NIPA2通过JAK/STAT信号通路对高糖诱导的成骨细胞凋亡的调控作用及其机制

目的:探讨普瑞德-威利/安格曼综合征区域蛋白2(NIPA2)对高糖诱导的成骨细胞凋亡的影响,阐明其作用机制。方法:将成骨细胞MC3T3-E1采用26 nmol·L^-1高糖处理24 h,将细胞分为HG+si-con组(转染si-con)、HG+si-NIPA2组(转染si-NIPA2)、HG+si-NIPA2+DMSO组(转染si-NIPA2后再用DMSO处理)和HG+si-NIPA2+AG490组(转染si-NIPA2后再用AG490处理),另设对照组。采用脂质体法转染MC3T3-E1细胞,再用26 nmol·L^-1高糖处理;采用qRT-PCR法检测MC3T3-E1细胞中NIPA2 mRNA表达水平,Western blotting法检测细胞中NIPA2、P21、Cleaved caspase-3、p-JAK2和p-STAT3蛋白表达水平,MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果:与对照组比较,HG组MC3T3-E1细胞中NIPA2 mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P<0.01)。敲减NIPA2后,与HG+si-con组比较,HG+si-NIPA2组MC3T3-E1细胞中NIPA2蛋白表达水平明显降低(P<0.01),P21和Cleaved caspase-3蛋白表达水平明显升高(P<0.01),MC3T3-E1细胞在48和72 h时细胞增殖活性明显降低(P<0.01),细胞凋亡率明显升高(P<0.01),JAK/STAT信号通路相关蛋白p-JAK2和p-STAT3的表达水平明显升高(P<0.01)。与HG+si-NIPA2+DMSO组比较,HG+si-NIPA2+AG490组MC3T3-E1细胞中NIPA2蛋白表达水平明显升高(P<0.01),P21和Cleaved caspase-3蛋白表达水平明显降低(P<0.01),在48和72 h时细胞增殖活性明显升高(P<0.01),细胞凋亡率明显降低(P<0.01)。结论:NIPA2对高糖诱导的成骨细胞增殖和凋亡具有调控作用,其调控机制与JAK/STAT信号通路有关。