死亡[蛋白]配体-1(programmed death ligand-1,PD-L1)蛋白表达与患者不良预后有关,但目前尚未见研究探讨它们之间的关系。探讨p65蛋白高表达与PD-1、PD-L1蛋白和mRNA的相关性,分析p65、PD-1、PD-L1蛋白表达与临床病理学特征、总生存期(overall survival,OS)的关系。方法:回顾性收集贵州医科大学附属医院病理科2010年1月-2017年12月90例DLBCL组织蜡块,采用免疫组织化学染色检测p65蛋白并分为p65蛋白高表达组和低表达组;免疫组织化学染色法检测各组PD-1蛋白;免疫组织化学双标记染色法检测各组肿瘤细胞PD-L1或肿瘤微环境细胞PD-L1(PD-L1 of tumor microenvironment cells,mP D-L1),即肿瘤浸润淋巴细胞(tumor-infiltrating lymphocyte,TIL)的细胞膜上表达的PD-L1蛋白;采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测各组中PD-1、PD-L1的mR NA表达水平;收集临床病理学资料并随访;对实验数据进行统计学分析。结果:90例样本中,p65高表达率为61.11%(55/90),PD-1阳性率为32.22%(29/90),肿瘤细胞PD-L1阳性率为24.44%(22/90),mPD-L1阳性率为28.89%(26/90);p65高表达与PD-1蛋白及mR NA均无相关性(P值均>0.05),但p65高表达与肿瘤细胞PD-L1或mP D-L1蛋白表达存在相关性(P=0.022,P=0.015),且在不同p65蛋白表达组间PD-L1 mRNA均值差异有统计学意义,p65高表达组相对较高(P=0.012);随访数据显示PD-1阳性与高国际预后指数(international prognostic index,IPI)评分有关(P=0.044),PD-L1阳性与高IPI评分及B症状的出现有关(P=0.007,P=0.001);Kaplan-Meier显示DLBCL中p65、PD-1、PD-L1、mPD-L1蛋白表达与患者OS相关,且p65高表达、PD-1阳性、PD-L1阳性、mPD-L1阳性患者OS相对较短(P值分别为0.038、0.015、0.028、0.010)。结论:DLBCL中PD-L1蛋白和mRNA上调表达与p65蛋白高表达相关;p65、PD-1、PD-L1、mPD-L1蛋白水平与患者OS较短有关,这些蛋白对临床及生存预后评估具有潜在价值。

AnnexinⅡ和NF-κBp65蛋白在胃腺癌组织中的表达意义

目的检测胃腺癌组织中AnnexinⅡ、NF-κBp65蛋白的表达,探讨两者在胃腺癌组织中的表达意义。方法用免疫组化S-P法检测33例胃腺癌组织、20例萎缩性胃炎组织和33例胃正常组织中AnnexinⅡ、NF-κBp65蛋白的表达情况,分析其与胃腺癌组织临床病理学特征的关系。结果1)AnnexinⅡ、NF-κBp65蛋白在胃腺癌组织中的阳性表达率分别为81.82%、75.76%,均显著高于萎缩性胃炎组织(45.00%、40.00%)(P<0.05)和胃正常组织(24.24%、15.15%)(P<0.05);2)AnnexinⅡ蛋白在伴有淋巴结转移的胃腺癌组织中的阳性表达率(95.00%)明显高于无淋巴结转移组织(61.54%)(P<0.05),NF-κBp65蛋白在低分化腺癌中的阳性表达率(93.75%)明显高于中高分化腺癌(58.82%)(P<0.05),NF-κBp65蛋白在伴有淋巴结转移的胃腺癌组织中的阳性表达率(90.00%)明显高于无淋巴结转移组织(53.85%)(P<0.05);3)AnnexinⅡ蛋白和NF-κBp65蛋白在胃腺癌组织中的表达呈正相关(r=0.467,P<0.05)。结论Annexin Ⅱ、NF-κBp65蛋白的高表达可能在胃腺癌的发生发展和浸润转移中起重要作用。

胃腺癌组织中p53和NF-κBp65蛋白表达的关系及意义

目的:探讨p53和NF-κBp65蛋白在胃腺癌中表达及与临床病理特征的关系。方法:采用免疫组化S-P法检测100例胃腺癌及42例胃腺癌淋巴结转移灶中p53和NF-kBp65蛋白表达水平。结果:胃腺癌组织中p53阳性表达率为53%。低分化胃腺癌组的阳性表达率明显高于中高分化胃腺癌组的阳性表达率(χ2=7.486,P<0.01);在有淋巴结转移的胃腺癌组中阳性的表达率明显高于无淋巴结转移的胃腺癌组(χ2=6.368,P<0.05);Ⅲ、Ⅳ期胃腺癌组的阳性表达率明显高于Ⅰ、Ⅱ期组的阳性表达率(χ2=13.864,P<0.01);胃底/贲门、胃体、胃窦/幽门胃腺癌之间的阳性表达率无显著差异性(χ2=2.529,P>0.05)。胃腺癌组织中NF-κBp65阳性表达率为58%。低分化、中高分化胃腺癌之间,有淋巴结转移、无淋巴结转移胃腺癌之间,Ⅲ、Ⅳ期和Ⅰ、Ⅱ期胃腺癌之间的阳性表达率均存在显著的差异性(χ2=4.624,P<0.05;χ2=3.876,P<0.05;χ2=7.436,P<0.01),而胃腺癌部位阳性表达率无显著差异性(χ2=3.306,P>0.05)。42例淋巴结转移灶中p53和NF-kBp65阳性表达率分别为30.95%和35.71%,均明显低于胃腺癌原发灶(χ2=4.861,P<0.05;χ2=8.052,P<0.05),p53和NF-kBp65在胃腺癌原发灶和淋巴结转移灶中的表达均呈正相关(c=0.505,P=0.001;c=0.316,P=0.041)。结论:p53的异常表达和NF-κBp65分别在胃腺癌的发展、侵袭和转移中起到重要作用;p53的和NF-κBp65在胃腺癌中协同表达,提示可能共同参与胃腺癌的增殖、侵袭和转移;联合检测胃腺癌中p53和NF-κBp65表达,可为临床诊断病情发展程度提供指导意义。

糖尿病大鼠体外循环术后认知功能变化及海马NF-κBp65蛋白的表达

目的探讨糖尿病大鼠体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)术后认知功能的变化。方法将SD大鼠随机分成非糖尿病CPB组(A组)及糖尿病CPB组(B组)。腹腔一次性注射1%STZ(溶于pH 4.2,0.1%mol/L柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液)60mg/kg建立糖尿病模型,糖尿病模型建立后第7周建立CPB模型。观察糖尿病大鼠CPB后认知功能的变化以及海马NF-κBp65蛋白的表达,抽取静脉血用ELISA法检测TNF-α及IL-10含量。结果各组大鼠术前认知功能测试无显著性差异(P>0.05),体外循环后5天各组差异显著,糖尿病CPB组(B组)电击次数明显增加(P<0.05,P<0.01),差别有显著性。B组大鼠脑组织海马NF-κBp65蛋白阳性细胞数明显增多,差异有统计学意义(P<0.01)。两组大鼠血清TNF-α及IL-10含量均有增高,B组大鼠增高更加明显,差异有统计学意义(P<0.05)。结论糖尿病可以引发并加重体外循环后大鼠脑内NF-κBp65蛋白过度表达,促使细胞因子释放,对脑组织产生损伤并出现认知功能障碍。糖尿病通过NF-κBp65蛋白途径参与糖尿病体外循环术后认知功能障碍的发生发展。

NF-κB p65蛋白在皮肤鳞状细胞癌中的表达分析

目的探讨NF-κB p65蛋白在皮肤鳞状细胞癌中的表达。方法选择贵州医科大学附属医院和赣南医学院第一附属医院2018年1月—2019年12月收治的50例皮肤鳞状细胞癌患者病理组织切片作为癌组织组,相对应癌旁组织50例进行对照。比较两组NF-κB p65蛋白的表达差异,并对NF-κB p65蛋白在皮肤鳞状细胞癌表达情况与患者性别、年龄、疾病临床分期和分化程度的关系进行分析。结果癌组织组的NF-κB p65蛋白表达阳性率高于癌旁组织组,差异有统计学意义(P<0.05)。患者不同性别、年龄情况下的NF-κB p65蛋白在皮肤鳞状细胞癌中的表达情况比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Ⅲ~Ⅳ期患者的NF-κB p65蛋白表达阳性率高于Ⅰ~Ⅱ期患者,差异有统计学意义(P<0.05)。低分化患者的NF-κB p65蛋白表达阳性率高于高中分化患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论NF-κB p65蛋白在皮肤鳞状细胞癌中的表达高于癌旁组织,且皮肤鳞状细胞癌的分期越高,则NF-κB p65蛋白表达越高;皮肤鳞状细胞癌的分化程度越低,则NF-κB p65蛋白表达越高。而NF-κB p65蛋白表达和患者的年龄、性别之间没有明显的关系。

黄芩汤对溃疡性结肠炎大鼠的保护作用及其影响NF-κB p65蛋白和相关炎症因子表达的机制研究

目的:研究黄芩汤对DSS所致溃疡性结肠炎大鼠细胞因子、NF-κBp65蛋白表达的影响,探讨其作用效果及机制。方法:运用右旋葡聚糖硫酸钠(Sodium dextran sulfate,DSS)制备UC大鼠模型,大鼠随机分成正常对照组、模型组、柳氮磺胺吡啶组和黄芩汤高、中、低剂量组。治疗7天后,取结肠组织,评估各组大鼠结肠长度、体重变化及组织损伤程度,采用ELISA法测定结肠组织中肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)、白介素-6(Interleukin6,IL-6)、白介素-1β(Interleukin1β,IL-1β)含量,运用Western blot法检测NF-κB p65蛋白表达情况。结果:模型组大鼠体重及结肠长度均明显低于正常组大鼠(P<0.01);血清中TNF-α、IL-6、IL-1β水平、结肠组织NF-κB p65蛋白表达量及组织损伤程度显著高于正常组(P<0.01)。与模型组大鼠相比,柳氮磺胺吡啶组大鼠上述指标均减轻,黄芩汤高、中剂量大鼠上述指标较模型组显著改善(P<0.01)。结论:黄芩汤能明显改善模型大鼠精神、体重、肠上皮损伤等,对溃疡性结肠炎的治疗作用可能是通过抑制NF-κB通路活化,进而下调促炎细胞因子TNF-α、IL-6、IL-1β表达实现的。

急性全脑缺血-再灌注后大鼠海马回中脑红蛋白与NF-κBp65表达的关系

目的通过探讨急性全脑缺血-再灌注（I／R）后大鼠海马回中脑红蛋白（NGB）与核因子-KappaBp65（NF-κB065）的表达关系，研究其在再灌注损伤后的作用。方法60只健康SD大鼠，随机分为假手术组（S0）30只和1／R组30只。观察I／R后3、6、12、24和48h苏木素一伊红（HE）染色海马CA1区存活锥体细胞数目；TUNEL原位末端标记法检测的锥体细胞凋亡率；免疫组织化学法检测锥体细胞中NF-κBp65、NGB的表达。结果NGB的表达随I／R时间的延长而下调，各时间点比较差异有统计学意义（P〈0．01），与SO组比较在3、6h下调不明显（P〉0．05），但到12h降低明显（P〈0．01）；锥体细胞凋亡率（AP）随再灌注时间的延长而提高，与NGB表达呈负相关（r=-0．813，P〈0．01）；NF-κBp65在胞核中的表达随1／R时间的延长而增强，各时间点问差异有统计学意义（P〈0．01），与SO组各相应观察时间点间差异有统计学意义（P〈0．01），与NGB的表达呈负相关（r=-0．767，P〈0．01）。结论随全脑I／R时间的延长，NGB在海马CAl区锥体细胞中的表达下调。NGB与抑制NF-κBp65的表达及抗神经元凋亡作用密切相关，因此短期内可能有一定的脑保护作用。

MEBT/MEBO对慢性难愈合创面NF-κB p65、IκBα、IKK及其磷酸化蛋白表达水平的影响

目的探讨创疡再生医疗技术(MEBT/MEBO)对慢性难愈合创面组织中核因子κB(NF-κB)p65、NF-κB抑制蛋白(IκB)、IκB激酶(IKK)及其磷酸化蛋白表达水平的影响。方法选取SPF级雄性Wistar大鼠90只适应性饲养1周后,按照随机数表法将其随机分为空白组、对照组、模型组、MEBO组和贝复新组,每组18只。空白组大鼠仅做备皮处理,对照组大鼠建立急性创面模型,模型组、MEBO组、贝复新组大鼠建立慢性难愈合创面模型。空白组大鼠备皮处皮肤及对照组、模型组大鼠创面采用生理盐水纱布换药处理,MEBO组大鼠创面采用湿润烧伤膏(MEBO)药纱换药处理,贝复新组大鼠创面采用重组牛碱性成纤维细胞生长因子换药处理,对比各组大鼠干预第3、7、14天创面愈合率、组织病理学变化,以及皮肤/创面组织中NF-κB p65、IκBα、IKK及p-NF-κB p65、p-IκBα、p-IKK蛋白表达水平。结果(1)干预第3、7天,各组大鼠创面愈合率均无明显差异(P均>0.05);干预第14天,模型组大鼠创面愈合率明显低于对照组、MEBO组(P均<0.05),其余各组间创面愈合率均无明显差异(P均>0.05)。(2)干预第7天,MEBO组、贝复新组大鼠创面组织中胶原纤维量均明显增加,可见大量成纤维细胞和新生毛细血管及少量毛囊结构生成;干预第14天,MEBO组、贝复新组大鼠创面组织中胶原纤维量明显多于模型组,可见整齐排列的毛细血管及成熟的毛囊、皮脂腺等组织,而模型组大鼠创面组织中仍可见少量炎症细胞浸润,但已有大量成纤维细胞生成。(3)干预第7、14天,空白组、对照组、MEBO组大鼠创面组织中NF-κB p65、IKK、p-NF-κB p65、p-IKK、p-IκBα蛋白表达水平均明显低于模型组(P均<0.05);干预第7天,MEBO组大鼠创面组织中NF-κB p65、IκBα蛋白表达水平均明显高于贝复新组(P均<0.05),IKK、p-NF-κB p65、p-IKK、p-IκBα蛋白表达水平均明显低于贝复新组(P均<0.05);干预第14天,MEBO组大鼠创面组织中IKK、IκBα蛋白表达水平均明显低于贝复新组(P均<0.05)。结论MEBT/MEBO促进慢性难愈合创面愈合的机制可能与创面组织中NF-κB p65、IκBα、IKK及其磷酸化蛋白的表达水平有关。

己酮可可碱抑制人卵巢癌HO-8910PM细胞AnnexinⅡ、NF-κB p65蛋白的表达

目的观察己酮可可碱(PTX)对体外培养的人卵巢癌细胞增殖及其AnnexinⅡ、NF-κB p65蛋白表达的影响。方法不同浓度PTX作用于人卵巢癌细胞HO-8910PM,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测其对HO-8910PM增殖的影响;采用免疫细胞化学方法检测PTX作用前后HO-8910PM细胞AnnexinⅡ、NF-κBp65蛋白表达的变化。结果 MTT结果显示:不同浓度PTX(0.25～2.0mg/ml)作用于HO-8910PM细胞12、24、48、72h,均可不同程度抑制细胞增殖,同一时间段各浓度PTX作用组与空白对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),各浓度PTX作用组组内两两相比差异有统计学意义(P<0.05)。PTX同一浓度组各时间点两两相比细胞增殖抑制率差异均有统计学意义(P<0.05)。免疫细胞化学显示:以不同浓度的PTX(0.5～2.0mg/ml)作用HO-8910PM细胞24、48、72h后,AnnexinⅡ蛋白较空白对照组有所降低;同一时间段内AnnexinⅡ蛋白表达呈浓度依赖性,差异有统计学意义(P<0.05),同一剂量组AnnexinⅡ蛋白表达呈时间依赖性,差异有统计学意义(P<0.05)。不同浓度PTX(0.5～2.0mg/ml)作用于HO-8910PM细胞24、48、72h后,NF-κBp65蛋白的表达均有所降低,也呈时间和浓度依赖性,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PTX可能通过抑制HO-8910PM卵巢癌细胞AnnexinⅡ、NF-κBp65蛋白表达而抑制其增殖。