矿化液和地塞米松增强大鼠原代骨髓基质细胞NF-κB受体活化剂配体的表达

NF-κB受体活化剂配体(receptoractivatorforNF-κBligand,RANKL)是调节破骨细胞生成的重要因子,它可在骨髓基质细胞中表达。矿化液(含10-8mol/L地塞米松、10mmol/Lβ-甘油磷酸钠、50μg/mlL-抗坏血酸)能够诱导骨髓基质细胞向成骨细胞分化,为探讨矿化液及其主要成分地塞米松对大鼠原代骨髓基质细胞表达RANKL的影响,采用矿化液培养原代大鼠骨髓基质细胞48h,通过免疫荧光染色观察RANKL的表达变化。结果显示矿化液和地塞米松在短期内均能增强鼠骨髓基质细胞RANKL的表达,提示地塞米松促进破骨细胞形成的分子机制可能与骨髓基质细胞RANKL表达的改变密切相关。

机械应力影响鼠骨髓基质细胞骨保护素/NF-κB受体活化剂配体mRNA表达变化

骨保护素/NF-κB受体活化剂配体/NF-κB受体活化剂(OPG/RANKL/RANK)系统对破骨细胞生成、功能起着关键的作用,它的发现是骨生理代谢研究领域的重大进展。为研究生理性机械应力对鼠骨髓基质细胞OPG/RANKLmRNA表达变化的影响,进一步探讨机械应力对破骨细胞的影响机制,通过对鼠骨髓基质细胞施加不同时段的生理性的机械应力,并以RT-PCR半定量的方法检测OPG/RANKLmRNA表达变化趋势。结果显示随着加力时间的延长(6h后)RANKLmRNA表达减少34.4%,而OPGmRNA(9h后)表达增加73%,提示生理性应力能显著影响鼠骨髓基质细胞OPG/RANKLmRNA表达变化,从而在一定程度上阐明了生理性应力延缓骨质吸收的内在机制。

核因子kB受体活化剂配体在牙源性角化囊肿中的表达和意义

目的:明确RANKL在牙源性角化囊肿中的表达和分布,了解牙源性角化囊肿骨破坏的机制。方法:经病理诊断的牙源性角化囊肿组织切片,用免疫组化法检测RANKL的表达及分布,用TRAP的免疫组化和降钙素受体的原位杂交明确RANKL阳性细胞的性质。结果:所有标本均显示RANKL阳性,阳性细胞位于牙源性角化囊肿的上皮层;均显示TRAP阳性,阳性细胞位于牙源性角化囊肿的上皮层,两种指标的阳性细胞定位类似;均显示CTR阳性,阳性细胞位于囊肿的上皮层,与RANKL和TRAP的阳性细胞定位类似。结论:RANKL在牙源性角化囊肿引起的颌骨破坏中起作用。

核因子κB受体活化剂配体对乳牙根吸收的影响

核因子κB受体活化剂配体(RANKL)是新近发现的破骨细胞活化因子,它与核因子κB受体活化剂(RANK)、骨保护素(OPG)组成一个具有调节破骨细胞增殖、分化、融合、激活和凋亡的相关细胞因子系统。与破骨细胞生物学行为相似的破牙质细胞调节乳牙根生理性吸收,表达于该过程中的RANKL对乳牙根吸收起到一定的促进作用,且对乳恒牙替换具有调控作用。本文就RANKL对乳牙根吸收所起的作用作一综述。

核因子κB受体活化剂研究进展

核因子κB受体活化剂 ,是肿瘤坏死因子受体超家族成员 ,是骨保护素配体在破骨细胞上的受体 ,骨保护素配体通过与核因子κB受体活化剂结合 ,将细胞分化等信号传入破骨细胞前体内 ,促进其分化、融合 ,并促进成熟破骨细胞的激活过程。

复方大黄散对类风湿关节炎NF-κB受体活化因子配体、骨保护素的影响

目的观察复方大黄散外敷对类风湿关节炎患者的治疗作用及对血清中NF-κB受体活化因子配体(RANKL)、骨保护素(OPG)的影响。方法将首诊60例类风湿关节炎患者随机分为2组,对照组30例给予甲氨蝶呤10mg/周口服;实验组30例给予甲氨蝶呤口服联合复方大黄散外敷治疗,2组均以1个月为1个疗程。观察2组患者治疗前后疼痛视觉模拟评分(VAS)和DSA28评分,检测2组患者治疗前后血清C反应蛋白(CRP)、血沉(ESR)、类风湿因子(RF)、抗环瓜氨酸肽抗体(CCP)及RANKL、OPG水平。结果治疗后2组患者VAS评分、DAS28评分及血清CRP、ESR、RF水平均较治疗前明显下降(P均<0. 05),且实验组VAS评分、DAS28评分及血清CRP、ESR水平均明显低于对照组(P均<0. 05);治疗后实验组患者RANKL水平明显低于治疗前及对照组(P均<0. 05),对照组患者RANKL水平和2组患者CCP、OPG水平均无明显变化(P均> 0. 05)。结论复方大黄散外敷联合甲氨蝶呤治疗类风湿关节炎能有效控制关节炎症,缓解患者关节疼痛,并能降低血清RANKL水平,有一定预防骨破坏的作用。

过氧化物酶体增殖物激活受体γ与炎症性肠病

过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)γ是核激素受体超家族成员,主要在脂肪组织、大肠、视网膜及部分免疫系统表达,在脂肪细胞分化、糖、脂代谢、动脉粥样硬化形成、炎性反应中发挥重要生物作用。其可能通过抑制NF-κB活化,减少促炎症细胞因子的转录及表达,从而下调过度的免疫反应,避免组织损伤。其配体主要有脂肪酸代谢产物、前列腺素、噻唑烷二酮类药物和NSAIDs等,研究报道PPARγ配体可能代表UC的新疗法。

阳和汤对裸鼠移植性乳腺癌骨转移模型作用机制的探讨

目的探讨阳和汤对裸鼠移植性人乳腺癌骨转移模型的作用及其相关调节因子的影响。方法股骨接种人乳腺癌细胞建立裸鼠乳腺癌骨转移模型。随机分为阳和汤高、低剂量组、唑来磷酸组、模型组、假手术组,动态观察各组裸鼠骨转移癌的生长情况,测量骨转移癌体积,绘制生长曲线;给药20 d后处死动物,测取瘤质量,计算抑瘤率;ELISA法检测裸鼠血清中相关调节因子PTHrP、RANKL、OPG含量的变化。结果 1.阳和汤高、低剂量组、唑来磷酸组的骨转移癌灶体积均小于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);2.阳和汤高、低剂量组、唑来磷酸组PTHrP和RANKL含量明显低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05),而OPG含量水平增加,RANKL/OPG的比率下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 1.阳和汤有抗移植性人乳腺癌骨转移作用;2.阳和汤下调PTHrP、RANKL的含量、增加OPG的含量,抑制RANKL/OPG比率可能是其抑制乳腺癌骨转移的作用机制之一。

淫羊藿苷对IL-1β刺激RA滑膜成纤维细胞增殖及TNF-α和RANKL分泌的影响

目的观察淫羊藿苷(Icariin,ICA)对IL-1β刺激类风湿性关节炎滑膜成纤维细胞(rheumatoid arthritis synovial fibroblasts,RASFs)增殖及培养上清TNF-α和RANKL含量的影响。方法体外分离培养RA患者来源滑膜成纤维细胞,取第二代细胞分别接种于96孔板和6孔板,除正常对照组(N组)外其余各组均以终浓度为5μg/L的IL-1β刺激24 h后加入不同药物干预,分别设置空白对照组(C组)、MTX组(50 mg/L)、淫羊藿高剂量组(IH组,50μmol/L)和淫羊藿低剂量组(IL组,5μmol/L);继续培养72 h后,以WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒检测各组细胞增殖情况,以ELISA法检测各组培养上清中TNF-α和RANKL含量。结果 C组以IL-1β连续刺激RASFs 96 h后,细胞增殖率为17.9%,培养上清中TNF-α、RANKL含量分别为(361.542±7.178)ng/L和(428.468±11.118)ng/L,与N组[TNF-α、RANKL含量分别为(346.458±3.329)ng/L和(400.630±7.007)ng/L]比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。以不同药物干预后,与C组比较,MTX组细胞增殖率为-34.70%(P<0.05);IH组培养上清中RANKL含量降低,为(375.766±7.806)ng/L(P<0.05);IL组细胞增殖率为-31.90%,培养上清中TNF-α、RANKL含量分别为(334.542±6.691)ng/L和(365.495±5.280)ng/L,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 IL-1β能促进RA滑膜成纤维细胞增殖和分泌细胞因子TNF-α、RANKL;淫羊藿苷能抑制IL-1β刺激RA滑膜成纤维细胞的增殖及TNF-α、RANKL的分泌。

IL-1β对人牙周膜成纤维细胞OPG、RANKL mRNA表达的影响

目的:以体外培养的人牙周膜成纤维细胞(HPDLF)为研究对象,观察不同浓度的白细胞介素-1β(IL-1β)对人牙周膜成纤维细胞(HPDLF)中骨保护素(OPG)、核因子κB受体活化剂配体(RANKL)mR-NA表达的影响。方法:组织块法体外原代培养HPDLF并鉴定,以第5代HPDLF作为实验靶细胞,分别用不同浓度(0、0.01、0.1、1、10、100 ng/mL)的IL-1β进行干预,半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测HPDLF中OPG、RANKL mRNA的表达。结果:IL-1β在0.01～10 ng/mL浓度范围内能明显上调HPDLF中OPG mRNA的表达(P<0.05),并在0.1 ng/mL时上调作用达到最大(P<0.05)。此后,随着IL-1β浓度的增加,OPG mRNA的表达量逐渐减少。IL-1β在0.01～100 ng/mL浓度范围内均可明显上调HPDLF中RANKL、RANKL/OPGmRNA的表达(P<0.05),且呈剂量依赖性,即随着IL-1β浓度增加,HPDLF中RANKL、RANKL/OPG mRNA的表达也逐渐增加,各浓度组两两比较除10 ng/mL与100 ng/mL相比无显著性差异外,其余各组间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:IL-1β可促进HPDLF中RANKL mRNA的表达,上调RANKL/OPG mRNA的比值。

地诺单抗联合手术治疗桡骨远端骨巨细胞瘤——外科降级及预后

目的评估地诺单抗治疗桡骨远端骨巨细胞瘤(giant cell tumor of bone,GCT)的疗效和安全性,分析地诺单抗对手术方式及预后的影响。方法回顾性分析2014年1月至2016年4月,在围手术期接受地诺单抗治疗的复杂桡骨远端GCT病人7例的临床资料。其中,男4例,女3例;年龄为23~33岁,平均28.43岁。所有病人均有明确GCT病理诊断,2例为手术后复发。病人术前接受120 mg地诺单抗皮下注射3~4次,术后根据实际手术类型安排用药。比较病人应用地诺单抗前后手术方案的差异,监测用药过程中的不良反应;随访病人的肿瘤学预后及术后功能恢复。结果病人均按计划用药,用药总次数为4~10次(平均7.71次),用药期间无死亡病例,未见下颌骨坏死,实验室指标未见异常,RECIST评估结果显示:部分缓解5例、疾病稳定2例;6例病人(85.71%)实现外科手术降级(行囊内刮除术5例,瘤段广泛切除2例),术后病理结果提示组织学巨细胞清除率为85.71%(6/7);随访20~41个月,平均26.71个月,7例病人随访期内均未见肿瘤复发;病人术后的肌肉骨骼肿瘤学会(MSTS)93功能评分平均为27.86分(得分率为92.87%),平均臂肩手功能障碍(DASH)评分为7.43分,平均疼痛视觉模拟量表(VAS)评分为1.00分。结论地诺单抗是治疗桡骨远端GCT的有效手段,围手术期用药可降低手术难度,从而实现外科降级并降低复发风险。

葡萄糖对人牙周膜成纤维细胞OPG、RANKL mRNA表达的影响

目的:以体外培养的人牙周膜成纤维细胞(HPDLF)为研究对象,观察不同浓度的葡萄糖对HPDLF中骨保护素(OPG)、核因子κB受体活化剂配体(RANKL)mRNA表达的影响,探讨葡萄糖在牙槽骨吸收中的作用。方法:组织块法体外原代培养HPDLF并鉴定,选择4～8代的HPDLF作为实验的靶细胞,不同浓度的葡萄糖(0、5.5、11.1、16.7、22.2、33.3mmol/l)干预HPDLF,半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测HPDLF中OPG、RANKL mRNA的表达。结果:高浓度的葡萄糖可下调HPDLF中OPG mRNA的表达,呈剂量依赖性;可上调RANKL mRNA的表达,也呈剂量依赖性,且使RANKL/OPG mRNA的比值随着葡萄糖浓度的增高而呈现持续上升的趋势。结论:糖尿病时,牙周组织中高浓度的葡萄糖,可下调OPG的表达,上调RANKL的表达,使RANKL/OPG的比值升高,调节破骨细胞分化,刺激骨吸收,导致牙槽骨的破坏,加重牙周病的病情。

RANKL在人乳牙根生理性吸收过程中的表达

目的:探讨核因子κB受体活化剂配体RANKL在人乳牙根生理性吸收过程中的表达及作用。方法:运用免疫组织化学的方法检测人乳牙根生理性吸收过程中RANKL蛋白的表达。结果:乳牙的破牙细胞、牙髓成纤维细胞及成牙本质细胞胞浆中RANKL免疫组化染色阳性,且表达高于恒牙组,差异有统计学意义(P<0.05),乳牙牙周韧带成纤维细胞RANKL染色结果与恒牙组相比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:RANKL在人乳牙牙根生理性吸收过程中有表达,其可能对乳恒牙替换起到一定的促进作用。

实验性正畸牙齿移动中RANKL在牙周组织中表达的研究

目的观察实验性正畸牙齿移动过程中,大鼠牙周组织中转录因子NFKB受体活化剂配体(receptor activator of NF-kB ligand/RANKL)的表达及定位,进一步探讨RANKL的来源、作用机制以及与正畸牙齿移动中骨改建的关系。方法采用SP免疫组织化学方法检测RANKL在正畸大鼠牙周组织中的表达,并采用计算机图像分析的方法对各组RANKL的表达强度进行半定量分析。结果实验性正畸牙齿移动过程中:①RANKL主要表达于牙槽骨表达的成骨细胞、破骨细胞和牙周膜成纤维细胞胞浆和胞膜中。②RANKL在牙周组织内的表达和分布在时间上是不均衡的,随时间的增加呈先增高后回降的趋势,峰值在第5天。③RANKL在牙周组织内的表达和分布在部位上是不均衡的,压力侧的表达量高于张力侧,牙槽骨表面的表达量高于近牙骨质侧的牙周膜。结论RANKL的表达与正畸牙槽骨改建过程中破骨细胞的生命过程密切相关,RANKL通过旁分泌、自分泌机制作用于破骨细胞前体、成熟破骨细胞膜表达的受体RANKL,促进破骨细胞前体的分化、成熟,激活成熟破骨细胞的功能,加速骨改建。

人乳牙根生理性吸收中RANKL的mRNA表达

目的:探求核因子κB受体活化剂配体-RANKL在人乳牙根生理性吸收过程中的表达和作用。方法:临床收集牙根吸收期人乳牙10个,运用原位杂交方法检测乳牙和牙周膜细胞中RANKL的mRNA表达情况。结果:吸收期乳牙中牙周韧带成纤维细胞、牙髓成纤维细胞、成牙本质细胞表达RANKL。乳牙吸收区陷窝内可见大量破牙细胞,RANKL表达不显著。结论:乳牙根生理性吸收过程由破牙细胞调节,RANKL可能促进破牙细胞的生成和活性。

甲状旁腺激素相关蛋白对去卵巢大鼠骨组织中OPG、RANKL基因表达的影响

目的观察不同剂量间歇性注射甲状旁腺激素相关蛋白氨基端片段1-34(PTHrP1-34)对去卵巢大鼠骨密度及股骨RANKL、OPG基因表达的影响。方法4月龄健康雌性未孕Wistar大鼠60只,随机分为6组,假手术组(Sham组)和卵巢切除+安慰剂组(Placebo组)给予生理盐水;卵巢切除+雌激素治疗组(E2组)给予苯甲酸雌二醇注射液;卵巢切除+PTHrP治疗组分别用20、40、80μg/kg剂量,每日1次注射PTHrP1-34。给药12周后,测定腰椎L3～6及股骨BMD,利用实时荧光定量RT-PCR方法检测大鼠股骨RANKL、OPG基因表达的水平。结果①BMD结果:PTHrP40组和PTHrP80组大鼠股骨、腰椎BMD明显高于Placebo组。②与Sham组相比,Placebo组OPG mRNA明显下降(P<0.01),RANKLmRNA水平则显著升高(P<0.01)。E2组OPG mRNA水平较Placebo组明显升高(P<0.01),RANKLmRNA水平显著下降(P<0.01)。与Placebo组相比,不同剂量PTHrP(1-34)治疗组OPG、RANKL mRNA水平无明显变化(P>0.05)。结论PTHrP1-34 40或80μg/kg每天皮下注射能提高去卵巢大鼠股骨、腰椎BMD,间歇性注射PTHrP(1-34)对去卵巢大鼠骨组织RANKL、OPG mRNA水平无明显影响。

乳牙根生理性吸收机制的研究进展

乳牙根的生理性吸收过程中既有牙槽骨、牙本质等的组织学改变,也有破骨细胞、破牙细胞等的细胞学改变,同时还有多种细胞因子的参与。继承恒牙的牙囊和星网状层似乎在乳牙根的吸收中起着重要作用,而继承恒牙先天性缺失的乳牙根吸收最终仍会发生,其机制目前尚不明了。下面从细胞及其分子水平就乳牙根生理性吸收机制的研究进展作一综述。

RANKL及iNOS在牙源性角化囊肿表达的相关性

目的:了解RANKL和iNOS在牙源性角化囊肿中的表达及相互关系。方法:对经病理诊断的牙源性角化囊肿组织切片26例,用免疫组化法检测RANKL和iNOS的表达。结果:所有标本均显示RANKL阳性,阳性细胞位于牙源性角化囊肿的上皮层,其中53.8%(14例)为弱阳性,46.2%(12例)为阳性;iNOS的阳性细胞位于囊肿上皮细胞的细胞质,阳性率为84.6%(22例),其中36.4%(8例)为弱阳性,63.6%(14例)为阳性。两者的表达呈正相关。结论:RANKL和iNOS在牙源性角化囊肿引起的颌骨破坏中起协同作用。

乳牙根生理性吸收不同时期RANKL的mRNA表达

目的探讨核因子κB受体活化剂配体(receptor activator of the nuclear factor-κappaB lig and,RANKL)在人乳牙根生理性吸收不同时期的表达及作用。方法临床选取牙根生理性吸收早期、吸收中期和吸收晚期的乳牙各9颗,用原位杂交方法检测RANKL在人乳牙根生理性吸收不同时期的mRNA表达情况。结果牙髓成纤维细胞、成牙本质细胞、破牙细胞RANKL原位杂交染色阳性,表达高于对照组(P<0.05)。吸收早期与吸收中、晚期比较各种细胞内RANKL表达差异有统计学意义(P<0.05),而吸收中期和吸收晚期各种细胞内的RANKL表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论RANKL参与了破牙细胞性牙根生理性吸收,且促进了破牙细胞的分化。牙周韧带成纤维细胞、牙髓成纤维细胞、成牙本质细胞可能促进了破牙细胞的分化并且部分细胞转化为破牙细胞。

JNK在牙囊细胞破骨细胞向分化的实验研究

目的通过特异性抑制剂SP600125抑制JNK信号通路,探究大鼠牙齿萌出中JNK信号在成熟破骨细胞形成过程中的相关调控机制。方法分离培养SD大鼠牙囊细胞。用不同浓度的SP600125对细胞预处理,实时定量PCR检测DFCs中核因子κB受体活化剂配体、骨保护素基因表达量。DFCs和BMMs建立共培养体系,TRAP染色观察OC的数量。结果SP600125在20μmol/L浓度范围内对DFCs的增殖无显著影响(P>0.05),RT-PCR结果示:SP600125干预72 h后,RANKL基因表达量下降,OPG上升,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。TRAP染色阳性计数结果:各组均有OC生成,9 d较7 d产生的OC数显著增加,加入不同浓度的抑制剂组破骨细胞数均有减少,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论本研究阐明了在大鼠牙齿萌出中,SP600125通过抑制JNK信号通路,对OC形成具有一定的抑制作用,可为牙齿萌出、牙槽骨改建等破骨细胞相关性口腔疾病提供研究基础。