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钙调蛋白小亚基Capn4对依托铂甙诱导的鼻咽癌细胞CNE2 DNA损伤修复NHEJ通路相关蛋白的作用
1
作者
王丰
王慧
+1 位作者
吴丽贤
郑鸣
《山西医科大学学报》
CAS
2019年第8期1093-1099,共7页
目的研究钙调蛋白小亚基Capn4对依托铂甙(VP-16)诱导的鼻咽癌细胞CNE2 DNA损伤修复NHEJ通路相关蛋白Ku80及DNApks的作用,以及对裸鼠体内成瘤的影响。方法高内涵分析仪检测空载的CNE2细胞及下调Capn4的CNE2细胞中非同源重组NHEJ修复通路...
目的研究钙调蛋白小亚基Capn4对依托铂甙(VP-16)诱导的鼻咽癌细胞CNE2 DNA损伤修复NHEJ通路相关蛋白Ku80及DNApks的作用,以及对裸鼠体内成瘤的影响。方法高内涵分析仪检测空载的CNE2细胞及下调Capn4的CNE2细胞中非同源重组NHEJ修复通路的特异性质粒EJ5-GFP的阳性率;检测空载的CNE2细胞及下调Capn4表达的CNE2细胞在VP16诱导后Ku80的表达;实时荧光定量PCR检测空载的CNE2细胞及下调Capn4表达的CNE2细胞的Ku80转录水平的变化;体内异种移植空载的CNE2细胞及下调Capn4的CNE2细胞后观察VP-16对鼻咽癌肿瘤质量大小的影响及抑瘤率。结果高内涵分析显示下调Capn4的表达能够抑制CNE2细胞DNA损伤后NHEJ修复通路的GFP阳性率(P<0.01);下调Capn4表达后VP16诱导的CNE2细胞NHEJ通路相关蛋白Ku80、DNApks的表达下降(P<0.01);下调Capn4表达能下调裸鼠成瘤后肿瘤的体积与质量(P<0.01)。结论Capn4对NHEJ通路的抑制与通路相关蛋白Ku80、DNApks有关;下调Capn4的表达能够抑制鼻咽癌肿瘤生长、增加鼻咽癌对放化疗的敏感。
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关键词
Capn4
鼻咽癌
VP-16
nhej通路
KU80
DNApks
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职称材料
钙调蛋白小亚基Capn4对依托铂甙诱导的鼻咽癌细胞CNE2 DNA损伤修复的作用
被引量:
1
2
作者
王丰
王慧
+1 位作者
吴丽贤
郑鸣
《山西医科大学学报》
CAS
2017年第7期685-690,共6页
目的研究钙调蛋白小亚基Capn4对依托铂甙(VP-16)诱导的鼻咽癌细胞CNE2 DNA损伤修复中的作用及可能影响的修复通路。方法构建shRNA下调Capn4表达的CNE2细胞并以Western blot法验证;高内涵检测γ-H2AX在CNE2细胞及下调Capn4表达的CNE2细...
目的研究钙调蛋白小亚基Capn4对依托铂甙(VP-16)诱导的鼻咽癌细胞CNE2 DNA损伤修复中的作用及可能影响的修复通路。方法构建shRNA下调Capn4表达的CNE2细胞并以Western blot法验证;高内涵检测γ-H2AX在CNE2细胞及下调Capn4表达的CNE2细胞中的平均荧光强度,分析下调Capn4对VP-16诱导的CNE2细胞DNA损伤修复的作用;NHEJ(非同源重组修复)通路特异性的质粒EJ5-GFP用Fugen6 HD转入CNE2细胞及下调Capn4的CNE2细胞,用高内涵仪检测GFP的阳性率,观察下调Canp4对VP-16诱导的鼻咽癌细胞DNA损伤NHEJ修复通路的影响。结果 shRNA确实下调Capn4在鼻咽癌细胞中的表达。2.5μmol/L VP-16处理CNE2^(Vector)细胞和CNE2^(Capn4(-))细胞后6 h和12 h,CNE2^(Capn4(-))的损伤都较空载体的CNE2^(Vector)细胞高;下调Capn4表达对VP-16造成的CNE2细胞DNA损伤修复有抑制作用(P<0.01)。2.5μmol/L VP-16作用后,CNE2^(Capn4(-))细胞与CNE2^(Vector)细胞相比较GFP平均荧光强度明显更低;下调CNE2表达能够抑制DNA损伤后NHEJ通路的修复(P<0.01)。结论在鼻咽癌细胞中下调Capn4的表达能抑制VP-16所致的DNA损伤修复,这种作用可能是通过抑制NHEJ通路实现的。
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关键词
Capn4
鼻咽癌
VP-16
shRNA
nhej通路
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职称材料
钙蛋白酶小亚基Capn4在鼻咽癌细胞CNE2中DNA损伤修复的作用
被引量:
1
3
作者
王慧
王丰
+1 位作者
吴丽贤
郑鸣
《中国临床解剖学杂志》
CSCD
北大核心
2017年第3期291-295,共5页
目的研究钙蛋白酶小亚基Capn4对放射所致的鼻咽癌细胞CNE2在DNA损伤修复中的作用及可能影响的修复通路。方法选取鼻咽癌细胞CNE2与293T细胞在37℃、5%CO_2条件下培养,Western blot法检测Capn4在不同细胞中蛋白表达水平;构建sh RNA下调Ca...
目的研究钙蛋白酶小亚基Capn4对放射所致的鼻咽癌细胞CNE2在DNA损伤修复中的作用及可能影响的修复通路。方法选取鼻咽癌细胞CNE2与293T细胞在37℃、5%CO_2条件下培养,Western blot法检测Capn4在不同细胞中蛋白表达水平;构建sh RNA下调Capn4表达的CNE2细胞并以Western blot法验证;高内涵细胞成像分析仪分析γ-H2AX在放射后的CNE2细胞及下调Capn4表达的CNE2细胞中的平均荧光强度;非同源末端连接(NHEJ)通路特异性的质粒EJ5-GFP用Fugen6 HD转入空载的CNE2细胞及下调Capn4的CNE2细胞,用高内涵细胞成像分析仪检测GFP的阳性率,观察下调Capn4对放射诱导的鼻咽癌细胞DNA损伤NHEJ修复通路的影响。结果 Capn4在鼻咽癌细胞系中表达明显高于正常细胞(P<0.01);sh RNA确实下调Capn4在鼻咽癌细胞中的表达;下调Capn4表达对放射造成的CNE2细胞DNA损伤修复有抑制作用(P<0.01);下调Capn4表达能够抑制CNE2细胞DNA损伤后NHEJ通路的修复(P<0.01)。结论 Capn4在鼻咽癌细胞CNE2中高表达,下调Capn4的表达能抑制放射所致的DNA损伤修复,这种作用可能是通过抑制NHEJ通路实现的。
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关键词
Capn4
鼻咽癌
放射
SHRNA
nhej通路
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职称材料
题名
钙调蛋白小亚基Capn4对依托铂甙诱导的鼻咽癌细胞CNE2 DNA损伤修复NHEJ通路相关蛋白的作用
1
作者
王丰
王慧
吴丽贤
郑鸣
机构
福建中医药大学中西医结合学院解剖学教研室
福建医科大学药学院药理学系药理学教研室
出处
《山西医科大学学报》
CAS
2019年第8期1093-1099,共7页
基金
福建省自然基金资助项目(2016J01394)
文摘
目的研究钙调蛋白小亚基Capn4对依托铂甙(VP-16)诱导的鼻咽癌细胞CNE2 DNA损伤修复NHEJ通路相关蛋白Ku80及DNApks的作用,以及对裸鼠体内成瘤的影响。方法高内涵分析仪检测空载的CNE2细胞及下调Capn4的CNE2细胞中非同源重组NHEJ修复通路的特异性质粒EJ5-GFP的阳性率;检测空载的CNE2细胞及下调Capn4表达的CNE2细胞在VP16诱导后Ku80的表达;实时荧光定量PCR检测空载的CNE2细胞及下调Capn4表达的CNE2细胞的Ku80转录水平的变化;体内异种移植空载的CNE2细胞及下调Capn4的CNE2细胞后观察VP-16对鼻咽癌肿瘤质量大小的影响及抑瘤率。结果高内涵分析显示下调Capn4的表达能够抑制CNE2细胞DNA损伤后NHEJ修复通路的GFP阳性率(P<0.01);下调Capn4表达后VP16诱导的CNE2细胞NHEJ通路相关蛋白Ku80、DNApks的表达下降(P<0.01);下调Capn4表达能下调裸鼠成瘤后肿瘤的体积与质量(P<0.01)。结论Capn4对NHEJ通路的抑制与通路相关蛋白Ku80、DNApks有关;下调Capn4的表达能够抑制鼻咽癌肿瘤生长、增加鼻咽癌对放化疗的敏感。
关键词
Capn4
鼻咽癌
VP-16
nhej通路
KU80
DNApks
Keywords
Capn4
nasopharyngeal carcinoma
VP-16
nhej
pathway
Ku80
DNApks
分类号
R739.6 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
钙调蛋白小亚基Capn4对依托铂甙诱导的鼻咽癌细胞CNE2 DNA损伤修复的作用
被引量:
1
2
作者
王丰
王慧
吴丽贤
郑鸣
机构
福建中医药大学中西医结合学院
福建医科大学药学院药理系
出处
《山西医科大学学报》
CAS
2017年第7期685-690,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(81572662)
文摘
目的研究钙调蛋白小亚基Capn4对依托铂甙(VP-16)诱导的鼻咽癌细胞CNE2 DNA损伤修复中的作用及可能影响的修复通路。方法构建shRNA下调Capn4表达的CNE2细胞并以Western blot法验证;高内涵检测γ-H2AX在CNE2细胞及下调Capn4表达的CNE2细胞中的平均荧光强度,分析下调Capn4对VP-16诱导的CNE2细胞DNA损伤修复的作用;NHEJ(非同源重组修复)通路特异性的质粒EJ5-GFP用Fugen6 HD转入CNE2细胞及下调Capn4的CNE2细胞,用高内涵仪检测GFP的阳性率,观察下调Canp4对VP-16诱导的鼻咽癌细胞DNA损伤NHEJ修复通路的影响。结果 shRNA确实下调Capn4在鼻咽癌细胞中的表达。2.5μmol/L VP-16处理CNE2^(Vector)细胞和CNE2^(Capn4(-))细胞后6 h和12 h,CNE2^(Capn4(-))的损伤都较空载体的CNE2^(Vector)细胞高;下调Capn4表达对VP-16造成的CNE2细胞DNA损伤修复有抑制作用(P<0.01)。2.5μmol/L VP-16作用后,CNE2^(Capn4(-))细胞与CNE2^(Vector)细胞相比较GFP平均荧光强度明显更低;下调CNE2表达能够抑制DNA损伤后NHEJ通路的修复(P<0.01)。结论在鼻咽癌细胞中下调Capn4的表达能抑制VP-16所致的DNA损伤修复,这种作用可能是通过抑制NHEJ通路实现的。
关键词
Capn4
鼻咽癌
VP-16
shRNA
nhej通路
Keywords
Capn4
nasopharyngeal carcinoma
VP-16
shRNA
nhej
pathway
分类号
R739.6 [医药卫生—肿瘤]
下载PDF
职称材料
题名
钙蛋白酶小亚基Capn4在鼻咽癌细胞CNE2中DNA损伤修复的作用
被引量:
1
3
作者
王慧
王丰
吴丽贤
郑鸣
机构
福建医科大学药学院药理系
福建中医药大学中西医结合学院
出处
《中国临床解剖学杂志》
CSCD
北大核心
2017年第3期291-295,共5页
基金
国家自然科学基金(81572662)
文摘
目的研究钙蛋白酶小亚基Capn4对放射所致的鼻咽癌细胞CNE2在DNA损伤修复中的作用及可能影响的修复通路。方法选取鼻咽癌细胞CNE2与293T细胞在37℃、5%CO_2条件下培养,Western blot法检测Capn4在不同细胞中蛋白表达水平;构建sh RNA下调Capn4表达的CNE2细胞并以Western blot法验证;高内涵细胞成像分析仪分析γ-H2AX在放射后的CNE2细胞及下调Capn4表达的CNE2细胞中的平均荧光强度;非同源末端连接(NHEJ)通路特异性的质粒EJ5-GFP用Fugen6 HD转入空载的CNE2细胞及下调Capn4的CNE2细胞,用高内涵细胞成像分析仪检测GFP的阳性率,观察下调Capn4对放射诱导的鼻咽癌细胞DNA损伤NHEJ修复通路的影响。结果 Capn4在鼻咽癌细胞系中表达明显高于正常细胞(P<0.01);sh RNA确实下调Capn4在鼻咽癌细胞中的表达;下调Capn4表达对放射造成的CNE2细胞DNA损伤修复有抑制作用(P<0.01);下调Capn4表达能够抑制CNE2细胞DNA损伤后NHEJ通路的修复(P<0.01)。结论 Capn4在鼻咽癌细胞CNE2中高表达,下调Capn4的表达能抑制放射所致的DNA损伤修复,这种作用可能是通过抑制NHEJ通路实现的。
关键词
Capn4
鼻咽癌
放射
SHRNA
nhej通路
Keywords
shRNA
Nasopharyngeal carcinoma
Radiation
shRNA
nhej
pathway
分类号
R329.24 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
R739.62 [医药卫生—肿瘤]
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题名
作者
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1
钙调蛋白小亚基Capn4对依托铂甙诱导的鼻咽癌细胞CNE2 DNA损伤修复NHEJ通路相关蛋白的作用
王丰
王慧
吴丽贤
郑鸣
《山西医科大学学报》
CAS
2019
0
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职称材料
2
钙调蛋白小亚基Capn4对依托铂甙诱导的鼻咽癌细胞CNE2 DNA损伤修复的作用
王丰
王慧
吴丽贤
郑鸣
《山西医科大学学报》
CAS
2017
1
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职称材料
3
钙蛋白酶小亚基Capn4在鼻咽癌细胞CNE2中DNA损伤修复的作用
王慧
王丰
吴丽贤
郑鸣
《中国临床解剖学杂志》
CSCD
北大核心
2017
1
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