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抑制NFBD1表达对喉癌放化疗敏感度影响的研究
被引量:
1
1
作者
邱志利
蒋晓平
+1 位作者
袁小东
谭嘉萌
《中国眼耳鼻喉科杂志》
2018年第5期316-320,324,共6页
目的研究抑制NFBD1基因表达后,对喉癌细胞放化疗敏感度的影响。方法应用慢病毒感染RNA干扰(RNAi)技术稳定下调人喉癌细胞Hep-2中NFBD1基因的表达,采用实时定量聚合酶链反应(QRTPCR)技术及Western印迹技术检测NFBD1基因mRNA和蛋白的表达...
目的研究抑制NFBD1基因表达后,对喉癌细胞放化疗敏感度的影响。方法应用慢病毒感染RNA干扰(RNAi)技术稳定下调人喉癌细胞Hep-2中NFBD1基因的表达,采用实时定量聚合酶链反应(QRTPCR)技术及Western印迹技术检测NFBD1基因mRNA和蛋白的表达,以验证RNAi的有效性。采用流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期,采用MTT比色法观察抑制NFBD1基因表达后对喉癌细胞放化疗后生长的影响。TUNEL检测细胞的凋亡情况。结果 QRT-PCR及Western印迹分析表明,慢病毒感染RNAi技术在mRNA及蛋白水平均能高效、特异地抑制NFBD1基因的表达;TUNEL染色结果显示,转染NFBD1 siRNA的Hep-2细胞其凋亡率显著增加。流式细胞术结果显示,转染NFBD1 siRNA的Hep-2细胞在放疗后的凋亡率及G2/M期阻滞显著增加。MTT比色结果显示,转染NFBD1 siRNA的Hep-2细胞在放化疗后的细胞存活率显著降低。结论重组的慢病毒NFBD1 siRNA序列能有效抑制NFBD1基因的表达,从而增加喉癌细胞的放化疗敏感度。
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关键词
喉癌
nfbd1
基因
放化疗敏感度
RNA干扰
下载PDF
职称材料
携带人NFBD1基因shRNA重组逆转录病毒载体的构建及鉴定
2
作者
程莉
袁成福
+5 位作者
黄秀凝
卜友泉
易发平
刘革力
汪长东
宋方洲
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第9期87-91,共5页
建立逆转录病毒介导的NFBD1基因RNA干扰表达体系,并观察其在宫颈癌SiHa细胞中对NFBD1表达的影响。将人NFBD1基因RNA干扰双链DNA片段重组到pSUPER Retro质粒中,构建携带人NFBD1基因RNA干扰的逆转录病毒载体pSUPER-shRNA-NFBD1,经PT67细...
建立逆转录病毒介导的NFBD1基因RNA干扰表达体系,并观察其在宫颈癌SiHa细胞中对NFBD1表达的影响。将人NFBD1基因RNA干扰双链DNA片段重组到pSUPER Retro质粒中,构建携带人NFBD1基因RNA干扰的逆转录病毒载体pSUPER-shRNA-NFBD1,经PT67细胞包装后,产生的重组逆转录病毒感染宫颈癌细胞株SiHa细胞,并用嘌呤霉素筛选产生稳定的细胞克隆,用实时荧光定量PCR和Westernblotting检测细胞中NFBD1mRNA和蛋白表达的变化。重组逆转录病毒质粒经测序鉴定正确;逆转录病毒感染SiHa细胞后用嘌呤霉素筛选出稳定的细胞克隆;实时荧光定量PCR和Westernblot-ting检测人NFBD1mRNA和蛋白表达水平明显低于阴性对照组和未干扰组。携带人NFBD1基因RNA干扰双链DNA片段的逆转录病毒感染SiHa细胞后能明显抑制NFBD1mRNA和蛋白表达,为进一步研究NFBD1在宫颈癌中的作用奠定了基础。
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关键词
逆转录病毒载体
SHRNA
nfbd1
基因
宫颈癌
下载PDF
职称材料
题名
抑制NFBD1表达对喉癌放化疗敏感度影响的研究
被引量:
1
1
作者
邱志利
蒋晓平
袁小东
谭嘉萌
机构
重庆三峡中心医院耳鼻喉科
出处
《中国眼耳鼻喉科杂志》
2018年第5期316-320,324,共6页
基金
重庆市万州区科技计划项目(201503022)
文摘
目的研究抑制NFBD1基因表达后,对喉癌细胞放化疗敏感度的影响。方法应用慢病毒感染RNA干扰(RNAi)技术稳定下调人喉癌细胞Hep-2中NFBD1基因的表达,采用实时定量聚合酶链反应(QRTPCR)技术及Western印迹技术检测NFBD1基因mRNA和蛋白的表达,以验证RNAi的有效性。采用流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期,采用MTT比色法观察抑制NFBD1基因表达后对喉癌细胞放化疗后生长的影响。TUNEL检测细胞的凋亡情况。结果 QRT-PCR及Western印迹分析表明,慢病毒感染RNAi技术在mRNA及蛋白水平均能高效、特异地抑制NFBD1基因的表达;TUNEL染色结果显示,转染NFBD1 siRNA的Hep-2细胞其凋亡率显著增加。流式细胞术结果显示,转染NFBD1 siRNA的Hep-2细胞在放疗后的凋亡率及G2/M期阻滞显著增加。MTT比色结果显示,转染NFBD1 siRNA的Hep-2细胞在放化疗后的细胞存活率显著降低。结论重组的慢病毒NFBD1 siRNA序列能有效抑制NFBD1基因的表达,从而增加喉癌细胞的放化疗敏感度。
关键词
喉癌
nfbd1
基因
放化疗敏感度
RNA干扰
Keywords
Laryngeal carcinoma
nfbd1 gene
Chemoradiotherapy sensitivity
RNA interference
分类号
R739.65 [医药卫生—肿瘤]
下载PDF
职称材料
题名
携带人NFBD1基因shRNA重组逆转录病毒载体的构建及鉴定
2
作者
程莉
袁成福
黄秀凝
卜友泉
易发平
刘革力
汪长东
宋方洲
机构
重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第9期87-91,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(30872758)
教育部博士点基金资助项目(20070631011)
重庆市科委自然科学基金资助项目(2007BB5302)
文摘
建立逆转录病毒介导的NFBD1基因RNA干扰表达体系,并观察其在宫颈癌SiHa细胞中对NFBD1表达的影响。将人NFBD1基因RNA干扰双链DNA片段重组到pSUPER Retro质粒中,构建携带人NFBD1基因RNA干扰的逆转录病毒载体pSUPER-shRNA-NFBD1,经PT67细胞包装后,产生的重组逆转录病毒感染宫颈癌细胞株SiHa细胞,并用嘌呤霉素筛选产生稳定的细胞克隆,用实时荧光定量PCR和Westernblotting检测细胞中NFBD1mRNA和蛋白表达的变化。重组逆转录病毒质粒经测序鉴定正确;逆转录病毒感染SiHa细胞后用嘌呤霉素筛选出稳定的细胞克隆;实时荧光定量PCR和Westernblot-ting检测人NFBD1mRNA和蛋白表达水平明显低于阴性对照组和未干扰组。携带人NFBD1基因RNA干扰双链DNA片段的逆转录病毒感染SiHa细胞后能明显抑制NFBD1mRNA和蛋白表达,为进一步研究NFBD1在宫颈癌中的作用奠定了基础。
关键词
逆转录病毒载体
SHRNA
nfbd1
基因
宫颈癌
Keywords
Retrovirus vector shRNA
nfbd1 gene
Cervical cancer
分类号
R737.33 [医药卫生—肿瘤]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
抑制NFBD1表达对喉癌放化疗敏感度影响的研究
邱志利
蒋晓平
袁小东
谭嘉萌
《中国眼耳鼻喉科杂志》
2018
1
下载PDF
职称材料
2
携带人NFBD1基因shRNA重组逆转录病毒载体的构建及鉴定
程莉
袁成福
黄秀凝
卜友泉
易发平
刘革力
汪长东
宋方洲
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
0
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
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