期刊导航
期刊开放获取
河南省图书馆
退出
期刊文献
+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
检索
高级检索
期刊导航
共找到
3
篇文章
<
1
>
每页显示
20
50
100
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
显示方式:
文摘
详细
列表
相关度排序
被引量排序
时效性排序
人源抗NH-LBP Fab抗体的制备和初步鉴定
被引量:
2
1
作者
葛晓冬
邹佳
+2 位作者
刘友生
杨艳丽
段光杰
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第4期359-362,共4页
目的构建人源抗脂多糖结合蛋白氨基端片段(NH-LBP)Fab抗体的原核表达载体,并制备高稳定性Fab抗体。方法用PCR方法,从可溶性表达抗NH-LBP抗体的重组质粒pComb3H-Fab中扩增出VH链和VL链基因序列,分别构建表达质粒pET-28a(+)-VH和pET-28a(+...
目的构建人源抗脂多糖结合蛋白氨基端片段(NH-LBP)Fab抗体的原核表达载体,并制备高稳定性Fab抗体。方法用PCR方法,从可溶性表达抗NH-LBP抗体的重组质粒pComb3H-Fab中扩增出VH链和VL链基因序列,分别构建表达质粒pET-28a(+)-VH和pET-28a(+)-VL,并于工程菌BL21(DE3)star中分别表达及TALON柱芯亲和纯化,将抗体片段VH和VL共同复性,通过二硫键形成Fab抗体,再采用ELISA法初步鉴定其与NH-LBP的结合力。结果扩增出VL链和VH基因片段长约为650bp和700bp,经BL21star表达出相对分子质量(Mr)约为28000和30000的目的蛋白,共同折叠后所获得Fab抗体与NH-LBP具有较高的结合力。结论成功地制备抗NH-LBPFab抗体,为临床抗炎研究提供了条件。
展开更多
关键词
脂多糖结合蛋白氨基端片段(
nh-lbp
)
人源抗体Fab
高效表达
下载PDF
职称材料
抗氨基末端脂多糖结合蛋白基因工程抗体库的构建及体外表达筛选
被引量:
2
2
作者
王长松
刘友生
+3 位作者
李红
葛晓冬
邓军
陈燕平
《中国生物制品学杂志》
CAS
CSCD
2005年第3期177-181,共5页
目的构建人源化的单链可变区抗体库,运用体外表达技术翻译并筛选特异性的抗NHLBP抗体。方法分离健康人外周血单核细胞,抽提总RNA设计引物,扩增抗体轻重链的可变区,通过一段柔性片段将其连接成单链抗体库;应用体外表达技术翻译抗体库,并...
目的构建人源化的单链可变区抗体库,运用体外表达技术翻译并筛选特异性的抗NHLBP抗体。方法分离健康人外周血单核细胞,抽提总RNA设计引物,扩增抗体轻重链的可变区,通过一段柔性片段将其连接成单链抗体库;应用体外表达技术翻译抗体库,并筛选出与NHLBP高度结合的单链抗体片段。结果扩增的单链抗体可变区片段分别为340bp和325bp,经连接后约为750bp。经过体外表达得到了约27000的抗体片段,经过5轮筛选进化,得到了可与NHLBP高度结合的抗体。结论已成功构建了人源化的单链抗体库;通过体外表达技术筛选到可与NHLBP高度结合的抗体。
展开更多
关键词
体外表达
脂多糖结合蛋白
抗体库
筛选
构建
基因工程
外周血单核细胞
氨基
单链抗体
可变区
总RNA
人源化
片段
特异性
技术
健康人
高度
翻译
连接
引物
进化
下载PDF
职称材料
用杆状病毒-昆虫细胞系统表达、纯化重组的人源化氨基末端LBP
3
作者
王长松
刘友生
+2 位作者
葛晓冬
李红
陈燕平
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
2004年第12期69-73,共5页
根据已有的资料显示LBP与LPS的结合位点位于其氨基末端的第 91~ 1 0 0个氨基酸残基。在体外构建含有人LBP与LPS结合活性部分的穿梭质粒pBacmidtLBP ,并且带上 6×his的标签 ,用此穿梭质粒转染sf2 1昆虫细胞 ,获得重组病毒。然后用...
根据已有的资料显示LBP与LPS的结合位点位于其氨基末端的第 91~ 1 0 0个氨基酸残基。在体外构建含有人LBP与LPS结合活性部分的穿梭质粒pBacmidtLBP ,并且带上 6×his的标签 ,用此穿梭质粒转染sf2 1昆虫细胞 ,获得重组病毒。然后用重组病毒液感染对数生长期的sf2 1昆虫细胞 ,72h后收获含有这种截断型人源化氨基末端LBP (NH LBP)的培养上清。用金属亲和树脂纯化后 ,采用SDS PAGE电泳以及Western Blot鉴定所得到的纯化物。成功获得相对分子质量约为 30 0 0 0的NH LBP。为进一步研究LBP在介导LPS活化靶细胞中的作用机制奠定了基础。
展开更多
关键词
LBP
昆虫细胞
LPS
人源化
穿梭质粒
纯化
表达
重组病毒
生长期
收获
下载PDF
职称材料
题名
人源抗NH-LBP Fab抗体的制备和初步鉴定
被引量:
2
1
作者
葛晓冬
邹佳
刘友生
杨艳丽
段光杰
机构
第三军医大学第一附属医院病理科
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第4期359-362,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(30400426)
第三军医大学校科研基金(2004年)
文摘
目的构建人源抗脂多糖结合蛋白氨基端片段(NH-LBP)Fab抗体的原核表达载体,并制备高稳定性Fab抗体。方法用PCR方法,从可溶性表达抗NH-LBP抗体的重组质粒pComb3H-Fab中扩增出VH链和VL链基因序列,分别构建表达质粒pET-28a(+)-VH和pET-28a(+)-VL,并于工程菌BL21(DE3)star中分别表达及TALON柱芯亲和纯化,将抗体片段VH和VL共同复性,通过二硫键形成Fab抗体,再采用ELISA法初步鉴定其与NH-LBP的结合力。结果扩增出VL链和VH基因片段长约为650bp和700bp,经BL21star表达出相对分子质量(Mr)约为28000和30000的目的蛋白,共同折叠后所获得Fab抗体与NH-LBP具有较高的结合力。结论成功地制备抗NH-LBPFab抗体,为临床抗炎研究提供了条件。
关键词
脂多糖结合蛋白氨基端片段(
nh-lbp
)
人源抗体Fab
高效表达
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
下载PDF
职称材料
题名
抗氨基末端脂多糖结合蛋白基因工程抗体库的构建及体外表达筛选
被引量:
2
2
作者
王长松
刘友生
李红
葛晓冬
邓军
陈燕平
机构
第三军医大学西南医院病理学研究所
第三军医大学西南医院国际合作实验室
出处
《中国生物制品学杂志》
CAS
CSCD
2005年第3期177-181,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(30271342).
文摘
目的构建人源化的单链可变区抗体库,运用体外表达技术翻译并筛选特异性的抗NHLBP抗体。方法分离健康人外周血单核细胞,抽提总RNA设计引物,扩增抗体轻重链的可变区,通过一段柔性片段将其连接成单链抗体库;应用体外表达技术翻译抗体库,并筛选出与NHLBP高度结合的单链抗体片段。结果扩增的单链抗体可变区片段分别为340bp和325bp,经连接后约为750bp。经过体外表达得到了约27000的抗体片段,经过5轮筛选进化,得到了可与NHLBP高度结合的抗体。结论已成功构建了人源化的单链抗体库;通过体外表达技术筛选到可与NHLBP高度结合的抗体。
关键词
体外表达
脂多糖结合蛋白
抗体库
筛选
构建
基因工程
外周血单核细胞
氨基
单链抗体
可变区
总RNA
人源化
片段
特异性
技术
健康人
高度
翻译
连接
引物
进化
Keywords
Genetic engineered antibody library
nh-lbp
Expression in vitro
Screening
分类号
Q75 [生物学—分子生物学]
Q513 [生物学—生物化学]
下载PDF
职称材料
题名
用杆状病毒-昆虫细胞系统表达、纯化重组的人源化氨基末端LBP
3
作者
王长松
刘友生
葛晓冬
李红
陈燕平
机构
第三军医大学西南医院病理学研究所
第三军医大学研究生管理大队三队
出处
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
2004年第12期69-73,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目 (3 0 2 713 42 )
文摘
根据已有的资料显示LBP与LPS的结合位点位于其氨基末端的第 91~ 1 0 0个氨基酸残基。在体外构建含有人LBP与LPS结合活性部分的穿梭质粒pBacmidtLBP ,并且带上 6×his的标签 ,用此穿梭质粒转染sf2 1昆虫细胞 ,获得重组病毒。然后用重组病毒液感染对数生长期的sf2 1昆虫细胞 ,72h后收获含有这种截断型人源化氨基末端LBP (NH LBP)的培养上清。用金属亲和树脂纯化后 ,采用SDS PAGE电泳以及Western Blot鉴定所得到的纯化物。成功获得相对分子质量约为 30 0 0 0的NH LBP。为进一步研究LBP在介导LPS活化靶细胞中的作用机制奠定了基础。
关键词
LBP
昆虫细胞
LPS
人源化
穿梭质粒
纯化
表达
重组病毒
生长期
收获
Keywords
nh-lbp
Baculovirus expression vector system Metal affinity chromatography Identify
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
R681 [医药卫生—骨科学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人源抗NH-LBP Fab抗体的制备和初步鉴定
葛晓冬
邹佳
刘友生
杨艳丽
段光杰
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007
2
下载PDF
职称材料
2
抗氨基末端脂多糖结合蛋白基因工程抗体库的构建及体外表达筛选
王长松
刘友生
李红
葛晓冬
邓军
陈燕平
《中国生物制品学杂志》
CAS
CSCD
2005
2
下载PDF
职称材料
3
用杆状病毒-昆虫细胞系统表达、纯化重组的人源化氨基末端LBP
王长松
刘友生
葛晓冬
李红
陈燕平
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
2004
0
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
上一页
1
下一页
到第
页
确定
用户登录
登录
IP登录
使用帮助
返回顶部