S100A9诱导单核细胞分泌血管内皮生长因子-A的初步机制研究

目的探讨S100A9诱导单核细胞分泌血管内皮生长因子-A(VEGF-A)的分子机制。方法收集体检健康者外周血,利用免疫磁珠分选技术分离纯化出CD14+单核细胞,流式细胞术检测晚期糖基化终产物受体(RAGE)的表达,然后在体外加入S100A9刺激培养,或预先加入抗RAGE抗体或NK-κB信号抑制剂孵育1h后再进行刺激培养,酶联免疫吸附试验检测VEGF-A水平。结果S100A9受体RAGE高表达于单核细胞表面,S100A9刺激的单核细胞以剂量和时间依赖的方式分泌VEGF-A;加入抗RAGE抗体阻断后,单核细胞分泌VEGF-A的能力明显下降(P<0.01)。进一步利用NK-κB信号抑制剂可明显抑制S100A9诱导单核细胞分泌VEGF-A的作用(P<0.01)。结论 S100A9通过RAGE-NK-κB信号途径诱导单核细胞上调VEGF-A的分泌,从而有利于新生血管的生成。

白细胞介素-17诱导单核细胞分泌白细胞介素-10的初步机制研究

目的探讨白细胞介素-17(IL-17)诱导单核细胞分泌白细胞介素-10(IL-10)的分子机制。方法收集该院体检中心健康者外周血,经淋巴细胞分离液分离获得单个核细胞后,利用免疫磁珠分选技术纯化CD14阳性的单核细胞,然后在体外用IL-17进行刺激培养,或预先加入信号通路抑制剂孵育1h后再进行刺激培养,酶联免疫吸附试验检测IL-10的水平。结果 CD14阳性的单核细胞经IL-17刺激后明显诱导IL-10的分泌(P<0.01),且具有剂量和时间依赖性;加入核转录因子(NK-κB)抑制剂可明显抑制IL-17诱导单核细胞分泌IL-10的作用(P<0.05),但MEK1/2抑制剂、p38/MAPK抑制剂和JNK抑制剂则无明显抑制作用。结论 IL-17可能通过NK-κB信号途径诱导单核细胞上调IL-10的分泌,从而发挥免疫抑制作用。