miR-200家族在西农萨能奶山羊乳腺组织中的表达分析

笔者拟获得山羊miR-200家族乳腺组织表达谱,研究miR-200家族成员之间表达相关性及miR-200家族成员与山羊乳成分的相关性。通过定量PCR,检测miR-200家族在西农萨能奶山羊泌乳中期和干奶期乳腺组织中的表达量;利用Pearson相关系数分析miR-200家族不同成员表达量之间的相关性,同时分析miR-200家族成员与山羊乳成分之间的相关关系;利用miRanda和TargetScan 6.2软件分析、RNAhybrid和PITA软件预测miR-200家族的靶基因。结果表明,miR-200家族在奶山羊泌乳中期的乳腺组织中的表达量极显著高于干奶期(P<0.01);miR-200a与miR-141之间的表达量显著相关(P<0.05),miR-200b与miR-200c之间的表达量极显著相关(P<0.01);泌乳中期奶山羊乳腺组织中miR-200c的表达量与乳蛋白、非脂固形物(SNF)、冰点(FPD)的含量显著相关(P<0.05);经软件分析及预测发现,miR-200a/miR-141靶向作用于在乳脂合成中起关键作用的基因STAT4。miR-200家族可能对山羊乳蛋白及乳脂合成具有一定的调控作用。

miR-200c调控RhoA基因表达介导RMP7增加血肿瘤屏障通透性机制的研究

目的研究miR-200c调控Ras基因家族成员A(RhoA)表达介导RMP7增加血肿瘤屏障(BTB)通透性的机制。方法应用real-time PCR检测RMP7作用BTB后人脑微血管内皮细(ECs)miR-200c的表达;应用miR-200c模拟物和miR-200c抑制物分别转染GECs(ECs和U87脑胶质瘤细胞共培养的细胞),测量跨内皮阻抗值(TEER)、辣根过氧化物酶(HRP)渗漏量,分析BTB通透性;应用Western blotting检测RhoA的表达;应用免疫荧光方法观察GECs中RhoA表达和分布;应用双荧光素酶报告基因检测miR-200c转录后水平调控RhoA机制。结果 RMP7作用GECs后,使GECs内源性miR-200c表达显著降低;miR-200c模拟物和miR-200c抑制物成功转染到GECs中;miR-200c模拟物显著抑制RMP7诱导TEER值的降低、HRP的升高;miR-200c模拟物显著减少RhoA的表达,促使RhoA在GECs细胞质和细胞核分布减少;miR-200c模拟物转录后水平负性调控RhoA基因表达。miR-200c抑制物与miR-200c模拟物实验结果相反。结论 miR-200c转录后水平负性调控RhoA表达,介导RMP7增加血肿瘤屏障通透性机制。

Hsa-miR-200a真核表达载体的构建及鉴定

目的:通过构建及鉴定miR-200a的真核表达载体pcDNA3.1(+)-miR-200a,为进一步研究miR-200a的功能奠定实验基础。方法:RT-PCR扩增pre-miR-200a基因序列,连接于表达载体pcDNA3.1(+)中,对重组质粒双酶切鉴定并测序验证。结果:pcDNA3.1(+)-miR-200a真核表达载体经酶切及测序鉴定正确。结论:pcDNA3.1(+)-miR-200a真核表达载体构建成功,为下一步深入研究miR-200a的生物学功能和验证miR-200a的靶基因提供有效工具。

miR200c及EZH2在乳腺癌中的表达及关系

目的:探究miR200c及组蛋白甲基化转移酶2(EZH2)在乳腺癌中的表达及关系。方法:收集70例浸润性导管乳腺癌(IDC)患者的乳房上皮标本(10例导管原位癌、20例原发性IDC、20例区域淋巴结受累原发性IDC及20例远处转移IDC)及15例正常乳房上皮临床组织标本,同时收集转染si AFAP-EZH2质粒(si EZH2组)、转染siRNA control(control组)及不进行转染(空白组)的乳腺癌MDA-MB-468细胞;采用实时定量PCR检测临床组织标本及各组乳腺癌细胞中miR-200c及EZH2 mRNA表达水平,比较EZH2 mRNA高表达及低表达乳腺癌组织中miR-200c表达水平;观察下调EZH2表达对乳腺癌细胞中miR-200c mRNA表达的影响,Transwell实验检测下调EZH2表达对乳腺癌细胞侵袭能力的影响。结果:与对照组比较,各组乳腺癌组织标本中miR-200c表达水平显著升高(P <0. 05),且淋巴结受累及远处转移严重程度越高,miR-200c水平升高越显著(P <0. 05);各组乳腺癌组织标本中EZH2 mRNA表达显著降低(P <0. 05),乳腺癌有远处转移组EZH2 mRNA表达水平显著低于淋巴结受累组(P <0. 05);与control组和空白组比较,si EZH2组EZH2 mRNA表达水平显著降低(P <0. 05); EZH2高表达组乳腺癌组织中miR-200c表达水平较EZH2低表达组明显降低(P <0. 05);转染si AFAPEZH2后的乳腺癌细胞miR-200c表达水平明显高于control组和空白组(P <0. 05); Transwell实验结果显示,下调EZH2表达时MDA-MB-468细胞的侵袭能力增加(P <0. 05)。结论:乳腺癌的发生发展与EZH2及miR-200c表达有关,调控乳腺癌细胞EZH2及miR-200c表达的可调控乳腺癌的侵袭转移。

妊娠期糖尿病视网膜病变患者血清miR-200c-3p、 miR-20b-5p表达水平及检测临床意义

目的:探讨妊娠期糖尿病视网膜病变(DR)患者血清miR-200c-3p、miR-20b-5p水平变化及检测临床意义。方法:选择妊娠期糖尿病孕妇80例(GDM组)和DR孕妇75例(DR组),正常妊娠期女性95例(对照组)。采用qRT-PCR法对受试者血清miR-200c-3p、miR-20b-5p水平进行测定,采用全自动生化分析仪对受试者低密度脂胆固醇(LDL-C)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)进行测定,采用血糖检测仪对受试者空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2 hPG)进行测定。结果:GDM组、DR组患者FPG、2 hPG、LDL-C、TG、TC、miR-200c-3p、miR-20b-5p值显著高于对照组(均P<0.05);DR组患者FPG、2 hPG、LDL-C、TG、TC、miR-200c-3p、miR-20b-5p值显著高于GDM组(均P<0.05);随着病情严重程度的增加,DR组患者miR-200c-3p、miR-20b-5p水平显著升高(均P<0.05);预后不良组DR患者FPG、2 hPG、LDL-C、TG、TC、miR-200c-3p、miR-20b-5p值显著高于预后良好组(均P<0.05);多因素Logistic回归分析显示血清miR-200c-3p、miR-20b-5p水平升高为DR患者发生预后不良的危险因素;ROC曲线结果显示,血清miR-200c-3p、miR-20b-5p、两者联合诊断DR患者不良预后曲线下面积(AUC)为0.927(95%CI:0.843~0.974)、0.848(95%CI:0.746~0.920)、0.985(95%CI:0.924~0.999)。结论:DR患者血清miR-200c-3p、miR-20b-5p水平升高,对DR不良预后具有一定的预测价值。

牦牛lncFAM200B的克隆鉴定、表达及生物信息学分析

旨在克隆鉴定牦牛lncFAM200B,为探索其在牦牛肌肉和脂肪发育过程中的调控作用奠定基础。以臀肌cDNA为模板,设计特异性引物扩增lncFAM200B全长序列,用在线软件CPC、CPAT对该lncRNA的编码能力进行预测,进一步通过原核表达试验鉴定其编码能力;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)对lncFAM200B进行组织表达分析,通过TargetScan 7.1和miRanda预测与lncFAM200B具有潜在相互作用miRNA的靶基因,利用DAVID在线软件对靶基因进行GO和KEGG分析。结果显示,牦牛lncFAM200B长度为531 bp;相较于普通牛多59 bp,编码潜能为-1.2874,且原核表达试验验证该lncRNA不具备蛋白编码能力,表明牦牛lncFAM200B确为lncRNA;组织表达谱研究表明,lncFAM200B在牦牛肺脏组织中表达量较高。与lncFAM200B具有潜在相互作用miRNA的靶基因,如Sirt1、SCD5、KLF9、PTEN和MYPN等,与肌肉和脂肪发育相关。为进一步探讨牦牛lncFAM200B在肌肉和脂肪发育中的生物学功能提供参考依据。

MNDA及MNDA-HIN200片段在大肠杆菌中克隆、表达及纯化

MNDA蛋白是与免疫反应相关的HIN-200家族成员之一,可作为模式识别受体来识别外源性双链DNA,它在人类免疫性疾病中发挥重要作用。通过PCR扩增获得的MNDA全长cDNA和MNDA-HIN200基因片段克隆到原核表达载体pET-28a中,使其N端带有一个His标签,将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)表达菌株,经IPTG诱导后,分别经过亲和层析和分子筛层析对MNDA和MNDA-HIN200进行纯化。DNA测序表明,构建的重组质粒正确,筛选了蛋白最适表达菌株BL21(DE3);由于PYD(88 aa)结构域之间的相互作用影响MNDA的表达量及聚集状态,因此设计了PYD缺失的只含有HIN-200结构域的突变体MNDA-HIN200,最终获得了大量的、均一性好、高纯度的MNDA-HIN200蛋白,为MNDA的蛋白的晶体筛选和结构解析奠定基础。

CD200表达与结直肠癌的关系研究

目的探讨CD200在结肠癌组织中的表达以及在肿瘤微环境中的作用。方法应用组织芯片技术,对43例结肠癌组织以及26例癌旁正常组织CD200的表达进行对比研究。结果结肠癌组织与癌旁正常组织中CD200的表达存在差异,癌组织中CD200表达强度及表达范围均显著高于正常组织(P=0.001)。结论 CD200在结肠癌组织中呈高表达,提示其在肿瘤微环境免疫调节中具有潜在的价值。

miR-200c通过下调TUBB3基因表达逆转老年肺癌患者顺铂耐药性的机制

目的探讨miR-200c逆转肺癌细胞顺铂耐药性的作用机制。方法miR-200c模拟物转染肺癌A549细胞后,采用实时定量PCR法检测miR-200c的表达;采用细胞活力测定(MTS)法检测miR-200c对肺癌A549细胞顺铂耐受性的影响。采用流式细胞术(FCM)检测肿瘤细胞凋亡率的变化。采用Western blotting检测肿瘤细胞耐药蛋白survivin和Bcl-2蛋白的表达。通过生物信息学分析发现miR-200c下游靶分子TUBB3表达存在差异后,构建TUBB33′UTR的野生型和突变型荧光素酶报告载体,然后利用双荧光素酶活性分析miR-200c对TUBB3基因表达的结合位点和调控作用。通过Western blotting检测miR-200c对TUBB3蛋白表达的调控作用以及Bcl-2蛋白和肿瘤细胞耐药蛋白survivin的表达。采用SPSS 19.0统计软件分析实验数据。结果与对照组相比,miR-200c转染肺癌细胞株后,肺癌细胞对顺铂的敏感性呈明显增加趋势[IC50分别为(37.3±3.1)和(15.3±3.3)μmol/L,P<0.01]。过表达miR-200c的A549/DDP组的细胞凋亡率明显高于NC组(P<0.01)。而肿瘤耐药相关基因Bcl-2和survivin蛋白表达降低。转染miR-200c mimics的A549/DDP细胞中TUBB3蛋白和mRNA的表达均下调(P<0.01)。双荧光素酶活性分析显示miR-200c对TUBB3基因表达具有调控作用(P<0.01)。这些结果均证实TUBB3为miR-200c的下游靶基因。pcDNA-TUBB3质粒转染后,过表达miR-200c的A549/DDP细胞株survivin和Bcl-2蛋白表达较miR-200c mimics组上调。结论miR-200c可通过下调TUBB3基因的表达逆转肺癌顺铂耐药细胞的耐药性。

延边半细毛羊羊毛细度测定及其CD200基因克隆与表达分析

本研究旨在了解CD200基因与延边半细毛羊毛用性状的相关性,为延边半细毛羊群体育种奠定理论基础。实验选择相同条件下饲养的体重相近的10月龄雌性延边半细毛羊20只,首先测定延边半细毛羊的细度,然后根据NCBI中绵羊CD200基因(登录号:XM012190412)的CDS区序列设计引物,通过RT-PCR扩增并克隆CD200基因,采用生物信息学软件进行序列分析;通过免疫组化方法说明CD200在皮肤毛囊中的定位表达。结果显示:延边半细毛羊的羊毛纤维直径为(19.26±2.69)μm;实验成功克隆出CD200基因,长度为729 bp,编码242个氨基酸残基,预测到蛋白二级结构由α螺旋、延伸链、无规则卷曲构成,蛋白质三级结构为球形;免疫组化结果显示CD200在毛囊的外根鞘、毛囊干细胞及表皮层表达。本研究结果表明延边半细毛羊的羊毛细度较细,可用于细毛羊的育种;CD200可能参与调控羊毛细度的表达。

肝细胞癌中miR-200a的表达水平及其临床意义

目的探讨miR-200a在肝细胞癌(HCC)组织及癌旁组织中的表达及其临床意义。方法采用实时荧光定量PCR检测HCC组织和癌旁组织中miR-200a的表达水平,并结合患者临床资料进行分析。结果 miR-200a在HCC组织中的表达水平明显低于癌旁组织,两者比较差异有统计学意义(P<0.05);miR-200a在HCC组织中的表达水平与患者病理分级有关(P<0.05),但与其他临床病理指标均无关(P>0.05)。结论 miR-200a在HCC组织中表达下调,可能与肝癌发生有关,有望成为HCC早期诊治的靶标。

血浆miRNA-200b及miRNA-21在浆液性卵巢癌中的表达特点分析

目的探讨血浆miRNA-200b及miRNA-21在浆液性卵巢癌中的表达特点。方法研究时间为2013年8月到2017年12月,采用回顾性、总结研究方法,选择浆液性卵巢癌患者60例作为卵巢癌组,同时选取同期患有良性上皮性卵巢肿瘤患者50例作为良性组,选择具有正常卵巢组织的40例患者作为对照组。采用荧光定量PCR检测3组患者血浆miRNA-200b及miRNA-21表达情况,调查患者的临床资料与其进行相关性分析。结果卵巢癌组中血浆miR-21、miRNA-200b相对表达量显著高于良性组与对照组(P <0. 05),miR-21、miRNA-200b在良性组与对照组中的相对表达量对比,差异无统计学意义(P> 0. 05)。不同临床分期、分化程度卵巢癌患者的miRNA-200b及miRNA-21表达量对比,差异都有统计学意义(P <0. 05)。在卵巢癌患者中,线性相关分析显示血浆miRNA-200b与miRNA-21表达量成正相关性(γ=0. 562,P <0. 05)。结论血浆miRNA-200b与miRNA-21在卵巢癌中呈现高表达状况,与患者的临床分期与组织学分化程度显著相关,两者可相互影响,在卵巢癌的发生、发展中发挥癌基因的功能。

microRNA-200c在胰腺癌干细胞中的表达及作用研究

目的分析microRNA-200c在胰腺癌干细胞中的表达及作用。方法在人胰腺癌的PANC-1细胞采取流式细胞术分选胰腺癌的干细胞,通过NOD/SCID鼠的瘤移植验证干细胞的特性;并采取RFQPCR检测胰腺癌干细胞、PANC-1细胞以及转染microRNA-200c的表达及侵袭的能力。结果 NOD/SCID鼠的瘤移植验证PANC-1细胞中分选胰腺癌干细胞具肿瘤干细胞的特性,瘤移植鼠的皮下胰腺癌干细胞瘤体积(1673.56±258.77)mm3大于移植同期的PANC-1细胞瘤体积(482.41±96.44)mm3;microRNA-200c表达量上,胰腺癌干细胞(0.14±0.01)%低于PANC-1细胞(0.98±0.11)%,平均穿膜的细胞数上,胰腺癌干细胞(311.00±6.93)个多于PANC-1细胞(73.00±17.11)个,转染microRNA-200c前体片段后,胰腺癌干细胞microRNA-200c表达量上升,平均穿膜的细胞数上明显降低(P<0.05)。结论 microRNA-200c在胰腺癌干细胞中的表达降低,microRNA-200c能够对胰腺癌的干细胞生长与减弱侵袭起到抑制的作用。

INSM1、CD200、突触素在胰腺神经内分泌肿瘤诊断中的作用及实用性探讨

目的探讨INSM1、CD200、突触素在胰腺神经内分泌肿瘤诊断中的作用。方法以免疫组织化学法为基础对2019年10月—2020年1月山东省聊城市第二人民医院参与研究的66例胰腺神经内分泌肿瘤患者进行病理诊断,选取60例胰腺非神经内分泌肿瘤患者,检测INSM1、CD200、突触素的表达,通过病理结果为金标准对INSM1、CD200、突触素及其组合在胰腺神经内分泌肿瘤中的诊断意义进行分析。结果胰腺神经内分泌肿瘤中,INSM1、CD200、突触素阳性率高于胰腺非神经内分泌肿瘤,差异有统计学意义(χ^(2)=58.570、67.120、64.156,P<0.05);INSM1、CD200、突触素对胰腺神经内分泌肿瘤的诊断效能差异无统计学意义(P>0.05),三者联合检测时,诊断的敏感度、特异度及准确度为98.48%、100.00%、99.21%,明显高于单项指标的诊断效能,差异有统计学意义(P<0.05)。结论INSM1与CD200、突触素是胰腺神经内分泌肿瘤临床诊断中的新型标志物,其对胰腺神经内分泌肿瘤得到有效诊断有积极意义,将三者联合应用,能进一步提升诊断效能。

LncFAM200B对牦牛肌内前体脂肪细胞脂质沉积的影响

【目的】拟通过腺病毒介导的超表达及siRNA干扰试验,分析lncFAM200B对牦牛肌内脂肪细胞脂质沉积的影响,为解析lncFAM200B对牦牛肌内脂肪细胞脂质沉积的调控机制奠定基础。【方法】采集牦牛背最长肌组织,采用酶消化法和差速贴壁法分离牦牛肌内前体脂肪细胞;构建包装lncFAM200B超表达腺病毒,设计合成其siRNA干扰序列;通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分析lncFAM200B超表达与干扰后脂肪分化标志基因PPARγ、C/EBPα、AP2,lncFAM200B潜在靶基因SIRT1、PTEN的表达水平;采用油红O染色、甘油三酯(TAG)测定、CCK-8检测等方法检测细胞内脂滴沉积情况、甘油三酯含量变化及细胞增殖情况。【结果】从牦牛背最长肌成功分离获得肌内前体脂肪细胞;lncFAM200B超表达后,脂肪分化标志基因C/EBPα、AP2表达量显著升高(P<0.05),随着诱导分化时间的增加,lncFAM200B潜在靶基因SIRT1表达量呈先降低后升高的趋势,PTEN表达量呈现先增高后降低趋势;细胞脂滴沉积显著增加(P<0.05),且胞内形成较大脂滴;超表达4 d后,细胞内甘油三酯含量显著增加(P<0.05)。干扰lncFAM200B可显著降低脂肪分化标志基因PPARγ、C/EBPα、AP2的表达水平(P<0.05),降低细胞脂肪沉积,且诱导分化第6天细胞内甘油三酯含量显著降低(P<0.05);干扰lncFAM200B后其潜在靶基因SIRT1呈现先升高后降低的表达趋势,PTEN则相反。CCK-8增殖实验表明,lncFAM200B超表达72 h后,细胞增殖效率显著降低(P<0.05),而干扰lncFAM200B后72 h后细胞增殖效率显著增强(P<0.05)。【结论】lncFAM200B可能通过影响脂肪分化标志基因C/EBPα和AP2,脂肪合成相关基因SIRT1和PTEN的表达从而影响牦牛肌内脂肪沉积,但其具体机制还需要进一步研究。

microRNA-200a在肝病发生发展中的作用

microRNA(miRNA)是一类小分子非编码RNA,能通过调控基因表达参与细胞的增殖和凋亡等多个环节。越来越多的证据表明miRNA-200a参与非酒精性脂肪性肝病、酒精性肝病、药物性肝损伤、肝纤维化以及肝细胞癌的发生发展,本文总结了关于miRNA-200a通过靶向其不同的下游靶基因,调控相关信号通路进而在多种肝病的进展中发挥的不同的作用,为探索多种肝病的机制研究提供参考。

miR-200b对奶牛乳腺上皮细胞泌乳功能的影响

为探索miR-200b对奶牛乳腺上皮细胞泌乳能力的影响,以奶牛乳腺上皮细胞为体外研究模型,利用miR-200b mimics转染进行miR-200b过表达;应用生物信息学软件分析预测miR-200b靶基因,qRT-PCR检测miR-200b过表达后预测靶基因及乳成分合成相关信号通路关键基因mRNA表达的变化;通过CASY细胞活力分析仪及5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷(Ed U)标记法分别检测miR-200b过表达对细胞活力及增殖的影响;应用CSN2(β-酪蛋白)试剂盒、TG试剂盒及乳糖试剂盒检测细胞胞外分泌β-酪蛋白、甘油三酯及乳糖含量的变化。生物信息学分析显示,miR-200b与乳腺泌乳功能基因Pten、Dnmt3a、Dnmt3b的3'UTR区序列具有互补结合的位点;qRT-PCR分析结果显示,与对照组相比,过表达miR-200b后的奶牛乳腺上皮细胞中Pten mRNA的表达量显著降低,而乳成分合成相关信号通路关键基因Akt、Srebp1、Csn2、Glut1 mRNA的表达量显著上调;miR-200b过表达能够提高奶牛乳腺上皮细胞活力,促进奶牛乳腺上皮细胞增殖及β-酪蛋白、甘油三酯和乳糖的合成分泌。综上,miR-200b能够负调控靶基因Pten的表达进而在奶牛乳腺泌乳过程中发挥重要的正调控作用。

缺氧缺血性脑损伤大鼠miR-200b对Rac-1的调控作用研究

目的分析缺氧缺血性脑损伤动物模型miR-200b及Rac-1 mRNA表达,以及转染miR-200b后Rac-1 mRNA表达变化,并探讨miR-200b对Rac-1 mRNA可能存在的调控关系。方法采用氧糖剥夺策略建立缺氧缺血性脑损伤新生大鼠模型,取全脑片分为4组:空白对照组、缺氧缺糖组、miR-200b转染组、阴性对照转染组,空白对照组正常培养,余3组予缺氧缺糖培养60 min,后缺氧缺糖组置于CO 2培养箱中继续培养,miR-200b转染组、阴性对照转染组进行相关转染。12 h、24 h、3 d、5 d和7 d采用实时定量聚合酶链式反应进行miR-200b及Rac-1 mRNA检测。结果成功建立了以纳米聚合物EntransterTM为载体转染miR-200b的方法。空白对照组12 h~3 d miR-200b mRNA表达呈上升趋势,3~7 d呈下降趋势。相反,缺氧缺糖组12 h~3 d miR-200b mRNA表达呈下降趋势,3~7 d呈上升趋势。miR-200b转染组miR-200b mRNA表达明显高于缺氧缺糖组及空白对照组(P<0.05)。空白对照组12 h~3 d Rac-1 mRNA表达呈下降趋势,3~7 d呈上升趋势;缺氧缺糖组12 h~5 d Rac-1 mRNA表达呈上升趋势,5~7 d呈下降趋势。24 h~7 d经缺氧缺糖处理各组Rac-1 mRNA表达一直高于空白对照组。miR-200b在mRNA水平上不影响Rac-1 mRNA表达。结论缺氧缺糖条件会导致脑组织中miR-200b mRNA表达下调及Rac-1 mRNA表达上调;miR-200b对Rac-1的调控关系尚未明确,仍需进一步实验验证。

肝硬化患者红细胞CD44数量表达与血清透明质酸含量变化的关系研究

目的:研究肝硬化患者红细胞CD44数量与血清透明质酸含量变化的关系。方法:将戊二醛固定的2% 红细胞悬液定量“液相包被”到V型板中,依次加入鼠抗人CD44单克隆抗体、碱性磷酸酶标记的羊抗鼠第二抗体,洗板后加底物显色,移显色液于比色板中,测定其A405吸光值。本文对111例肝硬化病人的红细胞CD44进行测定,同时采用AU600全自动生化仪检测其胆碱酯酶(CHE),采用ACL200检测凝血酶原活动度(PTA),采用ELISA定量试剂盒检测血清透明质酸含量。结果:肝硬化患者红细胞CD44数量表达都显著低于正常对照,并且重度肝硬化患者的红细胞CD44的数量变化显著低于轻度肝硬化患者(t=-4. 55,P=5. 76×10-6 ),肝硬化患者红细胞CD44变化与血清HA含量的变化关系密切(P<0. 01),同时与CHE和PTA的变化密切相关(P<0 .05)。结论:肝硬化患者的红细胞CD44数量变化与其病情发展关系密切。

基于Cre/loxP重组系统的多基因载体构建及烟草转化研究

利用一套基于Cre/loxP重组系统的植物多基因表达载体系统将苏云杆菌毒蛋白基因(BtCryIAc)、甜菜碱醛脱氢酶基因(BADH)、GA20氧化酶基因(pttGA20ox)和rolB基因构建于植物表达载体pYL1305上,命名为pYL1305BBGR。采用农杆菌介导的叶盘法转化烟草,经PCR和Southern blot检测发现,多基因已成功转入烟草基因组中;经半定量RT-PCR检测证实,4个基因均能正常表达。