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芪白平肺胶囊可降低慢性阻塞性肺疾病钙调磷酸酶和活化T细胞核因子c3(NFATc3)的水平 被引量:7
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作者 朱洁 王保芹 +4 位作者 李泽庚 陆梅 彭青和 杨程 童佳兵 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1497-1501,共5页
目的通过建立慢性阻塞性肺疾病(COPD)痰瘀阻肺证大鼠模型,观察益气化痰祛瘀方-芪白平肺胶囊(QPC)对钙调磷酸酶(Ca N)-活化T细胞核因子c3(NFATc3)信号分子表达的影响,探讨QPC对COPD肺血管重构的干预机制。方法雄性SD大鼠60只,随机分为正... 目的通过建立慢性阻塞性肺疾病(COPD)痰瘀阻肺证大鼠模型,观察益气化痰祛瘀方-芪白平肺胶囊(QPC)对钙调磷酸酶(Ca N)-活化T细胞核因子c3(NFATc3)信号分子表达的影响,探讨QPC对COPD肺血管重构的干预机制。方法雄性SD大鼠60只,随机分为正常组、模型组、高、中、低剂量QPC组和硝苯地平组。采用游泳、烟熏、低氧,建立COPD痰瘀阻肺证大鼠模型;观察QPC对肺功能参数和大鼠的肺血管形态学的影响;通过实时荧光定量PCR检测大鼠肺组织Ca N和NFATc3mRNA的表达、Western blot法检测Ca N和NFATc3的蛋白表达。结果模型组大鼠第0.3秒用力呼气容量(FEV0.3),用力肺活量(FVC)和FEV0.3/FVC等肺功能参数值显著下降,高、中、低剂量QPC组和硝苯地平组的肺功能参数值均有不同程度的上升。模型组大鼠肺血管的管壁增厚,代偿性肺气肿形成。高、中、低剂量QPC组和硝苯地平组也存在血管壁增厚、肺泡扩张,但程度较轻。与正常组相比,模型组肺组织Ca N和NFATc3的mRNA和蛋白表达水平显著增加;与模型组相比,高、中、低剂量QPC以及硝苯地平组的Ca N和NFATc3的mRNA和蛋白表达量显著减低。结论 QPC可降低COPD肺组织Ca N、NFATc3的水平。 展开更多
关键词 芪白平肺胶囊 慢性阻塞性肺疾病 肺血管重构 钙调磷酸酶(calcineurin) 活化T细胞核因子c3(nfatc3)
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左卡尼汀抑制过氧化氢介导的NFATc3核转位 被引量:3
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作者 戴红良 黄雷 +3 位作者 贾桂枝 梁春光 李昕 戚春玲 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1902-1904,1909,共4页
目的:探讨在过氧化氢(H2O2)刺激下,左卡尼汀对心肌细胞内胞浆活化T细胞核因子3(NFATc3)的表达及分布的影响。方法:以200μmol/L H2O2刺激心肌细胞12 h建立氧化应激模型。在药物处理组,于氧化刺激前30 min加入左卡尼汀及钙调神经磷酸酶(C... 目的:探讨在过氧化氢(H2O2)刺激下,左卡尼汀对心肌细胞内胞浆活化T细胞核因子3(NFATc3)的表达及分布的影响。方法:以200μmol/L H2O2刺激心肌细胞12 h建立氧化应激模型。在药物处理组,于氧化刺激前30 min加入左卡尼汀及钙调神经磷酸酶(CaN)特异性抑制剂环孢素A(CsA)。待刺激完成后,利用蛋白质免疫印迹法检测细胞内总NFATc3,以及胞浆内和胞核内NFATc3的水平,并以免疫荧光法检测NFATc3在细胞中的分布状况。结果:H2O2刺激不影响心肌细胞NFATc3的表达,但可诱导其由胞浆至胞核的转位。左卡尼汀预处理可以显著抑制NFATc3的核转位。结论:左卡尼汀可通过抑制NFATc3的核转位发挥其抗氧化应激损伤的作用。 展开更多
关键词 左卡尼汀 心肌细胞 氧化性应激 nfatc3蛋白
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鸭发育早期骨骼肌NFATc3 mRNA差异表达及其与生长性状的相关性研究
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作者 单艳菊 束婧婷 +2 位作者 徐文娟 刘宏祥 李慧芳 《中国家禽》 北大核心 2015年第19期9-13,共5页
为研究不同品种鸭胚胎期和出雏早期骨骼肌中NFATc3基因mRNA表达规律及其与生长发育的相关性,运用荧光绝对定量PCR技术检测了生长速度差异较大的高邮鸭和金定鸭13、17、21、25、27胚龄和7日龄胸肌和腿肌中NFATc3 mRNA的表达水平。结果表... 为研究不同品种鸭胚胎期和出雏早期骨骼肌中NFATc3基因mRNA表达规律及其与生长发育的相关性,运用荧光绝对定量PCR技术检测了生长速度差异较大的高邮鸭和金定鸭13、17、21、25、27胚龄和7日龄胸肌和腿肌中NFATc3 mRNA的表达水平。结果表明胸肌和腿肌NFATc3 mRNA在两鸭品种中均具有相似的表达模式,不存在品种效应,胸肌和腿肌NFATc3 mRNA的表达均是13胚龄时表达量最高,显著高于其它各胚龄或日龄(P<0.05);相关性分析结果表明两个品种鸭骨骼肌NFATc3 mRNA表达量与其组织重、体重均呈极显著负相关(P<0.01),而与肌肉组织中IGF-Ⅰm RNA的表达量呈极显著正相关(P<0.01)。鸭骨骼肌中NFATc3主要在早期的肌纤维生成中起作用,与IGF-Ⅰ可能共同参与了对骨骼肌生长发育的调节。 展开更多
关键词 nfatc3基因 发育早期 骨骼肌 差异表达 相关性
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鸡NFATc3基因在不同表型肌肉中表达差异的研究
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作者 盛中伟 束婧婷 +4 位作者 单艳菊 姬改革 章明 屠云洁 邹剑敏 《中国家禽》 北大核心 2020年第4期24-28,共5页
为探讨NFATc3在生长速度差异较大的2个品种鸡生长发育早期不同表型肌肉中的表达规律,利用实时荧光定量PCR技术检测清远麻鸡(慢生型)和隐性白羽鸡(速生型)三种表型肌肉(腓肠肌外侧头、比目鱼肌和趾长伸肌)NFATc3 mRNA在0、1、3、5、7、9... 为探讨NFATc3在生长速度差异较大的2个品种鸡生长发育早期不同表型肌肉中的表达规律,利用实时荧光定量PCR技术检测清远麻鸡(慢生型)和隐性白羽鸡(速生型)三种表型肌肉(腓肠肌外侧头、比目鱼肌和趾长伸肌)NFATc3 mRNA在0、1、3、5、7、9周龄时的表达情况。结果发现:2个鸡品种中三种表型肌肉均呈现先下降后上升再下降的趋势,除隐性白羽鸡的腓肠肌外侧头、比目鱼肌外,2个鸡品种中其他表型肌肉的表达量均在2周龄最低;趾长伸肌和比目鱼肌NFATc3 mRNA的表达峰值在清远麻鸡中出现在3周龄,而在隐性白羽鸡中三种表型肌肉的表达峰值均出现在0周龄;总体而言,NFATc3 mRNA在比目鱼肌中的表达量要低于其在趾长伸肌和腓肠肌外侧头中的表达量;品种间比较发现,NFATc3 mRNA在清远麻鸡三种表型肌肉的表达量在3周龄时高于隐性白羽鸡。研究结果提示,鸡肌肉NFATc3表达发育模式具有品种、年龄和表型特异性,并可能与鸡肉品质存在关联。 展开更多
关键词 nfatc3 不同表型肌肉 实时荧光定量PCR 表达
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NFATc3基因在不同品种鸡骨骼肌中的mRNA表达分析
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作者 姬改革 单艳菊 +3 位作者 束婧婷 章明 屠云洁 邹剑敏 《中国家禽》 北大核心 2016年第21期6-10,共5页
活化T细胞核因子3(Nuclear factor of activated T cells 3,NFATc3)是NFAT家族的重要成员,在肌纤维类型转换中具有重要的作用。为探讨NFATc3 mRNA在不同品种鸡不同类型肌肉中的表达情况,以生长速度具有较大差异的清远麻鸡和隐性白羽鸡... 活化T细胞核因子3(Nuclear factor of activated T cells 3,NFATc3)是NFAT家族的重要成员,在肌纤维类型转换中具有重要的作用。为探讨NFATc3 mRNA在不同品种鸡不同类型肌肉中的表达情况,以生长速度具有较大差异的清远麻鸡和隐性白羽鸡为材料,采用实时荧光定量PCR方法,检测不同发育时期趾长伸肌和比目鱼肌中NFATc3 mRNA的表达情况。结果发现,NFATc3 mRNA在两个品种骨骼肌的变化趋势基本一致,1日龄时,NFATc3在趾长伸肌和比目鱼肌中的表达量都较高,7日龄时显著下降,21日龄时出现上升,之后表达量趋于平稳;品种间比较,比目鱼肌中在21、49日龄时,清远麻鸡的基因表达量显著高于隐性白羽鸡(P<0.05),趾长伸肌中则在1、21日龄时,清远麻鸡的基因表达量显著高于隐性白羽鸡(P<0.05);同一品种不同类型肌肉间比较,总体上都是趾长伸肌的表达量高于比目鱼肌。提示,鸡骨骼肌中NFATc3 mRNA表达变化规律不存在品种差异,NFATc3可能在鸡不同类型肌肉肌纤维的发育中起重要作用。 展开更多
关键词 nfatc3 肌纤维 MRNA表达
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IGF-I-CaN-NFATc3信号通路相关基因在鸭发育早期骨骼肌中的同步表达及其与肌纤维性状相关性 被引量:7
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作者 束婧婷 宋迟 +6 位作者 徐文娟 章明 单艳菊 陈文峰 宋卫涛 陶志云 李慧芳 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1195-1204,共10页
【目的】IGF-I-钙调磷酸酶(Ca N)-NFAT信号途径是调节肌肉生长、决定不同肌纤维类型的主要信号途径,本研究选择生长速度不同的高邮鸭和金定鸭为试验材料,首次对不同品种鸭胚胎期和出雏早期肌肉中IGF-I-Ca N-NFAT信号通路相关基因的表达... 【目的】IGF-I-钙调磷酸酶(Ca N)-NFAT信号途径是调节肌肉生长、决定不同肌纤维类型的主要信号途径,本研究选择生长速度不同的高邮鸭和金定鸭为试验材料,首次对不同品种鸭胚胎期和出雏早期肌肉中IGF-I-Ca N-NFAT信号通路相关基因的表达规律及其与肌纤维类型的相关性进行了研究。【方法】采用实时荧光定量PCR方法研究鸭13、17、21、25、27胚龄和出雏后7日龄胰岛素样生长因子(insulin-like growth factors,IGF-I),钙调磷酸酶(calcineurin,Cn Aα)和活化T细胞核因子(nuclear factor of activated T cells,NFAT c3)基因的表达量,同时采用肌球蛋白ATPase碱孵育法对两个鸭种腓肠肌外侧头不同发育阶段的肌纤维性状进行组织学观察,对不同类型肌纤维比例进行统计,用SPSS20.0软件进行差异显著性分析,探讨IGF-I-Ca N-NFAT信号通路相关基因对鸭骨骼肌肌纤维类型转换的调控机制。【结果】随着胚龄或日龄增加,两鸭种快肌纤维比例均呈现下降趋势,中间型肌纤维比例仅存在少量波动,慢肌纤维比例除在高邮鸭中27胚龄时有所下降外,总体上呈现上升的趋势;IGF-I,Cn Aα和NFATc3基因在不同鸭种的同一肌肉部位的表达模式相对一致,仅存在显著的发育时段差异,在不同的部位(胸肌和腿肌)的表达也存在差异,但并不存在显著的性别效应,3个基因均在13胚龄即可检测到表达,且表达量均表现为最高,显著地高于其他各胚龄的表达量,提示IGF-I-Ca N-NFATc3信号通路可能在鸭胚胎发育早期肌纤维的形成过程中发挥了重要作用。Cn Aαm RNA在胸肌中呈近似"V"形的表达趋势,21胚龄时表达量最低然后呈持续上升趋势,而在腿肌中则呈"波浪形"表达趋势,表达量最低点出现在27胚龄;NFATc3在胸肌和腿肌中的表达量均表现为13胚龄最高,然后至17胚龄显著下降并维持在较低的表达水平,在胸肌中表达量最低点出现在21胚龄,而腿肌中21胚龄的表达量则要显著高于17、25、27胚龄和7日龄的表达量,17胚龄表达量最低;IGF-I m RNA在胸肌和腿肌中总体上表现为先下降,至出雏前(27胚龄)降至最低,然后出雏后一周略有上升的趋势。IGF-I,Cn Aα和NFATc3基因的表达两两之间均表现出显著或极显著的正相关关系,同时,3个基因的表达与快肌纤维比例存在正相关,而与慢肌纤维比例及中间型纤维的比例呈负相关。【结论】在鸭胚胎发育后期至出雏早期,腓肠肌外侧头肌纤维类型存在由快肌纤维向慢肌纤维转换的趋势,IGF-I-Ca N-NFAT信号通路相关基因之间存在协同表达,在鸭早期骨骼肌纤维类型转换中可能发挥着调控作用。 展开更多
关键词 早期发育 基因表达 肌纤维类型 IGF-I-CaN-NFAT信号通路
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斑马鱼Nfatc3基因多克隆抗体的制备及检测
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作者 冯德峰 屈永贵 +3 位作者 袁佳佳 陈发 吴秀山 李永青 《湖南理工学院学报(自然科学版)》 CAS 2014年第2期21-24,共4页
为了在斑马鱼模型中更深入地研究Nfatc3蛋白在心脏发育中的功能,采用PCR技术扩增斑马鱼Nfatc3基因的部分编码区并插入pET-28a表达载体中,之后将重组质粒转入大肠杆菌(E.coli)通过IPTG诱导表达His-Nfatc3融合蛋白,对该融合蛋白采用Ni-ID... 为了在斑马鱼模型中更深入地研究Nfatc3蛋白在心脏发育中的功能,采用PCR技术扩增斑马鱼Nfatc3基因的部分编码区并插入pET-28a表达载体中,之后将重组质粒转入大肠杆菌(E.coli)通过IPTG诱导表达His-Nfatc3融合蛋白,对该融合蛋白采用Ni-IDA凝胶柱层析纯化后,免疫新西兰兔制备了多克隆抗体,并用western blotting对抗体进行分析.结果表明获得了高效价的特异性兔抗Nfatc3多克隆抗体.这为Nfatc3功能的进一步研究奠定了基础. 展开更多
关键词 nfatc3 斑马鱼 融合蛋白 多克隆抗体
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NFATc3在恶性黑素瘤中的表达及其对细胞存活和转移的影响
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作者 张婉琪 沈潇潇 +1 位作者 李红丽 鲁元刚 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期1080-1088,共9页
目的探讨NFATc3在不同恶性程度的恶性黑素瘤(malignant melanoma,MM)组织及细胞中的表达及意义。方法收集转移(11例)和未转移(20例)MM组织及癌旁组织(3例)石蜡切片;对比不同恶性度MM细胞系,运用免疫组化染色、Crispr/Cas9敲减技术并转... 目的探讨NFATc3在不同恶性程度的恶性黑素瘤(malignant melanoma,MM)组织及细胞中的表达及意义。方法收集转移(11例)和未转移(20例)MM组织及癌旁组织(3例)石蜡切片;对比不同恶性度MM细胞系,运用免疫组化染色、Crispr/Cas9敲减技术并转染细胞,通过qPCR、Westernblot、CCK-8及流式细胞学等方法观察NFATc3表达对MM细胞活性、增殖凋亡与侵袭迁移的影响。结果(1)NFATc3在转移性MM组织中呈高表达,在癌旁组织中几乎无表达(P<0.01);在转移性MM细胞Mel-RM中,NFATc3 mRNA和蛋白水平较原位来源MM细胞A375显著上调(P<0.01);(2)敲减NFATc3后,敲减组的细胞存活率显著下降(P<0.01),而Caspase-3阳性荧光细胞比例则显著升高(P<0.01);流式细胞检测及TUNEL染色结果显示,敲减组中凋亡细胞比例增加(P<0.01);Western blot检测发现敲减组细胞中活化的Caspase-3(17×103)和Caspase-8(18×103)蛋白表达增高;(3)划痕实验及Transwell检测均表明敲减组中侵袭和迁移的细胞数目显著减少(P<0.01)。结论NFATc3在转移性MM中表达上调,且其表达水平与恶性程度相关。下调NFATc3能减少MM细胞存活、促进细胞凋亡并抑制细胞转移能力。 展开更多
关键词 恶性黑素瘤 nfatc3 恶性程度 细胞存活与凋亡 转移
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miR-93对睾丸畸胎瘤细胞增殖、心肌分化的影响及其与NFATC3的调控关系
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作者 许耿 仲逢钰 顾海涛 《山东医药》 CAS 2021年第29期1-5,共5页
目的观察miR-93对常用于心脏发育研究的睾丸畸胎瘤细胞P19增殖与心肌分化的影响,并分析其与活化T细胞核转录因子3(NFATC3)在此过程中的调控关系。方法将P19细胞分为三组,miR-93组、NC组分别转染miR-93 mimic及阴性对照空白质粒,对照组... 目的观察miR-93对常用于心脏发育研究的睾丸畸胎瘤细胞P19增殖与心肌分化的影响,并分析其与活化T细胞核转录因子3(NFATC3)在此过程中的调控关系。方法将P19细胞分为三组,miR-93组、NC组分别转染miR-93 mimic及阴性对照空白质粒,对照组不转染;采用CCK-8法观察转染0、24、48 h后miR-93对P19细胞增殖的影响,Western blotting法检测miR-93对心肌分化标志基因心肌肌钙蛋白T(cTnT)与锌指转录因子CATA结合蛋白4(GATA4)的影响。通过TargetScanhuman7.2数据库筛选发现NFATC3为miR-93的下游靶基因,通过双荧光素酶基因报告验证两者的结合情况;采用Western blotting法检测miR-93对P19细胞中NFATC3表达的影响。再将P19细胞另分为三组,miR-93组、miR-93+NFATC3组及NC组分别转染miR-93 mimic、miR-93 mimic+NFATC3 mimic及阴性对照空白质粒,采用CCK-8法、Western blotting法观察NFATC3对miR-93过表达所致细胞增殖及心肌分化的影响。结果miR-93组除0 h外同时点细胞OD值及cTnT、GATA4蛋白表达均低于NC组及对照组(P均<0.05),NC组与对照组各指标比较差异无统计学意义。转染NFATC3 wt+NC质粒的P19细胞荧光素酶相对活性与转染NFATC3 wt+miR-93 mimic质粒的细胞比较有明显差异(P<0.01);转染NFATC3 mut+NC质粒的P19细胞荧光素酶相对活性与转染NFATC3 mut+miR-93 mimic质粒的细胞比较无统计学差异。miR-93组NFATC3蛋白表达低于对照组及NC组(P均<0.05),除0 h外同时点细胞OD值及cTnT、GATA4蛋白表达NC组>miR-93+NFATC3组>miR-93组(P均<0.05)。结论miR-93可抑制P19细胞增殖及心肌分化,该作用可能通过沉默NFATC3表达来实现,或可为先天性心脏病提供潜在的治疗靶点。 展开更多
关键词 微小核糖核酸 miR-93 睾丸畸胎瘤细胞 细胞增殖 心肌分化 nfatc3 先天性心脏病 信号调控
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Cyclosporin A inhibits the growth of neonatal MHC-expressing myotubes independent of NFATc1 and NFATc3 in the mechanically overloaded soleus muscle of mice
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作者 Kunihiro Sakuma Akihiko Yamaguchi 《American Journal of Molecular Biology》 2011年第1期7-16,共10页
ABSTRACT The molecular signaling pathway linked to hyper-trophy of the anti-gravity/postural soleus muscle af-ter mechanical overloading has not been identified. Using Western blot and immunohistochemical analy-ses, w... ABSTRACT The molecular signaling pathway linked to hyper-trophy of the anti-gravity/postural soleus muscle af-ter mechanical overloading has not been identified. Using Western blot and immunohistochemical analy-ses, we investigated whether the amounts of NFATc3, GSK-3?, NFATc1, and neonatal MHC change in the mechanically overloaded soleus muscle after cyc-losporine A (CsA) treatment. Adult male ICR mice were subjected to a surgical ablation of the gas-trocnemius muscle and treated with either CsA (25 mg/Kg) or vehicle once daily. They were sacrificed at 2, 4, 7, 10, and 14 days post-injury. Mechanical over-loading resulted in a significant increase in the wet weight and the cross-sectional area of slow and fast fibers of the soleus muscle in placebo-treated mice but not CsA-treated mice. After 4 days of mechanical overloading, we observed a similar co-localization of neonatal MHC and NFATc3 in several myotubes of both mice. The placebo-treated mice possessed larger myotubes with neonatal MHC than CsA-treated mice. At 7 days, mechanical overloading induced marked expression of neonatal MHC in myotubes and/or myofibers. Such neonatal MHC-positive fibers emerged less often in the hypertrophied soleus mus-cle subjected to treatment with CsA. CsA treatment did not significantly change the amount of GSK-3? protein in the soleus muscle. The modulation of growth in neonatal MHC-positive myofibers by CsA treatment may inhibit the hypertrophic process in the soleus muscle after mechanical overloading. 展开更多
关键词 CALCINEURIN nfatc3 NEONATAL MHC SKELETAL Muscle HYPERTROPHY
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miR-202-5p通过下调NFATc3的表达抑制口腔鳞状细胞癌细胞的生长、迁移和侵袭 被引量:2
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作者 杨谊琼 李丹丹 +2 位作者 刘平 郑文涛 胡赟 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期1206-1212,共7页
目的:探讨miR-202-5p对口腔鳞状细胞癌(oral squamous carcinoma,OSCC)细胞生长、集落形成、迁移和侵袭的影响及其可能的机制。方法:通过qPCR法检测OSCC细胞系(Tca8113和SCC-4)和口腔角质细胞HOK中miR-202-5p和T细胞核因子c3(nuclear fa... 目的:探讨miR-202-5p对口腔鳞状细胞癌(oral squamous carcinoma,OSCC)细胞生长、集落形成、迁移和侵袭的影响及其可能的机制。方法:通过qPCR法检测OSCC细胞系(Tca8113和SCC-4)和口腔角质细胞HOK中miR-202-5p和T细胞核因子c3(nuclear factor of activated T-cells isoform c3,NFATc3)mRNA的表达水平;将miR-202-5p mimic或/和NFATc3过表达质粒转染入Tca8113和SCC-4细胞,用MTT和集落形成实验检测转染对细胞增殖的影响,划痕伤口愈合实验和Transwell实验检测转染对细胞迁移和侵袭的影响,用Western blotting实验检测转染对NFATc3蛋白表达的影响;通过双荧光素酶报告基因实验验证miR-202-5p对候选靶基因NFATc3的直接调控作用。结果:与正常口腔角质细胞HOK相比,miR-202-5p在OSCC细胞Tca8113和SCC-4中呈低表达(均P<0.01),NFATc3 m RNA和蛋白质表达显著升高(P<0.01)。在Tca8113细胞和SCC-4细胞中,过表达miR-202-5p可显著抑制细胞生长、集落形成、迁移、侵袭以及细胞中NFATc3表达(均P<0.01)。NFATc3被证实是miR-202-5p的靶基因,过表达NFATc3能逆转miR-202-5p对OSCC细胞生长、迁移和侵袭的抑制作用。结论:miR-202-5p通过下调NFATc3表达发挥其肿瘤抑制功能,导致OSCC细胞的生长、迁移和侵袭受到抑制。 展开更多
关键词 口腔鳞状细胞癌 miR-202-5p T细胞核因子c3 增殖 侵袭 迁移
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PARP1对NFATs的调控在病理性心肌肥大中的作用 被引量:3
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作者 郭锴腾 李景艳 +1 位作者 路静 刘培庆 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期915-922,共8页
目的 探究多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1(PARP1)与活化T细胞核转录因子3(NFATc3)、NFATc4在病理性心肌肥大中的调控关系及其机制。方法 采用异丙肾上腺素(ISO)刺激原代心肌细胞24 h,在细胞水平建立心肌肥大模型;SD大鼠皮下注射ISO,在动物... 目的 探究多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1(PARP1)与活化T细胞核转录因子3(NFATc3)、NFATc4在病理性心肌肥大中的调控关系及其机制。方法 采用异丙肾上腺素(ISO)刺激原代心肌细胞24 h,在细胞水平建立心肌肥大模型;SD大鼠皮下注射ISO,在动物水平建立心肌肥大模型。使用核蛋白抽提试剂盒分离胞质和胞核蛋白,免疫印迹法检测相应蛋白的出入核及蛋白表达水平变化;利用免疫荧光,检测NFATc3、NFATc4的亚细胞定位;采用腺病毒感染的方法进行PARP1过表达,通过转染小干扰RNA进行PAPR1的敲低。结果 在细胞及动物水平上,ISO成功建立心肌肥大模型,均观察到ISO引起NFATc3和NFATc4在细胞核的聚集增加;同时,ISO可致PARP1的PAR化酶活性上升;单独过表达PARP1可诱导NFATc3和NFATc4入核增加,敲低PARP1抑制了ISO引起的入核增加,而给予PARP1抑制剂3AB则可一定程度逆转NFATc3和NFATc4的入核转位。结论 ISO可能通过诱导PARP1酶活性的上调,进而促进NFATc3和NFATc4的转位入核,从而诱导心肌肥大的发生。 展开更多
关键词 心肌肥大 nfatc3 NFATc4 PARP1 核转位 PAR化修饰
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基于PI3K/Akt/GSK3β/NFATc1通路分析沉默miR-664-3p对去卵巢骨质疏松大鼠的干预作用 被引量:6
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作者 胡广 关智宇 张开伟 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2021年第20期4463-4467,共5页
目的探究基于磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/糖原合成酶(GSK)3β/活化T细胞核因子(NFATc1)通路分析沉默miR-664-3p对去卵巢骨质疏松大鼠的干预作用。方法选取30只SD雌性大鼠,将其中10只设为正常组,剩余20只建立去卵巢骨质疏松... 目的探究基于磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/糖原合成酶(GSK)3β/活化T细胞核因子(NFATc1)通路分析沉默miR-664-3p对去卵巢骨质疏松大鼠的干预作用。方法选取30只SD雌性大鼠,将其中10只设为正常组,剩余20只建立去卵巢骨质疏松大鼠模型,并随机分为模型组、沉默组。检测对比骨密度变化,Micro-CT扫描重建股骨微结构,采用酶联免疫吸附试验、免疫透射比浊法分别对血清骨钙素(OC)水平、碱性磷酸酶(ALP)含量进行检测,通过Western印迹法检测各组骨髓基质细胞(BMSCs)的PIK3、Akt、GSK3β、NFATc1的磷酸化水平,miR-664-3p表达。结果模型组骨细胞指数、骨密度Tb.N、Tb.Th、BV/TV均低于正常组,Tb.Sp、miR-664-3p、PI3K、Akt、NFATc1均高于正常组,差异均有统计学意义(P<0.05);沉默组TB.Sp、miR-664-3p、PI3K、Akt、NFATc1均低于模型组,骨密度、骨细胞指数及Tb.N、Tb.Th、BV/TV、GSK3β高于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论沉默miR-664-3p通过对PI3K/Akt/GSK3β/NFATc1通路调控促进BMASc增殖,对成骨细胞凋亡产生抑制,从而达到治疗骨质疏松目的。 展开更多
关键词 PI3K/Akt/GSK3β/NFATc1通路 沉默miR-664-3p 骨质疏松
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芝麻素通过抑制AKT/GSK3β/NFATc1信号通路减轻2型糖尿病大鼠骨质疏松症
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作者 杨璐 赵国宏 +2 位作者 祝松涛 任引刚 白莉敏 《现代生物医学进展》 CAS 2024年第1期31-37,共7页
目的:探究芝麻素对2型糖尿病性骨质疏松症(T2DOP)的治疗作用及其可能机制。方法:将健康雄性SD大鼠分为对照组、模型组、低剂量芝麻素组(L-Ses组)和高剂量芝麻素组(H-Ses组),每组10只。模型组、L-Ses组和H-Ses组大鼠给予高脂高糖饲料喂饲... 目的:探究芝麻素对2型糖尿病性骨质疏松症(T2DOP)的治疗作用及其可能机制。方法:将健康雄性SD大鼠分为对照组、模型组、低剂量芝麻素组(L-Ses组)和高剂量芝麻素组(H-Ses组),每组10只。模型组、L-Ses组和H-Ses组大鼠给予高脂高糖饲料喂饲4周,并一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ,剂量35 mg/kg)溶液建立2型糖尿病性骨质疏松症大鼠模型。造模成功后,L-Ses组和H-Ses组大鼠分别按照10 mg/kg和40 mg/kg的剂量给予芝麻素灌胃处理,每日1次,持续药物处理8周。对照组和模型组大鼠同时间段给予等量的生理盐水灌胃处理。分别检测大鼠血清中空腹血糖值(Fasting plasma glucose,FPG)、空腹胰岛素(Fasting insulin,FINS)、糖化血红蛋白(Glycosylated hemoglobin,HbA1c)、血清总胆固醇(Serum total cholesterol,TC)、甘油三酯(Triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(Low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(High-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(Catalase,CAT)、谷胱甘肽(Glutathione,GSH)和丙二醛(Malondialdehyde,MDA)的水平。采用苏木素-伊红(Hematoxylin-eosin staining,HE)染色检测大鼠股骨组织形态。μCT扫描仪分析大鼠股骨干骺端三维结构以及骨密度(Bone mineral density,BMD)、骨小梁数(Trabecular number,Tb.N)和骨小梁厚度(Trabecular thickness,Tb.Th)参数,Western blot检测骨形成指标骨碱性磷酸酶(Bone alkaline phosphate,BALP)、骨钙素(Osteocalcin,OCN)、成骨相关基因2(Runt-related transcription factor 2,Runx2),以及磷脂酰肌醇-3激酶(Phosphoinositide 3 kinase,PI3K)/蛋白激酶B(Protein kinase B,Akt)/糖原合成酶激酶3β(Glycogen synthase kinase 3β,GSK3β)/活化T细胞核因子1(Nuclear factor of activated T cells c1,NFATc1)信号通路相关蛋白的表达。结果:与对照组比较,模型组大鼠血清FPG、FINS、HBA1c、TC、TG、LDL-C和MDA水平均升高(P<0.05),HDL-C、SOD、CAT和GSH水平均降低(P<0.05);股骨组织中骨小梁断裂状态较多,排列紊乱,骨质严重流失,BMD、Tb.N和Tb.Th均降低(P<0.05),股骨组织中BALP、OCN和Runx2蛋白表达水平均降低(P<0.05),AKT和NFATc1蛋白磷酸化水平均升高(P<0.05),GSK3β蛋白磷酸化水平降低(P<0.05)。与模型组比较,L-Ses组和H-Ses组大鼠血清中FPG、FINS、HBA1c、TC、TG、LDL-C和MDA水平均降低(P<0.05),HDL-C、SOD、CAT和GSH水平均升高(P<0.05);股骨组织中骨小梁断裂状态较少,排列、形态结构和骨质流失均呈现较大改善,BMD、Tb.N和Tb.Th均升高(P<0.05),股骨组织中BALP、OCN和Runx2蛋白表达水平均升高(P<0.05),AKT和NFATc1蛋白磷酸化水平均降低(P<0.05),GSK3β蛋白磷酸化水平升高(P<0.05)。与L-Ses组比较,H-Ses组大鼠血清中FPG、FINS、HBA1c、TC、TG、LDL-C、SOD、CAT、GSH和MDA水平均降低(P<0.05),HDL-C水平升高(P<0.05);大鼠股骨组织和形态稍有缓解,BMD、Tb.N和Tb.Th均升高(P<0.05),股骨组织中BALP、OCN和Runx2蛋白表达水平均升高(P<0.05),AKT和NFATc1蛋白磷酸化水平均降低(P<0.05),GSK3β蛋白磷酸化水平升高(P<0.05)。结论:芝麻素可能通过抑制AKT/GSK3β/NFATc1信号通路,促进骨形成,进而缓解T2DOP大鼠的骨质疏松症进展。 展开更多
关键词 芝麻素 AKT/GSK3β/NFATc1信号通路 2型糖尿病 骨质疏松症
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