肝癌组织中NHE1蛋白的表达及其临床意义

目的:研究人原发性肝癌(hepatocelluar carcinoma,HCC)中的钠氢交换蛋白1(Na+/H+ exchanger1,NHE1)的表达以及与肝癌侵袭转移的关系,进一步探讨其在临床中的意义。方法:用免疫组织化学方法检测人HCC组织、癌旁组织中NHE1蛋白的表达水平,分析人HCC组织中NHE1蛋白的表达情况与临床病理因素之间的相关性。结果:人HCC组织中NHE1蛋白的表达显著高于癌旁组织中NHE1蛋白的表达(t=17.821,P<0.05),其阳性率也显著高于癌旁组织(χ2=42.507,P<0.05)。NHE1蛋白的表达与组织学分级、临床TNM分期以及有无门静脉癌栓密切相关(P<0.05),而与HCC患者的年龄、肿瘤大小、肿瘤个数、血清AFP水平临床病理学指标无关(P>0.05)。结论:NHE1蛋白在人HCC组织中表达水平升高,可能与HCC的恶性程度、疾病的进程以及人HCC的侵袭转移有密切的关系。

善胃Ⅰ号方对胃癌前病变大鼠胃粘膜NHE1蛋白及胃内pH值的影响

目的:通过观察善胃Ⅰ号方对胃癌前病变模型大鼠胃粘膜NHE1蛋白及胃内pH值的影响,从胃内环境角度,探讨该方干预胃癌前病变的作用机制。方法:将80只健康Wistar大鼠随机分为4组,即正常对照组、模型对照组、阳性药物组和善胃Ⅰ号方组,每组20只,造模24周后开始给予药物干预,给药6周后,采用免疫组化法检测大鼠胃粘膜NHE1蛋白的表达水平,高精度酸度计测定大鼠胃液pH值的变化。结果:善胃Ⅰ号方组NHE1蛋白的阳性表达率及胃液pH值较模型对照组及阳性药物组均明显降低(P<0.05)。结论:善胃I号方可能通过抑制胃癌前病变模型大鼠胃粘膜NHE1蛋白的表达,降低胃液pH值,有效维持胃内酸性环境,从而起到干预胃癌前病变发展的作用。

NHE1蛋白在胃癌中的表达及与肿瘤侵袭转移的关系

目的探讨NHE1蛋白在胃癌组织中的表达及其与肿瘤侵袭转移的关系。方法采用SP免疫组织化学方法检测NHE1蛋白在40例胃癌中的表达。结果NHE1蛋白在40例胃癌原发灶阳性表达率为82.50%。NHE1蛋白表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移关系密切,而与肿瘤分化程度无关。结论NHE1蛋白在胃癌侵袭转移中起重要作用,对判断预后具有重要意义。

生姜对大鼠脑缺血再灌注脑组织NHE1和HIF-1α蛋白水平的影响

目的研究生姜压榨汁对脑缺血再灌注大鼠脑组织缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF1α)蛋白和Na^+/H^+交换蛋白1型(Na^+/H^+exchanger protein 1,NHE1)表达水平的影响。方法通过线栓法构建大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,造模成功的大鼠随机分为模型组(MCAO)、生姜压榨汁高(H)、中(M)和低(L)剂量组,另设假手术组(CLT)为对照,各组大鼠经灌胃给药5 d,神经功能评分后,病理组织检查大脑病变情况,干湿重法测大脑含水量,免疫荧光法检测NHE1蛋白在脑组织中的表达,Western Blot法研究HIF-1α蛋白和NHE1蛋白水平。结果与CTL组比较,MCAO组大鼠出现明显的神经功能障碍,病理检测结果显示脑组织出现明显的梗死灶,脑组织含水量明显升高,NHE1蛋白和HIF-1α蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。与MCAO组相比,生姜H、M剂量组能明显改善MCAO大鼠神经病学症状,显著缩小脑梗死面积,降低脑组织含水量,并降低NHE1蛋白和HIF-1α蛋白表达水平(P<0.05)。结论生姜对脑缺血再灌注大鼠脑组织可能发挥保护作用。

低浓度二甲双胍干预肝癌微环境诱导肿瘤细胞衰老的机制

目的研究低浓度二甲双胍干预肝癌微环境诱导肿瘤细胞衰老抑制其增殖的机制。方法对5种肝癌细胞株分别采用0 mmol/L(对照组)、1 mmol/L(实验组)二甲双胍处理,筛选出高表达衰老相关β半乳糖苷酶(SA-β-Gal)的2种细胞株;通过MTS实验观察1 mmol/L二甲双胍对筛选出的肝癌细胞HepG2和Huh-7增殖的影响。采用免疫印迹检测低氧条件下药物干预HepG2和Huh-7细胞,钠氢交换蛋白1(NHE1)、质子转运ATP酶(V-ATPase)、HIF-1α、Glut1和CAXII蛋白的表达。结果肝癌HepG2和Huh-7细胞SA-β-Gal较对照组显著升高(P<0.05)。MTS结果显示二甲双胍抑制肝癌HepG2和Huh-7细胞的增殖。NHE1、V-ATPase、HIF-1α在对照组中表达高于实验组,而Glut1和CAXII蛋白两组相比无明显差异。结论低浓度二甲双胍可通过诱导肿瘤细胞衰老抑制其增殖,抗癌作用可能与改变肝癌细胞微环境pH值有关。

Cariporide对胆囊癌细胞株GBC—SD转移及基质金属蛋白酶表达的影响

目的研究钠氢交换蛋白1（NHl）特异性抑制剂Cariporide对人胆囊癌细胞株GBC—SD体外转移能力的影响，初步探讨其作用机制。方法采用双羧乙基碳氧荧光素四乙酰氧甲酯（BCECF-AM）荧光染料和酚红检测细胞内外氢离子浓度（pH）值。采用细胞-基质黏附实验、细胞划痕实验和细胞迁移侵袭（Trans well）实验分别检测Cariporide对GBC—SD细胞的黏附、迁移和侵袭能力的影响；实时PCR、蛋白印迹法分别检测Cariporide对GBC—SD细胞基质金属蛋白酶（MMPs）mRNA及蛋白表达的影响。结果Cariporide处理后GBC—SD细胞的细胞内pH和NHEl活性明显下降，胞外pH明显上升。细胞-基质黏附实验结果显示，Cariporide处理后的GBC-SD细胞体外黏附率降低至对照组的80％和6l％，差异有统计学意义（P〈0．05）。细胞划痕实验和Transwell侵袭实验结果显示细胞损伤愈合的速度和穿过滤膜的细胞数量均少于对照组。实时PCR及蛋白印迹结果表明Cariporide可显著降低MMP-2和MMP-9mRNA和蛋白水平的表达量（P均〈0．05）。结论Cariporide可有效抑制人胆囊癌细胞株GBC—SD的体外转移能力，其作用机制可能与细胞内外pH值改变降低MMPs的表达有关。