糖耐康对db/db小鼠肝脏p38MAPK/NF-κBp65信号通路的影响

目的基于p38MAPK/NF-κBp65通路,探讨糖耐康对db/db小鼠肝脏的保护作用。方法16只db/db小鼠按体重、血糖随机分为糖耐康组和模型组,每组8只,另设同周龄db/m+小鼠8只为正常组,分别以3.24 g/kg溶液及等量超纯水灌胃。给药8周后,检测各组小鼠空腹血糖、血脂和肝功水平,HE染色观察肝组织病理改变,检测肝组织TNF-α、IL-6、IL-1β含量以及相关蛋白的表达。结果糖耐康组可显著降低肝重、空腹血糖、血清ALT、AST、TG、TC和FFA的水平,下调肝脏组织炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β和p-p38MAPK、核NF-κBp65的蛋白表达水平。病理显示糖耐康组可显著减少小鼠肝细胞的脂肪样变性。结论糖耐康可改善db/db小鼠的糖脂代谢紊乱,减少脂肪在肝脏中的蓄积以及相关炎症因子的表达,其作用机制可能通过调节p38MAPK/NF-κBp65信号通路有关。

藏茵陈对重症胰腺炎大鼠TLR9/MyD88/NF-κBp65信号通路的影响

目的:探讨藏茵陈对重症胰腺炎大鼠TLR9/MyD88/NF-κBp65信号通路的影响。方法:将大鼠分为假手术组、模型组及藏茵陈高、中、低剂量组,连续灌胃给药14天后造模。采用酶联免疫吸附法测定各组大鼠白细胞介素1(interleukin-1,IL-1)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)及Toll样受体(toll-like receptors 9,TLR9)、髓样分化因子(Myeloid differentiation primary response gene,MyD88)、核转录因子kappa B p65(nuclear factor kappa Bp65,NF-κBp65)的蛋白表达;实时荧光定量PCR测定IL-1、IL-6、TNF-α及TLR9、MyD88、NF-κBp65的基因表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠IL-1、IL-6、TNF-α及TLR9、MyD88、NF-κBp65的蛋白和基因表达均升高(P<0.05);与模型组比较,藏茵陈高剂量组能够降低大鼠胰腺组织IL-1、IL-6、TNF-α及TLR9、MyD88、NF-κBp65的蛋白和基因表达(P<0.05)。结论:藏茵陈能阻断TLR9/MyD88/NF-κBp65信号通路,减轻重症胰腺炎大鼠炎症反应。

哮喘丸抑制顽固性咳嗽及其对TLR4-MyD88-NF-κBp65信号通路的调控作用

目的:咳嗽变异性哮喘是顽固性咳嗽的主要病因。观察哮喘丸对咳嗽变异性哮喘大鼠的治疗效果,并进一步探讨其作用机制。方法:选用4%鸡蛋清白蛋白和2%的Al(OH)3共同致敏大鼠,建立咳嗽变异性哮喘大鼠模型。模型大鼠分别灌胃给予低、中、高剂量(0.9,1.8,3.6 g/kg)哮喘丸或孟鲁司特钠,每天1次,连续14 d,并于干预7,14 d后从各组分别随机取5,10只大鼠用于采集支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)和气管、肺组织。对BALF中的白细胞及嗜酸性粒细胞计数;采用ELISA试剂盒检测各组大鼠BALF中IFN-γ,IL-1β,TNF-α的水平;对各组大鼠肺组织行病理学检查,观察其组织形态学变化;采用蛋白质印迹法检测各组大鼠肺组织中TLR4,MyD88,NF-κBp65和p-p65的蛋白质表达。结果:哮喘丸能明显减少变异性哮喘模型大鼠BALF中白细胞及嗜酸性粒细胞的数目(P<0.05或P<0.01),并能改善气管及支气管黏膜上皮增生和肺组织炎症细胞浸润程度;干预14 d,与模型对照组比较,哮喘丸高剂量组IFN-γ水平明显升高(P<0.01),IL-1β和TNF-α水平明显降低(均P<0.05),大鼠肺组织TLR4,MyD88,p-p65及p65的蛋白质表达水平均明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论:哮喘丸对大鼠顽固性咳嗽具有治疗作用,其作用机制可能与调控气道TLR4-MyD88-NF-κBp65信号通路,调节炎症和免疫反应有关。

NF-κBp65信号通路在子宫内膜异位症发生中作用的研究进展

子宫内膜异位症(endometriosis,EMS)是妇科最常见的疾病之一,发病率呈逐年上升趋势,是引起痛经、月经不调、不孕症等的重要原因,严重影响妇女的身心健康和生活质量。目前对其机制包括核转录因子κB(NF-κBp65)在EMS中作用机制进行了不少研究,但仍未完全阐明且缺乏有效的治疗方法。该文对NF-κBp65在EMS中作用机制进行综述,以期为NF-κBp65的研究及应用上升到新的领域。

TPPU通过抑制p38 MAPK/NF-κB p65信号通路对阿尔茨海默病细胞模型的抗神经炎症作用

目的在Aβ25-35诱导的阿尔茨海默病(AD)小胶质细胞(BV2细胞)模型中,采用对BV2细胞进行干预,探讨1-三氟甲氧基苯基-3-(1-丙酰哌啶-4-基)脲(TPPU),TPPU是否具有抗神经炎症作用及其可能的抗炎机制。方法利用Aβ25-35作用BV2细胞构建AD细胞模型,CCK8法分别检测不同浓度Aβ25-35和TPPU处理对BV2细胞活性的影响,最终选择20μM Aβ25-35诱导BV2细胞48 h作为造模组,0.1μM TPPU预处理BV2细胞3h,20μM Aβ25-35诱导BV2细胞48 h作为治疗组进行后续实验。利用ELISA法检测丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,倒置荧光显微镜检测活性氧(ROS)产生,real-time PCR检测小胶质细胞M1表型促炎因子肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素-1β(IL-1β)基因mRNA表达水平和检测M2表型抗炎因子IL-10及标志物Arg1基因mRNA表达水平。通过Western blot法检测细胞中炎症因子TNF-α蛋白及p38 MAPK/NF-κB p65信号通路相关蛋白表达水平。结果与对照组相比,模型组BV2细胞活力降低(P<0.05),ROS显著升高(P<0.05),MDA含量显著增多(P<0.05),SOD活性显著下降(P<0.05),TNF mRNA、IL-1βmRNA表达水平明显上调(P<0.05),IL-10 mRNA、Arg1 mRNA表达水平明显下调(P<0.05),TNF-α蛋白及p-p38 MAPK、p-NF-κB p65蛋白表达明显上调(P<0.05)。与模型组相比,经TPPU预处理后,BV2细胞活力明显升高(P<0.05),ROS显著降低(P<0.05),MDA含量显著下降(P<0.05),SOD活性显著提高(P<0.05),TNF mRNA、IL-1βmRNA表达水平明显下调(P<0.05),IL-10 mRNA、Arg1 mRNA表达水平明显上调(P<0.05),TNF-α蛋白及p-p38 MAPK、p-NF-κB p65蛋白表达明显下调(P<0.05)。结论TPPU抑制Aβ25-35诱导的BV2细胞炎症反应,促进BV2细胞由M1表型向M2表型极化,其机制可能与抑制p38MAPK/NF-κB p65信号通路激活有关。

岩藻多糖调控G3BP1/NF-κB信号通路影响胰腺癌细胞增殖

目的:探讨岩藻多糖对胰腺癌的影响,并分析其机制。方法:MTT法分析细胞增殖抑制率,GEPIA数据库分析G3BP1在胰腺癌组织中的表达水平及与生存率的关系。qRT-PCR分析GTP酶激活蛋白结合蛋白1(Ras-GTPase-activating protein binding proteins,G3BP1)水平,Western blot法分析p-NF-κBp65、NF-κBp65和IκB-α水平。免疫共沉淀检测G3BP1与p-NF-κBp65之间相互作用。敲低或G3BP1过表达,观察其对岩藻多糖调控细胞增殖以及NF-κB信号通路的影响。裸鼠成瘤实验验证岩藻多糖对裸鼠体内瘤体的瘤重、瘤体积及G3BP1、p-NF-κBp65、NF-κBp65和IκBα水平的影响。结果:1~32μg/mL岩藻多糖抑制capan-1细胞增殖,岩藻多糖48 h IC_(50)为7.729μg/mL。G3BP1在胰腺癌肿瘤组织中的表达明显高于正常组织,G3BP1高表达患者的生存率低于G3BP1低表达患者。2、4、8μg/mL岩藻多糖能下调G3BP1、p-NF-κBp65,上调IκBα水平。Co-IP实验发现G3BP1与p-NF-κBp65相互结合,并且岩藻多糖作用后结合能力降低。敲低G3BP1能促进岩藻多糖抑制capan-1细胞增殖,下调G3BP1、p-NF-κBp65,上调IκBα水平(P<0.05);G3BP过表达能下调岩藻多糖抑制capan-1细胞增殖效果,上调G3BP1、p-NF-κBp65,下调IκBα水平(P<0.05)。体内实验显示,敲低G3BP1能促进岩藻多糖减少瘤体体积、瘤体质量,下调瘤体G3BP1、p-NF-κBp65,上调IκBα水平(P<0.05)。结论:岩藻多糖抑制capan-1细胞增殖,对体内移植瘤抑瘤效果显著,其机制与调控G3BP1/NF-κB信号通路有关。

乌梅丸及其拆方对溃疡性结肠炎大鼠炎性因子及TLR9/MyD88/NF-κBp65信号通路的影响

目的:探讨乌梅丸及其拆方对溃疡性结肠炎(UC)大鼠炎性因子及TLR9/My D88/NF-κBp65信号通路的影响,并分析其作用机制。方法:大鼠随机分为正常组、模型组、柳氮磺吡啶组、乌梅丸组、乌梅丸辛开苦降组、乌梅丸辛开组、乌梅丸苦降组、乌梅丸补益组。三硝基苯磺酸/乙醇法造模2d后给药4周,观察大鼠疾病活动指数(DAI)及结肠黏膜损伤程度,ELISA法检测结肠黏膜白介素-4(IL-4)、干扰素-γ(INF-γ)水平,免疫组化法观察Toll样受体9(TLR9)、髓样分化因子88(My D88)、细胞核因子κBp65(NF-κBp65)的表达。结果:乌梅丸组、乌梅丸辛开苦降组均能显著升高IL-4,降低INF-γ水平,显著减少结肠黏膜TLR9、My D88、NF-κBp65的蛋白表达(P<0.01),且效果优于其它乌梅丸拆方组。结论:乌梅丸组、乌梅丸辛开苦降组对UC大鼠结肠黏膜炎症有较好的缓解作用,其作用机制可能与调节炎性因子平衡,抑制TLR9/My D88/NF-κBp65信号通路的异常活化有关;辛开苦降、寒温并施的配伍方式可能是乌梅丸治疗UC的内在机制之一。

木瓜总三萜对DSS诱导溃疡性结肠炎小鼠PPARγ/SIRT1/NF-κBp65信号通路及黏膜屏障的影响

观察木瓜总三萜对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导溃疡性结肠炎小鼠PPARγ/SIRT1/NF-κBp65信号通路及结肠黏膜屏障的影响。将C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、木瓜总三萜(50,100 mg·kg-1)组和柳氮磺吡啶(250 mg·kg-1)组。实验小鼠通过自由饮用2.5%DSS诱导溃疡性结肠炎(UC)模型,在自由饮用2.5%DSS前3 d,各给药组灌胃给予相应的药物,正常组和模型组给予等体积的0.5%羧甲基纤维素钠溶液,每天1次,连续10 d。每天观察实验小鼠一般状况、记录疾病活动指数(DAI)。末次给药次日,取血,进行血液中TNF-α,IL-1β,IL-6,IFN-γ,IL-4,IL-10含量检测;取结肠进行长度测量、结肠黏膜损伤指数(CMDI)计算、MPO活性检测和组织形态学分析;实时定量PCR法检测结肠组织中E-cadherin,occludin,MUC2,TFF3 mRNA表达,Western blot法检测结肠组织中SIRT1,IKKβ,p-IKKβ,IκBα,p-IκBα及胞浆和胞核中PPARγ,NF-κBp65蛋白表达。结果显示,木瓜总三萜(50,100 mg·kg-1)可显著改善DSS诱导的UC模型小鼠一般状况,降低DAI,CMDI和组织病理学评分,增加结肠长度,减轻结肠黏膜溃疡、糜烂及炎性浸润,恢复黏膜屏障的正常功能,降低血液中促炎因子TNF-α,IL-1β,IL-6,IFN-γ含量,升高抗炎因子IL-4,IL-10含量,抑制结肠组织中MPO活性,上调结肠组织中黏膜屏障保护因子E-cadherin,occludin,MUC2,TFF3 mRNA表达,下调结肠组织胞浆中PPARγ,组织中p-IKKβ,p-IκBα和胞核中NF-κBp65蛋白表达,降低p-IKKβ/IKKβ和p-IκBα/IκBα的比值,上调胞核中PPARγ,组织中SIRT1和胞浆中NF-κBp65蛋白表达(P<0.05或P<0.01),且随着剂量的增加,其作用效果更加明显。表明木瓜总三萜对DSS诱导的小鼠UC有显著治疗作用,其作用机制可能与其调节PPARγ/SIRT1/NF-κBp65信号通路、抑制促炎因子生成、上调肠黏膜屏障保护因子的蛋白表达有关。

NF-κB信号通路与肝纤维化的研究进展

核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)是一类广泛存在的、调控着多种基因转录的重要转录调节因子。NF-κB是细胞中重要的转录调节因子,通常以p50-p65异二聚体的形式与其抑制性蛋白结合而呈非活化状态。NF-κB的不适当表达和激活与各种疾病的发生密切相关。因此,以NF-κB为治疗靶点的药物研究可能为预防和治疗这些疾病提供新思路。本文就NF-κB信号通路与肝纤维化发生、发展及其与肝星形细胞之间关系的研究进展做一综述。

基于NF-κB p65信号通路探讨金汁修复受损的小鼠肠黏膜上皮细胞的机制

目的观察金汁含药血清对脂多糖(LPS)诱导的小鼠肠黏膜上皮细胞自噬相关蛋白及NF-κB p65信号通路的影响,探讨其对肠黏膜上皮细胞的保护作用机制。方法选择雄性BALB/c小鼠制备空白血清和不同浓度(10%,15%,20%)的金汁含药血清。将LPS诱导的体外培养的小鼠肠黏膜上皮细胞随机分成空白组、模型组(LPS+空白血清)及金汁低含药血清组(LPS+10%金汁含药血清)、金汁中含药血清组(LPS+15%金汁含药血清)、金汁高含药血清组(LPS+20%金汁含药血清),各组干预24 h后,用透射电镜观察肠黏膜上皮细胞自噬情况,q-PCR法检测细胞中LC3A、LC3B mRNA表达情况,Western blot法检测细胞中LC3Ⅰ/LC3Ⅱ、p65、p-p65表达情况,ELISA法检测细胞上清液中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量。结果与空白组比较,模型组细胞内的双层膜结构明显减少,细胞中LC3A、LC3B mRNA相对表达量及LC3Ⅰ/LC3Ⅱ均明显降低(P均<0.05),p65、p-p65相对表达量及IL-1β、IL-6、TNF-α含量均明显升高(P均<0.05)。与模型组比较,金汁高含药血清组自噬体明显增多;金汁高含药血清组LC3A mRNA相对表达量和金汁低、中、高含药血清组LC3B mRNA相对表达量及LC3Ⅰ/LC3Ⅱ均明显升高(P均<0.05),金汁低、中、高含药血清组细胞中p65、p-p65相对表达量和金汁中、高含药血清组IL-1β、IL-6、TNF-α含量均明显降低(P均<0.05)。结论金汁含药血清可通过抑制NF-κB p65信号通路,促进肠黏膜上皮细胞自噬而修复受损的小鼠肠黏膜上皮细胞。

基于NF-κBp65通路分析散瘀通络汤治疗高血压脑出血的疗效

目的基于核因子-κBp65(NF-κBp65)通路分析散瘀通络汤治疗高血压脑出血的疗效。方法将2020年10月~2022年10月开封市人民医院神经外科收治的86例高血压脑出血患者纳入本研究,遵循随机双盲法原则分为研究组和对照组,均43例。对照组采用常规西医治疗方案,研究组在此基础上辅以散瘀通络汤。比较2组临床疗效、血肿体积、水肿体积、神经缺损状态[美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)]、NF-κBp65通路相关因子[NF-κBp65、白细胞介素(IL)-17、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)]。结果研究组治疗总有效率93.02%较对照组76.74%高(P<0.05)。研究组治疗后血肿体积、水肿体积、NIHSS评分与血清NF-κBp65、IL-6、IL-17、TNF-α水平均低于对照组(P<0.05)。结论散瘀通络汤治疗高血压脑出血可有效提高治疗效果,改善血肿、水肿和神经缺损状态,其作用机制可能与调控NF-κBp65通路相关因子表达有关。

GPR120对脂多糖诱导的胰岛β细胞炎症损伤及TLR4/MyD88/NF-κB p65信号通路的影响

目的:探讨过表达G蛋白偶联受体120(GPR120)对脂多糖(LPS)诱导的胰岛β细胞炎症损伤及Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子(MyD88)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的影响。方法:将MIN6细胞分为control组(细胞用无血清培养液进行培养)、LPS组(细胞用含10μg·ml^(-1) LPS的培养液进行培养)、LPS+control组(感染阴性对照慢病毒的细胞用10μg·ml^(-1) LPS培养液处理)、LPS+GPR120组(感染pcDNA3.1-GPR120慢病毒的细胞用10μg·ml^(-1) LPS培养液处理)4组。CCK-8法检测细胞增殖;Annexin-V-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡;ELISA检测IL-6、IL-1β和TNF-α水平;蛋白质印迹法检测GPR120、TLR4、MyD88、NF-κB p65蛋白的表达。结果:LPS组GPR120蛋白相对表达量明显低于control组(P<0.05);LPS+GPR120组GPR120蛋白相对表达量明显高于LPS+control组(P<0.05)。LPS组细胞增殖活力明显低于control组(P<0.001);LPS+GPR120组细胞增殖活力明显高于LPS+control组(P<0.001)。LPS组细胞凋亡率明显高于control组(P<0.001);LPS+GPR120组细胞凋亡率明显低于LPS+control组(P<0.001)。LPS组细胞上清液中IL-6、IL-1β和TNF-α水平均高于control组(均P<0.001);LPS+GPR120组IL-6、IL-1β和TNF-α水平均低于LPS+control组(均P<0.001)。LPS组细胞TLR4、MyD88、NF-κB p65蛋白相对表达量均高于control组(均P<0.001),LPS+GPR120组TLR4、MyD88、NF-κB p65相对表达量均低于LPS+control组(均P<0.001)。结论:GPR120可能通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB p65信号通路在LPS诱导的胰岛β细胞炎症损伤中发挥保护作用。

益心附葶饮对主动脉缩窄大鼠心肌纤维化及p38MAPK/NF-κB p65信号通路的影响

目的:研究益心附葶饮对腹主动脉缩窄致心力衰竭大鼠心肌纤维化的改善作用及机制。方法:采用腹主动脉缩窄法构建心衰大鼠模型,将造模成功的30只大鼠随机分为模型组和中药组,另设15只穿线不结扎的假手术组。中药组给予益心附葶饮灌胃3.5 g/(kg•d),假手术组和模型组给予等体积蒸馏水灌胃。喂养8周后取材,采用Masson染色法测定心肌组织胶原蛋白分布及含量。Western blot法检测心肌组织中1型胶原蛋白(Collagen 1)、Ⅲ型胶原蛋白(Collagen 3)、p38MAPK、NF-κB p65蛋白的表达水平。结果:益心附葶饮可降低心衰大鼠心肌纤维组织表达面积。与假手术组比较,模型组大鼠心脏组织Collagen 1、Collagen 3、p38MAPK、NF-κB p65蛋白表达升高,差异有统计学意义(均P<0.05)。中药组Collagen 1、Collagen 3、NF-κB p65蛋白表达低于模型组,差异有统计学意义(均P<0.05)。中药组与模型组p38MAPK蛋白表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:益心附葶饮通过下调Collagen 1、Collagen 3蛋白表达和抑制NF-κB p65信号通路介导的炎症反应,抑制压力性心力衰竭大鼠心肌纤维化。

唐草片对大鼠肝纤维化及NF-κB P65/IκBα信号通路的影响

目的:研究唐草片对肝纤维化大鼠的保护作用并探讨其对NF-κB P65/IκBα信号通路的影响。方法:采用四氯化碳(CCl)联合猪血清的方法建立大鼠肝纤维化模型,72只SD大鼠按体重随机分为正常组、模型组、秋水仙碱组(0.12 mg/kg)、唐草片高中低剂量组(2,1,0.5 g/kg)。造摸第5周后,秋水仙碱组大鼠和唐草片组大鼠以体重按照剂量灌胃相应的药物,正常组大鼠和模型组大鼠灌胃同等容积的纯净水,持续8周后处死,取血和肝脏,苏木精-伊红和马松染色观察肝脏组织病理学改变;免疫组化染色法检测肝组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA);全自动生化仪检测血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT),Elisa法检测透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原蛋白(PCⅢ)、Ⅳ型胶原蛋白(Ⅳ-C)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平;Western blot检测各组肝组织核转录因子(NF-κB P65)、核因子κB抑制蛋白(IκBα)。结果:与正常组比较,模型组大鼠肝组织出现明显肝纤维化,肝板结构排列紊乱,肝组织α-SMA,AST、ALT、HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C、TNF-α、IL-6表达水平显著升高(P<0.01);与模型组大鼠比较,唐草片组大鼠及秋水仙碱组大鼠可降低AST、ALT、HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C、TNF-α、IL-6的水平(P<0.05,P<0.01),肝组织病理学明显改善,同时可抑制NF-κB P65蛋白的表达,促进IκBα蛋白的表达。结论:唐草片对CCl4联合猪血清诱导的肝纤维化大鼠有保护作用,其作用机制可能与调控NF-κB P65/IκBα信号通路有关。

归原疏筋合剂治疗腰椎间盘突出症的临床疗效及对血清NF-κB p65表达水平的影响

【目的】探究归原疏筋合剂治疗腰椎间盘突出症(LDH)患者的临床疗效及其可能的作用机制。【方法】将68例气滞血瘀证LDH患者随机分为试验组和对照组,每组各34例。对照组给予塞来昔布及甲钴胺片内服治疗,试验组在对照组的基础上加用归原疏筋合剂内服治疗,疗程为4周。观察2组患者治疗前后腰痛和下肢痛视觉模拟量表(VAS)评分、Oswestry功能障碍指数(ODI)评分、改良日本骨科协会(JOA)评分以及血清炎症因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)]和血清核因子κB p65(NF-κB p65)水平的变化情况,并评价2组患者的临床疗效和用药安全性。【结果】(1)脱落情况方面,研究过程中,试验组脱落1例,对照组脱落3例,最终试验组33例、对照组31例纳入疗效统计。(2)疗效方面,治疗4周后,试验组的总有效率为96.97%(32/33),对照组为87.10%(27/31);组间比较(秩和检验),试验组的疗效明显优于对照组(P<0.05)。(3)量表评分方面,治疗后,2组患者的腰痛及下肢痛VAS评分、ODI评分均较治疗前降低(P<0.05或P<0.01),改良JOA评分均较治疗前升高(P<0.01),且试验组对腰痛及下肢痛VAS评分、ODI评分的降低幅度及对改良JOA评分的升高幅度均明显优于对照组(P<0.05或P<0.01)。(4)血清炎症相关指标方面,治疗后,2组患者血清TNF-α、IL-6、IL-1β、NF-κB p65水平均较治疗前降低(P<0.01),且试验组的降低幅度均明显优于对照组(P<0.01)。(5)安全性方面,治疗过程中,试验组的不良事件发生率为2.94%(1/34),对照组为8.82%(3/34),组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。【结论】归原疏筋合剂治疗气滞血瘀证LDH患者疗效确切,可有效缓解患者疼痛症状,改善患者腰椎功能,降低血清炎症因子及NF-κB p65表达水平,其作用机制可能与降低炎症因子水平,抑制NF-κB信号通路的活化有关。

人参皂苷Rg1通过TLR4/MyD88/NF-κB p65通路调控小鼠急性肾损伤诱导的急性肝损伤的机制研究

目的:探讨人参皂苷Rg1(GRg1)对小鼠急性肾损伤所诱导的急性肝损伤的保护作用及其调控机制。方法:昆明小鼠随机分为假手术(sham)组、模型(model)组、GRg1组和necrostatin-1 (Nec-1)组,每组10只。制备急性肾损伤模型,24 h后收集血液。采用生化试剂盒检测小鼠血清肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)、天冬氨酸转氨酶(AST)、谷氨酸转氨酶(ALT)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平。采用ELISA法检测炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、IL-8和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达。HE染色观察组织病理学改变,采用免疫组织化学和Western blot法检测TLR4、MyD88和NF-κB p65蛋白的表达水平。结果:与假手术组比较,model组小鼠出现明显的肝细胞坏死、肝肾功能减退,血清中SCr、BUN、AST和ALT均显著升高(P<0.01),MDA含量显著上升,SOD活性显著降低(P<0.01),且血清中炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α含量显著升高(P<0.01),TLR4、MyD88和NF-κB p65蛋白表达显著增高(P<0.01);与model组相比,GRg1和Nec-1组处理后小鼠肝细胞坏死减轻,肝肾功能显著改善(P<0.01),血清中SCr、BUN、AST和ALT水平显著降低(P<0.01),MDA含量显著降低,SOD活性显著增高(P<0.01),血清中炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α含量显著降低(P<0.01),TLR4、MyD88和NF-κB p65蛋白表达显著降低(P<0.01);GRg1组和Nec-1组小鼠上述指标比较差异无统计学意义。结论:GRg1可以改善小鼠急性肾损伤所致急性肝损伤的肝肾功能,其机制可能与抑制TLR4/MyD88/NF-κB p65信号通路有关。

补阳还五汤通过SIRT1/NF-κB p65信号通路减轻大鼠脑缺血/再灌注损伤

目的:探讨补阳还五汤(BYHWD)通过调控沉默信息调节因子1(SIRT1)/核因子κB p65(NF-κB p65)炎症信号通路减轻大鼠脑缺血/再灌注损伤(CIRI)的作用机制。方法:SD大鼠随机分为假手术(sham)组、模型组(MCAO/R组)、BYHWD组、SIRT1抑制剂组(EX527组)和BYHWD+EX527组,每组15只。除sham组外,其余各组均构建大脑中动脉栓塞(MCAO)模型缺血2 h再灌注3 d并给予药物干预。采用ZeaLonga评分标准进行神经功能缺损评分;TTC染色检测脑梗死体积百分比;HE染色观察脑组织病理学变化;Westernblot检测SIRT1、乙酰化核因子κB p65(AcNF-κB p65)、NF-κB p65、和白细胞介素6(IL-6)蛋白的相对表达量;免疫荧光检测NF-κB p65入核表达水平;免疫组化染色检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达水平。结果:与sham组相比,MCAO/R组神经功能学评分升高(P<0.05);脑梗死体积百分比增加(P<0.05);缺血侧脑组织皮质区病理损伤严重,神经细胞排列紊乱、细胞核固缩、碎裂;SIRT1蛋白表达减少,AcNF-κB p65/NF-κB p65和IL-6蛋白表达升高(P<0.05);免疫荧光显示细胞核内NF-κB p65表达增多(P<0.05);免疫组化显示TNF-α阳性表达升高(P<0.05)。与MCAO/R组相比,BYHWD组神经功能学评分降低(P<0.05);脑梗死体积百分比减小(P<0.05);缺血侧脑组织皮质区病理损伤减轻,神经细胞形态有所恢复;SIRT1蛋白表达增加,AcNF-κB p65/NF-κB p65和IL-6蛋白表达减少(P<0.05);免疫荧光显示细胞核内NF-κB p65表达减少(P<0.05);免疫组化显示TNF-α阳性表达减少(P<0.05)。SIRT1抑制剂EX527能降低SIRT1的表达,抑制脱乙酰酶活性,削弱了BYHWD通过激活SIRT1后对CIRI产生的上述作用。结论:BYHWD可有效减轻大鼠CIRI,激活SIRT1/NF-κB p65信号通路进而抑制炎症反应是其发挥作用的机制之一。

大黄牡丹汤对炎症相关性结直肠癌的治疗作用及对TLR4/My D88/NF-κB-p65信号通路的影响

目的:探讨大黄牡丹汤(DHMD)对炎症相关性结直肠癌(CAC)的治疗作用,以及对TLR4/MyD88/NF-κB-p65通路的影响。方法:构建小鼠CAC模型,给予DHMD处理,对小鼠一般状况进行观察和评估;ELISA检测小鼠IL-1β、IL-6、IL-10和TNF-α表达,Western blot和免疫组化染色法检测小鼠结直肠组织TLR4、MyD88和NF-κB-p65表达。结果:与模型组相比,DHMD干预后,小鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α水平降低,而IL-10水平升高,且小鼠结直肠中TLR4、MyD88、NF-κB-p65表达降低。结论:DHMD可改善炎症反应、减轻CAC症状,抑制结肠癌发生,且对TLR4/MyD88/NF-κB-p65信号通路激活具有调节作用。

基于TLR4/NF-κB信号通路探讨重组BPI对肺炎支原体感染小鼠肺炎症反应的影响

目的探讨重组BPI对肺炎支原体感染小鼠肺炎症反应及TLR4/NF-κB信号通路的影响。方法67只BALB/c小鼠随机分为正常对照组、肺炎支原体(MP)模型组和重组BPI蛋白高、中、低剂量组。除正常对照组外对其余小鼠连续4 d鼻滴1×10^(6) CCU/mL(100μL)的MP菌液建立MP模型。造模成功后,重组BPI蛋白各治疗组小鼠腰静脉注射1.5 mL浓度分别为0.45、0.3和0.15 mol/L的重组BPI蛋白溶液,空白对照组和模型组腰静脉给予等量生理盐水注射,所有小鼠均采用不同方法干预4周。末次给药收集小鼠肺组织和血清,计算小鼠肺指数和干湿比;HE染色法观察各组小鼠肺组织病理改变并进行肺组织病理评分;ELISA法检测血清炎症因子水平;RT-PCR检测肺组织中mRNA表达;Western blot检测肺组织蛋白表达。结果与MP模型组比较,重组BPI蛋白各组小鼠肺指数降低(P<0.05),干湿比增加(P<0.05),血清中TNF-α、IL-1β、IL-6水平降低(P<0.05);与MP模型组比较,重组BPI各组小鼠肺组织TLR4、NF-κB p65 mRNA及蛋白表达明显下调(P<0.05),I-κBαmRNA及蛋白表达明显上调(P<0.05)。结论重组BPI蛋白可能通过调控TLR/NF-κB信号通路抑制TNF-α、IL-1β、IL-6的产生,从而起到减轻小鼠肺部炎症反应的作用。

干扰素-γ水平影响系统性红斑狼疮小鼠体TLR9/MyD88/NF-κB p65信号通路的初步研究

目的探究干扰素-γ(IFN-γ)水平对系统性红斑狼疮(SLE)小鼠体内Toll样受体9/髓样分化因子88/核因子κB亚基p65(TLR9/MyD88/NF-κB p65)信号通路的影响。方法将30只SLE MRL/lpr小鼠随机分为模型组、空质粒组和IFN-γsiRNA组,空质粒组和IFN-γsiRNA组采用活体电转染技术分别转入空质粒、IFN-γsiRNA质粒,并鉴定转染后SLE小鼠外周血IFN-γ的表达;另取10只C57BL/6小鼠作为正常组,ELISA检测IL-6、TNF-α和自身抗体[抗双链DNA(ds-DNA)抗体、抗组蛋白抗体(IgM)]水平,观察各组小鼠肾组织病理变化及肾功能情况[血清肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)],Western blot检测肾组织中TLR9、MyD88、NF-κB p65蛋白表达。结果与正常组比较,模型组血清IFN-γ、IL-6、TNF-α、抗ds-DNA抗体、抗IgM抗体、SCr、BUN、肾组织TLR9、MyD88、NF-κB p65磷酸化水平显著升高(P<0.05);与模型组比较,IFN-γsiRNA组IFN-γ、IL-6、TNF-α、抗ds-DNA抗体、抗IgM抗体、SCr、BUN、肾组织TLR9、MyD88、NF-κB p65磷酸化水平显著降低(P<0.05);但空质粒组与模型组上述指标的比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论转染IFN-γsiRNA质粒后,可减轻SLE小鼠炎症反应与肾损伤,可能与抑制TLR9/MyD88/NF-κB p65信号通路有关。