NF-к B/Rel转录因子与白血病

NF-кB/Rel蛋白家族是一类参与炎症、免疫、应激、细胞生长及癌症发生等诸多生物学过程中基因调节的重要转录因子。已经发现许多癌症的发生与之相关。本文综述了NF-к B/Rel蛋白在白血病发生及治疗方面的研究进展。NF-кB是正常髓系骨髓细胞转化的调节因子。人类T细胞性白血病病毒Ⅰ型编码的Tax蛋白能通过激活NF-кB而参与人类成人T细胞白血病的发生。一些染色体易位可能影响NF-кB/IкB之间的平衡,从而参与白血病及淋巴瘤的发生。一系列与NF-кB/Rel转录因子相关的白血病化疗药物正在探索之中。

GATA 1和BCL-xL在骨髓增生异常综合征患者外周血单个核细胞中的表达研究

目的:探讨珠蛋白转录因子1(globin transcription factor 1,GATA 1)和B细胞淋巴瘤因子(B-cell leukemia/lymphoma xL,BCL-xL)在骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndromes,MDS)患者外周血单个核细胞中的表达以及Notch信号通路相关机制。方法:以36例MDS患者为MDS组,20例定期献血的健康人为对照组。采用实时荧光定量PCR法检测外周血单个核细胞中GATA 1、BCL-xL、Notch 1及其下游分子HES 1和Herp 2的表达,分析GATA 1和BCL-xL的表达与MDS患者血小板计数和血红蛋白的相关性,采用流式细胞术分析外周血单个核细胞的凋亡。结果:与对照组比较,MDS患者外周血单个核细胞中GATA 1和BCL-xL mRNA表达量明显降低(P<0.05),而Notch 1、HES 1、Herp 2 mRNA表达量显著增加(P<0.05)。GATA 1 mRNA表达水平与MDS患者血小板计数呈正相关(r=0.7575,P=0.0181)。与对照组比较,凋亡细胞比例增高(P<0.01)。结论:MDS患者GATA 1和BCL-xL mRNA表达下降,Notch信号通路下游因子HES 1和Herp 2增高,可能是导致细胞凋亡显著增加的原因。

JMJD2B和HPIP在宫颈癌组织中的表达及其与临床预后的关系

目的分析JMJD2B与造血前B细胞白血病转录因子相互作用蛋白(HPIP)在宫颈癌组织内的表达以及与患者预后的关系。方法选取75例宫颈癌患者,术中采集其癌组织与癌旁正常组织(距肿瘤组织边缘≥3 cm)分别纳入观察组与对照组,以免疫组化法测定两者的JMJD2B、HPIP表达差异。收集患者的年龄等一般资料,分析JMJD2B、HPIP表达与患者临床病理特征之间的关系。随访1年,分析JMJD2B、HPIP表达与宫颈癌患者预后的关系。结果观察组的JMJD2B、HPIP阳性表达率分别为53.33%(40/75)、45.33%(34/75),高于对照组的24.00%(18/75)、20.00%(15/75),差异均有统计学意义(P<0.05)。JMJD2B、HPIP阳性表达与宫颈癌患者的年龄、病理类型、肿瘤分期无关,与患者的肿瘤直径、分化程度、淋巴结转移、浸润程度有关(P<0.05);JMJD2B、HPIP阳性表达患者的1年生存率分别为65.00%(26/40)、55.88%(19/34),均低于阴性表达患者的85.71%(30/35)、90.24%(37/41),差异有统计学意义(P<0.05)。结论JMJD2B、HPIP在宫颈癌患者的癌组织内呈高表达,且与患者的肿瘤直径、分化程度、淋巴结转移、浸润程度有关。两者表达阳性率越高,患者生存率越低。

miR-181b对肝癌HepG2细胞增殖以及Bcl-2和SP1蛋白表达的影响

目的:研究miR-181b对人肝癌G2细胞(HepG2)中B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和转录因子SP1蛋白及mRNA表达的调节作用,探讨miR-181b对HepG2细胞增殖的影响。方法:用人工合成的miR-181b相应的双链互补DNA片段,插入miRNASelectTMpEGP-miR载体中,经测序鉴定后克隆microRNA的高表达质粒;用脂质体将miR-181b高表达质粒转染进HepG2细胞,经嘌呤霉素筛选获得阳性克隆。用RT-PCR技术和Western blotting方法分别检测该细胞系中Bcl-2和SP1的mRNA和蛋白表达情况。用MTT法检测HepG2细胞增殖的变化情况。结果:Western blotting结果显示miR-181b能够减少Bcl-2和SP1蛋白质的表达,RT-PCR分析显示Bcl-2和SP1 mRNA表达减少。MTT显示转染后细胞的生长速率比未转染的细胞明显减慢。结论:miR-181b抑制HepG2肝癌细胞增殖,提示可能与其下调Bcl-2和SP1的表达有关。

敲低造血前B细胞白血病转录因子相互作用蛋白对胰腺癌细胞增殖、周期和凋亡的影响

目的探讨造血前B细胞白血病转录因子相互作用蛋白(HPIP)对胰腺癌细胞增殖、周期及凋亡的影响。方法采用免疫组织化学染色方法检测胰腺癌组织及对应癌旁组织中HPIP的表达水平,小干扰RNA瞬时转染的方法敲低胰腺癌细胞中HPIP的表达水平,细胞计数试剂盒-8实验、克隆形成实验、流式细胞术检测敲低HPIP对细胞增殖、周期及凋亡的影响,免疫印迹法检测敲低HPIP对于cyclin D1、caspase 7和cleaved caspase 7表达水平的影响。结果胰腺癌组织中HPIP的表达明显高于癌旁组织(Z=-2.060,P=0.039)。敲低HPIP表达水平后,在24 h起MIA PaCa-2和BxPC-3细胞的生长受到抑制(P均<0.05);MIA PaCa-2(t=4.706,P=0.009)和BxPC-3细胞(t=9.514,P=0.000)形成的阳性克隆数明显减少;MIA PaCa-2(t=7.642,P=0.001)及BxPC-3细胞(t=2.714,P=0.051)中S期细胞比例明显降低,G0/G1期细胞比例明显增加(t=3.244,P=0.031;t=6.095,P=0.003);MIA PaCa-2(t=24.58,P=0.000;t=29.43,P=0.000)和BxPC-3细胞(t=36.45,P=0.000;t=43.52,P=0.000)中的晚期凋亡率和总凋亡率均明显上升;MIA PaCa-2(t=6.705,P=0.002)和BxPC-3细胞(t=6.238,P=0.003)的cyclin D1表达水平明显下降,caspase 7表达水平变化无统计学意义(t=0.711,P=0.516;t=0.027,P=0.979),cleaved caspase 7表达水平明显上升(t=3.991,P=0.016;t=6.536,P=0.002)。结论与癌旁组织相比,HPIP在胰腺癌中表达水平较高。敲低HPIP可导致胰腺癌细胞生长受到抑制,细胞周期由G0/G1期向S期转化受阻,并促进胰腺癌细胞凋亡。HPIP可能在胰腺癌中发挥癌基因作用。

磷酸化STAT3和Bcl-2在子宫内膜异位症的表达及相互关系

目的检测子宫内膜异位症(EMs)患者的在位内膜、异位内膜中磷酸化信号传导和转录激活因子3(P-STAT3)和B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)蛋白的表达情况,分析两者的相关性。方法应用免疫组化SP法检测40例内异症的在位内膜、异位内膜和40例正常子宫内膜中P-STAT3和Bcl-2的表达情况。结果 P-STAT3和Bcl-2在内异症的在位内膜和异位内膜中的表达强度高于正常子宫内膜(P<0.05)。P-STAT3和Bcl-2在异位内膜中的表达强度高于在位内膜(P<0.05)。P-STAT3与Bcl-2的表达强度在内异症在位内膜、异位内膜的增殖期和分泌期均呈正相关。结论 STAT3和Bcl-2在子宫内膜异位症的发病中可能发挥重要作用。

Ikaros通过靶向c-KIT抑制B-ALL白血病细胞的增殖

Ikaros是一种重要的造血细胞分化与发育调控因子,其基因结构、蛋白质活性的改变与淋巴细胞白血病的发生密切相关。致癌基因c-KIT与白血病的发生有直接联系,但Ikaros与c-KIT之间的调控关系尚未见报道。本研究报道,在人急性B淋巴细胞白血病(B-acute lymphoblastic leukemia,B-ALL)细胞中,Ikaros可靶向调控c-KIT基因的转录与蛋白质表达。通过在人B-ALL细胞系Nalm6中分别高表达和shRNA干扰Ikaros后,qRT-PCR与Western印迹结果显示,Ikaros可直接抑制c-KIT基因的表达。双荧光素酶报告实验检测Ikaros及其突变体对c-KIT基因的直接靶向作用。结果显示,野生型Ikaros可明显抑制c-KIT的表达,而突变体则不能。进一步利用染色质免疫共沉淀技术(chromatin-immunoprecipitation,Ch IP),检测Ikaros对c-KIT上游启动子序列的结合活力。结果显示,Ikaros蛋白在c-KIT的上游调控区约-500 bp处有明显的结合。Ikaros通过靶向cKIT上游启动子,抑制c-KIT表达,抑制B-ALL细胞的增殖,为临床治疗白血病提供了新思路。

骨肉瘤组织PBX1表达及其对患者预后的影响

目的 探讨骨肉瘤组织中前B淋巴细胞白血病转录因子(PBX1)基因和蛋白表达与患者临床病理参数的相关性及其对预后的影响。方法 选取2013年1月—2016年1月焦作市第二人民医院骨肉瘤患者85例,检测其骨肉瘤组织及正常骨组织(距肿瘤边缘>5 cm)中PBX1蛋白和mRNA的表达。收集所有患者的临床资料。从患者术后第1天开始随访,随访时间为5年。采用Kaplan-Meier生存曲线分析骨肉瘤患者的生存情况。采用Cox比例风险回归分析评估影响骨肉瘤患者预后的危险因素。结果 骨肉瘤组织PBX1蛋白阳性率和mRNA相对表达量均显著高于正常骨组织(P<0.001)。Enneking分期ⅡB~Ⅲ期和发生远隔转移的骨肉瘤患者肿瘤组织PBX1蛋白阳性率和mRNA相对表达量分别高于Enneking分期Ⅰ~ⅡA期和无远隔转移的骨肉瘤患者(P<0.05)。Kaplan-Meier生存曲线分析结果显示,PBX1蛋白阳性患者生存时间和5年生存率均低于PBX1蛋白阴性患者(P<0.001)。Cox比例风险回归分析结果显示,Enneking分期ⅡB~Ⅲ期、发生远隔转移和PBX1蛋白阳性是影响骨肉瘤患者生存期的危险因素[风险比(HR)值分别为2.861、2.244、2.361,95%可信区间(CI)分别为1.204~6.799、1.047~4.814、1.258~5.265]。结论 骨肉瘤组织PBX1蛋白阳性率和mRNA表达量显著升高,且与Enneking分期和远隔转移有关,或可作为骨肉瘤患者早期诊疗和预后评估潜在的生物标志物。

miR-370、Bmi-1、Nrf2在肺癌中的表达及其与临床病理特征的相关性

目的分析微小核糖核酸-370(miR-370)、B细胞特异性莫洛氏鼠白血病病毒插入位点1(Bmi-1)、核转录相关因子-2(Nrf2)在肺癌中的表达及其与患者临床病理特征的关系。方法选择我院收治的73例肺癌患者的癌组织标本,并保留同期38例肺癌患者距肿瘤边缘5 cm的癌旁组织标本。比较miR-370、Bmi-1、Nrf2在肺癌组织及癌旁组织中的表达情况,分析miR-370、Bmi-1、Nrf2表达与肺癌临床病理特征及预后的关系。结果肺癌组织miR-370高表达率低于癌旁组织,Bmi-1、Nrf2阳性表达率高于癌旁组织,差异均有统计学意义(P<0.05)。miR-370、Bmi-1、Nrf2表达在不同性别、年龄、肿瘤大小及细胞分型中的差异无统计学意义(P>0.05),在淋巴结转移、TNM分期中的差异有统计学意义(P<0.05)。miR-370高表达患者生存率明显高于低表达患者,Bmi-1、Nrf2阳性表达患者生存率明显低于阴性表达患者(P<0.05)。COX回归模型分析显示,淋巴结转移、TNM分期、Bmi-1及Nrf2是影响预后的危险因素,miR-370是保护因素。结论 miR-370、Bmi-1、Nrf2表达与肺癌患者临床病理特征相关,能够反映肿瘤的恶性生物学行为,可作为肺癌患者预后评估的参考指标。

NF-κB、Bcl-2与酒精性肝病

酒精性肝病(ALD)是由于长期过度饮酒而引发的一系列肝脏损害疾病。现研究表明肝细胞的凋亡对该病的发生、发展起着十分重要的作用。其中核因子κB(NF-κB)、B细胞淋巴瘤-2基因(Bcl-2)与ALD关系密切。ALD患者肝细胞内活化的NF-κB,通过刺激大量炎性细胞因子释放,引发肝组织炎症、纤维化、坏死和凋亡,同时通过调控凋亡蛋白酶(Caspase)、Bcl-2、死亡受体等基因来干预肝细胞凋亡;被激活的Bcl-2,除本身具有抗凋亡功能外,还与NF-κB以复合物的形式发挥抗凋亡作用,同时与同家族促凋亡蛋白Bax以二聚体的形式依比例对肝细胞凋亡发挥抑制或促进作用。肝细胞凋亡和抗凋亡的动态失衡将成为酒精性肝病发病的重要途径之一。

核因子kappa B的结构与功能研究进展

核因子kappaB是一种重要的核内转录因子 ,在细胞炎性反应、免疫反应以及细胞凋亡等过程中起着举足轻重的作用。自 10多年前被发现开始 ,其结构、功能及作用机制就一直是研究的热点。作者就近年来在核因子kappaB结构和功能上的研究进展作一回顾 。

成人急性B淋巴细胞白血病微小RNA和转录因子的生物信息学分析

目的 构建成人急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)的miRNA-转录因子调控网络,发现新的核心调控因子。方法 综合运用miRNA测序、转录因子芯片结合生物信息学分析的系统生物学方法构建B-ALL的miRNA-转录因子调控网络,从中鉴定出调控模块和核心调控因子并对网络节点进行GO和Pathway分析。结果 在miRNA-转录因子调控网络中鉴定出535个调控模块(包括526个前馈环和9个反馈环)以及47个核心调控因子(包括28个核心miRNA和19个核心转录因子)。GO分析表明,网络节点主要参与了基因表达的正性调控、大分子代谢过程的正性调控、造血或淋巴样器官发育等10个生物学过程。Pathway分析表明,网络节点主要富集在癌症信号通路、癌症转录失调信号通路以及慢性髓性白血病信号通路等25个信号通路。结论 多种核心调控因子可能在B-ALL发病机制中起一定作用。

3D腹腔镜结肠癌根治手术疗效分析及预后评价

目的探讨3D腹腔镜结肠癌根治手术疗效及安全性,分析Bmi-1和CDX-2表达与结肠癌临床病理特征及预后的关系。方法对比分析腹腔镜手术与开腹手术2组切口总长度、手术时间、术中失血量、清扫淋巴结数目、术后12 h疼痛评分、肠功能恢复时间及术后平均住院日7项指标;采用免疫组化EliVision TM plus两步法检测结肠癌组织Bmi-1和CDX-2的表达,分析其与患者年龄、瘤体大小、分化等级、淋巴结转移及5年内复发转移5项临床病理特征的相关性。结果腹腔镜组与开腹组比较,手术时间、清除淋巴结数目无显著差异,但切口总长度小,手术失血量少,术后12 h疼痛评分低,肠功能恢复快,术后平均住院日短。结肠癌组织Bmi-1和CDX-2阳性率分别为79.1%和64.2%。Bmi-1表达与年龄、瘤体大小、分化等级无关,在有淋巴结转移、5年内复发转移患者中其阳性率显著高于无淋巴结转移、5年内无复发转移者;CDX-2表达与年龄、瘤体大小无关,在低分化等级、有淋巴结转移、5年内复发转移患者中其阳性率显著低于(高+中)分化、无淋巴结转移、5年内无复发转移者。Bmi-1和CDX-2表达呈负相关性。结论3D腹腔镜结肠癌手术具有满意的根治效果和安全性,癌组织Bmi-1高表达、CDX-2低表达预示术后易发生复发转移,患者预后不良。

核转录因子RelB对慢性B淋巴细胞白血病细胞蛋白酶体抑制剂敏感性的影响

目的 探讨核转录因子RelB对慢性B淋巴细胞白血病（B-CLL）细胞蛋白酶体抑制剂敏感性的影响.方法 以初诊B-CLL患者CD5＋CD19＋细胞为研究对象,用RT-PCR法检测NF-κB家族成员RelB mRNA的表达水平;采用凝胶迁移实验及TransAMTMELISA法分析细胞核中RelB的活性;根据CLL细胞RelB活性将细胞分为RelB阳性（RelB＋）和RelB阴性（RelB-）两组,与人骨髓基质细胞共培养,分别加入氟达拉滨（10 μmol/L）、MG-132（1 μmol/L）和硼替佐米（1μmol/L）作用不同时间,采用碘化丙锭染色法分析药物对RelB＋和RelB-细胞死亡率的影响.结果 CLL细胞存在RelB mRNA表达及RelB活化,不同CLL细胞RelB mRNA表达水平及RelB活化水平不一.与骨髓基质细胞共培养时,三种药物均可促进细胞死亡,并具有时间依赖性.氟达拉滨对RelB＋和RelB-组CLL细胞的杀伤活性无明显差异,作用72 h后,两组CLL细胞死亡率分别为（61.11±6.91）％和（67.57±9.45）％;MG-132处理72 h对RelB＋细胞的杀伤活性高于RelB-组,两组细胞死亡率分别为（66.22±3.39）％和（51.07±5.93）％;硼替佐米处理24及48 h对RelB＋细胞杀伤活性高于RelB-组.24 h,两组细胞死亡率分别为（75.50±4.66）％和（66.32±10.20）％;48 h,死亡率分别为（92.11±3.14）％和（85.84±5.81）％.结论 骨髓来源CLL细胞中存在以RelB为代表的非经典性NF-κB活性.RelB活性增强可增加CLL细胞对蛋白酶体抑制剂硼替佐米和MG-132的敏感性,而对氟达拉滨的敏感性无明显影响.

非经典性NF—κB活性在慢性B淋巴细胞白血病中的作用

目的探讨非经典性NF—κB信号通路在慢性B淋巴细胞白血病（B—CLL）中的作用。方法采用实时荧光定量RT-PCR法检测56例B—CLL初诊患者骨髓CD5＋CD19＋细胞（CLL—B细胞）NF-κB家族成员mRNA表达水平；采用TransAM^TM ELISA法定量分析CLL—B细胞核中NF-κB蛋白质复合物的活性成分；采用流式细胞术分析CLL—B细胞体外单独或与骨髓基质细胞（hBMSC）共培养后细胞死亡率；采用Westemblot法检测共培养对骨髓CLL-B细胞中NF-κB家族成员RelA和RelB蛋白水平表达的影响。结果CLL—B细胞的NF-κB家族成员RelA、p50、RelB和p52mRNA水平均高于正常B细胞，差异有统计学意义（P值均〈0．01）。所有标本中CLL—B细胞都存在RelA活化，而RelB只在部分标本中活性增强。CLL．B细胞核中平均RelA活性比正常B细胞显著增强，而平均RelB活性与正常B细胞相似。体外单独培养24、48和72h时，RelA＋／RelB组CLL．B细胞死亡率分别为（35．544-4．43）％、（50．92土8．44）％和（49．24士8．16）％；RelA＋／RelB＋组CLL—B细胞死亡率分别为（20．65±2．37）％、（18．17±1.36）％和（26．55±4．08）％。与hBMSC共培养，RelA＋／RelB一组CLL．B细胞死亡率较单独培养时下降，但相对于RelA＋／RelB＋组CLL—B细胞死亡率仍较高；共培养48h后，RelA＋／RelB-组CLL—B细胞中RelA和RelB显著上调，RelA＋／RelB＋组中CLL—B细胞质中RelA表达上调，RelB在胞质中显著下调并在胞核中轻度上调。结论骨髓CLL—B细胞中存在非经典性NF-κB的活化，RelB活化程度在不同的CLL—B细胞中差异显著；RelB和RelA活化共表达赋予骨髓CLL—B细胞存活优势，CLL—B细胞与hBMSC共培养，通过诱导CLL—B细胞中RelA和RelB的表达发挥对其体外存活的保护作用。

山精胶囊对心肌缺血大鼠NF-κB信号通路调控机制探讨

目的:探讨山精胶囊对心肌缺血大鼠能量代谢、氧自由基及细胞凋亡相关基因的作用及其机制。方法:选取Wista大鼠采用冠状动脉结扎法,建立慢性心肌缺血模型。将筛选出来的大鼠随机分为山精胶囊低、中、高剂量组(283.5,850.5,1 701.0 mg·kg^(-1))和阳性药组(心安胶囊324.0 mg·kg^(-1)),假手术组和模型组灌胃给予同等剂量的0.9%的氯化钠注射液,给药10 d。紫外可见分光光度计检测血清及组织中乳酸(LD),游离脂肪酸(NEFA),丙二醛(MDA),超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),一氧化氮(NO)及三磷酸腺苷酶(ATP)水平;蛋白质免疫印迹(Western blot)法及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测心肌组织中核转录因子-κB(NF-κB),半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3),B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)及Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠LD,NEFA,MDA明显升高(P<0.05),NO,Na^+-K^+-ATP,Ca^(2+)-ATP酶,SOD,GSH-Px明显降低(P<0.05),心肌NF-κB,Caspase-3,Bax mRNA及蛋白表达明显上调(P<0.05),Bcl-2 mRNA及蛋白表达明显下调(P<0.05);与模型组比较,山精胶囊能显著降低LD,NEFA,MDA(P<0.05),NO,Na^+-K^+-ATP,Ca^(2+)-ATP酶,SOD,GSH-Px显著升高(P<0.05),明显下调NF-κB,Caspase-3,Bax mRNA及蛋白表达(P<0.05),明显上调Bcl-2的mRNA及蛋白表达(P<0.05)。结论:山精胶囊可能通过调控NF-κB信号通路,提高心肌缺血大鼠清除氧自由基能力,改善心肌细胞能量代谢,调节凋亡相关蛋白和基因的表达,从而抑制了心肌细胞凋亡,减少缺血缺氧对心肌细胞的病理损害,起到保护心肌的作用。

B细胞淋巴瘤基因-2、Twist家族碱性螺旋-环-螺旋转录因子1转录因子在舌鳞癌中调控上皮-间充质转化的研究

目的探讨B细胞淋巴瘤基因-2（bcl-2）、Twist家族碱性螺旋-环-螺旋转录因子1（Twistl）在舌鳞癌中的表达及对上皮-间充质转化（EMT）调控。方法应用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶（SP）法检测bcl-2、Twistl及EMT相关因子在82例舌鳞癌及24例癌旁组织中的表达，分析bcl-2、Twistl及EMT相关因子与舌鳞癌临床病理特征的关系。Westernblot法检测舌鳞癌细胞株Tb3．1中bcl-2、Twistl及EMT相关因子表达水平；免疫共沉淀证明bcl-2、Twistl的相互作用。结果bcl-2、Twistl在舌鳞癌组织中的表达明显高于癌旁组织，82例癌组织中48例（58．64％）bcl-2、46例（56．10％）Twistl表达呈阳性表达，明显高于癌旁组织[bcl-2：6例（25．00％），P〈0．05，Twistl：4例（16．67％），P〈0．05]；bcl-2、Twistl、神经钙黏素、波形蛋白在中低分化组及淋巴转移组中阳性表达高于在高分化组及非淋巴结转移组中的表达，在中低分化组中的表达分别为28例（70．00％）、28例（70．00％）、30例（75．00％）、30例（75．00％），在淋巴结转移组中的表达分别为29例（72．50％）、29例（72．50％）、29例（72．50％）、31例（77．50％），钙黏着蛋白则与之相反，分别为15例（37．50％）、16例（40．00％）。且Twistl与bcl．2、神经钙黏素、波形蛋白的表达呈正相关（相关系数分别为0．303、0．249、0．348，P〈0．05），与钙黏着蛋白的表达呈负相关（相关系数为-0．547，P〈0．05）；免疫共沉淀结果显示bcl-2、Twistl间可互相作用。结论bcl-2和Twistl在舌鳞癌中高表达，两者形成复合体可能参与调控舌鳞癌EMT过程。

急性B淋巴细胞白血病的差异microRNA综合调控网络的生物信息学分析

目的通过生物信息分析途径，从系统水平揭示参与急性B淋巴细胞白血病（B—ALL）发病的分子机制，为研究提供新的思路。方法从公共数据库GEO中下载B—ALL的microRNA（miRNA）芯片数据，利用QlucoreOmicsExplorer3．0软件筛选差异表达miRNA，再分析得到差异miRNA与靶基因、长链非编码RNA和转录因子各自的调控数据，然后构建以差异miRNA为中心的综合调控网络。另外，功能富集分析有功能的靶基因。结果共筛选出15个差异miRNA，其中7个miRNA表达上调，8个miRNA表达下调。通过差异miRNA为中心的综合调控网络可知，hsa—miR．126和hsa—miR-486—3p调控大量的靶基因，其中hsa．miR-126的靶基因包括MYC基因。hsa—miR．29a、hsa．miR-130a和hsa—miR-181c调控大量的长链非编码RNA，包括XIST。hsa．miR-181a．2、hsa—miR．18ib-2和hsa．miR-663调控大量的转录因子，包括CDX2、YYl等。hsa—miR．126靶基因的通路分析显示富集到Wnt通路。结论通过生物信息学方法分析得出，hsa—miR-29a、hsa．miR-126和hsa—miR-181家族是B．ALL的核心差异miRNA，及其转录因子CDX2、长链非编码RNAXIST和靶基因MYC基因在B．ALL的发生发展中起重要作用，可能为潜在的治疗靶点。

伊曲康唑联合多柔比星对急性髓系白血病细胞增殖和凋亡的影响

目的研究伊曲康唑联合多柔比星对急性髓系白血病细胞增殖、凋亡及蛋白激酶B(AKT)/叉头转录因子O3a(FoxO3a)信号通路的影响。方法体外培养人急性髓系白血病细胞HL-60,伊曲康唑组以6μmol·L-1伊曲康唑干预,多柔比星组以0.75μmol·L-1多柔比星干预,联合组以6μmol·L-1伊曲康唑+0.75μmol·L-1多柔比星干预,对照组以等量生理盐水干预,分别干预12,24,48 h。用活细胞计数(CCK-8)法测定人急性髓系白血病细胞HL-60增殖;用Hoechst 33258染色法检测人急性髓系白血病细胞HL-60凋亡;用克隆形成实验检测人急性髓系白血病细胞HL-60克隆形成率;用蛋白质印迹(Wb)法检测人急性髓系白血病细胞HL-60磷酸化AKT(p-AKT)、磷酸化FoxO3a(p-FoxO3a)蛋白的表达水平。结果干预48 h时,伊曲康唑组、多柔比星组与联合组细胞增殖抑制率分别为(49.45±3.89)%,(62.51±4.83)%和(79.06±5.42)%;对照组与伊曲康唑组、多柔比星组、联合组细胞凋亡率分别为(9.32±3.11)%,(21.06±2.97)%,(40.28±3.76)%,(63.19±5.21)%。干预12,24,48 h,伊曲康唑组、多柔比星组与联合组人急性髓系白血病细胞HL-60的增殖抑制率逐渐升高,且联合组高于伊曲康唑组与多柔比星组;与对照组比较,其余3组人急性髓系白血病细胞HL-60凋亡率均显著升高,且联合组高于伊曲康唑组与多柔比星组;而克隆形成率及p-AKT、p-FoxO3a蛋白相对表达量均显著降低,且联合组低于伊曲康唑组与多柔比星组(均P<0.05)。结论伊曲康唑联合多柔比星可显著抑制人急性髓系白血病细胞HL-60增殖,降低其克隆形成率,并促进其凋亡,抑制AKT/FoxO3a信号通路可能是其发挥抑制人急性髓系白血病细胞HL-60增殖,诱导凋亡的作用机制之一。

IKZF1突变在慢性粒细胞白血病急变成急性淋巴细胞白血病中的作用

目的探讨IKZF1基因变异与慢性髓细胞白血病急变的关系。方法选取北京大学第一医院及陆道培血液肿瘤中心2009年6月至2011年10月就诊的212例白血病[156例急性淋巴细胞白血病（B-ALL）、20例急性髓性白血病（AML）、36例慢性髓细胞白血病（CML）]患者及10名健康对照者为研究对象。采用巢式PCR方法扩增患者初治或急变期标本中IKZF1基因cDNA，PCR后的产物进行电泳检测，对异常扩增片段进行基因测序分析，以确定IKZF1基因的不同亚型。结果B-ALL中常有IKZF1异常表达，156例B-ALL中43例（27．6％）出现IKZF1异常表达。20例AML和10名健康对照者标本中均未检测到IKZF1异常表达。BCR-ABL1阳性B-ALL有IKZF1异常表达，38例中有30例（79．0％）增高，其中25例表达Ik6、2例表达Ik9、1例表达Ik7，2例IKZF1表达缺失。BCR-ABL1阴性的118例B-ALL中，仅有13例（11．0％）IKZF1异常表达（均为Ik6）。CML初治和慢性期标本中均未检测到IKZF1异常表达。CML发生B-ALL急变的12例患者中，7例（58．3％）有Ik6表达；而发生AML急变的CML标本中均无IKZF1异常表达。结论IKZF1基因变异所致的2次打击是CML急变为B-ALL的一个重要因素。