NIS蛋白在良恶性甲状腺疾病中的表达

目的:通过免疫组织化学方法,观察组织中碘钠同向转运体(sodium/iodide symporter,NIS)蛋白在甲状腺疾病中的表达情况,并探讨其临床应用价值。方法:选取我院病理科存档的甲状腺外科56例手术患者的蜡块标本,其中甲状腺癌40例,包括滤泡状腺癌2例、乳头状癌38例;未分化癌2例;甲状腺良性病变14例(甲状腺腺瘤7例,原发性甲状腺功能亢进7例)。应用免疫组织化学法处理,观测NIS的表达情况。结果:分化型甲状腺癌、未分化癌、甲状腺腺瘤、原发性甲状腺功能亢进中NIS蛋白阳性率分别为90.00%、50.00%、42.86%、100.00%,在癌旁组织中表达阳性率为66.67%。NIS在原发性甲亢患者组织的细胞膜上表达水平显著高于其他分型,各组对比有显著差异(P<0.01)。结论:NIS功能蛋白定位于细胞膜,在不同甲状腺疾病组织中的表达水平有所差异;在不同甲状腺疾病中,NIS分布有明显差异,行131I放射治疗时,可以考虑其NIS分布情况,给予个体化调整。

小鼠NIS蛋白的生物信息学特征及其在乳腺中的表达分析

为探究小鼠钠碘转运体(Na^+/I-symporter,NIS)蛋白的结构、功能及其在乳腺组织的表达特征,本研究扩增小鼠乳腺NIS基因编码区,测序鉴定后采用结构预测软件对NIS蛋白进行生物信息学分析,同时采用Western blotting、免疫组织化学技术和半定量PCR技术对NIS基因在不同乳腺发育时期的转录和表达水平进行分析。结果显示,小鼠NIS基因编码区全长1857 bp,与人NIS的同源性为80.40%,保守性较强。NIS蛋白含有618个氨基酸残基,分子质量约为65.7 ku,分子式为C2996H4701N749O833S32,理论等电点为7.44,半衰期为30 h,消光系数为102510,不稳定系数为29.31,脂溶系数为105.91,富含疏水性氨基酸,为稳定的疏水蛋白。NIS蛋白二级结构含有α-螺旋(41.42%)、延伸链(18.28%)、β-转角(4.05%)和无规则卷曲(36.25%),三级结构与之相一致。Western blotting结果显示,4个时期均出现特异性杂交带,大小为65.7 ku,与预期结果相符。免疫组织化学结果表明,NIS蛋白在小鼠的青春期、妊娠期到泌乳期的乳腺组织中表达量逐渐增加,在泌乳期达到高峰,存在显著差异(P<0.05),在退化期逐渐恢复到类似青春期状态;NIS基因mRNA的变化规律与蛋白表达一致。本研究结果为进一步探究NIS蛋白在乳腺发育和泌乳调控中的作用提供了参考依据。

抗人钠碘转运体单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立与鉴定

目的 利用合成短肽制备抗人钠碘转运体 (NIS)单克隆抗体。方法 以人NIS蛋白质的两个片段 (第 2膜外段和第14f段 )为抗原免疫小鼠 ,运用杂交瘤技术 ,制备鼠抗人NIS单克隆抗体 (rhNISMAb) ,然后采用小鼠Ig亚类测定试剂条测定单抗的亚类 ,并通过ELISA、Western blot、免疫组化染色等技术鉴定其特异性。结果 运用杂交瘤技术成功地制备出能稳定分泌抗人NIS单克隆抗体的细胞系。Western blot分析表明 :此单抗所识别的靶分子的相对分子量主要在 97KD ,免疫组化染色显示 :甲状腺滤泡细胞膜上有棕黄色着色 ,以基底侧最为明显。结论 成功地制备出抗人NIS单克隆抗体 ,为NIS抗原

钠/碘转运体在甲状腺癌中的表达

目的:探讨钠/碘转运体(sodium iodide symporter,NIS)在甲状腺癌组织中的表达。方法:应用实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative-PCR,RFQ-PCR)和免疫组织化学法检测NIS mRNA和蛋白在18例正常甲状腺组织、27例结节性甲状腺肿组织和23例甲状腺癌组织中的表达。结果:甲状腺癌组织中NIS mRNA的表达显著低于正常甲状腺组织和结节性甲状腺肿组织(P=0.002)。免疫组织化学检测结果表明,甲状腺癌组织中NIS蛋白主要定位于细胞质,强阳性表达13例(56.6%)、阳性表达3例(13.0%),强阳性表达率显著高于正常甲状腺组织(P=0.010)。与正常甲状腺组织相比,甲状腺癌组织中NIS mRNA表达下降并且NIS蛋白表达升高者17例(74%),显著高于结节性甲状腺肿组织(χ2=4.428,P=0.035)。结论:甲状腺癌组织中NIS mRNA的表达下降而NIS蛋白的表达增强,推测NIS蛋白主要位于细胞质可能是NIS不能发挥正常的运输功能,导致甲状腺癌患者不能聚碘的重要原因之一。