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高通量测序解析驴骨胶原蛋白促进伤口愈合的潜在分子机制
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作者 廖峰 樊雨梅 +2 位作者 帖航 赵海晴 苏宁 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2022年第6期358-364,共7页
探讨驴骨胶原蛋白对成纤维细胞(NHDFs细胞)增殖、迁移和Ⅰ型胶原蛋白分泌的影响以及可能的作用通路。通过八肽胆囊收缩素(CCK-8)法、5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)法和划痕实验,研究驴骨胶蛋白对成纤维细胞增殖和迁移的影响,并利用转录组测... 探讨驴骨胶原蛋白对成纤维细胞(NHDFs细胞)增殖、迁移和Ⅰ型胶原蛋白分泌的影响以及可能的作用通路。通过八肽胆囊收缩素(CCK-8)法、5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)法和划痕实验,研究驴骨胶蛋白对成纤维细胞增殖和迁移的影响,并利用转录组测序技术(RNA-seq)分析驴骨胶原蛋白作用于成纤维细胞的差异表达基因。结果表明,驴骨胶原蛋白对NHDFs细胞无毒性,且在0.16~5.0 g/mL内对NHDFs细胞有一定的促生长作用。0.75~1.50 g/mL的驴骨胶原蛋白能够促进NHDFs细胞增殖,且驴骨胶原蛋白对NHDFs细胞增殖的影响呈现剂量依赖关系。1.50 g/mL的驴骨胶原蛋白可显著促进NHDFs细胞迁移和Ⅰ胶原蛋白的分泌。驴骨胶原蛋白作用于成纤维细胞后,共筛选出384个差异表达基因,其中172个基因上调,212个基因下调。GO功能富集分析结果表明,差异表达基因与中性粒细胞趋化性、中性粒细胞迁移、粒细胞趋化性等有关;KEGG通路富集分析表明,差异基因参与细胞因子-细胞因子受体相互作用、化学致癌、IL-17和TNF等重要生物学通路。推测,驴骨胶原蛋白可能通过IL-17和TNF-α介导CXCL趋化因子发挥促进皮肤伤口愈合的作用。本文明确了驴骨胶原蛋白促进伤口愈合的效果,填补驴骨胶原蛋白促进伤口愈合的研究空白,为驴骨胶原蛋白高值转化提供了思路。 展开更多
关键词 驴骨胶原蛋白 伤口愈合 nhdfs细胞 Ⅰ型胶原蛋白 RNA-seq技术
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IL-13对正常人表皮成纤维细胞炎症及纤维化相关基因表达的影响
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作者 杨高云 乌日娜 +3 位作者 乌日嘎 钱革 孟悦 赵俊英 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2010年第6期499-501,共3页
目的探讨IL-13对正常人表皮成纤维细胞(NHDF)炎症及纤维化相关基因的作用,从而进一步了解IL-13在皮肤纤维化过程中的病理机制。方法将不同浓度的IL-13(0.1ng/mL,1ng/mL,10ng/mL)加入到体外培养的NHDF,作用24h后,采用实时定量PCR(Real-Ti... 目的探讨IL-13对正常人表皮成纤维细胞(NHDF)炎症及纤维化相关基因的作用,从而进一步了解IL-13在皮肤纤维化过程中的病理机制。方法将不同浓度的IL-13(0.1ng/mL,1ng/mL,10ng/mL)加入到体外培养的NHDF,作用24h后,采用实时定量PCR(Real-TimePCR)方法 ,研究不同浓度IL-13刺激NHDF后CCL-2,IL-13ra1,IL-13ra2,CTGF和Pro-collagenI基因的表达情况。结果不同浓度的IL-13刺激NHDF24h后,CCL-2,IL-13ra2和Pro-collagenI基因表达显著增加(P<0.05),并呈剂量依赖关系;IL-13ra1和CTGF基因表达无明显改变(P>0.05)。结论 CCL-2,IL-13ra2和Pro-collagenI基因的高表达可能参与了IL-13在皮肤组织纤维化中的病理过程。 展开更多
关键词 IL-13 正常人表皮成纤维细胞 皮肤纤维化 基因表达
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IL-13对正常人表皮成纤维细胞产生炎症因子作用的实验研究
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作者 杨高云 乌日娜 +3 位作者 赵雅兰 崔文颖 王莉 钱革 《北京医学》 CAS 2010年第4期301-303,共3页
目的探讨白介素-13(IL-13)对正常人表皮成纤维细胞(NHDF)产生炎症因子的影响。方法使用不同浓度IL-13(0.1、1、10ng/ml)刺激体外培养的NHDF,应用ELISA方法检测IL-13刺激NHDF24h后,白介素-6(IL-6),白介素-8(IL-8),巨噬细胞趋化蛋白-1(MCP... 目的探讨白介素-13(IL-13)对正常人表皮成纤维细胞(NHDF)产生炎症因子的影响。方法使用不同浓度IL-13(0.1、1、10ng/ml)刺激体外培养的NHDF,应用ELISA方法检测IL-13刺激NHDF24h后,白介素-6(IL-6),白介素-8(IL-8),巨噬细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和嗜酸性粒细胞趋化因子(Eotaxin)的蛋白表达水平。结果0.1ng/mlIL-13刺激下,IL-6、MCP-1和Eotaxin的蛋白表达水平分别为(727.33±39.88)pg/ml、(414.67±13.01)pg/ml、(124.67±8.67)pg/ml;1ng/mlIL-13刺激下,分别为(1222.50±49.95)pg/ml、(705.33±25.15)pg/ml、(205.33±16.59)pg/ml;10ng/mlIL-13刺激下,分别为(1502.83±5.31)pg/ml、(1329.17±56.08)pg/ml、(457.50±15.32)pg/ml,均明显高于对照组[(283.50±15.86)pg/ml、(205.17±3.76)pg/ml、(13.50±5.01)pg/ml,P<0.05或0.01],并具有浓度依赖性。IL-8蛋白表达水平与对照组无显著性差异(P>0.05)。结论IL-13可刺激NHDF产生IL-6、MCP-1和Eotaxin,这些炎症因子的大量表达可能参与了IL-13在皮肤组织纤维化过程中的病理性作用。 展开更多
关键词 白介素-13 正常人表皮成纤维细胞 皮肤纤维化
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Induction of Apoptosis in the Human Prostate Cancer Cell Line DU-145 by a Novel Micronutrient Formulation
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作者 M. Waheed Roomi Neha Shanker +1 位作者 Aleksandra Niedzwiecki Matthias Rath 《Open Journal of Apoptosis》 2015年第1期11-21,共11页
Prostate cancer, the most frequently diagnosed cancer in men, primarily affects males aged 55 and older and is more common in African Americans than Caucasians. Once the cancer has metastasized, current treatments are... Prostate cancer, the most frequently diagnosed cancer in men, primarily affects males aged 55 and older and is more common in African Americans than Caucasians. Once the cancer has metastasized, current treatments are generally ineffective. We have identified a novel anti-neoplastic agent, a specifically designed nutrient mixture (NM), containing ascorbic acid, lysine, proline and green tea extract that demonstrates a broad spectrum of anti-tumor activity against a number of human cancer cell lines. In a previous study NM significantly inhibited prostate tumor in nude mice. In this study, we tested whether the formulation exerts its anti-tumor effects through induction of apoptosis on prostate cancer cell line DU-145. The effect of the nutrient mixture (NM) on cell growth inhibition in DU-145 cells was examined by 3-(4,5-dimethylthiazole-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay. Morphological changes and caspase activation associated with apoptosis induction was checked by H&E staining and Live Green Caspase assay, respectively. The NM was found to be slightly toxic to DU-145 cells at 100 μg/ml, but significantly toxic at 500 μg/ml and 1000 μg/ml. Percentage of cells undergoing apoptosis also increased from 6% at 100 μg/ml to 49% at 500 μg/ml and 83% at 1000 μg/ml, with greater number of cells showing morphological changes such as condensed nuclei and an acidophilic cytoplasm at higher concentrations. For the purpose of comparison, NM was also tested on a normal human dermal fibroblast (NHDF) cell line which exhibited far less apoptosis induction as compared to DU-145 cells. The percentage of cells undergoing apoptosis in case of NHDF cells was 7% at 100 μg/ml, 25.6% at 500 μg/ml and 76.5% at 1000 μg/ml. Our results demonstrate that the NM is effective in inhibiting cancer cell viability and inducing apoptosis in prostate cancer DU-145 cells and can thus be used as an effective treatment for prostate cancer. 展开更多
关键词 PROSTATE Cancer DU-145 nhdf APOPTOSIS CYTOTOXICITY CASPASE MTT
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GelMA复合凝胶的挤出式3D打印工艺及其性能研究 被引量:5
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作者 顾恒 连芩 +3 位作者 王慧超 李涤尘 靳国瑞 崔滨 《机械工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第1期196-204,共9页
甲基丙烯酸酐明胶(Methacrylated gelatin,Gel MA)是具有光敏官能团的改性明胶,有良好的生物相容性,广泛用于构建皮肤、神经等软组织支架。然而,光照交联单一成分的GelMA,其力学性能和结构维持性较差,难以通过挤出3D打印成形生物支架。... 甲基丙烯酸酐明胶(Methacrylated gelatin,Gel MA)是具有光敏官能团的改性明胶,有良好的生物相容性,广泛用于构建皮肤、神经等软组织支架。然而,光照交联单一成分的GelMA,其力学性能和结构维持性较差,难以通过挤出3D打印成形生物支架。提出一种适用于挤出式打印且力学性能增强的GelMA复合凝胶,其主要成分为GelMA、明胶和海藻酸钠。黏度测试试验筛选出适合挤出3D打印的复合材料配比,3D打印工艺试验研究和分析了打印气压、喷头移动速度、喷头高度、光照条件对挤出连续性和微丝直径的影响。当喷头内径为200μm时,GelMA复合凝胶实现顺畅出丝(φ293~1211μm)的条件为气压在0.05~0.25 MPa,打印速度为1~15 mm/s,喷头高度为200~600μm,光照强度为70~272.56 mW/cm^2。拉伸试验表明光照交联后,复合凝胶较之同浓度Gel MA(5%,w/v)的弹性模量提高近1倍,伸长率保持一致。细胞培养试验显示GelMA复合凝胶具有良好的生物相容性,包埋在其内部的人真皮成纤维细胞培养至第7天时存活率达85%。 展开更多
关键词 甲基丙烯酸酐化明胶 复合凝胶 挤出式生物3D打印 人真皮成纤维细胞
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